全 文 ：222．
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收稿日期:2013-12-17; 修订日期:2014-05-21
基金项目:国家自然科学基金(No． 30860373) ;
贵州省科技厅社会攻关项目(黔科合 SY字［2013］)3065
作者简介:涂 平(1985-) ，男(汉族) ，江西丰城人，遵义医学院在读硕士
研究生，学士学位，主要从事阿片类药物成瘾机制研究工作．
* 通讯作者简介:罗素元(1957-) ，女(汉族) ，贵州赤水人，遵义医学院教
授，学士学位，主要从事阿片类药物成瘾机制研究及中医药干预工作．
脱氢紫堇碱和巴马汀
协同 l － THP抗吗啡成瘾药效初探
涂 平，白威峰，余守洋，邱成楷，吴明松，罗素元*
(遵义医学院，贵州 遵义 563099)
摘要:目的 初步探寻延胡索中 1 ～ 2 种与左旋延胡索乙素(l － THP)协同抗吗啡成瘾的有效成分。方法 小鼠吗啡
50 mg·kg －1腹腔 1 次注射，至 3 h纳洛酮注射建立小鼠吗啡依赖纳洛酮催促戒断跳跃反应模型。按 l － THP、脱氢紫堇碱
和巴马汀各自在延胡索中自然存在比例(l － THP∶ 脱氢紫堇碱:巴马汀 = 1∶ 2． 31∶ 0． 46)配置成“l － THP －脱氢紫堇碱
－巴马汀”混合液，分别观察 l － THP 3 mg·kg －1单体、混合液(混合液内所含 l － THP的量等同 l － THP单体治疗组的剂
量)灌胃治疗后，对模型小鼠戒断 10 min内跳跃反应发生率和每鼠跳跃次数，以及 1 h体重改变的影响。结果 模型组较
生理盐水对照组小鼠跳跃次数和跳跃反应百分率明显增加(P ＜ 0． 01)，体重下降(P ＜ 0． 01) ;l － THP 3 mg·kg －1组与模
型组各指标数据接近(P ＞ 0． 05) ;混合液组跳跃次数和跳跃反应百分率比模型组均显著减少(P ＜ 0． 05) ，而体重下降幅
度减轻(P ＜ 0． 05)。结论 从行为学方面初步表明，延胡索水提液中的脱氢紫堇碱和巴马汀成分具有协同 l － THP抗吗啡
成瘾的药效作用。
关键词:吗啡成瘾; 左旋延胡索乙素; 脱氢紫堇碱; 巴马汀; 协同作用
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2014． 11． 009
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2014)11-2587-03
Primary Study on Synergistic Efficacy of Dehydrocorydaline and Palmatine with l － THP
in the Treatment of anti －morphine Addiction
TU Ping，BAI Wei-feng，YU Shou-yang，QIU Cheng-kai，WU Ming-song，LUO Su-yuan*
(Zunyi Medical College，Zunyi 563099，China)
Abstract:Objective To study 1 － 2 components within Corydalis yanhusuo synergy with l － THP in the Treatment of anti － mor-
phine addiction．Methods The Naloxone － induced withdrawal jumps in the morphine － dependent experimental mice model was
established by injecting morphine in mice with the dose of 50 mg·kg －1 and naloxone after 3 h． The l － THP，dehydrocorydaline
and palmatine were mixed in an appropriate ratio based on the natural part of each component in corydalis yanhusuo(l － THP:de-
hydrocorydaline:palmatine = 1:2． 31:0． 46)to compare the effect of the mixed － drug with that of l － THP(3 mg·kg －1)on with-
