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肋果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫拒食及毒杀活性的研究



全 文 :肋果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫
拒食及毒杀活性的研究*
陈 鹏 , 何 蓉 , 祁荣频 , 杨 卫
(云南省林业科学院 , 云南 昆明 650204)
摘要:用提取物试液浸渍甘蓝圆形叶碟饲喂害虫幼虫的方法测定了肋果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾 3龄幼虫的
拒食及毒杀活性。结果表明 , 肋果茶枝叶乙醇提取物能使小菜蛾幼虫取食量减少 , 死亡率增加 , 羽化率降低。
其提取物试液的浓度越高 , 这些作用的效果越明显。在非选择性的条件下 , 肋果茶枝叶乙醇提取物试液对小菜
蛾 3龄幼虫的有效拒食浓度 (AFC50) 24 h时为 151.88 mg/L, 48 h时为 94.53mg/L。
关键词:肋果茶;枝叶乙醇提取物;小菜蛾幼虫;拒食及毒杀活性
中图分类号:S763  文献标识码:A  文章编号:1672-8246 (2008) 03-0072-04
BioactivityofExtractsfromSladeniacelastrifoliaagainst
LarvaeofPlutelaxylostela
CHENPeng, HERong, QIRong-pin, YANGWei
(YunnanAcademyofForestry, KunmingYunnan650204, P.R.China)
Abstract:ThebioactivitiesoftheethanolextractsfromSladeniacelastrifoliaonthelarvaeofdiamondbackmoth,
Plutelaxylostelawereinvestigatedinlaboratorybymeasuringantifeedingactionoftheextractsandlarvaemortality
afterthelarvaehadfedontheextracts-coatedcabbageleaves.Theresultsindicatedthatleafconsumptionbythein-
sectswasreduced, thelarvalmortalitywasincreasedandemergencerateofnewadultswasdeclined.Thehigher
theconcentrationoftheextractswas, theseverertheefectonthepestwas.Theresultsshowedthatthemedium
antifeedantconcentrations(AFC50)were151.88 mg/Lin24h, 94.53 mg/Lin48hforno-choicetest.
Keywords:Sladeniacelastrifolia;plantextract;Plutelaxylostela;antifeedingactionandinsecticideactivity
小菜蛾 (Plutelaxylostela)属鳞翅目菜蛾科 ,
是一种全球性危害十字花科蔬菜的害虫 。据估算 ,
全球每年用于防治小菜蛾的费用超过 10亿美元 [ 1] 。
长期以来 , 人们对小菜蛾的防治主要依赖于合成杀
虫剂 , 而长期大量不合理的使用杀虫剂 , 使得小菜
蛾对合成杀虫剂的抗性普遍提高 , 为害也越来越猖
獗 。由于植物源杀虫剂具有不污染环境 , 对人畜安
全 , 害虫不易产生抗性等特点 [ 2] , 故很多研究人
员开发以植物为原料对小菜蛾有控制作用的杀虫剂
十分关注 [ 3 ~ 5] 。
肋果茶 (Sladeniacelastrifolia)属于肋果茶科
(Sladeniaceae)肋果茶属 (Sladenia)植物 , 俗称
毒药树 , 也称史拉登茶 , 是云南省的一种珍贵乔木
树种 。云南民间常用肋果茶的树叶和树皮捣碎后投
入水中作为捕鱼的毒饵 , 而人食用被其毒死的鱼不
中毒 , 且用肋果茶木材制作冲制茶叶的茶臼 , 对饮
茶者也没表现出毒性 [ 6] 。有关肋果茶的提取物对
昆虫生物活性影响的研究尚无报道 , 本项研究探讨
 第 37卷 第 3期
