全 文 ：论著·社区中医药
CHINESECOMMUNITYDOCTORS
146　 中国社区医师·医学专业 2010年第 25期(第 12卷总第 250期)　
敦煌三味蛇床方对肾虚不孕模型大鼠 FSH、LH及 E2 的影响
燕恒毅 1　李淑梅 1　刘喜平(通讯作者)2
明海霞 2
743000甘肃定西市人民医院 1
730000甘肃中医学院 2
摘　要　目的:探讨敦煌三味蛇床方对排
卵障碍性不孕症卵巢 、子宫形态和内分泌
功能的影响。方法:采用雄激素致不孕大
鼠模型(ASR模型), 观察敦煌三味蛇床
方对不孕模型大鼠卵巢 、子宫形态结构的
影响以及血清中 FSH(促排卵素)、LH(黄
体生成素)、E2(雌二醇)水平的影响。结
果:敦煌三味蛇床方大 、中剂量组模型大
鼠卵巢色泽鲜红 ,卵泡数目增多 ,卵泡明
显增大 ,表面见较多黄体 , 子宫外观粗大
发紫;子宫内膜较厚 , 血管较丰富 ,间质疏
松;同时 , 敦煌三味蛇床方大 、中剂量组及
阳性组大鼠血中 FSH、LH、E
2
的水平高于
模型组(P<0.01)。 结论:敦煌三味蛇床
方可改善模型大鼠卵巢 、子宫形态 , 增强
垂体的内分泌功能 ,促进促性腺激素的合
成和释放 ,从而促进卵泡的发育和卵巢的
排卵。
关键词　敦煌三味蛇床方　排卵障碍性
不孕症　 FSH、LH、E2
doi:10.3969/j.issn.1007 -614x.2010.
25.167
AbstractObjective:ToexpLoretheEfects
ofDunhuangCnidiumshamisenonanovuLa-
toryinfertiLityovarian, uterinemorphoLogy
andendocrinefunction.Method:Theuseof
androgen-steriLizedratmodeL(ASRmod-
eL), Observation ofDunhuang on the
shamisenCnidiumratovarianinfertiLity, u-
terineshapeandstructureofserum FSH
(LRH), LH(Luteinizinghormone), E2(es-
tradioL)LeveLs.ResuLts:Dunhuangshamis-
ensideCnidium Large, medium -dose
groupratovariancoLorred, foLLicLesin-
creaseinthenumberoffoLLicLesincreases
markedLy, seemoreyeLLowbodysurface,
theappearanceofLargeuterinepurpLe;
Thickendometrium, bLoodvesseLsthanthe
rich, Loosestroma;Atthesametime, Dun-
huangCnidiumsideshamisenLarge, medi-
um-dosegroupandpositivegroupofbLood
FSH, LH, E2 LeveLshigherthanthemodeL
group(P< 0.01).ConcLusion:Cnidium
shamisenDunhuangratmodeLmayimprove
theovarian, uterineshape, andenhanceen-
docrinepituitaryfunction, andpromotethe
synthesisandreLeaseofgonadotropin, thus
contributingtoovarianfoLLicLedeveLop-
mentandovuLation.
KeywordsCnidium shamisen Dunhuang
AnovuLatoryinfertiLityFSHLHE2
敦煌三味蛇床方源于敦煌遗书 S.
4433[ 1] ,临床表明该方可促使排卵型月经
恢复正常 ,在治疗排卵障碍性不孕方面取
得了一定的疗效 [ 2] 。 为进一步揭示本方
的作用机理 ,本研究观察了该方对肾虚不
孕模型大鼠血清中 FSH(促排卵素)、LH
(黄体生成素)、E2(雌二醇)水平的影响。
资料与方法
药品与试剂:敦煌三味蛇床方由蛇床
子 、五味子 、远志按一定比例混合 ,常规制
备为煎液 , 浓缩至每毫升含生药 1g, 消毒
灭菌保存备用。 中药材购自甘肃中医学
