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红白忍冬不同花期花蕾千蕾质量及指标成分含量比较



全 文 :第 47 卷 第 5 期 河 南 农 业 大 学 学 报 Vol. 47 No. 5
2013 年 10 月 Journal of Henan Agricultural University Oct. 2013
收稿日期:2013 - 03 - 25
基金项目:中医药行业科研专项(201207002 ) ;河南省重点科技攻关项目(112102310019) ;新乡市重点科技攻关计划项目(ZG12009)
作者简介:李建军,1964 生,男,河南延津人,副教授,硕士,主要从事药用植物资源评价及育种方面的研究.
文章编号:1000 - 2340(2013)05 - 0534 - 04
红白忍冬不同花期花蕾千蕾质量及
指标成分含量比较
李建军1,贾国伦1,王 君1,李静云1,杨 丽2
(1.河南师范大学生命科学学院,河南省高校道地中药材保育及利用工程技术研究中心,
河南 新乡 453007;2.封丘县农村科技研究开发推广中心,河南 封丘 453341)
摘要:为了确定红白忍冬的最佳采收期,利用天平测量了红白忍冬 7 个不同花期鲜花蕾和干花蕾的千蕾质量,采
用 HPLC和 SPSS差异分析法,比较了 7 个不同花期花蕾的千蕾质量及指标成分的含量变化.结果表明,红白忍
冬 7 个不同花期的千蕾质量差异极显著,不同花期指标成分的含量差异显著,最佳采收期为大白期和银花期.
关键词:红白忍冬;花期;千蕾质量;绿原酸;木犀草苷
中图分类号:R931. 5 文献标志码:A
Weight and index ingredients components content comparison
of different flowering phase in Lonicera japonica. var.
chinensis(Wats.)Bak
LI Jian-jun1,JIA Guo-lun1,WANG Jun1,LI Jing-yun1,YANG Li2
(1. College of Life Sciences,Engineering Technology Research Center of Nursing and Utilization of Genuine
Chinese Crude Drugs,Higher institutions of Henan Province,Henan Normal University,Xinxiang 453007,China;
2. The rural science and technology research and development promotion center of Fengqiu
Fengqiu 453341,China)
Abstract:To study the best harvest time,using scale and vernier caliper to measure the fresh flowers
and dried flowers’thousand bud weight of different flowering phase,using HPLC and SPSS analysis
methods to compare and analyze the thousand-bud weight and index ingredients contents changes of
seven different flowering phase. Results show that the thousand-bud weight of different flowering phase
had significant differences. The content of index ingredients also had significant differences. The best
harvest time is the great white period and the silvery flower period.
Key words:Lonicera japonica var. chinensis(Wats.)Bak.;flowering phase;thousand buds weight;
chlorogenic acid;luteolin
红白忍冬[Lonicera japonica. var. chinensis
(Wats.)Bak.]为忍冬科植物忍冬的变种,山东平
邑县将其花蕾称为红银花或小红花[1]。主要分布
于安徽(岳西) ,现湖南、江苏、浙江、江西、云南、山
东、河南等地有栽培. 其幼枝紫黑色,幼叶带紫红
色,小苞片比萼筒狭,花冠外面紫红色,内面白色,
上唇裂片较长,裂隙深超过唇瓣的 1 /2[2],每年开
1 ~ 2茬花,产量比忍冬低.红白忍冬集药用、观赏、
绿化于一体,市场潜力大,开发前景广阔.根据忍冬
7 个花期[3,4]和测量数据,可将红白忍冬从幼蕾至
DOI:10.16445/j.cnki.1000-2340.2013.05.020
第 5 期 李建军等:红白忍冬不同花期花蕾千蕾质量及指标成分含量比较 535
开放凋落分为幼蕾(紫红色小花蕾,长约 1 cm )、
三青(紫红色花蕾,长约 2. 0 ~ 3. 0 cm )、二白(紫
红色花蕾,长 2. 8 ~ 3. 5 cm )、大白(红色花蕾长
3. 5 ~ 4. 1 cm )、银花(刚开放的内白外红色花蕾,
长 4. 0 ~ 4. 5 cm )、金花(花变黄色,长 3. 7 ~ 4. 2
cm)和凋花(棕黄色)7 个阶段,其中幼蕾期花蕾太
小、产量低,凋花期质量较轻、色泽很差,因此商
品金银花包括其余 5 个阶段的花.
2010 年中国药典[5]规定,绿原酸和木犀草苷
为金银花检测的指标成分.目前对红白忍冬 7 个花
期的千蕾质量并结合绿原酸和木犀草苷含量综合
分析的研究鲜有报道[6],红白忍冬最佳采收期也
未见报道.本研究对红白忍冬的 7 个花期花蕾千蕾
质量及绿原酸和木犀草苷含量进行了比较分析,为
制定金银花采收标准化操作规程和资源合理开发
利用提供理论支撑.
