全 文 ：大鼠口服苏合香丸 10 天后对肝肾功能的影响及汞蓄积情况
李海芳， 孙 鹏， 迪丽努尔·沙比托夫， 杨玲玲， 闫明俞， 刘君康
(新疆维吾尔自治区食品药品检验所，新疆 乌鲁木齐 830004)
收稿日期:2011-05-17
作者简介:李海芳(1977—) ，女，副主任药师，研究方向:药理学及药品检验。Tel:(0991)2816492，E-mail:LHFHR@ 163． com
摘要:目的 研究大鼠口服苏合香丸 10 d后对其肝肾功能的影响及汞在肝肾中的蓄积情况。方法 大鼠口服苏合香丸
10 d后进行血液生化学指标及组织病理学测定，同时采用湿法消解肝肾组织，使用双道氢化物发生原子荧光光谱法测定
组织中的汞。结果 大鼠口服苏合香丸 10 d后对其体质量及肝肾的脏器系数没有影响;苏合香丸各组肌酐数值与阴性
组比较均有显著性增高(P ＜ 0． 05) ;肝肾组织中的汞量均高于阴性组(P ＜ 0． 05) ，计算后发现汞在肾脏蓄积率远远高于
肝脏。结论 口服苏合香丸 10 d后，大鼠血清肌酐升高，肝肾组织汞蓄积，蓄积率肾脏高于肝脏。
关键词:苏合香丸;大鼠;肌酐;汞;原子荧光法
中图分类号:R285． 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2012)01-0145-04
苏合香丸是著名的温通开窍药，被《中国药典》收录，现
代临床多用于中风所致的神志不清、牙关紧闭、半身不遂重
症，至今仍是抢救煤气中毒和心肌梗塞、心绞痛的有效药物。
该药处方中含有朱砂矿物药材，由于历史原因，该药基础研
究薄弱，随着中药安全性问题日益引起重视，朱砂的毒性问
题也引起了国内外广泛的关注［1-2］。因此，本实验进行了大
鼠口服苏合香丸 10 d后对其肝肾功能的影响及汞蓄积情况
的研究。
1 实验材料
1． 1 实验动物 wistar大鼠，(150 ± 30)g，雄性，清洁级。购
于新疆医科大学实验动物中心，动物许可证号 SCXK(新)
2003-0001。
1． 2 试药 苏合香丸(批号:JB65001、8010079、9010464、
9010171)大蜜丸 3 g /丸;朱砂细粉(本所药材标本室提供)。
制备方法:取一丸苏合香丸剪碎后，用 5%羧甲基纤维
素钠溶液 30 mL溶解，使用拍打式无菌均质器拍打 180 s，制
备成 0． 1 g /mL 的混悬液;精密称取朱砂细粉 105 mg，加入
5%羧甲基纤维素钠溶液 30 mL，制备成 3． 5 mg /mL 的混悬
液。每天临用现配。
1． 3 试剂 硝酸(优级纯，批号 20100508，北京化工厂) ;硫
酸(优级纯，批号 20100508，北京化工厂) ;盐酸(优级纯，批
号 100325，西安化学试剂厂) ;硼氢化钾(优级纯，批号
20100617，天津市光复精细化工研究所) ;氢氧化钾(分析纯，
批号 20070720，天津市福晨化学试剂厂) ;重铬酸钾(分析
纯，批号 20030407，天津市化学试剂三厂)。
1． 4 标准品 汞单元素标准溶液(GBW 08617 8094，标准
值 1 000 μg /mL，中国计量科学研究院) ;鱼肉中的总汞与甲
基汞含量标准物质［GBW 10029 0801，总汞标准值(0． 85 ±
0． 03)mg /kg，甲基汞标准值(0． 84 ± 0． 03)mg /kg，中国计量
科学研究院］。
1． 5 仪器 组织匀浆机(D-130，WIGGEN HAUSER) ;低温
冰箱(型号 MDF-U333，三洋医用生物电子有限公司) ;低温
高速离心机(SIGMA3K15 型，德国 SIGMA 公司) ;电子天平
(BP221S，北京赛多利斯天平有限公司) ;拍打式无菌均质器
(BD-400，南京贝帝实验仪器有限公司) ;双道原子荧光光度
