全 文 ：中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀注入液相色谱仪，测定。
以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归，得标准曲
线方程为:y = 19314x － 7927，Ｒ2 = 0． 9997，胡椒碱在 21． 88
～ 218． 80ug /mL范围内呈良好的线性关系。
2． 4 精密度试验
取 3． 2． 1 项下对照品溶液，按上述色谱条件，连续进样
5 次，峰面积的值为指标计算 ＲSD，考察精密度。结果胡椒
碱的 ＲSD为 0． 15%，表明仪器精密度良好。
2． 5 重复性试验
取同一批(批号:201406123)样品 5 分按“3． 2． 2”项下
方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定。结果胡椒碱
含量的平均值为 5． 46mg /g，ＲSD 为 1． 20%表明本方法重
复性较好。
2． 6 稳定性试验
取同一批号(201406123)分别在同一天的不同时间
(2h，4h，8h，12h，24h)用上述色谱条件下重复测定 5 次，计
算胡椒碱峰面积，ＲSD为 0． 70%
2． 7 回收率试验
采用标准添加法测定回收率。精密称取供试品(批
号:201406123)1． 5g ，制备供试品溶液，精取供试品溶液 5．
0mL，共 5 份，置 10mL 容量瓶中，分别加入浓度为 0．
1094mg /mL的胡椒碱对照品溶液 5． 0mL，并进样 10μL 测
定含量，结果见表 1。
表 1 回收率试验
成分
取样
量 /g
样品中胡椒
碱的含量
/mg
加入对照
品的量
/mg
实测量
/mg
回收率
/%
平均回
收率 /%
ＲSD
/%
胡
椒
碱
1． 4318 5． 5412 0． 547 6． 2080 101． 95
1． 4466 5． 5874 0． 547 6． 2400 101． 72
1． 4304 5． 5840 0． 547 6． 2241 101． 52 102． 11 0． 53
1． 4366 5． 5514 0． 547 6． 2541 102． 55
1． 3895 5． 5201 0． 547 6． 2363 102． 79
3 样品的含量测定
取 3 批样品分别按上述方法制备供试品溶液，注入液
相色谱仪，按上述色谱条件下测定，计算样品中胡椒碱的含
量。结果分别为 5． 37mg /g、5． 42mg /g、5． 41mg /g，平均含量
为 5． 40mg /g。
4 讨论
胡椒碱为胡椒的主要成分，该方法专属性强，测定结果
准确可靠，重复性，相关性好。
参考文献
［1］卫生部药典委员会．中华人民共和国卫生部药品标准
维吾尔药分册［S］．
［2］卫生部药典委员会．中国药典［S］． 一部． 2010 年．
2015 年 2 月 10 日收稿
HPLC法测定蒙药材脓疮草中盐酸水苏碱的含量
王 栋 丁 宁 周雪梅
( 内蒙古自治区食品药品检验所，内蒙古 呼和浩特 010010)
摘 要:目的:建立脓疮草的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法。以丙基酰胺键合硅胶为填充剂色谱柱;乙腈 － 0．
5%冰醋酸溶液( 82: 18) 为流动相，流速为 1 mL·min －1 ;用蒸发光散射检测器检测。结果:以对数方程进行回归分析，盐酸
水苏碱在 0． 675 ～ 13． 510μg范围内呈良好的线性关系( r = 0． 9996) ; 平均回收率为 100． 39%。结论:本实验方法准确，灵
敏，简便，可作为脓疮草中盐酸水苏碱的含量测定方法。
关键词:脓疮草;白益母草;盐酸水苏碱;高效液相色谱法
中图分类号:Ｒ291． 2 文献标识码:A 文章编号:1006 － 6810(2014)05 － 0053 － 02
脓疮草为唇形科植物白龙昌菜 Panzeria alaschanica
Kupr．的干燥地上部分，别名白益母草，为蒙古族常用药
材，具有活血调经，祛云退翳的作用［1］［2］。经实验研究，
脓疮草含有盐酸益母草碱、盐酸水苏碱等成分，本文结合
文献方法［3］，对脓疮草中的盐酸水苏碱进行了含量测定
方法研究，认为盐酸水苏碱的含量满足高效液相色谱法
蒸发光散射检测器检测的要求，故进行了方法学研究，结
果如下。
1 仪器与试剂试药
1． 1 仪器:日本岛津 LC － 20AT 型高效液相色谱仪(带
ELSD 2000 型蒸发光散射检测器)，Sartorius ME5 型电子天
平，Mettler AE － 100 型电子天平，JD200 － 2 型电子天平。
1． 2 试剂与试药:盐酸水苏碱对照品由中国药品生物制品
检定所提供(批号:110712 － 201010)，纯度 99． 9%;乙腈为
色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为高纯水。