 2008年 9月          
西 部 林 业 科 学
JournalofWestChinaForestryScience          
Vol.37 No.3 
Sept.2008 
* 收稿日期:2008-02-30
   基金项目:云南省应用基础研究项目 (2006C0067M);云南省科技攻关项目 (2006NG32)。
   第一作者简介:陈 鹏 (1975-), 男 , 云南昭通人 , 副研究员 , 博士 , 主要从事害虫防治方面的研究。
DOI :10.16473/j.cnki.xblykx1972.2008.03.002
了不同浓度的肋果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫
拒食及毒杀的活性 , 为以肋果茶为原料的生物杀虫
剂在小菜蛾无公害治理中的应用提供理论依据 。
1 材料和方法
1.1 供试提取物的制备
用于获取乙醇提取物的肋果茶枝叶采自生长于
云南省丘北县冲头林场的肋果茶树。将采集到的肋
果茶叶片及小枝经风干后粉碎 , 用 70 %热乙醇浸
提 , 其提取液经浓缩后得到浓缩物 , 浓缩物加水稀
释后 , 用正丁醇萃取 , 正丁醇提取液经浓缩干燥得
到供试用的肋果茶枝叶乙醇提取物。
1.2 供试幼虫的选用
供试小菜蛾的虫源 , 采自云南省农业科学院农
业环境资源研究所试验基地内的小菜蛾敏感种群 ,
该种群已于实验室内用萝卜 (Raphanussativus)苗
连续饲养了 100多代 , 其在饲养期间未接触任何杀
虫剂 , 已成为敏感种群。从中挑选大小基本一致的
小菜蛾 3龄幼虫进行此次活性测定实验。
1.3 非选择拒食活性的测定
(1)不同提取物浓度的设定及对饲叶的处理
 将所获肋果茶的枝叶乙醇提取物用 75 %乙醇充
分溶解后 , 分别稀释成浓度为 0 mg/L、 50 mg/L、
100mg/L、 200 mg/L、 400 mg/L、 800 mg/L的试
液 , 其试液中加入 0.2 mg/g的缓冲剂 (吐温
-80), 共设 6个处理 , 其中以 0mg/L浓度处理为
对照。采用浸渍圆形叶碟法 [ 7] , 将新鲜的嫩甘蓝
(Brassicaoleracea)叶片剪成直径为 8 cm的圆形叶
碟 。其叶碟依处理分别放入相应的试液中浸渍 10 s
后 , 取出在阴凉处晾干 , 备饲小菜蛾幼虫用。
(2)非选择性拒食作用测定 取经不同试液
浓度处理的甘蓝叶碟 , 放在每个底部垫有湿滤纸
片 、直径为 9 cm的培养皿中 , 各处理其叶碟 2片 。
每处理在其培养皿中央接 10头 3龄小菜蛾幼虫作
非选择性饲喂观测 , 4次重复。于饲喂 24h和 48h
后用坐标纸统计被取食的叶面面积 , 以确定各浓度
处理的小菜蛾幼虫非选择性拒食作用 。
(3)非选择性拒食作用后对幼虫羽化率的影
响 不同浓度的肋果茶枝叶乙醇提取物试液处理的
甘蓝叶碟 , 在非选择性地饲喂小菜蛾幼虫 48 h后 ,
换上不经试液处理的无毒新鲜甘蓝叶继续饲喂小菜
蛾的幼虫 。待幼虫羽化统计各处理小菜蛾幼虫的羽
化率 。
(4)拒食率计算方法 拒食率 (%) =(对
照组取食叶面积 -处理组取食叶面积)/对照组取
食叶面积 ×100
利用 DPS6.55 (DataProcessingSystem)软件 ,
统计实验数据 , 计算拒食率回归方程 、 AFC50 (拒
食中浓度);差异显著性测验采用 Duncan新复极
差法 。
1.4 胃毒活性测定
设定的肋果茶枝叶乙醇提取物试液的浓度及对
饲叶的处理同非选择拒食活性测定。
取经系列试液浓度处理的甘蓝叶碟 , 放在每个
底部垫有湿滤纸片直径为 9 cm的培养皿中 , 各处
理具叶碟 2片。每处理在其培养皿中央接 10头 3
龄小菜蛾幼虫作饲喂后的毒杀性观测 , 4次重复。
各处理分别于饲喂 24 h和 48 h后统计各处理的小
菜蛾幼虫死亡率 。各处理在饲喂小菜蛾幼虫 48 h
后换上不经其试液处理的无毒新鲜甘蓝叶片继续饲
喂 , 待其幼虫羽化时统计各处理小菜蛾幼虫的羽化
率。
2 结果与分析
2.1 不同浓度试液的非选择拒食活性
室内非选择性拒食活性测定的结果表明 , 肋果
茶枝叶的乙醇提取物试液浸甘蓝饲叶对小菜蛾 3龄
幼虫具有一定的拒食效果 (表 1)。非选择性饲喂
24h时 , 在 800 mg/L高浓度试液处理下的拒食效
果最佳 , 其拒食率为 88.0 %, 而在 50 mg/L低浓
度处理下的拒食效果最弱 , 仅为 20.4 %。在其 24
h非选择性的饲喂实验中 , 其拒食活性随试液浓度
