全 文 ：HPLC法测定华山前胡中升麻素苷
及 5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量
李永亮1 ,刘　燕2 ,张朋斌1(1.渭南市药品检验所 , 陕西
渭南 714000;2.榆林市药品检验所 , 陕西 榆林 719000)
摘要:目的　建立华山前胡中升麻素苷及 5-O-甲基维斯阿米
醇苷的含量测定方法。方法　采用高效液相色谱法 , 以 Eor-
bax SB-C18(250 mm×4.6 mm , 5 μm)为色谱柱;流动相为甲
醇-水(40∶60);检测波长 254 nm;柱温 35 ℃。结果　升麻素
苷进样量在 0.063 2 ～ 0.632 0 μg范围内 , 质量浓度与峰面积
线性关系良好(r =0.999 8);5-O-甲基维斯阿米醇苷进样量
在 0.0605 ～ 0.6050 μg 范围内 , 质量浓度与峰面积线性关系
良好(r =0.999 3)。结论　方法重现性好 , 结果准确 ,可用于
华山前胡的质量控制。
关键词:华山前胡;升麻素苷;5-O-甲基维斯阿米醇苷;高效液
相色谱法
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:A　　　
文章编号:1004-2407(2008)06-0361-02
伞形科植物华山前胡(peucedanum ledebourie-
lloides K.T .Fu)的根在陕西作为防风的习惯用药由
来已久[ 1] 。由于其使用历史长 、范围广 ,药材产量大 ,
并经常销往外省区 ,有必要对其内在质量控制进行研
究 ,为确保临床用药安全有效以及进一步制定地区中
药材质量标准提供科学依据。华山前胡中含有升麻素
苷及 5-O-甲基维斯阿米醇苷 ,为其主要化学成分[ 2] 。
笔者采用高效液相色谱法对陕防风中所含的升麻素苷
和5-O-甲基维斯阿米醇苷进行了定量测定 ,方法简便
快速 ,重现性好 ,可以用于华山前胡的质量控制。
1　仪器与试药
1.1　仪器　Agi lent 1100 系列高效液相色谱仪(美
国安杰伦科技有限公司),紫外检测器。
1.2　试药　升麻素苷及 5-O-甲基维斯阿米醇苷对
照品购自中国药品生物制品检定所;华山前胡药材由
陕西华阴新胜福中药饮片厂提供 ,经渭南市药品检验
所侯喜祥主任中药师鉴定为伞形科植物华山前胡
Peucedenum ledebouriel loides K.T .Fu的根。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:Angilent Eorbax SB-C18
(250 mm ×4.6 mm , 5 μm);流动相:甲醇-水(40∶
60);流速:1.0 mL·min-1 ;检测波长:254 nm;柱温:
35 ℃;进样量:3 μL。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取升麻素苷对照品
及 5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品适量 ,分别加甲醇
制成每 1 mL 含 60 μg 的溶液 。
2.3　供试品溶液的制备　取华山前胡药材细粉约 0.25
g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇 10 mL ,称
定质量;水浴回流 2 h ,放冷;再称定质量 ,用甲醇补足减
失的质量 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液作为供试品溶液。
2.4　线性关系考察　吸取升麻素苷对照品溶液(63.2
mg ·L-1)1 ,2 ,3 ,6 ,8和10μL ,依次注入高效液相色谱
仪 ,按上述色谱条件测定峰面积 ,以升麻素苷进样量
(μg)为横坐标(X),升麻素苷峰面积积分值为纵坐标
(Y),绘制标准曲线 ,得回归方程为:Y =1.263 6×106 X
-14.022 2×104 , r =0.999 8。结果表明升麻素苷在
0.063 2 ～ 0.632 0 μg 范围内呈线性关系。
吸取 5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品溶液(60.5
mg ·L-1)1 ,2 ,3 ,6 ,8和 10 μL ,依次注入高效液相色
谱仪 ,同前法操作绘制标准曲线 ,回归方程为:Y =
2.034 3 ×106 X -1.773 1 ×104 , r =0.999 3。结果
表明 5-O-甲基维斯阿米醇苷在 0.060 5 ～ 0.605 0 μg
范围内呈线性关系。
2.5　精密度试验　吸取对照品溶液 3 μL ,注入高效
液相色谱仪 ,按上述色谱条件试验 ,重复测定 6次 ,升
麻素苷峰面积积分值的 RSD 为 0.87%;5-O-甲基维
