全 文 ：灭幼服及 B . T制剂处理赤松毛虫的组织病理观察
张小娣 白锦涛 李桂林 王彦文
摘 要 应用石蜡切 片技米对赤松
毛 虫幼虫进行组织病理观察 。 经灭
幼脉 l号处理 的赤松毛 虫幼 虫 , 其
内 、 外表皮结构松散 , 内表皮厚度不
均匀且明 显变薄 ; 6一 7 龄幼 虫体壁
几丁质含量降低 70 . 9% 。 经 B . T 制
剂处理的幼 虫 , 中肠上 皮细胞 与底
膜分离 ,部分上皮细胞被破坏 。 因食
膜变薄 ,断 裂或清烂 , 中肠变黑 。
关键词 病理反应 组织病理变化
灭 幼脉 l 号 B . T 生 物
杀虫剂 赤松毛 虫
赤 松 毛 虫 ( D e n d r o l im u s
s p e c t a b i l i s )是威胁赤松 生长的主要
害虫 。 长期以来 , 使用速效 、 广谱性
化学农药进行 防治 ,破 坏 了生态平
衡 ,造成年年成灾为患的局面 。 近年
来有些地 区试用无公害杀虫剂灭 幼
脉及 B . T 制剂进行防治 ,逐 步摆脱
了治虫被动的局面 。 为进一步探讨
这两种 制剂的杀虫机理 , 我们观察
了经 灭 幼脉 l 号 、 B . T 制剂处理后
的赤松 毛虫幼虫组 织病理 变化 , 并
测定 了灭 幼脉 l 号对幼虫体壁几丁
质的抑制作用 。
1 材料与方法
1
.
1 供试幼虫 6一 7 龄赤松毛虫
越冬代幼虫 。
1
.
2 供试药剂 2 5 % 灭 幼脉 l 号
胶悬剂 (吉林通化农药厂 生产 ) 。 稀
释 1 0 0 0 倍液 。 B . T 生物杀虫剂 (济
南科贝尔生物有 限公 司生产 ) ,有效
作者单位 : 山东农业大学林学系
泰安市 2 7 1 0 1 8
收稿 B期 : 1 9 9 3一 1 0一 1 0
成分 为伴抱 晶体蛋 白质和活芽袍 ,
含 活抱子数 1 0 0 亿 /m l ,稀释 4 0 0 倍
液 。
1
.
3 试验方法
1
.
3
.
1 试 虫的饲养 : 将采回 的赤松
毛虫幼虫置于室 内养虫缸 中饲养 3
天 。待其适应环境正常取食后 , 再饥
饿 12 小 时 , 取新鲜赤松针叶 , 分别
放入灭 幼脉及 B . T 制剂稀 释液浸
泡 4 分钟 ,取 出后晾干 , 分置 2 个养
虫缸 内 , 接入饥饿幼虫进行饲养 。 另
设 一组 幼虫 作为对照 。 2 4 小时后更
换新鲜针叶 ,每 天 定时观 察幼虫活
动情况 。
1
.
3
.
2 石 蜡切片制作 将 出现 中
毒症状濒于死 亡 的赤松毛虫幼虫 ,
放入 盛有 冷水 的烧杯 中加 热 80 ~
1 0 0℃杀死 , 1 0 分钟 后取 出幼虫 先
后放入 5 0% 、 70 % 酒精 中各保存 30
分钟 , 取 出虫体 切去头 、 尾 , 于解剖
显微镜下进行解 剖 , 剪取体壁及 中
肠 , 并将上面 附着 的肌 肉 、 脂肪体和
背血 管等 组 织 一 一 清除 , 分 别 用
B o iu n 氏液固定 。 2 4 小 时后取 出 ,放
到不 同浓度 的酒 精 中逐级脱水 , 二
甲苯透明 、 石蜡包埋 、 切片 。 切片厚
度 中肠为 6拌m , 体壁为 8拜m 。 切片
脱蜡 后 用 苏木精 液染 色 , 经 0 . 5%
三氯化铁溶液分 色 , 再用 1 0 %伊 红
( 9 5% 酒 精液 )染 色液 复染 , 封片 后
在显微镜 下观察 、 拍照 。 用测微尺对
内表皮厚度进行测量 。
2 结果与分析
2
.
1 灭幼脉中毒症状及组 织病变
2
.
1
.
1 中毒症状 幼虫中毒后 , 最
初表现为活动迟缓 ,取食量减少 ,体
1 4
躯逐渐萎缩 , 最后呈干缩状死亡 ,有
的个体新表皮 极薄 , 很易破裂流 出
体液而死亡 ; 或者蜕皮受阻 , 不 能顺
利蜕皮而成半蜕皮状态死 亡 。
2
.
1
.
2 组 织 病理变化 未经 灭 幼
脉 l 号处理 的幼虫 ,体壁层次清楚 ,
各层紧密附着在一起 。 经 灭幼脉 l
号处理 的幼虫 , 脂肪体 蓄积量 明显
减少 , 周缘层脂肪体及肌 肉与体 壁
分 离 ; 脂肪体破碎 , 其体 壁 内表 皮 、
外表皮结构松散 , 内表皮 结构异常 ,
厚度不均且 明显变薄 , 为正 常体 壁
的 4 9 . 2 0% (见表 l ) 。
2
.