计(AFS-830a，北京吉天仪器有限公司)。智能电热消解仪
(型号 LabTach，莱伯泰科公司)。
2 实验方法和检测指标
2． 1 试验分组 wistar 大鼠，60 只，随机分为 6 组，即阴性
组、苏合香丸Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、朱砂组。阴性组灌胃给
予等容量的 5%羧甲基纤维素钠溶液;苏合香丸Ⅰ组(批号
8010079)、Ⅱ组(批号 9010464)、Ⅲ组(批号 9010171)、Ⅳ组
(批号 JB65001)、朱砂组分别灌胃给予相应组的供试液 0． 5
mL /100 g。每天一次，连续灌胃 10 d。
2． 2 检测指标
2． 2． 1 肝肾功能相关血生化指标检验 最后一次给药后，
所有大鼠禁食不禁水 18 h，称量体质量后，25%乌拉坦溶液
(0． 4 mL /100 g)腹腔注射进行麻醉，腹主动脉取血离心制备
血清进行谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血清胱抑素、尿素氮、肌
酐的检验。同时小心剥取大鼠肝脏及肾脏并称质量，计算脏
器系数。
2． 2． 2 组织病理学检查 右肾及剩余肝脏组织浸泡于
10%甲醛溶液中备用进行组织病理学检查。
2． 2． 3 肝肾组织中总汞的测定 取所有大鼠的左肾及部分
肝脏组织使用双道原子荧光光度计检测动物组织中总汞量。
3 统计方法 采用 SPSS 11． 0 统计软件进行统计分析。
4 结果
4． 1 大鼠口服苏合香丸 10 d 后对体质量的影响 大鼠口
服苏合香丸、朱砂粉 10 d 后的体质量增长正常，毛发光泽，
经统计检验各组较阴性对照组比较无显著性差异。见表 1。
541
2012 年 1 月
第 34 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2012
Vol． 34 No． 1
表 1 大鼠口服苏合香丸 10 d后对体质量的
影响 (x ± s，n =10)
组别 初给药体质量 / g 10 d后体质量 / g
阴性组 146． 1 ± 27． 5 181． 4 ± 23． 0
苏合香丸Ⅰ组 146． 2 ± 26． 8 177． 7 ± 23． 0
苏合香丸Ⅱ组 158． 6 ± 30． 8 180． 1 ± 30． 4
苏合香丸Ⅲ组 160． 6 ± 37． 3 191． 7 ± 38． 3
苏合香丸Ⅳ组 151． 8 ± 34． 9 183． 1 ± 31． 0
朱砂组 147． 6 ± 30． 4 179． 9 ± 27． 4
4． 2 大鼠口服苏合香丸 10 d后对肝、肾脏器系数的影响
大鼠口服苏合香丸、朱砂粉 10 d 后，解剖大鼠对心、肝、脾、
肺、肾等主要脏器进行肉眼观察，结果发现各组均无明显病
变情况。称量肝、肾组织的湿质量，按体质量折算脏器系数
(脏器质量 g /100 g体质量) ，经统计检验各组大鼠脏器系数
较阴性对照组比较无显著性差异。见表 2。
4． 3 大鼠口服苏合香丸 10 d 后对血液生化指标的影响
大鼠口服苏合香丸、朱砂粉10d后，用25%乌拉坦溶液
表 2 大鼠口服苏合香丸 10 d后对大鼠肝肾脏器系
数的影响 (x ± s，n =10)
组别 肝脏 g /(100 g体质量)肾脏 g /(100 g体质量)
阴性组 2． 74 ± 0． 23 0． 63 ± 0． 05
苏合香丸Ⅰ组 2． 77 ± 0． 25 0． 63 ± 0． 05
苏合香丸Ⅱ组 2． 75 ± 0． 26 0． 65 ± 0． 07
苏合香丸Ⅲ组 2． 68 ± 0． 17 0． 61 ± 0． 06
苏合香丸Ⅳ组 2． 65 ± 0． 13 0． 63 ± 0． 04
朱砂组 2． 60 ± 0． 17 0． 61 ± 0． 05