drawal symptoms and weight loss in the model mice． Ｒesults Compared with the physiological saline treatment group，morphine －
dependent experimental mice group showed a remarkably increase in jumping times and jumping rate and weight loss (P ＜ 0． 01，
P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 05)． l － THP treatment group showed the same outcomes as morphine － dependent experimental mice group． Com-
pared with the morphine － dependent experimental mice group，mixed － drug treatment group showed a remarkably decrease in
jumping times and jumping rate and weightloss (P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 05)． Conclusion These results showed that there was
synergistic efficacy of dehydrocorydaline and palmatine with l － THP in the Treatment of anti － morphine Addiction．
Key words:Morphine addiction; L － tetrahydropalmatine; Dehydrocorydaline; Palmatine; Synergistic Efficacy
延胡索为罂粟科紫堇属植物延胡索 Corydalis yanhusuo W． T． Wang的干燥块根茎，是临床多种戒毒复方中药组方中的主药，动
物实验发现延胡索单味中药以及其中的单体成分—左旋延胡索
乙素(l － THP，俗称颅通定)有降低吗啡诱导大鼠条件性位置偏
爱效应消退(即抗精神依赖)的药效、抑制吗啡戒断症状或行为
敏化等［1 ～ 3］，而本身不具成瘾性。但前期在延胡索和 l － THP 用
于吗啡成瘾治疗的比较研究中，发现含一倍量 l － THP 单体的延
胡索中药水提液相当于单独应用约 24 倍 l － THP 单体的效
果［4，5］，提示延胡索水提液中有其他成分参与并与 l － THP 协同
发挥抗吗啡成瘾的作用。现从延胡索中分离出并经过结构鉴定
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的化学成分已达 40 多种，那究竟什么成分具备这样的作用，目前
未见文献报道。既往研究已证实，对多巴胺系统的影响是目前比
较公认的 l － THP治疗药物成瘾的重要药理学机制［6］;同时神经
细胞内钙离子浓度增高是阿片类成瘾的重要变化，而 l － THP 本
身具备钙拮抗剂的作用［7］。此外，有文献报道延胡索中的脱氢
紫堇碱(dehydrocorydaline，又称去氢延胡索甲素)和巴马汀(pal-
matine)成分亦具有一定程度的钙离子拮抗作用［8］，或者具有对
多巴胺系统的影响［9］，因而推测至少这两种成分可能具有协同 l
－ THP抗吗啡成瘾的作用。本文在小鼠身体依赖性实验—小鼠
吗啡依赖纳洛酮催促戒断跳跃反应模型上，观察应用脱氢紫堇碱
和巴马汀与 l － THP协同治疗后对吗啡成瘾行为的抑制，初步探
寻延胡索中与 l － THP协同抗吗啡成瘾的有效成分，旨在为从以
延胡索为主药的戒毒单、复方中，开发出治疗阿片类成瘾特效的
组分中药提供实验依据。
1 材料与仪器
1． 1 动物 雄性昆明种小鼠，SPF级，体质量(20 ± 2)g，购于第三
军医大学实验动物中心，许可证号:SCXK(渝)2012 － 0001。实验
前在动物房适应性饲养 1 周，实验室通风良好，室温 24 ℃，光照
周期 8:00 ～ 20:00，小鼠自由进食饮水。
1． 2 药品及试剂 盐酸吗啡注射液，沈阳第一制药厂(批号:
TD2006 － 0028);盐酸纳洛酮注射液，康哲(湖南)制药有限公司