1 材料与方法
1. 1 仪器
天平;安捷伦 1200 高效液相色谱仪(安捷伦科
技有限公司).
1. 2 材料
红白忍冬鲜花蕾材料采自河南师范大学生命
科学学院资源圃,树龄 5 年,常规管理,生长健壮,
从出现幼蕾开始至花开放变为黄棕色凋落的 7 个
时期,于早晨 6 点至 8 点采集样品,7 个时期编号
分别为 1,2,3,…,7,每隔 2 d 重复采 1 次,及时烘
干.采集时间为 2012 - 05 - 01—2012 - 05 - 20,最
后把相同编号的样品均匀混在一起,样品由河南师
范大学植物学李发启副教授鉴定为红白忍冬(L.
japonica)的花蕾. 按照表 1 的条件分阶段烘干,粉
碎,过 4 号筛[孔径(250 ± 9)μm].
表 1 金银花花蕾烘干条件
Table 1 Bud drying conditions of Honeysuckle
温度 /℃
Temperature
时间 /min
Time
38 ~ 40 10
40 120
40 ~ 45 10
45 120
45 ~ 50 10
50 720
1. 3 试剂
甲醇、乙醇、乙腈均为色谱纯,磷酸为分析纯,
水为超纯水.绿原酸对照品和木犀草苷对照品为色
谱纯,购于中国药品生物制品检定所.
1. 4 花蕾的鲜重、干重和折干率等的测量
用天平分别称量不同花期的鲜花蕾和干花蕾
的千蕾质量,并计算出折干率(折干率 =干花蕾千
蕾质量 /鲜花蕾千蕾质量 × 100%).
1. 5 绿原酸含量测定
1. 5. 1 色谱条件 色谱柱填充剂:十八烷基硅烷
键合硅胶;检测波长 327 nm;进样量 10 μL;流动
相:乙腈一 0. 4% 磷酸溶液(13 ∶ 87) ,流速 1. 0
mL·min -1 .
1. 5. 2 对照品溶液制备 精密称取绿原酸对照品
适量,置棕色量瓶中,加体积分数 50%甲醇制成每
1 mL含 40 mg的溶液,即得.
1. 5. 3 金银花绿原酸样品溶液制备 分别精密称
定不同花期红白忍冬的粉末各 0. 500 0 g,置具塞
锥形瓶中,精密加入体积分数 50%甲醇 50 mL,称
量质量,超声处理(功率 250 W,频率 35 kHz)30
min,放冷,再称量质量,用体积分数 50%甲醇补足
减失的质量,摇匀,过滤,精密量取滤液 5 mL,置 25
mL棕色量瓶中,加体积分数 50%甲醇至刻度,摇
匀即得[7].
1. 6 木犀草苷含量测定
1. 6. 1 色谱条件 色谱柱填充剂十八烷基硅烷键
合硅胶;检测波长 350 nm;进样量 10 uL;流动相:
乙腈为流动相 A,0. 5%的冰乙酸为流动相 B,流速
1. 0 mL·min -1,按照表 2 进行梯度洗脱.
表 2 高效液相测量木犀草苷的梯度洗脱表
Table 2 HPLC gradient elution of Luteolin
glycosides logging table
时间 /min
Time
流动相 A /%
Mobile phase A
流动相 B /%
Mobile phase B
0 ~ 15 10 ~ 20 90 ~ 80
15 ~ 30 20 80
30 ~ 35 20 ~ 10 80 ~ 90
35 ~ 40 10 90
1. 6. 2 对照品溶液制备 精密称取木犀草苷对照
品适量,加 70%乙醇制成每 1 mL 含 40 mg 的溶
液,即得.
1. 6. 3 金银花木犀草苷样品制备 精密称定不同
花期红白忍冬的粉末各 2. 000 0 g,置具塞锥形瓶
中,加入体积分数 70%乙醇 50 mL,称量质量,超声
处理(功率 250 W,频率 35 kHz)1 h,放冷,再称量
质量,用体积分数 70%乙醇补足减失的质量,摇
匀,过滤,精密量取滤液 10 mL,回收溶剂至干,残
渣用体积分数 70%乙醇溶解,转移至 5 mL容量瓶
中,加体积分数 70%乙醇至刻度,摇匀即得[7].