(0． 4 mL /100 g)腹腔注射进行麻醉，腹主动脉取血进行肝功
能及肾功能相关血生化指标检验［3］。结果表明:朱砂组与阴
性组比较肝功能及肾功能均有损伤迹象，即谷草转氨酶、血
清胱抑素、肌酐数值显著性增高(P ＜ 0． 05) ;尿素氮数值与
阴性组比较有显著性降低(P ＜ 0． 05)。苏合香丸各组肌酐
数值与阴性组比较均有显著性增高(P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 01) ，表
明苏和香丸在本实验条件下对肾功能有一定影响。见表 3。
表 3 大鼠口服苏合香丸 10 d后对大鼠血液生化指标的影响 (x ± s，n =10)
组别
谷丙转氨酶 ALT
/(U·L －1)
谷草转氨酶 AST
/(U·L －1)
ALT /AST
血清胱抑素
/(μg·mL －1)
尿素氮 BUN
/(mmol·L －1)
肌酐 Cr
/(μmol·L －1)
BUN /Cr
阴性组 76． 90 ± 39． 83 229． 40 ± 99． 93 3． 06 ± 0． 94 1． 08 ± 0． 22 11． 09 ± 0． 86 36． 10 ± 6． 37 0． 31 ± 0． 05
苏合香丸Ⅰ组 75． 40 ± 13． 75 243． 30 ± 57． 97 3． 27 ± 0． 66 1． 59 ± 0． 45 10． 94 ± 1． 24 47． 50 ± 8． 46* 0． 24 ± 0． 04＊＊＊
苏合香丸Ⅱ组 72． 70 ± 17． 99 215． 80 ± 43． 66 3． 02 ± 0． 45 1． 39 ± 0． 32 11． 29 ± 0． 90 44． 50 ± 4． 03＊＊ 0． 26 ± 0． 03＊＊
苏合香丸Ⅲ组 64． 70 ± 25． 11 223． 90 ± 63． 51 3． 62 ± 0． 83 1． 46 ± 0． 35 10． 89 ± 1． 22 43． 90 ± 6． 90＊＊ 0． 25 ± 0． 04＊＊
苏合香丸Ⅳ组 87． 30 ± 27． 94 270． 30 ± 52． 64 3． 22 ± 0． 49 1． 34 ± 0． 16 11． 15 ± 0． 64 44． 30 ± 4． 27＊＊ 0． 26 ± 0． 03＊＊
朱砂组 118． 10 ± 45． 16 298． 90 ± 92． 29* 2． 64 ± 0． 40 1． 49 ± 0． 19* 10． 19 ± 0． 92* 42． 90 ± 4． 68* 0． 24 ± 0． 04＊＊＊
注:各组与阴性组比较:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01，＊＊＊P ＜ 0． 001。
4． 4 大鼠口服苏合香丸 10 d后对肝肾组织病理学的影响
大鼠解剖肉眼观察各组大鼠肝、肾均未见明显异常。毒性病
理组织形态检查结果显示苏合香丸各组、朱砂组与阴性对照
组相比较均未见到有关的病理改变，在本次实验条件下，各
组均未对大鼠肝、肾造成病理性损伤。
4． 5 大鼠口服苏合香丸 10 d后肝肾组织中总汞的测定［4］
4． 5． 1 样品的处理方法［5］ 精密称取大鼠肝脏和肾脏组织
各 0． 5 g，分别置 50 mL聚丙烯消解管中，加入硝酸∶硫酸(V /
V，3 ∶ 1)4 mL，于智能电热消解仪中 120 ℃恒温消解 3 h，放
冷，加双氧水 0． 5 mL，摇匀，消解 0． 5 h，取出冷却至室温，用
5%盐酸加至聚丙烯消解管 10 mL刻度处，摇匀。取 1． 0 mL，
转移至刻度管中加 5%盐酸定容至 10 mL，摇匀后进行测定，
同时做试剂空白。
4． 5． 2 大鼠肝肾组织中总汞测定方法学研究
