全 文 ：药学学报 8 1( 12 ): 92 9~ 93 3, 1 9 8 3 。
、 _ ’ 气 ’ 、 ’ 二 · _ .
大乌头及藤乌头类鸟头 _的调查鉴定与成分分析
肖培根 . 高凤英 . 李百龙左司州慕王。
。中国医翰搬药杨协舫 、 北京 )
叭 卜 门
_ ’ 提要 本文报道了民间药大乌头及藤乌头类乌头的植物来源 , 一前者属于乌头属乌头亚属 乌头
组中的辱柱乌头系 (冬er 召勺 205 吵类掉吻, _ 后者不困争的蔓乌头系 ( s “ V ol 幼“ “ )类植物 , 药用部
分为菜羹晃药 ,生物碱的高效森色颧云法 , 少 用十磕、 。 合 , 、 , 。 甲醇一水一三乙胺
(75
: “ “ : “ 忍于作流动相,` 各生物碱均能辛线分离 · 仓析了属于这类乌头的十二种不同植物品种的
生药块根 ,’ -
的联系 。
关键词
均含有呼碱羚鲤 : ,终化粉类学斑明这两群乌头植物在亲缘关系坤较密切
鸿头 , 藤乌头 , `衅够类生啊畔扣高效液相色谱测定
我国西南山区卜民间习惯取乌杀举黝瘫翩以祛风湿 、 逐寒 f 止痛 。 . 这半乌头的原植物 , . 除乌头 ( A叩瓜扭饥 。。 腿￡。 h ae “ D e互x )外 , `大都为乌头属乌头亚属乌头组中的显柱乌
头系 ( ” “ r 从 , `Os “ )类植物 , 这类鸟头的块根一般较木, 一 _ 俗称 “大乌头 ” ; 、 此外 ,
同组的蔓乌头系 ( s “ r V ol ” b“ l沁夕类植胸的块根 : . 后者的茎缠绕 , 俗称 “ 藤乌头 ,’o
一般均含滇乌碱 ( y u an c b itr it en )型的立裕生物碱 , 毒性较大 。 `
也广泛使 用
这两类乌头
为了进一步搞清这类乌头的植物来瘾, 分析其药用块根中生物碱组成情况 , ’ 了解 其毒
性 , 以便控制其质量及保证用药安全 , 我们对这类乌头进行了植物及化学方面的研究·
原 植 物 鉴 定
根据多年调查 , 这类乌头的民间所用药材名称 , 原植物及疗效见表 1。
_ _ 一 ’ · 。 一 : - . ’ 生 物 碱 、 分 析下 、 _ 一 . 卜
这类乌头块根中夫都含肴滇乌碱类生物碱, 主妻为滇鸟碱和粗茎乌头碱甲 ( 。 r a s s i c a ul ien
)A
,
c 有的乌头含有黄草乌碱 甲 (斌l伍or r摄n in 。 火 )毛其结构如下 : `
9饭
饰 CH “ 一士叮` 户
否 r
滇乌碱
粗茎乌头碱甲
黄草乌碱甲 ’
这类生物碱的毒性很大 。 、 因此 , 这类缈鲜在生药.中的含量及组成即反映出它们的毒性 。为了了解生药中生物碱的组成 , 我们研究了高效液相色谱测定生物碱的方法 , 并对这类
乌毕攀行了分娜 卿“ 不同另衅户牛费峰粤 , 卜 ; 」 一
本文于 1 98 2 年 1 月 8 日收到
DOI : 10. 16438 /j . 0513 -4870. 1983. 12. 009
9 3 0药 学 学 报 ’ “ 1
表 1 大乌头及 藤乌头类乌头的原植物及疗效
药 材 名 、 称 、 一 、 原 植 物 丫 民 呀间 一、 疗 一 效 备 注
大 黄草乌( 云南 ) 丽 口乌头 治风湿 , 强壮 , 解毒乌 ( A e u 。乞t。哪 fo , e o t￡滋 S t帅 f )
头
类 七星草乌 (云南 ) 苍山乌头 治凤湿 , 祛寒 , 止痛 , 治跌打
(A
.
