全 文 ：2001年 1月 内蒙古大学学报 (自然科学版 ) Jan. 2001第 32卷第 1期 Acta Scientiarum Naturalium Univ ersi tati s NeiM ongol Vol. 32 No. 1
　　文章编号: 1000- 1638( 2001) 01-0050-04
天然植物脓疮草中黄酮类
有效成分提取与分离的研究 (一 )
邹淑仙 , 宝乐日
(内蒙古大学化学系 ,内蒙古 呼和浩特 010021)
摘要:将脓疮草晾干粉碎后 ,依次用石油醚、乙醚、 70%乙醇水浴加热迥流提取 ,后两种提取液
浓缩后 ,用乙酸乙酯萃取 ,经聚酰胺柱层析分离、薄层层析及紫外光谱检查 ,证明 70%乙醇提
取液的上清液中含六种黄酮类化合物 .
关键词: 脓疮草 ;黄酮类有效成分 ;提取分离
中图分类号: O658. 1　　文献标识码: A
引　言
　　脓疮草 ( Panzerina Lanata ( L. ) Sojak)、俗名白龙昌菜 ,为唇形科脓疮草属植物 ,在内蒙古乌兰
察布、鄂尔多斯、东阿拉善有分布 .内蒙古蒙医将其全草入药用于治疗妇科疾病 ,其疗效优于益母草 .
《内蒙古蒙药材标准》已将其收录在册〔 1〕 ,其蒙药名为查干—都日布乐吉—乌布斯 .目前 ,国内外对脓
疮草中成分的研究尚属空白 ,我们的初步研究结果表明 ,脓疮草中富含人体必需的微量元素和常量元
素以及生物碱和黄酮类有效成分〔2〕 .
由于中草药中有许多黄酮类成分具有特殊的生理效能 ,如防治高血压、脑溢血、肝炎、肝硬化 ,延
缓机体衰老及抗癌活性等药理作用 .因此 ,本文首先对脓疮草中所含黄酮类有效成分〔3〕进行提取与分
离的研究 ,以备获得各单一的黄酮类成分、进行结构表征 ,也为制药配伍及探讨脓疮草的药效、发现其
新疗效提供植化依据 .
黄酮类化合物是泛指两个芳环 ( A与 B)通过三碳链相互联结而成的一系列化合物 ,其基本结构
为:
A
5
6
7
8
C
O
O
2 1 B′
2′ 3′
4′
5′6′
3
, C6 - C3 - C6
3位碳上有 OH取代基时 ,称为黄酮醇 ,若 C环内 2与 3位碳之间为单键时 ,称为二氢黄酮类 ;若 B环
连接于 C环的 3位碳上 ,则称为异黄酮 .天然黄酮类化合物多为上述基本母体的衍生物 ,常见的取代
基有 - OH、 - O CH3 ,也称为黄酮甙元 ,若甙元中 - OH、 - O CH3取代基中的 H或 CH3被糖类取代 ,
则称之为黄酮甙 ,其极性大于黄酮甙元 ,黄酮类化合物广泛分布于植物药中 ,其药理作用多种多样 ,引
收稿日期: 1999-11-18
基金项目: 内蒙古自然科学基金资助项目
作者简介: 邹淑仙 ( 1942～ ) ,女 ,辽宁省盖县人 ,内蒙古大学教授 .
起了国内外的重视 ,研究脓疮草中的黄酮类有效成分 ,也为充分开发利用这一自然资源提供植化依
据 .
1　实验部分
1. 1　仪器与试剂
恒温水浴箱 ,迥流加热装置 ,真空旋转蒸发器、紫外灯 ,玻璃层析缸 ( 10cm× 10 cm ) ,层析柱 ( 30cm
× 1. 5 cm )分液漏斗 , UV— 240紫外—可见分光光度计 .聚酰胺填料 ( 30～ 60目及 10～ 30目 ) ,聚酰
胺— 6薄膜 ( 8cm× 8 cm ) (原浙江黄岩四青生化材料厂生产 ) ,乙醇 ,乙醚 ,石油醚 ,乙酸乙酯 ,丁酮 ,乙
酰丙酮 ,甲醇 ,苯 (均为分析纯 ) .