4． 5． 2． 1 仪器条件［6］ 光电倍增管负高压 270 V;灯电流
(峰值)26 A;原子化器高度 8 mm;载流液 5%盐酸溶液;还原
剂为 20 g /L KBH4 + 5 g /L KOH;载气(Ar)流量 300 mL /min;
测量方式为标准曲线法。
4． 5． 2． 2 标准曲线测定 吸取汞标准溶液 1 000 μg /mL，
5． 0 mL于 100 mL量瓶中，用 5%HNO3(含 0． 5 g /L K2Cr2O7，
保护 Hg2 +不还原成单质汞而被玻皿吸附)溶液定容至刻度，
摇匀。用 5%盐酸溶液稀释至汞溶液质量浓度分别为 0、
0． 1、0． 2、0． 5、1． 0、1． 5、2． 0 μg /L。按上述测定条件设置仪器
参数，稳定 30 min 后开始测定，记录荧光强度，以质量浓度
(μg /L)为横坐标，荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线。汞浓
度在 0 ～ 2． 0 μg /L 范围内，含量与荧光强度呈正相关，γ 为
0． 999 5。
4． 5． 2． 3 标准物质鱼肉(GBW 10029 0801)中的总汞回收率
测定 称取标准物质鱼肉 9 份，每份约 0． 2 g，精密称定后，
置 50 mL聚丙烯消解管中，加入硝酸∶硫酸(V /V，3 ∶ 1)4 mL，
于智能电热消解仪中 120 ℃恒温消解 3 h，放冷，加双氧水
0． 5 mL，摇匀，消解 0． 5 h，取出冷却至室温，用纯水加至聚丙
烯消解管 10 mL刻度处，摇匀。取 1． 0 mL，转移至刻度管中
加 5%盐酸定容至 10 mL，摇匀后进行测定，同时做试剂空
白，测定结果均在标准值范围内，回收率达到要求，为 0． 82 ～
0． 88 mg /kg。
4． 5． 2． 4 正常大鼠肝脏组织加标回收率测定 正常大鼠肝
脏组织匀浆后称取 12 份，每份约 0． 5 g，精密称定后，置 50
mL聚丙烯消解管中。1 ～ 3 份用于测定肝脏组织中汞的浓
度;4 ～ 6 份(加标 A-1 ～ 3)加入 0． 5 μg /mL汞标准溶液 0． 04
mL;7 ～ 9 份(加标 B-1 ～ 3)加入 0． 5 μg /mL 汞标准溶液 0． 1
mL;10 ～ 12 份(加标 C-1 ～ 3)加入 0． 5 μg /mL 汞标准溶液
641
2012 年 1 月
第 34 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2012
Vol． 34 No． 1
0． 16 mL，每份加入硝酸∶硫酸(V /V，3 ∶ 1)4 mL，按照前述样
品处理方法进行消解，消解液稀释后进行测定，同时做试剂
空白，测定结果各组回收率为 107% ～122%。详见表 4。
表 4 正常大鼠肝脏组织中汞加标回收实验结果
标号 样品质量 / g 本底值 /(μg·L －1)加标量 /(μg·L －1)实测值 /(μg·L －1) 回收率 /% 平均回收率 /% 相对标准偏差 /%
加标 A-1 0． 520 4 0． 373 0． 2 0． 608 117． 64
加标 A-2 0． 490 9 0． 352 0． 2 0． 544 96． 21 106． 77 10． 04
加标 A-3 0． 516 7 0． 370 0． 2 0． 583 106． 47
加标 B-1 0． 526 5 0． 377 0． 5 0． 917 107． 98
加标 B-2 0． 559 8 0． 401 0． 5 1． 055 130． 81 121． 72 9． 94
加标 B-3 0． 533 7 0． 382 0． 5 1． 014 126． 35
加标 C-1 0． 485 5 0． 348 0． 8 1． 258 113． 79
