全 文 :收稿日期:2012-08-30;修回日期:2013-04-25
基金项目:内蒙古农业大学博士基金项目(202-206057)资助
作者简介:雷雪峰(1980- ),男,内蒙古呼和浩特人,讲师,博士,
从事草地植物生理生态等方面的教学与科研工作,发表相关论文7
篇,E-mail:leixuefeng80@163.com.
文章编号:1673-5021(2013)06-0014-05
偃麦草属三种植物幼苗干旱、盐渍交叉适应生理基础比较
雷雪峰,曹会志,董烨文,石淳博
(内蒙古农业大学农学院,内蒙古 呼和浩特 010019)
摘要:采用人工气候箱砂培的方法研究了不同抗性的三种偃麦草属植物幼苗在干旱、盐渍交叉逆境下生理特性
的变化与交叉适应的关系。结果表明,三种偃麦草属植物幼苗经适度干旱、盐渍单一逆境处理后,RC、MDA含量、
Pro含量、SP含量及POD活性等指标较对照均有显著升高,苗高显著降低;经交叉逆境处理后,上述各指标较单一
逆境处理存在明显差异,其中RC及 MDA含量明显降低,Pro含量、SP含量及POD活性等指标明显增强,苗高差异
不显著。偃麦草属植物幼苗对干旱、盐渍相互交叉处理存在明显的交叉适应现象,经一种逆境处理后可提高对另一
逆境的抗性。线性相关分析显示,在干旱、盐渍及其交叉逆境下,三种材料相比各项生理指标线性相关性总体趋势
基本一致,但也存在部分差异。
关键词:偃麦草属;交叉适应;逆境;干旱;盐渍
中图分类号:S543 文献标识码:A
偃麦草属(Elytrigia)是禾本科小麦族(Triticeae
Dumort)多年生根茎疏丛型草本植物,具有十分重要的
利用价值。有的种质以其强抗旱性、抗寒性、耐盐碱性
和抗病性等成为小麦进行远缘杂交的重要亲本材料,
成为小麦改良不可缺少的野生基因库;有些种质还是
我国中西部地区重要的牧草资源和防风固沙、水土保
持、改良盐碱地的理想植物。有关偃麦草属植物的抗
性研究多数为单一逆境下[1~3]的研究,对其交叉抗逆性
研究至今鲜为报道。本试验选取不同抗性的三种偃麦
草属植物幼苗为实验材料,进行干旱、盐渍交叉适应生
理基础比较研究,为探讨偃麦草属植物的交叉适应生
理机制提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为三种不同抗性的偃麦草属植物,其
抗性强弱顺序为:中间偃麦草[Elytrigia interme-
dia(Host)Nevski]>偃麦草[E.repens(L.)Nevs-
ki]>硬叶偃麦草[E.smithii(Rydb.)Keng cv.Ro-
sana][4],由内蒙古农业大学农学院草地植物生理生
态研究室提供,详见表1。
1.2 试验方法
1.2.1 幼苗培养
实验以细沙为基质,将其装入口径为12cm、高
12cm的圆形花盆中。将供试种子以 0.1% 的
HgCl2 消毒10min,漂洗干净,每盆播种40粒饱满
的种子于上述花盆中,每个处理4次重复,将花盆中
缓慢地浇透自来水(以花盆下部开始渗水为准),后
表1 供试材料及来源
Table 1 Species and sources of Elytrigiain experiment
编号
Code
中文名称
Chinese
name
来源
Sources
采种地点
Seed
colection
sites
采种时间
Seed
colection
time
Ⅰ 中间偃麦草 中国 内蒙古农业大学 2008.9
Ⅱ 偃麦草 中国 内蒙古农业大学 2008.9
Ⅲ 硬叶偃麦草 美国 内蒙古农业大学 2008.9
移入25℃的人工气候培养箱中培养,待种子萌发后
开启光照,光照强度为白天(7∶00~19∶00)
12300Lx,夜晚(19∶00~7∶00)0Lx,同时每天定
时定量浇水1次,培养3d后用于下述处理。
1.2.2 材料处理方法
(1)对照:将培养3d后的供试材料继续培养
(正常浇水)10d后测定各项生理指标。
(2)正常+干旱:将培养3d后的供试材料继续培
养6d后,将其干旱处理(停止浇水)4d,测定各项指标。
(3)正常+盐渍:将培养3d后的供试材料继
续培养6d后,将其用按 NaCl∶CaCl2∶MgSO4∶
K2SO4 为71∶3∶4∶22的比例配制[5]的0.6%的
复盐处理4d后测定各项指标。
—41—
第35卷 第6期
Vol.35 No.6
中 国 草 地 学 报
Chinese Journal of Grassland
2013年11月
Nov.2013
(4)干旱+盐渍:将培养3d后的供试材料干
旱处理4d后恢复浇水2d,再将其用0.6%的复盐处
理4d后测定各项指标。
(5)盐渍+干旱:将培养3d后的供试材料用
0.6%的复盐处理4d,用自来水充分冲洗后正常浇
