全 文 ：2009年 7月 第 33卷第 4期
白颖苔草［Carex rigescens（Franch.）V.Krecz］，莎
草科、苔草属。《中华本草》记载其味甘、苦、涩，性平，
能清热利尿通淋，主治乳糜尿［1］。倪培忠等［2］报道其根
茎入药，采集时间为冬季或初春。本研究小组已经报
道了其全草提取物对呼吸道合胞病毒、流感病毒甲型
的活性抑制作用以及抗疱疹科病毒的活性 ［3］。本文采
用单纯疱疹病毒 - 1（HSV-1）-HEK293体外感染模型对
采集于不同季节及不同部位的白颖苔草进行了抗病
毒活性追踪，以对其最佳入药时间、部位和抗病毒活
性作出评价。
1 材料与仪器
1.1 药品 2008 年 3，5，6，7，11 月份采集的白颖苔
草，由山东中医药大学周凤琴教授鉴定，储存于 - 20℃
备用；阳性对照药更昔洛韦，50 mg瓶装，国药准字
H10980189，湖北科益药业有限公司产品，生产日期：
2008- 07- 06。
1.2 细胞株与病毒株 HEK293 细胞购自美国 Clon-
tech 公司；单纯疱疹病毒 - 1（herpes simplex virus- 1，
HSV-1）引自中国 CDC病毒病研究所。
1.3 主要试剂 MEM培养基为 GIBCO公司产品；新
生牛血清为济南劲牛生物材料有限公司产品；细胞维
持液为含有 2％新生牛血清的 MEM；细胞培养液为含
有 10％新生牛血清的MEM；其他化学试剂均为分析纯。
1.4 仪器 R5003KE2旋转蒸发仪（上海申生科技有
限公司）；CKX-31倒置显微镜（Olympus公司）；隔水式
二氧化碳培养箱（美国 Forma 公司）；BHL-1300IIA生
物安全柜（上海康为公司）；MK3酶标仪（Labsystems公
司）；Labofuge 400 低温高速离心机（德国 Heraeus 公
司）。- 20℃冰箱（中国美菱集团产品），- 80℃冰柜（美
国 Forma公司产品）。
2 方法
2.1 白颖苔草样品处理 将 3月份采集的白颖苔草
鲜品地上部分和地下部分各 10 g分别捣碎、挤压获取
榨汁，将榨汁 20 000 r/min离心 15 min，得相当于鲜品
5 g/ml的新鲜榨汁。0.2μm孔径滤膜过滤除菌获滤液
［收稿日期］ 2009- 02- 21
［基金项目］ 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金课题（编号：
02BS085）；山东中医药大学大学生研究训练计划（SRT）基金资助项目
（编号：2008- 029）
［作者简介］ 高川（1987-），男，山东济南人,主要从事抗病毒药物
的研究。
［通讯作者］ 容蓉，女，副教授，主要从事中药及复方活性成分与
质量控制研究。Tel:0531- 89628593；E-mail:r.rong@sdutcm.edu.cn
·中药研究·
白颖苔草抗病毒药用价值的初步研究
高 川 1，容 蓉 2，孟 红 3，张治强 1，郭培俊 1
（1. 山东中医药大学药学院 2006 年级本科生，山东 济南 250355； 2. 山东中医药大学药学院，山东 济南 250355；
3. 山东省医学科学院基础医学研究所微生物学研究室，山东 济南 250062）
［摘要］ 目的：探讨不同部位（地上和地下）、不同采集时间的白颖苔草抗病毒活性。方法：制备白颖苔草 3月份地
上和地下部分鲜草榨汁和干药材丙酮提取物以及 3，5，6，7，11月份全草干药材的丙酮提取物，采用 HSV-1-HEK293
细胞感染模型检测抗病毒活性。结果：3月份白颖苔草地上鲜药材榨汁治疗指数（TI）为 427.56，干药材提取物为 48.50；
地下部分鲜药材榨汁为 537.45，提取物为 76.11；3，5，6，7，11月份干全草提取物 TI分别为 79.34、89.26、58.08、32.67
和 64.89。结论：白颖苔草地上、地下部分以及 3～11月采集的药材均有抗病毒活性。
［关键词］ 白颖苔草；抗病毒活性；入药部位；采集时间
［中图分类号］ R285.5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1007-659X（2009）04-0343-02
Investigation of the antiviral activity and medicinal value of Carex rigescens GAO Chuan1，RONG Rong2，
MENG Hong3，ZHANG Zhi-qiang1，GUO Pei- jun1（1.Junior of Chinese Materia Medica Faculty，Shandong University of
Traditional Chinese Medicine，Jinan 250355，China；2.Chinese Materia Medica Faculty，Shandong University of Tradi-
tional Chinese Medicine，Jinan 250355，China；3.Institute of Basic Medicine，Shandong Academy of Medical Science，
Jinan 250062，China）
［Abstract］ Objective: To investigate the antiviral effect of different parts of Carex rigescens obtained in different
months. Methods: The antiviral effect of the fresh juice of the above- ground and under- ground parts of the herbs
obtained in March，the acetone extract of the above-ground and under-ground parts of the dry herbs obtained in
March，the acetone extract of the dry herbs obtained in March，May，June，July and November are explored in the
model of HSV-1-HEK293. Results:The therapeutic indexes of the fresh juice of the above-ground and under-ground
part of the Carex rigescens obtained in March are 427.56 and 537.45；the therapeutic indexes of the acetone extract
of the above-ground and under-ground parts of the dry Carex rigescens obtained in April are 48.50 and 76.11；the
acetone extract of the dry Carex rigescens obtained in March，May，June，July and November are 79.34，89.26，58.08，
32.67 and 64.89 respectively. Conclusion:Both of the above-ground part and the under- ground part of the Carex
rigescens obtained from March to November have the antiviral effect.