e o ” t o r 亡社饥 F i n e t e t G a g n e P ) 损钱
大草乌 ; 直缘乌头 治风 湿黑草乌 (云南 ) ( A . ; r a 朴 s s e e t Z` 饥 D i e l s )
金牛七 (陕西 ) · 伏白乌头 、厂 · 治跌打损伤 , 风湿疼痛 ` 本种块根在这类中
、
(殊, t a ￡尹夕￡c “ 叭 H a n d 一M a Z z ) 最小 , . 与草乌近似
棚压那博 (西藏 ) 工布乌头 解热止痛 , 治炭疽病 , 外用治跌 本种是在西藏使用
( A
.
k o ” g b o e ” 邻 L a u e n e r ) 打损伤 , 镬虫咬伤 _ 较广的丫种乌头` -
藤 黄草乌 ; 黄草乌 二 祛风散寒 , 除湿乡止痛 , 治跌打 , 本种在云南使用较乌 堵喇 (云南 ) ( A . 公 11杭。 了, 艺a ” 此仍 K o m ) 手足撇冷 普遍
头
类 铜皮 , 小黑牛 ` 滇南乌头 治风寒湿痹 , 中风瘫痪 , ’跌打 `
(云南 ) (A · a u 占 t r o了“ 称 泥 a n e n s e w T W a n g ) 损伤
紫草乌 (云南 ) 粗茎乌头 1( A . c r a 召召云e a 以 l e W T W a n g ) 抬风湿疼痛 , 祛寒
黑心解 , 藤子草 、一 玉龙乌头 , · ` . 、 祛风湿 , · 镇痛 汽 , ` 今 「
乌 (云南 ) ( A l “ `件可 , a ,` “ ” H a n d 一 M a z z ) 二 , 个厂 ` -
草乌 ,藤乌 (云南 ) , 松潘乌头 : 一 卜 _ - `治跌打损伤 , 一风湿 , 关节疼痛 子蔓乌头 ,蔓乌药 ,金 ( A . 8吐几 g p a n e n s e H a n d二 M a z z ) 、 , , 产 一 奈牛七 , 火焰子 (陕西 ) 六 户 - 一 ` 岁
藤乌 (湖北 , 四川 ) , 瓜叶乌头 ’ 二 洽跌打损伤 , ` 关节疼痛 , 外擦 · 木种应用较广泛草乌 (湖北 ,湖南 , 四川 ) ( A 九巴仍￡ l e y a n 份仍 p r } t z ) 治矛名肿毒贵州堵喇 ,藤乌 .毕头 . ` 、 , ,一 、 一 舫 一一 …, 一(贵州 ) , 愁今 ’叨子“ ` 。夕华峪 为 e vl 少“紫草乌 ; 堵喇 气五 . 砂矛` , 几 O r犷艺0 刀 似 J几 V a r .(云南 ) a l t汀艺d 。 , W T W a n g )
(一 ) 高效液相色谱测定
1
. 色谱分离
高效液相色谱仪 e o n s t a M e t r i e导xx G 泵一 (山 e , L` 美 ) , R h e o d y n e 7 2 2 5 进样 器 , u v
lI M
“
int
” r “ “ 4 .