斯阿米醇苷峰面积积分值的 RSD为 0.95%。
2.6　稳定性试验　取华山前胡供试品溶液在 0 , 2 ,
4 ,6 ,8和 10 h 分别进样 3 μL ,结果 6 次进样升麻素
苷峰面积积分平均值为 231 865.7 , RSD为 0.94%;
5-O-甲基维斯阿米醇苷面积积分平均值为 369 232.1 ,
RSD为 0.97%。表明在 10 h内供试品溶液较稳定。
2.7　重复性试验　精密称取同一供试品细粉 5份 ,平
行制成供试品溶液 ,分别按供试品测定法测定 ,测得升
麻素苷平均含量为 0.206%,RSD为 1.23%(n =5);5-
O-甲基维斯阿米醇苷平均含量为 0.134%, RSD 为
1.31%(n =5)。
2.8　加样回收率试验　精密称取已知含量的供试品细
粉 0.25 g ,分别精密加入升麻素苷对照品溶液(0.242 0
mg ·L-1)和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品溶液(0.166 2
mg·L-1)各 2 mL ,蒸干甲醇 ,按供试品测定法操作 ,测
得升麻素苷的平均回收率为 99.16%, RSD为 1.32%;
5-O-甲基维斯阿米醇苷平均回收率为97.90%, RSD为
1.58%,结果见表 1和表 2。
表 1　升麻素苷回收率试验结果(n=6)
称样量/g 含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/ % 平均回收率/ % RSD/ %
0.253 8 0.522 8 0.484 0 1.007 6 100.17
0.252 3 0.519 7 0.484 0 1.001 9 99.63
0.254 1 0.523 4 0.484 0 0.997 8 98.02 99.16 1.32
0.253 1 0.521 4 0.484 0 1.010 5 101.05
0.252 8 0.520 8 0.484 0 0.994 9 97.95
0.254 0 0.523 2 0.484 0 0.998 2 98.14
2.9　样品测定　照 2.3项下方法制备供试品溶液 ,按
上述色谱条件测定 ,以外标法计算样品中升麻素苷 、5-
O-甲基维斯阿米醇苷的含量 ,共测定3批样品 ,结果升
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麻素苷 3次平均含量(%)分别为 0.20 ,0.24和 0.21 ,
RSD分别为 1.05%,1.31%和 0.99%;5-O-甲基维斯阿
米醇苷 3次平均含量分别为 0.13%,0.16%和 0.17%,
RSD分别为1.12%,1.24%和1.01%。
表 2　5-O-甲基维斯阿米醇苷回收率试验结果(n=6)
称样量/g 含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/% 平均回收率/ % RSD/ %
0.253 8 0.340 1 0.332 4 0.664 9 97.71
0.252 3 0.338 1 0.332 4 0.663 1 97.77
0.254 1 0.340 5 0.332 4 0.667 3 98.32 97.90 1.58
0.253 1 0.339 2 0.332 4 0.664 0 97.71
0.252 8 0.338 8 0.332 4 0.667 9 99.01
0.254 0 0.340 4 0.332 4 0.662 5 96.90
3　讨论
3.1　流动相的选择　分别采用甲醇-水(35∶65)、甲醇-
水(40∶60)、甲醇-水(45∶55)。其中甲醇-水(35∶65)为
流动相时 ,5-O-甲基维斯阿米醇苷色谱峰保留时间过长 ,
而甲醇-水(45∶55)时 ,升麻素苷色谱峰与相邻峰分离不
好。使用甲醇-水(40∶60)为流动相 ,对照品对应的色谱
峰与其它色谱峰分离较好且保留时间适中 ,见图 1。
图 1　HPLC图
A-5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品;B-升麻素苷对照品;
C-华山前胡供试品;1-5-O-甲基维斯阿米醇苷;2-升麻素苷
3.2　含量限度　经各项实验考察 ,结果表明本方法
具有重现性好 、精密度高的特点 ,可以作为华山前胡
药材的质量控制方法 。参照《中国药典》2005年版一
部防风含量测定项下规定[ 3] ,根据对样品的含量测定
结果 ,建议对华山前胡含量限度作如下规定:本品按
干燥品计算 ,含升麻素苷(C22H 27O 11)和 5-O-甲基维
斯阿米醇苷(C22H 28O 10)的总量不得少于 0.30%。
参考文献:
[ 1] 　李永亮 ,侯喜祥 ,侯晓军.渭南地区习用药材防风的调查
[ J] .西北药学杂志 , 2004 , 19(2):65.