加标 C-2 0． 513 5 0． 368 0． 8 1． 282 114． 28 108． 23 9． 29
加标 C-3 0． 504 1 0． 361 0． 8 1． 134 96． 62
4． 5． 2． 5 精密度及检出限 仪器检测精密度为 3． 92%。仪
器检出限为0． 004 5 μg /L(相关系数0． 994 0，n = 5)。方法检
出限为0． 013 55 μg /L。
4． 5． 3 计算 肝、肾组织中含汞量，代入下列公式计算:X =
(C1 － C0)× V /m。式中 X:样品中汞的质量分数(μg /g) ;C1:
测定样液中汞的含有量(μg /L) ;C0:试剂空白中汞的含有量
(μg /L) ;v:为样品消解定容后总体积;m为样品称样量(g)。
4． 5． 4 大鼠口服苏合香丸 10 d 后肝、肾组织中汞测定 将
消解好的样品稀释后进行检测，检测结果表明:大鼠口服苏
合香丸 10 d后与阴性组比较，在肝脏和肾脏均有明显的蓄
积，且在肾脏的蓄积更为显著。具体见表 5。
表 5 大鼠口服苏合香丸 10 d后肝、肾组织中含汞量
(x ± s，n =10)
组别 肝脏中汞 /(μg·g － 1) 肾脏中汞 /(μg·g － 1)
阴性组 0． 094 4 ± 0． 034 3 0． 064 4 ± 0． 026 7
苏合香丸Ⅰ组 0． 104 9 ± 0． 022 4 0． 233 5 ± 0． 044 4＊＊＊
苏合香丸Ⅱ组 0． 141 9 ± 0． 031 9＊＊＊ 0． 309 9 ± 0． 116 6＊＊＊
苏合香丸Ⅲ组 0． 138 2 ± 0． 035 7* 0． 301 8 ± 0． 129 0＊＊＊
苏合香丸Ⅳ组 0． 134 2 ± 0． 028 6* 0． 314 8 ± 0． 065 6＊＊＊
朱砂组 0． 175 6 ± 0． 032 8＊＊＊ 0． 387 6 ± 0． 109 0＊＊＊
注:各组与阴性组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01，＊＊＊P ＜ 0． 001。
4． 5． 5 大鼠口服苏合香丸 10 d 后肝、肾中总汞蓄积率测定
经前期测定［7］，得知实验各批号苏合香丸中成药的总汞量，
计算每克组织中的汞蓄积率，发现汞在肾脏组织蓄积高于在
肝脏组织的蓄积。计算公式:每克组织中汞蓄积率(‰)=每
克组织中汞量 × 1000 /(大鼠日服用量 ×苏合香丸总汞量 ×
10)。具体结果见表 6。
表 6 大鼠口服苏合香丸 10 d后肝、肾中总汞蓄积率
测定结果
组别 每克肝脏中汞蓄积率 /‰ 每克肾脏中汞蓄积率 /‰
苏合香丸Ⅰ组 0． 004 218 ± 0． 000 890 0． 009 45 ± 0． 002 438
苏合香丸Ⅱ组 0． 006 067 ± 0． 001 107 0． 014 24 ± 0． 006 806
苏合香丸Ⅲ组 0． 005 735 ± 0． 001 763 0． 012 23 ± 0． 005 873
苏合香丸Ⅳ组 0． 005 359 ± 0． 001 720 0． 012 43 ± 0． 003 573
朱砂组 0． 008 008 ± 0． 002 198 0． 017 46 ± 0． 005 202
5 讨论
汞的毒性已众所周知，以硫化汞为主要成分的朱砂的
毒性也已引起人们的高度警惕和重视。但目前仍有大量的
中药成方制剂含有朱砂［8］，这些制剂多以经典方为主，由于
历史原因，这些制剂的基础研究非常薄弱。由于我国开展
重金属限量标准的研究工作较晚，目前仅对部分中药产品中
的 Pb、Hg、As等量作了限制，对大多数中药(包括中药生药、
制剂、提取物)目前尚未制定和完善其限量标准［9］。我国对
《中国药典》中的朱砂剂量进行过修订，如 1990 年版及以往