1. 2　实验方法
1. 2. 1　黄酮类成分的提取　脓疮草经粉碎机粉碎后 ,每次取 250 g于 2000 m l圆底烧瓶中 ,依次用
石油醚 ,乙醚 , 70%乙醇进行水浴加热迥流提取 ,每种溶剂提取 3次 ,每次 2～ 3 h,乙醚及 70%乙醇提
取液均趁热过滤、经真空旋转蒸发器回收溶剂、浓缩后 ,用乙酸乙酯萃取 ,萃取液浓缩得浸膏 ,分别提
供薄层层析和柱分离研究 .
1. 2. 2　薄层层析　取少量浸膏溶于少量甲醇中 ,用自制毛细管点样于聚酰胺— 6薄膜上 (样点距薄
膜底边 1 cm) ,于层析缸中 ( 10 cm× 10 cm)分别用不同的展开剂展开 ,待溶剂前沿上移至距薄膜上边
缘 0. 5 cm时 ,取出、晾干 ,置紫外灯下观察各样的荧光斑点 ,据此确定样中所含黄酮类成分的数目 ,并
选择最佳展开剂供柱层析分离用 .
1. 2. 3　柱层析分离　以 30～ 60目的聚酰胺干法装柱 ,填料高度为 20 cm ,以 10～ 30目的聚酰胺与
溶于甲醇中的样品的浸膏混匀拌样装于柱填料之上 ,样品高度为 2 cm,其上再装入聚酰胺 ( 30～ 60
目 ,高度为 1 cm )填料 ,盖滤纸片后 ,放入数粒玻璃珠 ,柱填料与样品之间的界面以滤纸片相隔 ,柱上
口安装磨口滴液漏斗 ,洗脱剂由该漏斗加入柱内 ,相继以甲醇—水 (比例依次为 4∶ 10, 4∶ 8, 4∶ 6,
4∶ 4, 4∶ 2)及甲醇进行洗脱 ,柱下端连接磨口锥形瓶 ,接收洗脱液 .
1. 2. 4　柱层析分离结果的检查　分别取少量各洗脱液蒸至近干后溶于甲醇中 ,点样于聚酰胺— 6薄
膜上进行薄层层析检查 .各洗脱液的剩余部分 ,用甲醇稀至一定体积后扫描各自的紫外吸收光谱 ,据
吸收峰位及数目判断柱层析的分离结果 .
2　结果与讨论
2. 1　提取剂的选择
用石油醚可提取除去叶绿素 ,用乙醚提取黄酮甙元 ,用 70%乙醇可提取部分黄酮甙元和全部的
黄酮甙 ,如此不但可完全提取黄酮类化合物 ,同时也为柱层析分离提供方便 .
图 1( a)　聚酰胺薄膜层析图
展开剂: 苯—丁酮—甲醇 ( 6∶ 2∶ 2) , 1. 70%乙醇提取液的上清液 ; 2. 70%
乙醇提取液的下层沉淀 ; 3. 1和 2的混合物
Fig . 1 ( a )　 Po lyamide thin film ch roma tog raphy , development r ea gent:
benzene-butanone-methano l ( 6∶ 2∶ 2) ; 1. clear so lution ove r ex tract o f
70% ethanol; 2. pr ecipitation in the ex tract o f 70% ethano l; 3. mix ture o f
1 and 2
图 1( b)　聚酰胺薄膜层析图
展开剂:水—丁酮—乙醇— 乙酰丙酮 ( 6. 5∶ 1. 5∶ 1. 5∶ 0. 5)
Fig . 1( b )　 Po lyamide thin film ch roma tog raphy , development r ea gent:
wa ter-butanone-ethanol-acety lacetone ( 6. 5∶ 1. 5∶ 1. 5∶ 0. 5)
2. 2　薄层层析结果
分别如图 1、图 2所示 .由图示可知 , 70%乙醇提取液的上层清液与下层沉淀所含黄酮类成分不
51第 1期 邹淑仙 ,宝乐日　天然植物脓疮草中黄酮类有效成分提取与分离的研究 (一 )
同 ;以甲醇—水为展开剂时其比例为 4∶ 1,分离效果好、选择甲醇—水其作为柱层析的洗脱液 .