mn
. 、检测器 ( L D C沁 台术自动平衡记录仪 X w T让海), C丁R l今数 据处理机 (岛津 , 日 ) 。 色谱柱 ( 25 c m 丫.4 石 m m i d) , 用固定相 Y w G ` C 1 8 H 3代*l0 拜 m , 天津化学
试剂二厂 ) 填充 , 高压匀浆装柱 。
在上述十八烷基键合相柱上 , 比较了各种流动相 , 以甲醇一水一三乙胺 ( 75 : 25 : 0 . 2) 分
离效果最好 。 滇乌碱 , 黄草乌碱甲尽粗茎乌头碱甲能达到基线分离 , 峰形尖锐。
定量选用内标法 , 联苯作内标。 生物碱及内标化合物的色谱图如图 1。 _ ,
2
. 标准曲线
生物碱标准溶液 精密称取滇乌碱 、 黄草乌碱甲及粗茎乌头碱甲,各 1 . s m g 于 Z m l 容量
瓶中 , 加二氯甲烷溶解 , 并稀释至刻度 。 -
内标准溶液
稀释至刻度 。
准确吸取 50 ,
精密称取联新 iL hst 浪 ) 5m介 _ mZ l 容郧电 , 加二氯甲.烷 溶解 并
,。。 , 2 。。 , 。。。 , 、 。。; l 生嘛标猫活液手恤 l `容量瓶中,分别加入飞师 ,
内标准溶液 , 加二氯甲烷稀释至刻度 。
药 学 学 报 9 31
一 ,一 . . - 一~- ~ ` ` ~ ~ 一一. - 和 .碑吃 ` ~ ~ ` ~ ~~ ~ ~一~ ~~ 一一一~ ~一一- 一 ` ` .一 ~ - 一一一一一 甲一 , 六- 一~ 州月 , ` 一岭 , ~ 一 , ~ 一一一一叫 — 一[ IJ 、 ]
黄草乌碱甲
;典乌碱粗茎乌头碱甲垢长式、袱
图 工 生物碱的高效液相色谱图 ·
色谱柱 : Y WG 一 C , : H 、 , ( 2 5 e m x 4 . 6 m m i d ) ,
流动相 : 甲醇一水一三乙胺 ( 7 5 : 2 5 : 。 . 2 ) , 流速 :
i m z /m i n扩检测 : 25 4 n m ; 量程 : 0 . 0右` a u f s ;
纸速 : 5 血m /m in
1
. 滇乌碱 2 . 黄草乌碱甲 3 . 联苯 (内标 )
4
. 粗茎乌头碱甲 少
争-
图 2 生物碱标谁曲线
用微量注射器吸取上述不同浓度的溶液 1 川
进样层析 , 用数据处理机计算峰面积 , 以生物碱
峰面积 /内标准峰面积为纵坐标 , 生物碱量 为 横
坐标 , 绘制标准曲线 , 在 0~ 2 5 0 户g间得 到 通
过原点的直线 , 如图 2 。 、
仁 ) 生药分析 ,
、 ` 卜 提取方法的比较 _ _ ` _ ’ \ 一 ” ~不同溶剂的提取效果 : 生药粉末用氨试液碱化 , 用不同溶剂浸泡提取 。 曾比较乙醚 、 氛
仿 、 二氯甲烷三种不同溶剂的提取效果 , 分析结果表明三种溶剂的提取效果相近 , 但以乙醚
提出的杂质较少 , ’提取溶液颜色较浅 , 故选用乙醚作提取溶剂 。
不同提取方法的提取效果 : 取同一生药粉末用乙醚按下述方法提取 。 (1 ) 冷浸不同时间
( 6
, 1 5
,
24 小时 ) 。 ( 2 ) 冷浸提取三次 , 第一次冷浸 1 5小时 , 滤出乙醚提取液 , 残 渣 换用
新乙醚再冷浸 4 小时 , :同样再重复一次 , 合并乙醚提取液 。 ( 3) 回流提取 : 将生药粉末用氨
水碱化后 , . 子沙氏提取器中用乙醚回流提取至天生物碱反应 (约 6一 8 小时 ) 。
` 取一定量上述不同提取方法所得的乙醚提取液 , 挥午 , 溶于二氯甲烷 , 层析侧定 。 其溉
定结果见表 2
表 2
提 取 方 法
,
_ . ` ’ ` 飞” , : 、
不同提取方法的提取效果
~夸 “ 碱 、 、兔, , ’ ` ’ 粗茎乌头碱甲 (% )
.0586279
.冷浸 6 h
冷浸 1 5 h .
冷授 2寸h ·
冷浸提取三次
回茹提取
0
.
8 8
石. 9 1
0
.
9 6
0
. 分3
0
.
