全 文 ：金沙绢毛菊三萜类成分的鉴别及含量测定
詹云静 ,赵　磊 ,武晓玉 ,余晓晖
(甘肃中医学院 ,甘肃兰州 730000)
　　摘要　目的:对金沙绢毛菊进行鉴别 , 并同时建立测定金沙绢毛菊中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。方
法:采用薄层色谱法对金沙绢毛菊中的三萜类成分进行鉴别 , 并采用 RP-HPLC对其进行含量测定。色谱柱为 Hy-
persil-ODS柱(4.6mm×250mm, 5μm),流动相:甲醇-水-冰醋酸(87∶13∶0.02), 流速 1.0 ml/min,检测波长 215nm,
柱温 25℃。结果:齐墩果酸在 0.44 ～ 4.4 μg范围内线性关系良好 , 回归方程为 Y=108.1075X-2.2928(r=
0.9998),平均回收率为 96.94%, RSD=1.3%;熊果酸在 0.50 ～ 5.5 μg范围内线性良好 , 回归方程为 Y=
113.1934X-20.9859(r=0.9999),平均回收率为 96.71%, RSD= 1.0%。结论:薄层色谱法呈现斑点清晰 , 专属性
强 , 可用于金沙绢毛菊的鉴别;HPLC法简便 、准确 、重现性好 , 可用于该药材的质量控制。
关键词　金沙绢毛菊;齐墩果酸;熊果酸;薄层色谱法;反相高效液相色谱法
中图分类号:R284.1/R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2008)04-0530-03
作者简介:詹云静 ,女 ,在读硕士研究生 , E-mail:pingyifufeng@yahoo.com.cn。
　　金沙绢毛菊为菊科植物毛菊 Soroserisgili(S.
Mcore)Stebb.的全草。藏名为索贡巴 ,为多年生草
本 。金沙绢毛菊具有清热解毒 、凉血止血 、舒经活脉
的功效 ,主治感冒发烧 、咽喉肿痛 、支气管炎 、疮痈肿
毒 、乳腺炎 、风湿痹痛 、崩漏 、带下 、跌打损伤 ,还可治
疗食物中毒 、经脉疼痛 、头部受伤 、胸腔积黄水 、四肢
水肿等 〔1〕。现代研究表明其含化学成分有异鼠李
素 、3-甲(基)氧基木犀草素 ,异鼠李素 -3β -D-葡萄糖
苷等 ,吕建伟等 〔2〕研究表明其中含有熊果酸和齐墩
果酸。齐墩果酸具有消炎 、增强免疫力 、抑制血小板
聚集和降糖作用〔3〕 ,还有抗肝损伤 , 降低小鼠肝内
谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平等多方面的临床药理
作用 ,是治疗急性黄疸型肝炎和慢性乙型肝炎较理
想的药物 ,且毒性低 , 不良反应少 〔4〕。熊果酸具有
多种生物活性 ,尤其在抗肿瘤 、抗氧化 、抗炎保肝 、降
血脂方面的作用显著 〔5〕。本文对金沙绢毛菊中三
萜类成分进行鉴别 ,并对其中的齐墩果酸和熊果酸
进行含量测定 ,以期为该植物资源开发和质量控制
提供参考依据。
1 　仪器与试药
Agilent1100高效液相色谱仪;齐墩果酸对照品
(供含量测定用 ,批号 0709-9803),熊果酸对照品
(供含量测定用 ,批号 742-8902)均购于中国药品生
物制品检定所 ,其它对照品由兰州大学药学院提供 。
甲醇为色谱纯 ,水为重蒸馏水 ,高效薄层板(青岛海
洋化工厂),其余试剂均为分析纯。 KQ-250TDB高
频数控超声波清洗器(昆明超声仪器有限公司)。
植物样品采自青海省循化县 ,经兰州大学药学院药
用植物教研室赵汝能教授鉴定为菊科毛菊属金沙绢
毛菊 Soroserisgili(S.Mcore)Stebb的全草 ,标本
保存于兰州大学药学院药用植物学教研室植物标本
室。
2　方法与结果
2.1　定性鉴别
2.1.1 　供试品制备:取金沙绢毛菊药材约 10 g,研
细 ,精密称定 ,加甲醇 140ml,超声提取 1h,滤过 ,滤
液挥干溶剂 ,残渣用石油醚(30 ～ 60℃)浸泡两次 ,
每次 20ml(浸泡约 2 min),倾去石油醚液 ,残渣加