［Key words］Carex rigescens；antiviral effect；medicinal part；time for herb gathering
第 33 卷 第 4 期 山东中医药大学学报 Vol．33，No．4
2009 年 7 月 JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY OF TCM Jul.2009
343
2009年 7月 山东中医药大学学报 第 33卷第 4期
表 2 不同月份白颖苔草抗病毒效果的比较
采集月份 N5（3月） N6（5月） N7（6月） N8（7月） N9（11月）
TC50（ρ/mg·ml-1） 2-3.91（1.33） 2-3.95（1.29） 2-3.76（1.48） 2-3.67（1.57） 2-3.52（1.74）
EC50（ρ/μg·ml-1） 2-10.22（16.77） 2-10.43（14.50） 2-9.62（25.42） 2-8.70（48.09） 2-9.54（26.87）
TI 79.34 89.26 58.08 32.67 64.89
表 1 白颖苔草地上、地下部分抑毒活性比较
样品序号
鲜草榨汁 提取物
更昔洛韦
地上部分（N1） 地下部分（N2） 地上部分（N3） 地下部分（N4）
TC50（稀释度） 2-1.52 2-1.75 2-3.84 2-3.65 10-2.27
TC50（ρ/mg·ml-1） - - 1.40 1.59 1.34
EC50（稀释度） 2-10.26 2-10.82 2-9.44 2-9.85 10-5.13
EC50（ρ/μg·ml-1） - - 28.79 21.67 0.19
TI 427.56 537.45 48.50 73.51 724.43
（N1、N2），然后分别用细胞维持液做 2倍比系列稀释
备用；将同时间采集的白颖苔草干品地上部分和地下
部分各称取 500 g，粉碎后用 2 倍量 50%丙酮室温浸
泡过夜，减压蒸馏得地上（N3）、地下（N4）棕色膏状提
取物。N3和 N4分别用细胞维持液配置成 10 mg/ml的
溶液后做 2倍比连续稀释备用。
将 3、5、6、7、11月份采集、- 20℃存放的干药材同
法制备，获得丙酮提取物 N5、N6、N7、N8、N9，分别用
细胞维持液配置成 10 mg/ml的溶液后做 2倍比连续
稀释备用；阳性对照药物为更昔洛韦，自 25 mg/ml始
做 10倍比连续稀释备用。
2.2 细胞毒性测定 参照文献方法［3］。将更昔洛韦、上
述样品 N1～N9按稀释顺序横向接种于 96板孔中的
单层细胞上，每孔 100μl，每稀释度纵向重复 3孔，同
时设有细胞对照和空白对照，37 ℃、5% CO2培养，每
日于显微镜下观察细胞生长情况和形态学变化，连续
观察 7 d，中性红染色，用酶标仪测定 A540值（空白孔
调零），将实验组与细胞对照组 A540均值相比计算细
胞存活率，用 Reed-Muench方法计算药物半数细胞中
毒浓度（median toxic concentration，TC50）。
2.3 抑毒试验 参照文献方法［3］。将上述样品 N1～
N9分别按稀释顺序横向接种于 96 板孔中的单层细
胞上，每孔 100 μl，每稀释度纵向（A、B、C、D）重复 4
孔，A、B、C行加含有 100 个 TCID50的 HSV-1 100 μl
作为实验组，D行补充等容量细胞维持液为不同浓度
的药物对照，平行设 E1～E6 孔作为病毒对照，E7～
E9孔作为细胞对照，E10～12孔作为空白对照（未接
种细胞，只接种细胞维持液）。同时设有阳性药物更昔
洛韦对照组。37 ℃、5% CO2培养，每日观察细胞病变
效应（cytopathogenic effect，CPE）。病毒对照出现 CPE
90%以上、细胞对照形态良好条件下，加 1％中性红平
衡盐水溶液染色 2 h，用磷酸盐平衡盐水洗至空白对
照无色（裸眼观察），加脱色液 100 μl，用酶标仪测