9 1
从测定结果得知 , 滇乌碱与粗茎乌头碱甲二者用乞醚的提取效率不同 , 粗茎乌头碱 甲需 ·
要更长的提取时间 , 考虑到操作的方便及提取效果 , 选用冷浸 24 小时的提取方法 。
2
. 样品测定 ’ · , . -二 . 卜 ` · 。 . 、测定方法 精密称取生药粉末 1 0 m g ( 60 目) 子 10 m l 磨口带塞试管中、 ` 加 0 . 1 m l 氮:试液 , 搅匀 , 加入 10 m l 乙醚 , 放置 24 小时 , 并不时振摇 , 滤出乙醚提取液 , 残渣 用 少 最 :
3 9 2药 学 学 报
一一- - - - 一 一 ~一一一- - - ~一一一- ` - 一一 州一- - - 一一一 - - ~一一 - ~一- - 一一` - 一一- 一 - - 一 -乙醚洗涤三次 , 合并乙醚提取液 , 调整至一定体积 , 堆确量取适量提取液 (含生物 碱 10 ~
20 。 产g) , 挥干 , 残留物用少量二氯甲烷溶解 , 定量转移至 1 m l 容量瓶中 , 加 内标 准 溶 液
40 川 , 用二氯 甲烷调整体积至刻度 , 取 1川 进样层析 , 用数据处理机根据峰面积比 计 算生
药含量 。
用上述方法测定了各种乌头样品的块根 , 其生物碱含量如表 3 。
表 3 各种乌头生药的生物碱含量
滇乌碱 (% ) 粗茎乌头碱甲 (% ) 黄草乌碱甲 (% )
丽江乌头
苍山乌头
直缘乌头
太白乌头
工布乌头
黄草乌
摈南乌头
粗茎乌头
玉龙乌头
松潘乌头
瓜叶乌头 *
紫乌头
::
ZJ670439邓乃ó6U九ù1ùnC.
31洲9285·604
所分析样品为瓜叶乌头变种 v ar le 。 二 g at 舰二
曾取玉龙乌头样品提取液渗
叭肠土 0 4 0 1 2% ; 粗茎乌头碱甲
连续进样测定十次 ,
0
.
3 8 5 土 0 . 0 0 5%
其测定结果及 标 准 偏差为 :
。 相对标准偏差分别为 1 . 4% ; 1
滇 乌碱
3%
。
讨 论 . _
1
, 从化学分类学观点来着 , 大乌头与藤鸟头的主要植物来源为显柱乌头系与蔓乌头系 ,这两群植物所含生物碱十瘫似 , 所分析的十二种不同植物品种生药块根 , 主要含有滇乌碱类生物碱 , 其中以含滇乌碱的品种最多 , 其次是粗茎乌头碱甲 , 而含黄草乌碱甲 的 品 种较
少 。 这类生物碱在其它乌头类群植物中很少存在 , 这表明所分析的两群植物在亲缘关系上有
较密切的联系 。
2
. 滇乌碱对小鼠静脉注射的 L D 50 为 0 . 05 m g /kg , 而乌头碱为 。 . 12 m g / kg `” , 滇乌 碱
毒性比乌头碱毒性还大 。 所以大乌头类和藤乌头类乌头毒性很强 , 因此 , 这两类乌头作为药
用时 , 必须十分注意 , 要控制其质量 , 以免发生意外 。
3
. 大乌头类和藤乌头类乌头在民间常用以代替草乌使用 。 草乌来源于乌头系 (旋 r l 。 -
f l
a t a ) 植物 : 乌头 ( A . e a : 饥 `c h a e l￡ D e b x ) 和北乌头 ( A . k o s o e : 可 i艺 R e i e h b ) 植 物 的 块
根 , 其中所含成分主要为乌头碱类生物碱 。 乌头碱与滇乌碱两类生物碱基本结构虽然一致 ,
均为二菇双醋类生物碱 , 但在 C , 4 位上 , 乌头碱为苯甲酸基 , 滇乌碱为茵香酚基 , 它们在药
理作用上是否完全一致 , 还有待进一步研究 。 因此 , 两类乌头 目前在使用上还应适当加以区
别 。 ·
4
. 用高效液相色谱分离测定乌头类生物碱 , 效果良好 , 各主要生物碱峰分离完全 , 峰
形尖锐 , 生药中含有卜的少量其它生物碱也均可分离 , 不干扰测定 。
本法操作简便 , 快速 , 测定结果准确 。
药 学 学 报 9 33
由于乌头类生物碱在甲醇溶液中放置后能逐渐破坏 , 故生药提取物最后溶在二氮 甲烷中
进行层析测定 , 生物碱在二氯甲烷中比较稳定 , 溶剂峰不干扰测定 。
致谢 承我所植化室王峰鹏同志提供生物碱标准品 , 植物室王立为同志协助提 供生 药 样 品 , 谨此致
谢 。
参 考 文 献
1
.