(批号:20120201) ;l － THP(罗通定)标准品，中国药品生物制品
检定所(批号:100452 － 200301);实验用 l － THP，广西中医药研
究所(经高效液相色谱法测得其纯度 ＞ 94%) ;脱氢紫堇碱与巴
马汀标准品，均购于成都艾特姆生物科技有限公司(批号分别为
A0782 和 A0031);实验用脱氢紫堇碱与巴马汀，均采用标准品;
醋炙延胡索中药饮片，成都吉安康药业有限公司(批号:
100401)，经本校药学院生药学教研室杨建文副教授鉴定为罂粟
科紫堇属植物延胡索的干燥块根茎;延胡索水提液的制备及该液
中 l － THP、脱氢紫堇碱、巴马汀的含量测定:取延胡索饮片 500g，
加水 1800mL，浸泡 70min后用大火煮开，再用文火煎煮 40min，将
药液冷至室温，用纱布过滤，得水提液 500mL(即 1g 延胡索得
1mL水提液)，对照标准品，用高效液相色谱法测定，每毫升水提
液内含 l － THP、脱氢紫堇碱、巴马汀的量分别为 137μg、316μg、
63μg，将 l － THP 的含量定为 1，则水提液内 l － THP:脱氢紫堇
碱:巴马汀 = 1∶ 2． 31∶ 0． 46;“l － THP －脱氢紫堇碱 －巴马汀”
三种成分混合液的配置:按照延胡索水提液中三种成分自然所占
比例即 l － THP∶ 脱氢紫堇碱:巴马汀 = 1∶ 2． 31∶ 0． 46 的比例配
置(简称混合液)，用于后续实验。
1． 3 仪器 YP1002Z型电子秤，上海菁海仪器有限公司;圆形有
机玻璃罩，高 35cm，直径 10cm，两端开口，杭州雨昕有机材料 －
淘宝网。
2 方法
2． 1 小鼠吗啡身体依赖性实验 小鼠吗啡依赖纳洛酮催促戒断
跳跃反应模型的建立(跳跃实验)将 20 只小鼠随机分为生理盐
水对照组(NS组)和吗啡跳跃反应模型组(模型组)，分别腹腔 1
次注射 50mg·kg －1生理盐水与吗啡 ，至 3 h 称重后，纳洛酮
5mg·kg －1皮下注射催促戒断，置入圆形机玻璃罩内，观察 10min
内小鼠跳跃反应发生率和每鼠跳跃次数，以及 1 h体重的改变情
况并与生理盐水对照组比较，有显著性差异表示模型建立成功。
2． 2 脱氢紫堇碱和巴马汀协同 l － THP 对吗啡身体依赖跳跃反
应和体重减少的影响 将 40 只小鼠随机分为 4 组:即 NS组、模型
组、l － THP 3mg·kg －1单体治疗组(l － THP 组)、混合液治疗组
(混合液组)。模型组、l － THP 组和混合液组吗啡 50mg·kg －1
腹腔 1 次注射，NS组同法注射生理盐水，此后至 2． 5 h NS组和模
型组灌胃生理盐水;l － THP 组灌胃 3mg·kg －1剂量的 l － THP
(说明:l － THP单体剂量确定为 3 mg·kg －1的依据是根据前期
对大鼠治疗的最小有效剂量换算而获得) ;混合液组灌胃含有
3mg·kg －1 l － THP 的混合液治疗，30 min后各鼠称重，并纳洛酮
5 mg·kg －1皮下注射催促戒断，置入圆形机玻璃罩内，观察记录
指标同“2． 1”项。
2． 3 统计学处理 数据以 珋x ± s 表示。运用 SPSS 16． 0 统计软件
对数据进行处理，多组间比较采用单因素方差分析，以 P ＜ 0． 05
表示差异有统计学意义。
3 结果
3． 1 小鼠吗啡身体依赖性实验 与 NS 组比较，模型组小鼠的跳
跃次数和跳跃反应百分率均明显增加(P ＜ 0． 01);体重下降幅度
增大(P ＜ 0． 01)(见表 1) ，且重复 3 次的结果相似，表明小鼠吗
啡依赖纳洛酮催促戒断跳跃反应模型建立成功。
表 1 小鼠吗啡依赖纳洛酮催促戒断跳跃反应及体重改变结果
组别 动物数
跳跃小鼠
/只
跳跃反应
发生率(%)
跳跃次数
/次
体重减少
/g
NS组 10 1 10 5 0． 37
模型组 10 10 100 13． 31) 0． 921)
与 NS对照组比较，1)P ＜0． 01;n =10
3． 2 脱氢紫堇碱和巴马汀协同 l － THP 对吗啡身体依赖—跳跃
反应及体重减少的影响 从表 2 可见，模型组与 NS组的结果类似
于表 1;但与模型组比较，混合液组跳跃次数和跳跃反应百分率
则显著减少(P ＜ 0． 05)，体重下降幅度减小(P ＜ 0． 05) ，且各数据
与 NS组比较，均无统计学差异(P ＞ 0． 05);而 l － THP3mg·kg －1
组与模型组比较，两组各指标数据非常接近，统计学处理均无显
著性差异(P ＞ 0． 05) ;l － THP 3mg·kg －1组与混合液组比较，混
