全 文 :收稿日期:2014-02-08; 修订日期:2014-06-28
基金项目:山西省科技攻关项目(No. 20120313015 - 1) ;
山西省太原市科技项目(No. 12024730)
作者简介:吕绍伟(1984-) ,男(汉族) ,山西汾阳人,山西省中医药研究院
在读硕士研究生,主要从事中药化学研究工作.
* 通讯作者简介:倪 艳(1965-) ,女(汉族) ,山西太原人,山西省中医药
研究院主任药师,硕士研究生导师,硕士学位,主要从事中药药效物质基
础研究工作.
还阳参的生药学研究
吕绍伟,贺石麟,彭照琪,郭丁丁,倪 艳*
(山西省中医药研究院,山西 太原 030012)
摘要:目的 通过对还阳参的生药学鉴定研究,为该药的开发利用及质量标准的制定提供依据。方法 采用原植物性状鉴
别、显微鉴别及薄层色谱鉴别法。结果 首次详细描述了还阳参显微鉴别特征;经薄层色谱分析发现该药材含有绿原酸
成分。结论 所发现的这些特征可作为鉴别还阳参的依据。
关键词:还阳参; 植物性状; 显微鉴定; 薄层色谱
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 01. 046
中图分类号:R282. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2015)01-0119-02
还阳参为菊科植物屠还阳参 Crepis turczaniowii C. A. Mey.的
全草,别名屠还阳参,驴打滚儿草,主要分布在山西、内蒙古一
带[1,2],在我省北部地区资源尤为丰富。其味苦,性微寒,具有益
气、止咳平喘、清热降火之功效,用于治疗慢性支气管炎、肺结核
等呼吸系统疾病[3,4]。鉴于缺乏有关还阳参的生药鉴定资料,本
文对药材性状鉴别、组织与粉末的显微鉴别和薄层色谱进行了比
较详细的研究,为其质量标准的制定和开发利用提供了科学的鉴
定依据。
1 材料与仪器
1. 1 药材 还阳参药材于 2013 年 6 月采集于山西山阴、沁源及
内蒙古,经山西省中医药研究院中药方剂研究所倪艳教授鉴定为
菊科植物屠还阳参 Crepis turczaniowii C. A. Mey.的全草。
1. 2 仪器与试剂 BX51 - P显微镜(日本奥林巴斯) ;KQ3200DB
型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司) ;BP211D型电
子天平 (德国赛多利斯) ;DZKW -4 型电子恒温水浴锅(北京中
兴伟业仪器有限公司) ;DFT - 200C 型粉碎机(上海比朗仪器有
限公司) ;标准筛(浙江上虞市金鼎标准筛具厂) ;薄层层析硅胶
G、薄层层析硅胶 H(化学纯 青岛海洋化工有限公司) ;聚酰胺薄
膜(10 × 20cm上海国药集团化学试剂有限公司) ;绿原酸对照品
(中国药品生物制品检定所,批号:110753 - 200413) ;其它试剂均
为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 药材性状 本品呈皱缩卷曲团状。根圆锥形,多碎断,棕褐
色。茎单生或 2 ~ 4 个簇生,不分枝或分枝。叶基生,多皱缩破
碎,完整叶片呈倒披针形,边缘羽状浅裂,基部渐狭,下延呈柄状,
下表面主脉明显;茎生叶条形,最上部叶小,多脱落。头状花序单
生枝端;总苞钟状,内层苞片边宽膜质;舌状花黄色。瘦果纺锤
形,暗紫色或黑色,长 5 ~ 6 mm,宽 1 mm,顶端无喙;冠毛白色,长
7 ~ 8 mm。气微,味微苦。
2. 2 显微鉴别[5]
2. 2. 1 石蜡封片 组织横切面采用石蜡封片法,制成永久装片进
行观察。
2. 2. 1. 1 取材 取还阳参药材根部、茎部,表皮完整,无破损、挫
伤、干枯,将其横切成厚度约 1 ~ 3 mm。