脓疮草药材:均为野外采集，1 号样品采于内蒙古鄂尔
多斯市;2 号样品采于内蒙古乌审旗;3 号样品采于内蒙古
伊金霍洛旗。经专家鉴定均为正品。
352015 年 5 月第 5 期 中国民族医药杂志
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2015.05.040
2 实验方法与结果
2． 1 色谱条件:丙基酰胺键合硅胶为填充剂色谱柱，本实
验研究采用 Venusil HILIC柱(250 × 4． 6mm 5μm);以乙腈
－ 0． 5%冰醋酸溶液(82:18)为流动相;柱温 30℃;检测器
漂移管温度 80℃，气体流速 2． 5mL·min －1。
2． 2 对照品溶液的制备:取盐酸水苏碱对照品适量，精密
称定，加 70%乙醇制成每 1mL 约含 0． 33mg 的溶液，即得
(色谱图见图 1)。
图 1 盐酸水苏碱对照品色谱图
2． 3 供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约 1g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 70%乙醇 25mL，称
定重量，加热回流 2h，放冷，再称定重量，用 70%乙醇补足
减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得(色谱图见图 2)。
图 2 脓疮草供试品色谱图
2． 4 线性关系考察:取盐酸水苏碱对照品 3． 388mg，置
10mL量瓶中，加 70%乙醇使溶解，并稀释至刻度，精密吸
取 2μL、5μL、10μL、15μL、20μL、30μL、40μL 注入液相色谱
仪，按上述色谱条件测定，以峰面积对进样量进行对数回归
分析，结果盐酸水苏碱在 0． 675μg ～ 13． 510μg 范围内呈良
好的线性关系，回归方程为 Y = X0． 7173EXP(－ 8． 4049)，r
= 0． 9996(标准曲线见图 3)。
图 3 盐酸水苏碱对数标准曲线图
2． 5 重复性试验:取同一供试品(1 号)6 份，各约 1g，精密
称定，分别按上述供试品溶液的制备方法和色谱条件进行
测定，进样量各 10μL，结果供试品平均含量为 11． 23mg·
g －1，ＲSD为 1． 2%。
2． 6 准确度试验:取同一供试品(1 号，含量 11． 23mg·
g －1)6 份，各约 0． 5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精
密加入对照品约 4mg，精密加 70%乙醇 25mL，按上述方法
测定，结果平均回收率为 100． 39%，ＲSD为 1． 0%。
2． 7 样品含量测定:取本品粉末按上述方法处理并测定，
不同来源的 3 批样品的测定结果分别为 1 号 11． 23 mg·
g －1、2 号 11． 84 mg·g －1、3 号 10． 25 mg·g －1。
3 讨论
3． 1 流动相的选择:结合文献方法［3］，采用乙腈 － 0． 2%冰
醋酸溶液(80:20)作为流动相，结果分离效果不好，经实验
摸索，将流动相调整为乙腈 － 0． 5%冰醋酸溶液(82:18)。
3． 2 柱温选择:实验中对 30℃和 35℃柱温进行了比较，结
果保留时间略有差异，但分离度及理论板数没有变化，故本
实验研究将柱温定为 30℃。
3． 3 供试品溶液的制备条件选择
3． 3． 1 提取溶剂的选择:结合文献方法［3］，选用 70%乙醇
作为提取溶剂，得到了较好的分离效果，故选择 70%乙醇
作为提取溶剂。
3． 3． 2 提取方法的选择:分别采用 70%乙醇加热回流和
超声提取两种方法进行了比较，结果加热回流含量较高，故
选用 70%乙醇加热回流进行提取。
3． 3． 3 提取效率考察:取本品粉末 4 份(过三号筛)，各约
1 g，精密加入 70%乙醇 25mL，称定重量，依次加热回流 1h、
2h、3h和 4h，放冷，再称定重量，用 70%乙醇补足减失的重
量，摇匀，滤过，取续滤液，按上述色谱条件测定，结果回流
提取 2h以后，盐酸水苏碱的含量不再增加，故确定回流提
取时间为 2h。
3． 4 稳定性考察:取同一供试品溶液，分别于 0h、2h、4h、
8h、12h、24h进行测定，结果峰面积积分值 ＲSD 为 0． 47%，
认为供试品溶液在 24h内盐酸水苏碱的含量是稳定的。
参考文献
［1］中华人民共和国卫生部．卫生部药品标准·蒙药分册
［S］． 1998: 11．
［2］马毓泉．内蒙古植物志( 第二卷) ［M］． 呼和浩特: 内蒙
古人民出版社，1980: 208．
［3］国家药典委员会．中国药典［S］． 一部． 北京: 中国医药
科技出版社，2010: 272 － 273．
2015 年 2 月 12 日收稿
45 中国民族医药杂志 2015 年 5 月第 5 期