[ 2] 　肖培根.新编中药志[ M] .第一卷.北京:化学工业出版
社 , 2002:468.
[ 3] 　中国药典 2005年版[ S] .一部.2005:102.
(收稿日期:2008-05-22)
叶酸铁质复方软胶囊中叶酸的含量
测定
杨仲儒1 ,孟方兵1 , 2 ,朱妙飞1(1.杭州海王生物工程有限
公司研发部 , 浙江 杭州 311101;2.东方药林药业有限公司 ,
广东 广州 510515)
摘要:目的　建立叶酸铁质复方软胶囊中叶酸的检测方法。
方法　去除样品的植物油后 ,用稀盐酸溶解 , 高效液相色谱法
测定。色谱柱为 C18分析柱;流动相为 5 mmol· L -1磷酸二氢
钾溶液(用稀磷酸溶液调节 pH 为 3.0)-乙腈(87∶13),检测波
长 260 nm。结果　叶酸在0.062～ 0.619 g· L-1质量浓度范围
内线性关系良好 , r =0.999 5 ,平均回收率为 100.7%, RSD为
1.2%(n =9)。结论　方法操作简便 , 结果准确 ,可用于叶酸
铁质复方软胶囊中叶酸的检测。
关键词:叶酸铁质复方软胶囊;叶酸;含量测定
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:A　　　
文章编号:1004-2407(2008)06-0362-03
叶酸铁质复方软胶囊为含叶酸和乳酸亚铁的复
方制剂 。叶酸为维生素 B 族生长因子 ,在体内参与
氨基酸与核酸的合成 ,并与维生素 B12共同促进红细
胞的生长和成长 。铁为血红蛋白及肌红蛋白的主要
组成成分 ,主要用于缺铁性贫血及预防新生儿畸形 。
叶酸单方制剂中叶酸的测定方法在中国药典 、美国药
典及英国药典中均有收载 ,但未收载叶酸和铁的复合
制剂中叶酸的测定方法。由于在碱性及弱酸性条件
下 ,铁会干扰叶酸的检测 ,因此药典收载的色谱条件不
适用于叶酸和铁的复合制剂[ 1] 。笔者采用乙醚萃取去
除软胶囊中的基质 ,用稀盐酸配制样品以排除铁对叶
酸测定时的干扰[ 2] 。方法简便 、快捷 ,灵敏度高 ,重复
性好 ,能满足叶酸铁质复方软胶囊中叶酸的含量测定。
1　仪器与试药
1.1 　仪器 　Agilent 1100 型液相色谱仪(包括
G1314A 可变波长检测器 , G1310A 单元泵 , LC 系统
化学工作站);Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱;涡旋
混合机;BS224 S 电子分析天平;水浴锅 。
1.2　试药　叶酸铁质复方软胶囊(自制);叶酸对照
品(中国药品生物制品检定所 ,批号 100074-200411 ,
纯度 90.6%);乙腈为色谱纯 ,其余为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 　色谱柱:Agi lent Eclipse XDB-C18
(150 mm×4.6 mm ,5 μm);流动相:5 mmo l·L-1磷
酸二氢钾溶液(用稀磷酸溶液调节 pH 为 3.0)-乙腈
(87∶13);检测波长:260 nm 。
2.2　对照品溶液的制备 　精密称量叶酸对照品约
10 mg ,置 50 mL 量瓶中 ,加稀盐酸适量 ,置温水中加
热溶解 ,冷却后加稀盐酸至刻度 ,摇匀 ,即得。
362 西北药学杂志　2008 年 12 月　第 23 卷　第 6 期