定 A540值（用空白对照孔调零），实验组 A540均值减
去病毒对照组 A540均值比细胞对照组 A540均值获
得细胞存活率，用 Reed-Muench方法计算半数抑毒浓
度（median efficacious concentration，EC50），最终将 TC50
和 EC50相比获得治疗指数（therapeutic index，TI）。
3 结果
3.1 样品 TC50测定 显微镜下观察对照组细胞贴壁
生长致密、形态良好。
更昔洛韦组第 1稀释度（25 mg/ml）细胞破碎、脱
落，第 2 稀释度（2.5 mg/ml）细胞内遮光性颗粒多，
细胞稀疏。根据 A540 值计算更昔洛韦 TC50为 10-2.27
（1.34 mg/ml）。
N1、N2组第 1稀释度均出现完全细胞脱落，呈碎
片状坏死，第 2稀释度细胞贴壁生长，细胞肿胀、遮光
性颗粒增多。根据 A540值计算 TC50分别 2- 1.52、2- 1.75。
N3～N9组细胞均在第 1、2稀释度出现完全细胞
脱落坏死，第 3孔均出现部分细胞脱落坏死，疏密不
一的贴壁细胞均有肿胀、遮光性颗粒增多，第 4孔细
胞肿胀、颗粒增多，尚呈单层生长。根据 A540值计算
TC50 分别为 2- 3.84（1.40 mg/ml）、2- 3.65（1.59 mg/ml）、2- 3.91
（1.33 mg/ml）、2- 3.95（1.29 mg/ml）、2- 3.76（1.48 mg/ml）、2- 3.67
（1.57 mg/ml）和 2- 3.52（1.74 mg/ml）。
3.2 抑毒试验
3.2.1 病毒对照 病毒对照组均在实验第 2 天，CPE
超过 90％，CPE以多细胞融合为特征，并有大量细胞
出现变圆、脱落。
3.2.2 更昔洛韦对照组 更昔洛韦对照组细胞于第 5
稀释度之前细胞贴壁生长，第 6孔细胞出现 HSV-1 CPE
特征表现为融合形成多核细胞，细胞肿胀、变圆、脱落。
取 A540均值计算更昔洛韦 EC50为 10- 5.13（0.19μg/ml），
TI为 724.43。
3.2.3 N1、N2 实验组 细胞均于第 10 稀释度出现
HSV-1 CPE，根据 A540 值计算 N1、N2 TC50 分别为
2- 10.26、2- 10.82，TI为 427.56和 537.45。见表 1。
3.2.4 白颖苔草提取物 N3、N4组 细胞均在第 9稀
释度出现病毒病变特征，根据 A540 值计算 N3、N4
EC50分别为 2- 9.44（28.79μg/ml）、2- 9.85（21.67μg/ml），TI
为 48.50和 76.11。见表 1。
从上表可以看出，白颖苔草地上部分和地下部分无
论榨汁还是提取物，对 HSV-1均有显著的抑制作用，地
上部分鲜药材榨汁 TI是其干药材提取物的 8.82倍，
地下部分鲜药材榨汁 TI是其干药材提取物的 7.31倍。
3.2.5 不同月份干药材提取物 N5～N9 组细胞分别
在第 9，10，9，8，9 稀释度出现病毒病变特征，根据
A540值计算 N5～N9 EC50分别为 2- 10.22（16.77μg/ml）、
2- 10.43（14.50μg/ml）、2- 9.62（25.42μg/ml）、2- 8.70（48.09μg/ml）
和 2- 9.54（26.87 μg/ml），TI 分别为 79.34、89.26、58.08、
32.67和 64.89。见表 2。
344
2009年 7月 第 33卷第 4期
柴胡是伞形科多年生草本植物，以干燥根供药用。
柴胡效用主要为解肌退热、和解少阳、疏肝解郁、升阳
举陷等，柴胡在临床上用于治疗发热非常多见。本文
对柴胡解热的物质基础、机制及影响因素等进行探讨。
1 物质基础
柴胡主要含柴胡皂苷（saikosaponins，可分为 a、
b1～b4、e、f、h等种）、甾醇（主要为 a- 菠菜甾醇 a- spinas-
terol，尚有豆甾醇 stigmasterol）、挥发油（柴胡醇 bupleur-