的升高而增强 , 拒食活性由强到弱的肋果茶枝叶乙
醇提取物试液浓度顺序为 A>B>C>D>E(各代
号相应的试液浓度见表 1, 下同), 其拒食率依次
为 88.0%、 75.7%、 57.5 %、 39.6%、 20.4%。
非选择性饲喂 48 h时 , 肋果茶枝叶乙醇提取物对
小菜蛾幼虫的拒食活性继续加强 , 其中低浓度处理
的增长率高于高浓度处理 , 其拒食活性由强到弱的
肋果茶枝叶乙醇提取物试液浓度顺序为 A>B>C>
D>E, 其拒食率依次为 90.3%、 79.8%、 66.1%、
49.2 %、 37.4 %。
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 第 3期    陈 鹏等:肋果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫拒食及毒杀活性的研究
表 1 不同浓度的肋果茶枝叶乙醇提取物试液浸渍甘蓝叶碟对小菜蛾 3龄幼虫的非选择拒食活性测定结果
Tab.1 Determinationresultsofno-choiceantifeedingactivityofextractsfromSladeniacelastrifolia
againstthreeagelarvaeofPlutellaxylostela
处理代号 试液浓度/mg· L-1
处理虫数
/头
取食面积 /mm2
24h 48 h
拒食率 /%
24 h 48 h 羽化率 /%
A 800 40 74.3d 64.8d 88.0 a 90.3 a 39 d
B 400 40 150.0 c 135.3 cd 75.7 ab 79.8 b 46c
C 200 40 261.3 c 227.3 c 57.5 b 66.1 bc 54c
D 100 40 371.5b 340.3 c 39.6 c 49.2 c 72 b
E 50 40 489.5 ab 419.3 b 20.4 c 37.4 c 88a
CK 0 40 616.5 a 670.0 a 0.0 0.0 93a
注:表中的分析结果均为 4次重复的平均值 , 小写字母表示 p=0.05水平下的差异显著性 (下同)。
用不同浓度肋果茶枝叶乙醇提取物试液浸渍过
的叶碟饲喂小菜蛾 3龄幼虫 48 h后更换不经试液
处理的新鲜甘蓝叶碟继续饲喂的试验结果表明 , 小
菜蛾幼虫的羽化率随其试液处理浓度的升高而降低 ,
其幼虫羽化率由低到高的肋果茶枝叶乙醇提取物试
液浓度顺序为 A>B>C>D>E>CK, 其羽化率依
次为 39%、 46%、 54 %、 72%、 88 %、 93%。
2.2 拒食性效果的试液浓度计算
计算不同浓度的肋果茶枝叶乙醇提取物试液浸
甘蓝叶碟饲喂小菜蛾幼虫的拒食活性 , 通过将试液
浓度转换成以 10为底的对数值 , 其拒食率转换成
几率值 , 利用 DPSv6.55专业统计软件求出回归方
程和其拒食效应中的试液浓度 , 结果见表 2。从表
2可以看出不同浓度试液处理甘蓝叶碟对小菜蛾幼
虫的拒食活性存在明显不同 , 在饲喂 24 h时其拒
食中浓度 AFC50的拒食活性明显高于 48h时相应浓
度的拒食中浓度 , 分别为 151.88 mg/L、 94.53
mg/L, 表明肋果茶枝叶乙醇提取物试液可在较短
时间内使小菜蛾幼虫产生较强的拒食作用 , 随着时
间的延长 , 拒食活性有所增长 , 但增长幅度缓慢 。
表 2 肋果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫的非选择性拒食作用
Tab.2 No-choiceantifeedingactivityofextractsfromSladeniacelastrifoliaagainstPlutelaxylostela
处理
时间 /h 拒食作用方程
AFC50
/mg· L-1 X2
95 %置信限 (95 %CL)
/mg· L-1
24 Y=8.5918-1.6465X 151.88±5.36 0.826 141.74 ~ 162.76
48 Y=7.6584-1.3457X 94.53±4.51 3.061 86.10 ~ 103.78
表 3 不同浓度的肋果茶枝叶乙醇提取物试液浸渍
甘蓝叶碟对小菜蛾幼虫的毒杀力
Tab.3 Toxicityofdifferentconcentratedextractsfrom
SladeniacelastrifoliaagainstPlutelaxylostella
处理
代号
试液浓度
/mg· L-1