院附属医院 ,经鉴定符合药典规定。
人血清促卵泡生成素(FSH)放射免
疫药盒 、人血清雌二醇(E2)购自北京华
英生物技术研究所;促黄体生成素(LH)
放射免疫药盒 ,购自北京北免东雅生物技
术研究所。 克罗米芬 、丙酸睾丸酮注射
液 ,丙酸睾丸酮注射液 25mg/ml。
动物及造模:SD大鼠 80只 , 由甘肃
中医学院科研实验中心提供 , 体重 180 ～
220g。检验报告编号:兰大动检(06)第
004号 ,动物许可证号:SCXK(甘)2004 ～
0006, 参照文献方法 [ 3, 4] , 制作无排卵大
鼠模型(即雄激素致不孕大鼠模型 ASR)
取第 9日龄雌性 SD大鼠 70只(实验组)
于颈背部皮下注射丙酸睾丸酮 1.25mg/
只(0.05ml/只), 第 22日龄断奶 , 利用自
然光照 ,室温维持在 20左右 , 同样条件饲
养 ,由专人喂养。第 70日龄大鼠体重约
150g左右阴道开口 , 连续阴道涂片 2个
性周期(1个性周期 5天), 阴道上皮无性
周期变化提示无排卵大鼠模型制作成功。
同样取第 9日龄雌性 SD大鼠 10只(正常
组)于颈背部皮下注射等量中性茶油 , 至
第 70日龄阴道开口 , 连续阴道涂片 2个
性周期观察其阴道上皮细胞有无性周期
变化。经涂片观察实验组 70只参与造模
大鼠 ,其中有 54只无性周期变化保留备
用 ,余 16只有性周期变化 , 剔除。正常组
10只注射中性茶油大鼠 , 全部具有有规
律的性周期变化 ,保留备用。
分组及给药:随机将造模成功的 52
只大鼠分为模型组(10只), 敦煌三味蛇
床方小 、中 、大剂量组治疗组(各 11只),
克罗米芬组阳性对照组(11只), 同时设
正常组(10只),从第 80天开始分别按临
床用药以 60kg人为标准 , 按照体表面积
剂量换算法计算大鼠给药剂量。 模型组
和正常组给予 12ml/(kg·日)蒸馏水灌
胃;敦煌三味蛇床方小 、中 、大剂量组分别
按煎液 6ml/(kg· 日)、 12ml/(kg· 日)、
24ml/(kg· 日)灌胃;克罗米芬组给予
4.5mg/(kg·日)灌胃 , 每天灌胃 1次 , 均
连续灌胃 28天 , 4周后检测指标。
敦煌三味蛇床方对不孕模型大鼠卵
巢 、子宫形态结构的影响:各组连续灌胃
28天后 , 断头处死 , 剖腹取出双侧卵巢和
子宫 ,观察卵巢 、子宫形态 , 将卵巢 、子宫
剥离干净后放入福尔马林液中固定 , 各级
酒精脱水 , 石蜡包埋 、切片 , 切片厚约
4μm, 卵巢苏木素伊红常规染色 ,子宫 HE
常规染色 ,光镜下观察并行电脑摄像。
敦煌三味蛇床方对不孕模型大鼠血
清 FSH、LH、E
2
的影响:各组连续灌胃 28
天后 ,颈静脉采血 , 离心后置于 4℃冰箱
中保存 ,按试剂盒说明测定 FSH、LH、和
雌二醇 E2的含量。
论著·社区中医药
　中国社区医师·医学专业 2010年第 25期(第 12卷总第 250期) 147　
统计学方法:将所测结果按试剂盒说
明书计算 , 采用 SPSS13.0软件统计 , 用 t
检验。计量资料以均数 ±标准差(X±S)
表示。
结　果
敦煌三味蛇床方对不孕模型大鼠卵
巢 、子宫形态结构的影响:模型组卵巢苍
白 ,表面见卵泡但卵泡数目少 , 卵泡较小 ,
无黄体 ,子宫较小 , 色泽欠红润 ,子宫内膜
厚度均较薄 ,血管稀少 , 间质致密;正常组
和敦煌三味蛇床方大 、中剂量组以及阳性
组大鼠卵巢色泽鲜红 ,卵泡数目明显多于
模型组 ,卵泡明显增大 , 表面见较多黄体 ,
子宫外观粗大发紫;正常组和敦煌三味蛇
床方大 、中剂量组子宫内膜较厚 ,血管较
丰富 ,间质疏松 , 但阳性组子宫内膜较薄 ,
腺体发育差 ,腺腔狭小 , 间质致密 ,间质细
胞呈梭形 ,间质血管比较少见 , 存在有子
宫内膜发育迟缓的现象。
敦煌三味蛇床方对不孕模型大鼠血
清 FSH、LH、E
2
的影响:结果见表 1。模
型组大鼠血中 FSH、LH、E2的水平明显低
于正常组 (P<0.05);敦煌三味蛇床方
大 、中剂量组及阳性组大鼠血中 FSH、
LH、E2的水平高于模型组(P<0.01),敦
煌三味蛇床方大 、中剂量与正常组比较无
差异。提示敦煌三味蛇床方能增强垂体
的内分泌功能 ,促进促性腺激素的合成和
释放提高垂体促性腺激素水平及雌二醇
E2以促进卵泡的发育和卵巢的排卵作
用。
讨　论
排卵是一个相当复杂的生理过程 ,是
形态学 、生理学与生物化学综合变化的结