mol、丁香酚、己酸、γ- 十一酸内酯、对 - 甲氧基苯二酮
等）、脂肪油（油酸、亚麻油酸、棕榈酸、硬脂酸等的甘
油酯）和多糖等。此外尚含有生物碱、黄酮类、山柰苷、
葡萄糖、氨基酸等。目前的研究结果一般认为，柴胡解
热的主要成分为柴胡皂苷、皂苷元 A和挥发油。其中
柴胡挥发油的解热作用比较强，用量少。柴胡总挥发
油中的丁香酚、己酸、γ- 十一酸内酯、对 - 甲氧基苯
二酮是其解热的主要成分。柴胡注射剂的成分即为挥
发油。然而，亦有不同看法者。薛燕［1］认为挥发油可能
不是柴胡解热的主要有效成分，疑问有二：一是挥发
油在柴胡中含量极少，大约 0.15％，而且挥发油的解
热活性不高，如果挥发油是解热成分，其活性一定很
强，但事实并不是这样，药理作用表明，300 mg/kg给
大鼠腹腔注射，才有解热活性，这种在 1/4LD50剂量表
现出来的解热作用，按北柴胡挥发油含量 0.15％换算
成人的服用量，一个 50 kg的成年人一次要服用柴胡
4 kg，才能表现出柴胡挥发油的解热作用，这显然是不
合理的。其二，临床上疗效好的北柴胡其挥发油的含
量明显低于南柴胡。并且认为皂苷也不是柴胡解热的
主要成分，一是皂苷消化道吸收差，二是发挥解热作
用同样需要超大剂量的柴胡。薛燕等［2］又通过水解反
应把柴胡皂苷转化成皂苷元，发现皂苷和皂苷元的解
柴胡解热的物质基础、机制及影响因素探讨
孙秀萍 1，张 宁 2
（1. 山东中医药大学基础医学院药理教研室，山东 济南 250355； 2. 山东中医药大学附属医院生殖中心，山东 济南 250011）
［摘要］ 对柴胡解热的物质基础、机制及影响因素进行了探讨。认为只有对柴胡复杂的化学成分进行配伍、比较
研究，才能揭示其解热的物质基础。同时指出柴胡解热的机制可能是多途径共同作用的结果，柴胡的配伍、剂量、剂型
及给药途径都是影响柴胡解热效应的重要因素。
［关键词］ 柴胡；解热；有效成分；机制；影响因素
［中图分类号］ R282.710.5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1007-659X（2009）04-0345-02
［收稿日期］ 2009- 01- 06
［作者简介］ 孙秀萍（1974-），女，山东陵县人，医学硕士，讲师，
主要从事中医药对心脑血管疾病保护作用的研究。
山东中医药大学学报
从表 2可以看出，3～11月份采集的白颖苔草药
材均有显著的抗病毒作用。
4 讨论
本研究将白颖苔草地上部分和地下部分用
HSV-1体外感染模型作了抗病毒活性研究，其中地上
部分鲜药材榨汁 TI 为 427.56，干药材丙酮提取物为
48.50；地下部分鲜药材榨汁为 537.45，干药材提取物
为 73.51。表明地上部分和地下部分均有较强的抗病
毒作用，新鲜榨汁的抗病毒活性远高于干药材的丙酮
提取物。
本研究还将不同采集时间的白颖苔草药材作了
比较研究，发现 3～11月采集的药材均有抗病毒活性，
5月份药材抗病毒活性（TI为 89.26）高于其他月份，7
月份相对活性低（TI为 32.67），除了因实验步骤繁多
造成可能的误差之外，应与其生长周期有关。
目前，临床抗病毒治疗常用的大青叶、鱼腥草、金
银花、败酱草、连翘、青蒿等，其抗病毒活性和抗病毒
谱已经基本明确，化学成分分离及抗病毒机制研究也
已日渐深入，多种制剂形式相继应用于临床［4-5］。同时，
从植物中分离抗病毒药物单体也取得一些成就，例
如 Duan等 ［6］获得的雷公藤单体（triptonine B）抑制人
类免疫缺陷病毒的指数超过 1000；Lin 等 ［7］分离的野
漆树双黄酮，对流感病毒的抑毒指数达到 450。
本论文首次报道了针对白颖苔草不同采集时间
和入药部位的研究资料，认为白颖苔草地上、地下部
分均可入药，且 3，5，6，11月份采集的全草均有显著
的抗病毒效果。
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