的历版药典朱砂日用剂量较大，为 0． 3 ～ 1． 5 g，1995 年版将
朱砂剂量降至 0． 1 ～ 0． 5 g，至 2010 年版仍为该限定剂量。
2005年版《中国药典》收录的含朱砂的成方制剂达 46 个，占
《中国药典》收载制剂的 8． 1%;2010 年版《中国药典》收录的
含朱砂的成方制剂达 54 个，占《中国药典》收载制剂的
5． 1%。鉴于含有朱砂的成方制剂在《中国药典》占有相当的
数量，所涉及的制剂及其功能主治、临床适应症数量、种类
繁多，重新评价朱砂在成方制剂中的毒性和应用价值的工作
就凸显出了迫切性。
苏合香丸是含有朱砂的成方制剂，目前被《中国药典》收
录。我们对其进行了大鼠口服 10 d 的毒性评价工作。发现
大鼠口服苏合香丸后对其体质量、肝肾器官脏器系数没有影
响;血生化检验中未发现其对肝功能敏感指标谷丙转氨酶和
谷草转氨酶有影响，对肾功能敏感指标血清胱抑素、尿素氮、
肌酐检验后发现服药组肌酐数值与阴性组比较均有显著性
增高(P ＜ 0． 05) ，但数值仍在正常值范围内;病理组织形态学
检查显示该药品在 10 d饲喂后未造成大鼠肝肾组织病理性
损伤;经双道原子荧光光度计测定组织中的总汞，发现在肝
肾组织中有汞蓄积现象，且在肾脏的蓄积率远远高于肝脏。
在本实验中选择的大鼠灌胃剂量为临床人用最大剂量，
在该剂量下服用 10 d 即可显示出肌酐数值出现增高趋势。
如果超剂量服用或超时服用，依据本次实验结果提示可能会
引起肌酐数值的进一步增高，可能会超过正常值范围甚至产
生病理性损伤。
汞的灵敏度非常高，因此需要特别注意来自各方面的污
染［10-11］。实验中用到的所有器皿必须经过 20% HNO3(V ∶
741
2012 年 1 月
第 34 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2012
Vol． 34 No． 1
V)浸泡过夜，并用去离子水清洗干净后方能使用。通常分析
纯试剂中可能会含有少量汞，影响实验测定结果，尤其是盐
酸，故所有试剂应尽可能采用优级纯，同时要作试剂空白用
来扣除试剂带来的影响。
另外，考虑到大鼠性别差异对血生化数值的影响［12］，本
次研究仅选择同一性别的大鼠进行了实验。
参考文献:
［1］ 赵惠莎．朱砂的毒性及影响其毒性的主要因素［J］． 浙江临床
医学，2000，2 (1) :72．
［2］ 金伟军，周阳海，张志东． 含朱砂中药成方制剂安全性问题的
探讨［J］．今日药学，2008，18(3) :56-58．
［3］ 段玉东，孟 伟，张春红．血清胱抑素 C、肌酐和尿素测定对肾
损伤的诊断［J］．中国现代医生，2008，46(3) :130．
［4］ 梁爱华，李春英，薛宝云，等．朱砂汞在大鼠体内的蓄积性研究
［J］．中国中药杂志，2009，34(23) :3068-3072．
［5］ 王宁生，汤毅珊，潘华新，等． 生物样品及中药中汞、砷的测定
［J］．分析测试学报，1999，18(4) :13-16．
［6］ 刘明钟．原子荧光应用手册［M］． 北京:北京吉天仪器有限公
司，2005:209．
［7］ 汤毅珊，黄志尧，潘新华，等．微波消解-原子荧光法测定中药
中的汞、砷［J］．中药新药与临床药理，1999，10(3) :177-179．
［8］ 周超凡，林育华．传统中药朱砂应用概况及其安全性［J］．药物
不良反应杂志，2008，10(3) :184-189．
［9］ 洪 薇，赵 静，李绍平． 中药重金属限量控制现状与对策
［J］．药物分析杂志，2007，27(11) :1849-1853．
［10］ 秦宏伟，朱爱国，姜国华，等．原子荧光光度计常见干扰因素与
排除［J］．化学分析计量，2009，18(3) :69-70．
［11］ 石 静．原子荧光光度计检定技术指标的影响因素及注意事