2. 2. 1. 2 固定 将药材用 F. A. A 固定液(70%乙醇∶ 甲醛∶ 冰
醋酸 = 90∶ 5∶ 5)固定 7 天。
2. 2. 1. 3 脱水-透明-浸蜡 将固定好的药材取 6 块,用 70%乙醇
冲洗 2 ~ 3 次,后放入脱水篮中进行脱水、透明、浸蜡。
2. 2. 1. 4 包埋 切片一摊片;脱蜡-染色-透明-封固;镜检,拍照 。
通过以上整个过程,制成永久性装片。然后通过镜检,观察其内
部构造,并将所观察到的主要特征进行拍照。
2. 2. 2 临时装片 粉末采用临时制片法制成临时装片进行观察。
2. 2. 2. 1 水合氯醛装片 取药材粉末(过 40 目筛)少许于载玻片
上,加水合氯醛 2 ~ 3 滴,加热片刻,加稀甘油 1 ~ 2 滴,封片后置
显微镜下观察。
2. 2. 2. 2 醋酸甘油装片 取药材粉末少许,加醋酸甘油 1 ~ 2 滴
直接封片后置显微镜下观察。
2. 2. 3 茎横切面观察结果 ①表皮:一层细胞,外被角质层。②
皮层:皮层薄壁细胞 4 ~ 5 层,在棱脊处有厚角组织,内皮层明显。
③维管柱:为无限外韧型维管束,环列,于棱脊处较大;韧皮部细
胞较小,形成层成环,髓射线宽窄不一。④髓:髓部宽广,中心常
中空。见图 1。
图 1 还阳参的茎横切面图
2. 2. 4 根横切面 ①木栓层:为数列细胞,栓内层窄。②皮层:环
状排列的异型构造。③维管束:韧皮部,形成层成环,木质部导管
甚多,呈放射状排列。见图 2。
2. 2. 5 药材粉末 本品粉末黄绿色,①可见冠毛;②非腺毛单细
胞,细长弯曲木栓细胞呈长方形或类方形,排列整齐;③导管主要
为螺纹或网纹导管,直径 17 ~ 19 μm。淀粉粒较少,层纹不明显,
纤维单个散在,少数成束,多平直,少数弯曲,胞腔线形,木化,且
有单细胞非腺毛;④花粉粒黄色近球形或圆三角形,具 3 孔沟,表
面有细密短刺及细颗粒状雕纹,。⑤木栓细胞呈长方形或类方
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形,排列整齐;⑥气孔不定式或不等式,副卫细胞 4 ~ 6 个。见
图 3。
图 2 还阳参的根横切面图
1.冠毛(20 ×) 2.非腺毛(40 ×)
3.导管(20 ×) 4.花粉粒(20 ×) ;
5.木栓细胞(20 ×) ;6.气孔(40 ×)
图 3 还阳参粉末显微特征图
2. 3 薄层鉴别[6]
2. 3. 1 样品制备
2. 3. 1. 1 供试品溶液制备 取本品粉末 1 g,加稀盐酸 1 ml 和乙
酸乙酯 50 ml,超声处理 30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 1 ml
溶解即得。
2. 3. 1. 2 对照品溶液制备 取绿原酸对照品,加甲醇配制成 1
mg /ml的溶液,作为对照品溶液。
2. 3. 2 点样 吸取上述对照品及供试品溶液各 5 μl,分别点于聚
酰胺板,以 36%醋酸溶液为展开剂,上行展开,取出,晾干,直接
置于紫外灯(365 nm)下检视。
2. 3. 3 结果 从实验结果可以看出,3 个产地的还阳参药材在与
绿原酸对照品相应的位置上有颜色相同并且 Rf 值相同的斑点。
见图 4。
1.绿原酸对照品 2.还阳参药材(内蒙古 20130610)
3.还阳参药材(山阴 20130601)4.还阳参药材(沁源 20130603)
5.绿原酸对照品
图 4 还阳参药材薄层色谱图
3 结论
通过显微鉴别研究,各种显微特征明显,采用薄层色谱法进
行研究,薄层鉴别实验分离效果和重现性好,首次发现还阳参含
有绿原酸成分,适用于对还阳参的鉴别研究,可为还阳参的开发
利用,质量控制提供方法和依据。
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