B i s s e t N K : A r r o w P o i s o n s i n C h i n a 11
.
A e o 一, i r u m b o t a n y , c h e m i s t r y a n d p h a r m a e o l o g y
.
J E th 介 o p h a ,饥 a c o 忿
4 : 2 4 7
,
1 9 8 1
B I O L O G I C A L I N V E S T I G A T IO N A N D C H E M CI A L
A N A L Y S I S O F B I G A C O N I T E S A N D
V I N E A C O N IT E S
W A N G M
u 一 z o u , X I A O P e i一 g e n
,
G A O F e n g
一 y i n g
,
a n d L I B a i
一 l o n g
( 1 0 5一i 。` `e of 万 a 考e : i a 万 e d i e a , C几i , e s e A e a d e m y oj ,
万 e ` i e a l S e葱e 玲 e e s , B e汀名n g )
A B S T R A C T
.
T h e
a C 0 l i t e
`
f Q I义 m , d i e i扛 e s ,「 b i g a e o in t e s a n d v i n e ` a e o h i t e s , a r e _ u s e d a s s u b s t i t u t e s o f
i n
`
t h e 垃 o u n t a i n r e g i o n ` o f ir o r t h ` w e s t C h i n a .
F r o m
,
P h y l 6 g e n y P b i n t
a n d t h o s e o f v i n e 乒` o n i t e s
o f v i e w
,
t h e
`
P l a n t s o f b i g
b七rl o n g t o 一 S e r
.
Vo 乙舫 b舫 l亿 .
a e o n i t e s b e l o n g t o S e r
.
S `y l o s a
T h e d r y
’
r o o t o f t h e s e P l a n t s 15
u s e d a s m e d i c i n .e
、 二 ,~ 。 二
人 n _ H P L C m `眯h o d w a s d e v e l o 琳d ’ 、 t o 、e v a l u 成t e t h e a l k a l o i d a l e o n t e n t s i n t h e s e
d r u g s
.
T h e e t h
e r e’i l 己x t r a e t w a s e h r o m a t o g r a p h e d o n a n Q D S ’ e o l u m n , u s i n g m e t h a n o l -
w a t e r 一 t r i e t h y l a谊i介e . ( 7 5 二2 5 : 0 . 2 ) . a s 巩 o b i l e p h a s e . E a e h 」 a l k a l o id e o u ld b e w e l l s e -
p a r a t e d
.
T w e l v e a e o n i t e s f r o m d i f f e r e n t sP e e i e s W e r e a n a l y z e d b y t h i s m e t h o d
.
T h e
a l k a l o i d s w e r e i d e n t i f i e d a n d q u a n t i f i e d
.
T h e r e s u l t s r e v e a l t h a t a l l o f t h e m e o n t a i n
y u n a e o n i t i n t y P e a l k a l o id s
.
T e n s a m P l e s e o n t a i n y u n a e o n i t i n e
, e i g h t s a m P l e s e o n t a i n
e r a s s i e a u l i ir e A a n d
.
t w o
’
s a m P l e s e o n t a i n
.
v i lm o r r i a n i n e A
.
T h i s m e a n s t h a t t h e s e P l a n t s
a r e P h y l o g e n y : P h y t o e h e m i e a l l y v e r y e l o s e l y r e l a t e d
.
K e y w o r a s B i g a e o n i t e s : V i n e a e o n i t e s : Y u n a e o n i t i n e t y P e a l k a l o id s ; H i g h
P e r f o r m a n e e l i q u i d e h r o m a t o g r a P h y