2 B
.
T 制剂 中毒症状及组 织 病
变
2
.
2
.
1 中毒症状 赤松毛 虫取食
B
.
T 制剂感病后表现为食欲减退 ,
活动停滞 , 对外界刺激反应失灵 , 由
于泄泻 而使肛 门附近体 节污染 , 虫
体 变软呈 腐烂状 , 有 的幼虫 口 吐 液
体 。
2
.
2
.
2 组 织病变 未经 B . T 制剂
处理的幼虫 ,其中肠组 织细胞完整 、
排 列整齐 而 紧密 , 中肠上皮细胞 正
常 , 排列在底膜上 , 围食膜完 整 、 较
厚 。 感染 B . T 制剂 的幼虫 , 中肠上
皮细胞 与底膜分离 , 细 胞破碎 或脱
落 , 围食膜 变薄 、 断裂 或溃烂 , 脂肪
体崩解 ,血液混浊 , 中肠变黑 , 腐烂 。
2
.
3 灭 幼服 l 号对几丁质抑制作
用的测定
利用灭 幼脉 l 号 1 0 0 0 倍 液处
理 6 ~ 7 龄幼虫 ,施药后第 5 天选取
刚脱皮 的幼虫放入 5 0%酒精中杀
死 , 然后移入 7 0 %酒精 中保存 。 在
双 筒解剖镜 下剪取 腹部 1一 3体 节
林业科技通讯 F O R E S T S C IE N C E A N D T E C H N O L O G Y 1 9 94 · 2
处背部体壁 , 将附着在上面 的肌肉 、
脂肪体 、 背血管除去 , 剪成 0 . c7 m x
k m 的小 块 , 放入 oB itr n 氏液 固 定
2 4 小时 。 另用 同样 方法选取 幼虫 ,
剪成 0 . sc m x k m 体壁作为对 照处
理 。 从固定液中取 出供试材料用蒸
馏水冲 洗干净放入烘 箱 , 在 10 2一
1 2 0℃条件下烘干 9 小 时 , 取 出后在
干燥器 中干燥 ,称量干重 。 将称重的
体壁先后放入 50 %及 10 % 氢氧化
钠溶液 中在 10 0℃水浴 中各加 热 2
小 时 , 待冷却后冲洗体壁上附着的
杂质 , 依 次移入 95 % 、 50 % 酒 精 和
0
.
4 %盐酸溶液 中各浸 1 0 分 钟 , 取
出后在蒸馏水 中浸泡 2 4 小 时 , 然后
重新烘干 , 置于干燥器中 , 称重 。 此
重量 即为体 壁 中所含 几 丁 质 之量
(见表 2 ) 。
由表 2 可知 , 赤松毛虫 6一 7 龄
幼虫体壁 中几丁质含量 占 38 . 8% ,
经 灭 幼脉 处理后 几丁质含 量仅 占
n
.
3 0%
, 抑制率达 7 0 . 9% , 证 实灭
幼脉对几 丁质的含成有强烈抑制作
用 ,进而 阻碍 了幼虫的变态 、 发育 。
3 结论
3
.
1 灭 幼脉 l 号对 赤松 毛虫幼 虫
体壁几 丁质的合成具有 强烈的抑制
作 用 , 用 2 5写灭 幼脉 l 号胶 悬 剂
10 0 0 倍液处理松针饲 喂幼虫 , 可使
体壁几丁质含量 大大 降低 , 内表皮
明显变薄 。
3
.
2 灭 幼脉 l 号仅对 赤松毛虫体
壁几丁质 的合成有抑制作用 , 对含
有大量几丁质 的中肠围食膜 的形成
却无 影响 , 说明灭 幼脉有较高 的专
一性 。 虽然它在 昆虫体 内会扩散到
所有组 织 , 但主要佳用于真皮细胞 ,
抑制几丁质 聚合反应 , 而对肠道几
丁质合成酶未有 千扰 , 是专作用于
真皮细胞 的几丁质抑制剂 。
3
.
3 感染 B . T 生物杀虫剂的赤松
毛虫 , 其组 织病 变表现在 中肠 围食
膜被破坏 ,上皮细胞脱落 、 破损 。
3
.
4 感染 的赤松 毛虫幼虫 其 内
部解剖病变亦很 明显 , 灭 幼脉处理
后幼虫体壁 变薄 、 变脆 、 易破 , 而感
染 B . T 生物杀虫剂的幼虫 中肠发
黑 、 溃烂 ; 两者体内脂肪体蓄积量明
显减少 ,随病 情加重脂肪解离 。
参考文献
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( 1 3 )
: 1 2 9~ 1 3 6 ☆
表 l 灭幼崛 l 号处理幼虫体壁内表皮厚度比较 表 2 灭幼腥 l 号对赤松毛虫几丁质抑制作用测定
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