水2d,再将其干旱处理4d后测定各项指标。
1.2.3 测定项目与方法
分别取上述五种处理材料的叶片,测定苗高
(SH)及以下生理指标:(1)相对电导率(RC)采用电导
率法;(2)丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法;
(3)游离脯氨酸(Pro)含量采用茚三酮比色法;(4)过
氧化物酶(POD)活性采用愈创木酚氧化比色法;(5)
可溶性蛋白(SP)采用考马斯亮蓝G-250染色法 [6]。
1.2.4 数据处理
利用Excel 2007及SPSS18.0相关统计软件进
行方差分析及相关分析。
2 结果与分析
2.1 偃麦草属三种植物幼苗相对电导率的变化
从表2可以看出,干旱、盐渍处理的三种偃麦草幼
苗RC与对照相比均有不同程度的增加,其中中间偃麦
草分别增加了91.50%、74.96%,偃麦草分别增加了
102.52%、80.08%,硬叶偃麦草分别增加了84.43%、
104.27%;在0.05水平上与对照差异均显著,表明
三种偃麦草幼苗在干旱、盐渍处理下细胞膜均受到
损伤,且抗性越弱受伤害程度越重。而干旱、盐渍交
叉逆境与单一逆境相比RC有所下降,其中中间偃
麦草 下 降 了 9.75%、15.98%,偃 麦 草 下 降 了
12.24%、13.50%,硬叶偃麦草下降了 6.71%、
9.12%。偃麦草交叉处理与单一处理RC差异显著
(P<0.05),其他两个种交叉处理与单一处理间RC
差异不显著。由此表明,干旱、盐渍交叉处理可减轻
后一逆境对植物造成的伤害,只是减轻的程度同植
物抗性强弱无一致性关系。
2.2 三种偃麦草幼苗丙二醛含量的变化
由表2可见,干旱、盐渍处理的3种偃麦草属植
物幼苗 MDA含量与对照相比均有不同程度的增
加,其 中 中 间 偃 麦 草 分 别 增 加 了 157.14%、
128.57%,偃麦草分别增加了166.67%、133.33%,
硬叶偃麦草分别增加了185.71%、157.14%;在
0.05水平上与对照差异均显著,表明三种偃麦草幼
苗在干旱、盐渍处理下 MDA含量均有明显的积累,
表2 干旱、盐渍交叉逆境下偃麦草属幼苗生理指标的变化
Table 2 Change of physiological indices under drought and saline stress of Elytrigiaseedlings
处理
Treatment
材料
Materials
相对电导率(%)
RC
丙二醛含量(μg/g)
MDA
游离脯氨酸含量
(μg/g)Pro
可溶性蛋白含量
(mg/g)SP
过氧化物酶活性
(U/μg·min)POD
苗高(cm)
SH
对照 Ⅰ 11.3c 0.007c 36.45d 9.22d 77.12d 15.24a
Ⅱ 12.3d 0.006c 88.51e 8.54d 71.65c 14.91a
Ⅲ 13.1c 0.007b 45.24e 8.35c 69.12c 14.53a
正常+干旱 Ⅰ 21.64a 0.018a 263.72b 45.34b 155.21b 12.56bc
Ⅱ 24.91a 0.016a 542.46c 38.15b 145.43a 12.42b
Ⅲ 24.16ab 0.020a 187.48c 29.49b 113.54b 11.84b
盐渍+干旱 Ⅰ 19.53ab 0.015ab 342.94a 51.42a 164.74a 12.17c
Ⅱ 21.86b 0.013ab 621.74a 42.33a 156.53a 11.06c
Ⅲ 22.54b 0.017a 224.71a 35.38a 137.73a 11.53b
正常+盐渍 Ⅰ 19.77ab 0.016a 233.45c 36.48c 145.56c 13.38b
Ⅱ 22.15b 0.014ab 480.23d 31.46c 125.94b 13.23b
Ⅲ 26.76a 0.018a 156.54d 26.95b 109.12b 12.28b
干旱+盐渍 Ⅰ 16.61b 0.012b 268.54b 39c 150.24bc 12.85bc
Ⅱ 19.16c 0.011b 591.13b 33.3c 131.52b 12.18bc
Ⅲ 24.32ab 0.015a 203.74b 30.3b 113.88b 11.92b
注:同一材料不同处理间不同小写字母表示0.05水平上差异显著。
Note:Different smal letters in the same accessions between different treatments mean significant difference at 0.05level.