项［J］．现代科学仪器，2007(4) :100-101．
［12］ 张 敏，纪晓光，王京燕． 清洁级 Wistar 大鼠血常规及生化指
标正常值观察［J］．中国消毒学杂志，2006，23(2) :119-123．
新疆马鹿角提取物对成骨细胞 MC3T3-E1 增殖、分化和矿化的影响
刘 盟1，2， 马 玉3， 高晓黎2，4* ， 魏 丽5， 阿尔孜古丽·吐尔逊5
(1．新疆医科大学附属肿瘤医院，新疆 乌鲁木齐 830011;2． 新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830054;
3．新疆乌鲁木齐市第四人民医院，新疆 乌鲁木齐 830002;4．新疆药物制剂工程技术研究中心，新疆 乌鲁木
齐 830054;5．新疆医科大学第一附属医院，新疆 乌鲁木齐 830054)
收稿日期:2011-05-10
基金项目:乌鲁木齐市科学技术项目(C06212003)
作者简介:刘 盟(1982—) ，男，药师，硕士，从事新药研究与开发。Tel:(0991)7819430，E-mail:67848101@ qq． com
* 通信作者:高晓黎(1962—) ，女，博士，教授，博士生导师，从事靶向给药系统的研究及新疆地产资源新药的开发。Tel: (0991)4362442，
E-mail:xli_g@ sina． com
摘要:目的 研究新疆马鹿角提取物对体外培养成骨细胞株 MC3T3-E1 细胞增殖、分化和矿化的影响。方法 以
MC3T3-E1 细胞作为药物筛选模型，用 MTT法测定不同浓度的新疆马鹿角提取物促细胞增殖作用，采用碱性磷酸酶活性
测定和骨钙素含有量检测，观察不同浓度的新疆马鹿角提取物促细胞分化作用，以 Von kossa钙化染色法观察新疆马鹿
角提取物溶液对 MC3T3-E1 细胞钙化能力的影响。结果 MTT检测结果表明 5 × 102、5 × 101、5 μg /mL新疆马鹿角提取
物溶液在 24、48、72 h均可促进 MC3T3-E1 细胞增殖，且呈时间依赖性。ALP检测结果表明 5 × 102、5 × 101μg /mL新疆马
鹿角提取物溶液在 24、48、72 h可提高 MC3T3-E1 细胞内 ALP的活性。BGP检测结果表明 5 × 102、5 × 101μg /mL新疆马
鹿角提取物溶液在 8、12 d可促进 MC3T3-E1 细胞内 BGP的合成和分泌。Von kossa染色钙化面积百分比结果表明 3 组
新疆马鹿角提取物溶液与对照组比较无明显区别。结论 新疆马鹿角提取物可促进成骨细胞株 MC3T3-E1 的增殖和分
化能力。
关键词:新疆马鹿角提取物;MC3T3-E1;增殖;分化;基质矿化
中图分类号:R285． 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2012)01-0148-04
马鹿角为鹿科动物马鹿 Cervus elaphus Linnaeus 的雄鹿
角产品，据本草记载［1］，马鹿角具有“温肾阳、强筋骨、益血
脉、行血消肿的功效”。新疆马鹿角的组织结构是以膜内成
骨形式形成的完全骨化的实角，并具有很强的再生功能，这
可能与新疆独特的气候、地域特点有关联性。已有文献报道
鹿茸(角)具有防治骨质疏松的生物活性［2］。但新疆马鹿角
促进成骨细胞增殖、分化的药效学研究未见报道。本课题组
选用的新疆马鹿角经酸化工艺提取制成浸膏，并冷冻干燥成
粉末，主要含有鹿角多肽等更有利于人体吸收的成分。前期
研究发现新疆马鹿角提取物有阻止 OPG基因敲除小鼠的骨
841
2012 年 1 月
第 34 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2012
Vol． 34 No． 1