果。排卵的机理包括卵巢外机理和卵巢
内机理。丘脑下部某些神经细胞具有内
分泌功能 ,产生 GnRH的为十肽类激素 ,
具有高度的生物活性 ,其主要生理作用是
调节垂体两种激素即卵泡刺激素(FSH)
和黄体生成素(LH)的合成和释放。垂体
分泌 FSH、LH控制卵泡发育 、雌孕激素分
泌 、排卵及黄体形成和退化等生理过程。
卵泡的发育需 FSH的启动 , 当 FSH达一
定水平 ,刺激颗粒细胞增殖 , 并激活芳香
化酶。比主要作用于卵泡内膜细胞 ,使胆
固醇转化为雄烯二酮(androstnedeinoe,
A)和睾酮(testostersone, T),分泌到血液 ,
或经基底膜到颗粒细胞 ,在芳香化酶作用
下转化为 E2。 E2与颗粒细胞上的受体结
合 ,使颗粒细胞再增殖 , 卵泡长大 , 随着
FSH、E
2
的增多 , 卵泡逐渐发育成熟 ,当卵
泡成熟达到顶点时导致 LH峰 , 触发排
卵。
以往研究表明 ,中医肾虚不孕的机理
与垂体 -下丘脑 -卵巢性腺轴功能失调
有关 ,而 FSH、LH及 E2分泌不足在影响
卵泡的发育和排卵中有重要意义。中医
认为肾藏精 ,为天癸之源 , 司生殖 ,而心为
君主之官 ,主宰肾精的发育和排出 , 亦有
主宰子宫的作用 ,在生殖生理中具有重要
作用 ,精卵藏之于肾 , 所以肾为生殖之本。
现代医学认为 , 卵子生成于卵巢 ,卵泡卵
子是卵巢的主要组成部分 , 卵泡的发育 ,
卵子的成熟 , 排卵的顺利 , 均有赖于雌激
素水平不断提高 [ 5] , 所以雌激素与卵泡 、
卵子的关系类乎于肾阳 、癸水 、与精的密
切关系 ,即中医学的肾 -天癸 -冲任 -胞
宫与现代医学下丘脑 -垂体 -卵巢轴有
一定的相似性。子宫与肾 , 同居下焦 , 心
脑居上焦最高之处 , 肾精的泌藏 ,胞脉胞
络的疏畅 ,表面看来 , 似乎是子宫肾脏的
作用 ,但实际上是肾精氤蕴之气触发心
脑 ,心脑下达排泄信息后 , 子宫才能行其
藏或泄的作用。月经排出 , 子宫行泻 , 先
由心脑 ,通过肾 , 再由肾下达子宫冲任 , 故
叶天士谓 “精之藏 , 其本在肾 , 而精之主
宰则在心”。
因此 , 肾虚精亏 , 心肾不交应为排
卵障碍性不孕的关键病机 , 补肾益精 ,
宁心安神则为治疗排卵障碍性不孕的
基本思路与方法 。 敦煌蛇床三味方源
于敦煌遗书 S.4433 , 该方由蛇床子 、五
味子 、远志三味药物组成 , 方中用蛇床
子 , 苦温入肾 , 故以其为君药 , 温肾助
阳 , 以五味子补肾固精 , 同时又能宁心
安神 , 助蛇床子补肾益精 ,为方中臣药;
佐以远志 , 交通心肾 , 安神定志。 全方
共奏补肾益精 , 宁心安神之效。 全方药
少力专 , 组方严谨。 研究表明方中蛇床
子可使子宫及卵巢重量增加 [ 6] , 蛇床子
提取物中本身含有睾丸酮和雌二醇 , 有
类似于性激素样的作用 [ 7] 。
本研究表明 ,经敦煌三味蛇床方干预
后的模型大鼠卵巢色泽鲜红 ,卵泡数目增
多 ,卵泡明显增大 , 表面见较多黄体 ,子宫
外观粗大发紫;子宫内膜也较厚 , 血管较
丰富 ,间质疏松。敦煌三味蛇床方能提高
FSH、LH及 E2水平 , 增强垂体的内分泌
功能 ,促进促性腺激素的合成和释放 , 提
高垂体促性腺激素水平 ,从而促进卵泡的
发育和卵巢的排卵。本研究从卵巢子宫
形态和内分泌功能方面初步揭示了敦煌
三味蛇床方促排卵的科学依据 ,相关机理
我们将进一步探讨。
参考文献
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表 1　敦煌蛇床三味方对不孕模型大鼠血清中FSH、LH、E
2
的影响
组别 n FSH(min/ml) LH(min/ml) E2(pg/ml)
正常组 10 1.53士 0.26﹡ 4.08士 0.78﹡ 9.833士 2.857﹡
模型组 10 1.22士 0.16 2.31士 0.44 6.286士 1.800
小剂量 11 1.43士 0.26△ 3.57士 0.25△ 6.032士 2.230△
中剂量 11 2.03士 0.32# 4.57士 0.04# 11.80士 2.815#
大剂量 11 2.31士 0.09# 4.12士 0.20# 12.75士 2.705#
阳性组 11 1.91士 0.29# 4.86士 0.98# 17.5士 2.081 #
　注:与模型组比较﹡ P<0.05;与模型组比较△P<0.05;与模型组比较#P<0.01。