且抗性越弱,MDA含量增加越多。而干旱、盐渍交
叉逆境与单一逆境相比 MDA含量有所下降,其中
中间偃麦草下降了16.67%、25.00%,偃麦草下降
了18.75%、21.43%,硬叶偃麦草下降了15.00%、
16.67%。中间偃麦草交叉处理(干旱+盐渍)与单
一处理(正常+盐渍)MDA含量下降显著(P<0.05),
其他两种交叉处理与单一处理间差异均不显著。
2.3 三种偃麦草幼苗脯氨酸含量的变化
由表2可见,干旱、盐渍处理的三种偃麦草属植
物幼苗Pro含量与对照相比均有显著的增加,其中
—51—
雷雪峰 曹会志 董烨文 石淳博 偃麦草属三种植物幼苗干旱、盐渍交叉适应生理基础比较
中间偃麦草分别增加了624%、540%,偃麦草分别
增加了 513%、443%,硬叶偃麦草分别增加了
314%、246%;在0.05水平上与对照差异均显著,表
明三种偃麦草幼苗在干旱、盐渍处理下Pro含量均
发生了明显的积累,且抗性越强Pro含量积累越多。
而干旱、盐渍交叉逆境与单一逆境相比Pro含量积
累更多,其中中间偃麦草增加了19.86%、30.15%,
偃麦草增加了30.04%、15.03%,硬叶偃麦草增加
了14.61%、23.09%。三种材料交叉处理与单一处
理Pro含量增加均达到显著水平(P<0.05)。
2.4 三种偃麦草幼苗可溶性蛋白含量的变化
从表2可以看出,干旱、盐渍处理的三种偃麦草
幼苗SP含量与对照相比均有显著的增加,其中中
间偃麦草分别增加了392%、296%,偃麦草分别增
加了347%、268%,硬叶偃麦草分别增加了253%、
223%;在0.05水平上与对照差异均显著,抗性越强
SP含量增加越多。而干旱、盐渍交叉逆境与单一逆
境相比SP含量增加更多,其中中间偃麦草增加了
13.41%、6.91%,偃麦草增加了10.96%、5.85%,
硬叶偃麦草增加了19.97%、12.43%。三种材料在
“正常+干旱”处理与“盐渍+干旱”处理间SP含量
差异均达到显著水平(P<0.05),在“正常+盐渍”
处理与“干旱+盐渍”处理间差异不显著。
2.5 三种偃麦草幼苗POD活性的变化
由表2可见,干旱、盐渍处理的三种偃麦草幼苗
POD活性与对照相比均有显著的增加,其中中间偃
麦草分别增加了101.26%、88.74%,偃麦草分别增
加了102.97%、75.77%,硬叶偃麦草分别增加了
64.27%、57.87%;在0.05水平上与对照差异均显
著,中间偃麦草与偃麦草POD活性增加量差异较
小,均明显大于抗性较弱的硬叶偃麦草POD活性增
加量。而干旱、盐渍交叉逆境与单一逆境相比POD
活性更强,其中中间偃麦草增加了6.14%(0.05水
平上差异显著)、3.22%(差异不显著),偃麦草增加
了7.63%(差异不显著)、4.43%(差异不显著),硬
叶偃麦草增加了21.31%(0.05水平上差异显著)、
4.36%(差异不显著)。供试材料交叉处理较单一处
理POD活性增加量与材料抗性强弱无一致关系。
2.6 三种偃麦草幼苗苗高的变化
由表2可见,干旱、盐渍处理的三种偃麦草幼苗
苗高与对照相比均有明显的降低,其中中间偃麦草
分别降低了17.59%、12.20%,偃麦草分别降低了
16.70%、11.27%,硬叶偃麦草分别降低了18.51%、
15.49%;在0.05水平上与对照差异均显著,三种材
料中抗性较弱的硬叶偃麦草幼苗苗高降低量最大。
干旱、盐渍交叉逆境与单一逆境相比幼苗苗高有所
降低,其中中间偃麦草降低了3.11%、3.96%(差异
均不显著),偃麦草降低了10.95%(差异显著)、
7.94%(差异不显著),硬叶偃麦草降低了2.62%、
2.93%(差异均不显著);总体差异较小。
2.7 三种偃麦草幼苗各指标间的相关性
供试三种偃麦草在干旱、盐渍及其交叉逆境下