合液组小鼠跳跃次数和跳跃反应百分率同样显著减少
(P ＜ 0． 05)，体重下降幅度减小(P ＜ 0． 05)。表明混合液能有效
抑制小鼠吗啡依赖纳洛酮催促戒断跳跃反应及减少体重的丢失，
而单独 l － THP 3mg·kg －1剂量治疗则无此作用。
表 2 小鼠吗啡依赖纳洛酮催促戒断跳跃反应及体重改变结果
组别 动物数
跳跃小鼠
/只
跳跃反应
发生率(%)
跳跃次数
/次
体重减少
/g
NS组 10 1 10 5 0． 37
模型组 10 10 100 13． 31) 0． 921)
混合液组 10 3 30 5． 32，3) 0． 422，3)
l － THP 组 10 8 80 12． 51) 0． 911)
与 NS 对照组比较，1)P ＜ 0． 01;与模型组比较，2)P ＜ 0． 05;与 l － THP 组比
较，3)P ＜0． 05;n =10
4 讨论
抗成瘾药物筛选常用的模型有整体动物模型、离体器官模
型、组织和细胞模型。在动物模型中，小鼠吗啡依赖纳洛酮催促
戒断跳跃反应模型因为具有实验周期短、简便易行，结果比较稳
定等优点最为常用［10］。建立该模型的方法有多种，本文采用大
剂量吗啡一次注射后纳洛酮催促戒断，其跳跃反应变化趋势与朱
玲等［11］的研究类似，表明该法能成功建立小鼠吗啡依赖纳洛酮
催促戒断跳跃反应模型，而且更快速和简便，小鼠死亡显著减少，
适用于抗成瘾药物的快速初步筛查。通常，经吗啡等阿片类药物
处理的小鼠，在腹腔注射纳洛酮后很快出现戒断反应，但在诸多
的戒断反应中，以跳跃反应和体重下降最为客观，便于定量观察
和统计处理［12］。故在小鼠催促戒断实验中，无论以何种方式形
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成依赖模型，均以小鼠跳跃反应和体重下降作为戒断症状指
标［12］。本实验采用 l － THP 3mg·kg －1剂量对急性吗啡依赖纳洛
酮催促戒断小鼠灌胃治疗，10 min内跳跃反应发生率和平均跳跃
次数均与用生理盐水治疗的模型组接近，表明单独 l － THP
3mg·kg －1剂量治疗不能抑制跳跃反应;但用含有 3mg·kg －1 l －
THP的“l － THP －脱氢紫堇碱 －巴马汀”混合液治疗后，跳跃反
应发生率和平均跳跃次数比模型组和 l － THP3mg·kg －1组均明
显减少，说明混合液对跳跃反应有抑制作用。再结合对体重变化
的影响，同样单独 l － THP 3mg·kg －1剂量治疗不能抑制纳洛酮
催促戒断后 1 h体重的下降(与模型组接近) ，而混合液组体重的
下降比模型组和 l － THP 3mg·kg －1组均明显减少，上述结果提
示混合液具有治疗吗啡戒断症状即抗吗啡成瘾的作用，这至少从
行为学方面初步表明，延胡索水提液中的脱氢紫堇碱和巴马汀成
分具有协同 l － THP抗吗啡成瘾的药效作用。
研究发现，延胡索中的 l － THP、脱氢紫堇碱和巴马汀成分同
属于原小檗碱型生物碱［13］;经胃途径均可入血［14］。在心肌实验
中，脱氢紫堇碱能阻止低氧条件下心肌细胞内的钙超载［8］，而巴
马汀本身是延胡索乙素 / l － THP的母体物，并发现可通过降低酪
氨酸羟化酶的合成而抑制多巴胺的合成［9］。因此，推测延胡索
水提液中的脱氢紫堇碱和巴马汀成分协同 l － THP 的抗吗啡成
瘾作用可能与之有关，但确切的机制需进一步的实验研究证实。
延胡索药用历史悠久，临床应用广泛，特别是近年来药理作
用的研究使其临床应用远远超出原有功效。但迄今为止，从大量
的文献中可以发现，多数研究是针对药材中的单一成分延胡索乙
素 / l － THP，而针对原药材多成分的研究相对较少，并且进展有
限［15］。本文以抗吗啡成瘾的行为学影响为切入点，率先对延胡
索中 l － THP、脱氢紫堇碱和巴马汀三成分的协同作用进行了初
步研究，首次发现脱氢紫堇碱和巴马汀具有协同 l － THP 的药效
作用，这不但从以延胡索为主药的戒毒单、复方中，开发出治疗阿
片类成瘾特效的组分中药提供了一定的实验依据，而且还是从饮
片层面进化到组分(成分)层面来分析和研究传统延胡索方剂
(单方和复方)的一种有益的探索，亦为今后能开发出作用靶点
明确、质量稳定性好、疗效上具有突破的延胡索单方和复方的现
代中药奠定了初步的基础。后续将在多种模型上以及机制方面
进行研究，以全面揭示延胡索中这三种成分协同抗吗啡成瘾的相
互作用。
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