热水溶解 ,将混悬液加入平衡的大孔吸附树脂 ,收集
80%的甲醇洗脱液 ,水浴加热挥干溶剂 ,残渣加甲醇
溶解定容至 5ml,即得。
2.1.2　对照品的制备:分别精密称取熊果酸 、齐墩
果酸 、降香萜醇乙酸酯和羽扇豆醇各 5.0 mg分别置
于 10 ml容量瓶中 , 用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇
匀 ,即得对照品溶液 ,混合液为临用前等量混合。
2.1.3 　薄层色谱法:照薄层色谱法(2005年版中
国药典一部附录Ⅵ B)试验 ,分别吸取上述各溶液 3
μl,点于同一块硅胶 G板上 ,以 环己烷-二氯甲烷 -
异丙醇-甲醇(62∶34∶4∶0.02)为展开剂 ,展开 ,取出 ,
阴干 ,喷以 10%硫酸乙醇溶液 ,在 105℃加热 6 ～ 10
min至斑点显色清晰。结果在供试品色谱中 ,在与
对照品色谱相应的位置上 ,显相同颜色的紫红色斑
点 ,结果见图 1。
2.2　含量测定 〔6-8〕
2.2.1 　色谱条件:色谱柱 Hypersil-ODS柱 (4.6
mm×250 mm, 5 μm), 流动相:甲醇 -水 -冰醋酸
(87∶13∶0.02),流速 1.0 ml/min,检测波长 215nm,
柱温 25℃,进样量 10μl,灵敏度:0.05 AUFS。理论
·530· 中药材　JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 31卷第 4期 2008年 4月DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.04.064
塔板数按齐墩果酸与熊果酸计 ,应不低于 7000,在
此条件下齐墩果酸与熊果酸达到基线分离 。见图 2
和图 3。
图 1　金沙绢毛菊的薄层色谱图
1.熊果酸 、齐墩果酸 、降香萜醇乙酸酯和羽扇豆醇的混合液
2.供试品　3.供试品　4.熊果酸和齐墩果酸混合液　
5.降香萜醇乙酸酯　6.羽扇豆醇
图 2　混合对照品溶液的高效液相色谱图
1.齐墩果酸　2.熊果酸
图 3　供试品溶液的高效液相色谱图
1.齐墩果酸　2.熊果酸
2.2.2　供试品溶液制备:取金沙绢毛菊药材约 10
g,研细 ,精密称定 。加甲醇 140ml,超声提取 1 h,过
滤 ,滤液挥干溶剂 ,残渣用石油醚(30 ～ 60℃)浸泡 2
次 ,每次 20ml(浸泡约 2 min),倾去石油醚液 ,残渣
加甲醇溶解定容至 5ml,进样前用 0.45μm微孔滤
膜压滤 ,即得 。
2.2.3　混合对照品溶液制备:精密称取齐墩果酸
对照品 4.4mg,熊果酸对照品 5.0mg置于 10ml容
量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀即得混合对
照品溶液 ,进样前用 0.45 μm微孔滤膜压滤 ,即得。
2.2.4　线性范围考察:精密吸取混合对照品溶液
1、3、5、7、10 μl分别进样 ,以对照品的峰面积为纵坐
标(Y),以对照品溶液的浓度为横坐标(X)绘制标
准曲线 。结果表明:齐墩果酸 、熊果酸分别在 0.44
～ 4.4μg/μl和 0.5 ～ 5.0 μg/μl范围内线性关系良
好 ,回归方程分别为:Y=108.1075X-2.2928(r=
0.9998);Y=113.1934X-20.9859(r=0.9999)。
2.2.5 　精密度试验:精密吸取齐墩果酸和熊果酸
的混合对照品溶液 5 μl,注入高效液相色谱仪 ,重复
进样 5次 ,齐墩果酸与熊果酸峰面积的 RSD分别为
2.0%和 2.3%。
2.2.6　重复性试验:称取同一批药材 ,按供试品溶
液制备的方法平行制备 5份供试品溶液 ,分别测定 ,
齐墩果酸峰面积积分值的 RSD=1.87%,熊果酸峰
面积积分值的 RSD=2.18%。
2.2.7 　稳定性试验:取同一供试品溶液 ,在 0、4、