各项生理指标简单线性相关分析显示(表3),材料
间各项生理指标线性相关性总体趋势基本一致,但
也存在部分差异。中间偃麦草RC与Pro含量、SP
含量及POD活性呈极显著(P<0.01)正相关;Pro
含量与SP含量及POD活性呈极显著(P<0.01)正
相关,与苗高呈极显著(P<0.01)负相关;SP含量
与POD活性呈极显著(P<0.01)正相关,与苗高呈
显著(P<0.05)负相关;其余指标间相关性不显著。
偃麦草苗高与SP含量、POD活性呈极显著负相关;
其余指标间相关程度同材料中间偃麦草。硬叶偃麦
草 MDA含量与POD活性呈显著(P<0.05)正相
关;苗高与Pro含量、POD活性呈显著(P<0.05)负
相关;RC与POD活性相关性不显著;其余指标间相
关程度同材料中间偃麦草。
3 讨论
3.1 偃麦草属植物的交叉适应及抗逆性
在自然条件下生长的植物经常会遇到干旱、高
温、低温以及盐渍等不良环境,而各种不良环境对植
物的影响往往是相互关联的。当植物进行某种抗性
锻炼时,它不仅增强了对这种逆境的抗性,而且还同
时增强了对其他逆境的抗性,此即植物的交叉适应。
目前,已经证实交叉适应广泛存在于许多植物中和
不同逆境之间[7]。如短期的干旱预处理会提高玉米
幼苗对干旱胁迫、冷胁迫、热胁迫及盐胁迫的抗性;
热激不仅提高植物的耐热性,且可诱导植物耐冷性、
耐盐性、耐旱性和对重金属污染的抗性[7];盐胁迫预
处理,可快速诱导菠菜(Spinacia oleracea L.)[8]和
马铃薯(Solanum tuberosum)[9]耐冷性;低温驯化可
提高冬黑麦(Secale cereale)的耐热性;干旱、低温相
互交叉逆境处理可提高小麦(Triticum aestivum)的
抗逆性[10]。本研究结果显示,三种偃麦草属植物经
适度的干旱、盐渍单一逆境处理后,各项生理指标均
产生了较大的变化,其中RC及 MDA含量显著增
—61—
中国草地学报 2013年 第35卷 第6期
表3 干旱、盐渍交叉逆境下三种偃麦草幼苗各指标间的相关性分析
Table 3 The Correlation analysis in drought and saline stress of Elytrigiaseedlings
材料
Accessions
指标
Indexes
丙二醛
含量
MDA
content
游离脯
氨酸含量
Pro content
可溶性蛋白
含量
Soluble
protein
POD活性
POD activity
苗高
Seedling
height
Ⅰ RC 0.479 0.745** 0.829** 0.811** -0.273
MDA 0.453 0.509 0.438 -0.364
Pro 0.976** 0.925** -0.666**
SP 0.898** -0.562*
POD -0.497
Ⅱ RC 0.07 0.778** 0.848** 0.707** -0.492
MDA 0.323 0.196 0.396 -0.041
Pro 0.970** 0.892** -0.797**
SP 0.923** -0.806**
POD -0.713**
Ⅲ RC 0.321 0.699** 0.657** 0.404 -0.426
MDA 0.366 0.419 0.553* -0.236
Pro 0.968** 0.836** -0.621*
SP 0.881** -0.673**
POD -0.640*
注:*表示0.05水平相关显著,**表示0.01水平相关极显著。
Note:*indicated significant correlation at 0.05level,**indicated extremely significant correlation at 0.01level.