处理虫
数 /头
死亡率 /%
24 h 48 h
羽化率
/%
A 800 40 56.1a 61.2 a 33 c
B 400 40 33.8 b 39.4 b 41b
C 200 40 0.0 18.3 b 56b
D 100 40 0.0 0.0 79 a
E 50 40 0.0 0.0 86 a
CK 0 40 0.0 0.0 91 a
2.3 不同浓度试液的胃毒活性
由表 3可知 , 用肋果茶枝叶乙醇提取物试液浸
渍甘蓝叶碟饲喂小菜蛾幼虫对其幼虫有一定的胃毒
作用 , 其不同浓度试液处理间的胃毒作用差异显
著。饲喂 24h时 A处理 (800 mg/L)的小菜蛾幼
虫死亡率为 56.1 %, B处理 (400 mg/L)的小菜
蛾幼虫死亡率为 33.8 %, 其他处理未引起小菜蛾
幼虫死亡 。饲喂 48h时 , 各处理的小菜蛾幼虫的死
亡率则有所上升 , 其中 A处理 (800 mg/L)的小菜
蛾幼虫死亡率达到 61.2%, B处理 (400mg/L)的
小菜蛾幼虫死亡率为 39.4%, C处理 (200mg/L)
的小菜蛾幼虫死亡率为 18.3 %, 而其他处理仍未
引起小菜蛾幼虫的死亡 。由此看来 , 肋果茶枝叶乙
醇提取物对小菜蛾幼虫的毒杀作用只有在高浓度时
才能在较短时间内体现出来 , 小菜蛾幼虫的死亡率
均随其处理浓度的增加而提高 , 浓度越高的处理与
对照死亡率的差异越显著。对于小菜蛾幼虫的羽化
率 , 从其胃毒活性的试验结果与非选择拒食活性试
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西 部 林 业 科 学              2008年 
验的结果来看 , 不同浓度处理的小菜蛾幼虫变化趋
势基本一致 , 即小菜蛾幼虫的羽化率随着肋果茶枝
叶乙醇提取物浓度的升高而降低。
3 结论与讨论
(1)应用肋果茶枝叶乙醇提取物试液浸渍甘
蓝叶碟作小菜蛾幼虫的非选择拒食活性的试验结果
表明 , 肋果茶枝叶的乙醇提取物对小菜蛾 3龄幼虫
具有拒食和抑制其虫体发育的作用。在非选择性取
食条件下 , 随着肋果茶枝叶乙醇提取物试液浓度的
增加 , 小菜蛾幼虫对其叶碟的取食量逐渐减少 , 即
拒食率逐渐增加 。其取食量的减少可能是由于小菜
蛾幼虫在取食了少量的肋果茶提取物后 , 食欲减退
引起的 。表明在肋果茶枝叶乙醇提取物中存在某种
或几种物质 , 可使小菜蛾对其处理过食物的兴趣降
低 , 或导致消化食物的速度减缓 , 或引起生理上的
不适。其具体原因还需通过行为学的直接观察和生
理学的实验才能进一步确定。
(2)本项研究的另一杀虫活性的试验结果表
明 , 肋果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫的生长有
抑制和胃毒作用 。用其较高浓度的提取物试液浸渍
处理甘蓝叶碟饲喂小菜蛾幼虫 , 可使其幼虫死亡;
在用浓度为 800mg/L的试液浸渍甘蓝叶碟(A处理)
时 , 经饲喂 24 h小菜蛾幼虫的死亡率为 56.1 %,
经饲喂 48 h小菜蛾幼虫的死亡率为 61.2 %。小菜
蛾幼虫在取食肋果茶枝叶乙醇提取物试液浸渍过的
甘蓝叶碟后 , 即使再喂以新鲜未处理的叶碟 , 其幼
虫的死亡率比对照仍有明显增加 , 导致该幼虫发育
期的完成率下降 , 最终致使小菜蛾羽化率下降 。表
明肋果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫存在瞬时效
应和滞后效应 , 这在害虫防治上应该受到重视。肋
果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾的其他活性的影响还
需作继续研究 。该物质对小菜蛾幼虫的毒杀及抑制
其生长发育的作用的有效成分及作用方式 、 作用机
理亦还有待于进一步的探讨 。
(3)肋果茶分布于云南的大部地区 , 其野外
植株的萌芽更新能力很强 , 易于人工繁殖。由于其
木材品质优良以及具有潜在的药用价值 , 近年来引
起植物学界和林学界对肋果茶的注意。研究其枝叶
乙醇提取物的杀虫活性 , 及其相应的机理可为肋果
茶的综合利用及无公害植物农药的开发提供科学依
据 , 由此而开辟新的利用途径。
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 第 3期    陈 鹏等:肋果茶枝叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫拒食及毒杀活性的研究