8、16、24、48h分别进样 10μl,结果齐墩果酸与熊果
酸峰面积积分值的 RSD分别为 1.32%和 1.45%。
2.2.8 　加样回收率试验:取 5份已知含量的金沙
绢毛菊药材各约 10 g,精密称定 ,分别精密加入齐墩
果酸和熊果酸对照品溶液 0.5 ml,按 2.2.2项下的
方法制备 ,测定齐墩果酸和熊果酸的平均回收率分
别为 96.94%、 96.71%, RSD值分别为 1.3%、
1.0%。
2.2.9　样品测定结果:采用上述方法和色谱条件 ,
吸取供试品溶液和对照品溶液各 15 μl,进样 ,采用
外标两点法测定含量。结果见表 1。
　表 1 　药材含量测定结果(n=3)
编号 熊果酸(mg/100g) 齐墩果酸(mg/100g)
1 2.87 2.67
2 2.94 2.59
3 2.81 2.61
平均值 2.87 2.62
RSD(%) 2.2 1.6
3　讨论
3.1　提取溶剂的选择　本实验以甲醇 、乙醚对金
沙绢毛菊药材超声提取 30min,回收溶剂至干 ,残渣
用石油醚脱脂 ,再用甲醇溶解 ,定容转移至 5ml容量
瓶中 ,每种溶剂平行做 2份。结果表明甲醇提取效
率高 。
3.2　提取方法的选择　本实验以甲醇为提取溶剂
考察了超声 、回流 、索氏 3种提取方法 ,每种方法平
行做 2份 。结果表明超声提取重复性好 ,数据稳定。
3.3　洗脱条件的选择　本实验收集了 20%、40%、
60%、80%、100%的甲醇洗脱液 ,分别点于同一硅胶
板上 ,展开显色后结果表明 80%的洗脱液中斑点清
·531·中药材　JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 31卷第 4期 2008年 4月
晰 、圆整 ,可作为薄层鉴别时的样品洗脱条件。
3.4 　色谱条件的选择　本文选用 215 nm为检测
波长 ,选用甲醇 -水 -冰醋酸为流动相与单纯使用甲
醇 -水为流动相相比基线稳定且齐墩果酸与熊果酸
达到基线分离 ,分离度 >1.5。
3.5 　本文采用薄层色谱法鉴别了金沙绢毛菊中的
三萜类成分 ,采用高效液相色谱法对其中的齐墩果
酸与熊果酸进行含量测定 ,方法简单 ,灵敏 ,重现性
好 ,将为金沙绢毛菊的资源的开发利用提供参考依
据 。
3.6 　齐墩果酸与熊果酸结构极为相似 ,要将两者
在薄层色谱上分离极为困难 ,本实验采用了多种展
开系统和吸附剂 ,仍未能分离 ,需进一步进行研究。
参 考 文 献
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版社 , 1999:7047.
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2005, 37(3):349.
[ 3] 柳占彪 , 王鼎 ,王淑珍 .齐墩果酸的降糖作用 .中国医
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[ 4] 王晓峰 , 李继尧 ,于吉人 , 等.齐墩果酸对肝损伤小鼠血
清及肝细胞培养液转氨酶作用的研究 .中国药学杂志 ,
1999, 34(16):377.
[ 5] 陈武 , 熊筱 , 李开泉 .熊果酸抗肝炎的实验和临床研
究 .宜春学院学报 , 2001, 23(2):21.
[ 6] 谢莹 , 杭太俊 ,程赞 .高效液相色谱法测定中药中齐墩
果酸与熊果酸含量 .中国中药杂志 , 2001, 26(9):615.
[ 7] 廖琼峰 , 李继 ,吴筱妹 .反相高效液相色谱法测定陆英
中齐墩果酸与熊果酸的含量 .药物分析杂志 , 2005, 25
(7):781.
[ 8] 赵宇新 , 李曼玲 .高效液相色谱-蒸发光散射检测法测
定中药及制剂中齐墩果酸与熊果酸的含量 .药物分析
杂志 , 2004, 24(2):167.
(2007-08-28收稿)
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