加,表明三种偃麦草已受到一定程度的伤害;Pro及
SP含量显著积累,表现出了一定的渗透调节能力;
保护酶系统中的POD活性也表现出明显的增强。
苗高较对照有所降低。而经交叉逆境(干旱+盐渍,
盐渍+干旱)处理后,RC及 MDA含量较单一逆境
明显降低,可见干旱、盐渍相互交叉处理可降低后者对
偃麦草属植物的伤害,表现出交叉适应现象。同时交
叉处理后上述两种渗透调节物质含量及POD活性明
显增加,这可能与干旱和盐渍交叉处理后降低后者伤
害的机制有关。交叉逆境处理与单一逆境处理相比,
生长指标苗高有所降低,但降低量较小,差异不显著,
其原因可能与植物应对逆境采取的适应对策有关,如
采取改变自身的根冠比来提高抗逆性。
从实验数据可见,三种供试偃麦草在不同逆境条
件下,抗性越强的种伤害越小,渗透调节物质含量及
POD活性增加越多,这说明偃麦草属植物对不同逆境
的适应可能存在着某些共同的生理基础。但是,从干
旱与盐渍交叉处理来看,三种材料交叉处理较单一处
理各项生理指标改变量与材料抗逆性强弱无一致关
系,不同方式(干旱+盐渍,盐渍+干旱)的交叉处理下
也存在一定差异,这些现象可能与逆境处理的时间和
处理后恢复的时间长短有关,有待今后进一步证实。
3.2 偃麦草属植物生理指标相关性分析
植物在逆境条件下,膜系统会受到不同程度的
损伤,导致膜质过氧化。丙二醛是膜脂过氧化的主
要产物之一,常作为判断膜脂过氧化作用的一种主
要指标。可溶性蛋白和游离脯氨酸都是植物体内有
效的渗透调节物质,植物在受到胁迫时其含量的改
变影响植物的渗透调节能力,对植物体内的新陈代
谢起到重要的保护作用。同时植物酶性防御系统可
及时清除过多的氧自由基,保护细胞免遭氧化伤害。
在多数情况下,植物受到胁迫时,上述各项生理指标
的变化并非独立,而是各类生理指标间相互协调,互
相影响,共同应对逆境,提高植物的抗逆性。焦树
英[11]等人对芒草 (Miscanthus sinesis)幼苗进行各
项生理指标间相关性分析结果表明,芒草幼苗在
PEG胁迫下自由水含量与POD活性显著负相关,
可溶性糖含量与POD活性显著正相关;NaCl胁迫
下可溶性糖含量与Pro和 MDA含量极显著正相
关,CAT活性与可溶性糖和 MDA含量显著正相
关。本研究对不同抗性的三种偃麦草在干旱、盐渍
及其交叉逆境下进行各项生理指标简单线性相关分
析显示,生理指标Pro含量、SP含量与其他指标相
关性在三种材料间基本一致,说明不同材料在应对
逆境时渗透调节物质表现出一致的调节机制,其调
节能力与材料抗性强弱无明显关系。生理指标
MDA含量、POD活性及苗高与其他部分指标相关
性在三种材料间存在一定差异,原因可能是不同材
料在应对逆境时保护性酶POD活性的增加能力存
在差异,致使膜质过氧化程度不同,从而导致生长指
标苗高与其他部分指标相关性在材料间有所不同。
—71—
雷雪峰 曹会志 董烨文 石淳博 偃麦草属三种植物幼苗干旱、盐渍交叉适应生理基础比较
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Comparison of the Physiological Basis of Cross Adaptation of
three ElytrigiaSeedlings under Drought and Saline Stress
LEI Xue-feng,CAO Hui-zhi,DONG Ye-wen,SHI Chun-bo
(Agronomy College,Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010019,China)
Abstract:Using the method of sand culture in artificial ilumination incubator,the relationships be-
tween physiological characteristics and cross-adaptation of three Elytrigiaseedlings with different resist-
ance under cross-stress of drought and salinity were studied.The results showed that the content of rela-
tive permeability(RC),malondialdehyde(MDA),proline,soluble protein(SP)and activity of peroxidase
(POD)significantly increased compared to the control in the seedlings of the three Elytrigiaunder moder-
ate single stress above mentioned,however,only the height of seedlings declined.There was significant
difference among above physiological indices under cross stress of drought and salinity,which caused the
distinct decrease in RC and MDA content,but a significant increase of proline content,SP content and
POD activity were observed under single stress condition,and there was no difference in seedling height.
The results indicated that there was clear cross adaptation in three Elytrigia seedlings under the cross
treatment of drought and salinity,drought stress can increase the resistant ability to salinity,and vice ver-
sa.In addition,under the cross-stress of drought and salinity,the linear correlation among physiological
indices showed a largely identical trends,but part of differences exist in a certain extent.
Key words:Elytrigia;Cross-adaptation;Stress;Drought;Salinity
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中国草地学报 2013年 第35卷 第6期