2. 3　柱层析分离的结果
　　以不同比例的甲醇—水进行柱层析梯度洗
脱 ,接收的洗脱液进行薄层层析和紫外吸收光
谱检查 .由薄层层析检查和紫外吸收光谱的检
查结果可知 ,两种方法所得结论一致 ,即以甲醇
—水 ( 4∶ 10, 4∶ 8和 4∶ 6, 4∶ 4, 4∶ 2)为洗脱
剂 ,可分别洗脱得到单一的黄酮类成分 ,用纯的
甲醇可洗脱得到两种黄酮类成分的混合物 ,试
验表明 ,仅 70%乙醇提取液的上清液中就至少
含六种黄酮类成分 .
　　表 1给出柱层析分离所得各洗脱液的紫外
吸收光谱的吸收峰以及橙皮甙标准品的紫外吸
收光谱的吸收峰 ,并由此可判断 ,柱层析可分离
得到四个单一的黄酮类成分和两种黄酮类成分
的混合物 ,这与薄层层析 (层析图略 )检查所得
结论一致 .对于乙醚提取液及 70%乙醇提取液
的下层沉淀部分中所含黄酮类成分 ,有待进一
步继续实验确定 .
图 2　聚酰胺薄膜层析图
展开剂: 甲醇—水 ,比例依次为 8∶ 2, 6∶ 4, 5∶ 5, 7∶ 3,
1∶ 9, 9∶ 1
Fig. 2　 Po lyamide thin film chromato g raph y develop-
ment reagent: me thano l-wa ter, the pr eopo rtion in o rder
to 8∶ 2, 6∶ 4, 5∶ 5, 7∶ 3, 1∶ 9, 9∶ 1
表 1　洗脱液及橙皮甙的紫外吸收峰
Table 1　 The absorb peak in ultra for eluant and hesperidin
洗脱剂 (甲醇—水 ) 洗脱液颜色 紫外吸收峰 ( nm)
A环吸收峰 ( nm) B环吸收峰 ( nm)
4∶ 10 黄 270 362
4∶ 8
4∶ 6 淡黄 265265 310310
4∶ 4 淡黄 (近于无色 ) 262 320
4∶ 2 黄 268 280
甲醇 (第一次洗脱 ) 土黄 (浑浊 ) 260 282 312 365
甲醇 (再次洗脱 ) 亮黄 (透明 ) 265 282 312 362
橙皮甙 (标准品 ) 无色 278 365
　　黄酮类化合物的紫外吸收光谱由两个吸收带组成 ,吸收带Ⅰ 在 300～ 400 nm之间 ,是由 B环桂
皮酰基系统的 π电子跃迁所引起 ,吸收带Ⅱ在 240～ 285 nm之间 ,是由 A环的苯甲酰基系统的 π电
子跃迁引起的 .柱层析的甲醇—水洗脱液的紫外吸收光谱呈现 A环和 B环吸收峰 ,说明这些洗脱液
中各自含单一的黄酮类成分 ,而甲醇的洗脱液的紫外吸收光谱呈现两个 A环吸收峰和两个 B环吸收
峰 ,说明该洗脱液中含两种黄酮类成分 ,有待进一步进行柱层析分离 .
52 内蒙古大学学报 (自然科学版 ) 2001年
参考文献:
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plant panzerina [ J].高等学校化学学报 , 1999, 20(增刊 ): 271.
Studies on Ex tracting and Separating of Flav onoids Effectiv e
Constituents in Natural Plant Panzerina
ZO U Shu-xian, BAO Le-ri
(Department of Chem istry , NeiMongol Univ ersity , Hohhot 010021, PRC )
　　 Abstract: The powder of Panzerina was dissolv ed in Ether and 70% EtO H respectiv ely, and
heated under back flow in w ater bath. The ex t racts o f Ether and 70% EtO H were fi ltered w hi le they
w ere ho t and inso luble substances w ere removed, then the ex t racts w ere concentrated under reduced
pressure, ex t racted by repeatedly shaking w ith ethyl acetate, and evapo ra ted to dryness. The residue
w as dissolv ed in MeOH and subjected to TLC. In o rder to find proper reagent of development the
sample w as studied on the polyamide thin fi lm chroma tog raphy. The result has show n that the best
reagent of development is M eOH-water( 4∶ 1) . Then compounding dif ferent propo rtion of M eOH-
water eluants conduct elution on polyamide powder co lumn ch romatog raphy to separate f lav onoids
consti tuents. From analy sis of the elut riant w e maintain tha t Panzerina contains at least four kinds
o f flavonoids effectiv e constituents.
Key words: Panzerina; f lav onoids consti tuents; ex t racting separating
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