536 河 南 农 业 大 学 学 报 第 47 卷
2 结果与分析
2. 1 不同花期花蕾千蕾质量和折干率结果分析
鲜花蕾和干花蕾的千蕾质量以及折干率结果
如表 3.由表 3 可知,不同花期鲜花蕾的千蕾质量
为 15. 65 ~ 124. 78 g,幼蕾期的千蕾质量最小为
15. 65 g,金花期的千蕾质量最大为124. 78 g,且不同
花期鲜花蕾的千蕾质量差异极显著;不同花期干花
蕾的千蕾质量为 5. 18 ~16. 38 g,幼蕾期的千蕾质量
最小为 5. 18 g,金花期的千蕾质量最大为 16. 38 g,
表 3 红白忍冬不同花期鲜花蕾和干花蕾的千蕾质量和折干率
Table 3 The fresh flowers and dried flowers’thousand-bud weight and drying
rate of Lonicera japonica var. chinensis(Wats.)Bak of different flowering phase
花期
Period
鲜花千蕾质量 / g
Fresh flower thousand-bud weight
干花千蕾质量 / g
Dried flower thousand-bud weight
折干率 /%
Drying rate
幼蕾期
Young period
15. 65 ± 0. 003 gG 5. 18 ± 0. 001 gG 33. 10
三青期
Three green period
44. 69 ± 0. 006 fF 10. 44 ± 0. 001 fF 23. 36
二白期
Two white period
64. 31 ± 0. 011 eE 12. 31 ± 0. 002 eE 19. 14
大白期
Great white period
85. 29 ± 0. 010 dD 15. 07 ± 0. 002 cC 17. 67
银花期
Silver period
102. 29 ± 0. 011 bB 16. 12 ± 0. 002 bB 15. 76
金花期
Golden period
124. 78 ± 0. 034 aA 16. 38 ± 0. 004 aA 13. 13
凋花期
Falling period
92. 29 ± 0. 018 cC 15. 05 ± 0. 003 dD 16. 31
其次为银花期和大白期,且不同花期干花蕾的千蕾
质量差异也极显著. 不同花期花蕾的折干率为
13. 13% ~ 33. 10%,金花期的折干率最低为
13. 13%,幼蕾期的折干率最高为 33. 10%,其次是
三青期的折干率为 23. 36% .单从干花蕾的千蕾质
量大小可以判定金花期、银花期和大白期采收
最佳.
2. 2 不同花期绿原酸和木犀草苷含量结果分析
取对照品溶液和金银花样品溶液进行测定,获
得绿原酸和木犀草苷对照品与样品的高效液相色
谱图,并根据高效液相色谱图峰面积值计算红白忍
冬 7 个不同花期的绿原酸、木犀草苷含量,通过
SPSS分析,结果见表 4.
由表 4 可知,不同花期绿原酸含量为 1. 025 ~
3. 910 g·kg -1,三青期最高为 3. 910 g·kg -1,其次
为幼蕾期和银花期,凋花期最低为 1. 025 g·kg -1;
木犀草苷含量为 0. 078 ~ 0. 178 g·kg -1,二白期最
高为 0. 178 g·kg -1,其次为三青期,凋花期最低为
0. 078 g·kg -1;差异性分析可知,绿原酸含量三青
期与幼蕾期和银花期差异不显著,银花期与大白和
二白期差异不显著,与金花期差异极显著,而凋花
期与其他花期差异均极显著;木犀草苷含量二白期
与其他花期差异均极显著,银花期与大白期和金花
期差异极显著,凋花期与金花期差异不显著,与其
他花期差异极显著. 按绿原酸含量高低判定采收
期:三青期、幼蕾期、银花期、大白期和金花期最佳;
按木犀草苷含量高低判定采收期:二白期、三青期、
幼蕾期和大白期最佳.
表 4 红白忍冬不同花期的绿原酸和木犀草苷含量
Table 4 Chlorogenic acid and luteoloside content of
different flowering phases
花期
Period
绿原酸含量 /(g·kg -1)
Content of chlorogenic acid
木樨草苷
含量 /(g·kg -1)
Content of iuteoloside
幼蕾期
Young period
3. 648 ± 0. 006aAB 0. 137 ± 0. 001cC
三青期
Three green period
3. 910 ± 0. 039aA 0. 167 ± 0. 008bB
二白期
Two white period
2. 945 ± 0. 067bABC 0. 178 ± 0. 000aA
大白期
Great white period
2. 880 ± 0. 006bBC 0. 135 ± 0. 001cC
银花期
Silver period
3. 495 ± 0. 069abAB 0. 099 ± 0. 000dD
金花期
Golden period
2. 164 ± 0. 039cC 0. 083 ± 0. 003eE
凋花期
Falling period
1. 025 ± 0. 024dD 0. 078 ± 0. 001eE
注:大、小写字母分别表示差异达 0. 01 和 0. 05 显著水平.
Note:The different capital and lowercase letters mean significant
difference at 0. 01 and 0. 05 level.
第 5 期 李建军等:红白忍冬不同花期花蕾千蕾质量及指标成分含量比较 537
2. 3 不同花期千蕾质量、绿原酸含量和木犀草苷
含量综合分析
以花期为横坐标,以千蕾质量、绿原酸和木犀
草苷含量为纵坐标,结果见图 1.
由图 1 可知,不同花期千蕾质量存在明显差
异,而不同花期绿原酸和木犀草苷含量差异显著.
从花蕾的千蕾质量大小分析判定:金花期、银花期
和大白期为最佳采收期,在此基础上绿原酸含量较
图 1 不同花期千蕾质量质量及指标成分含量
Fig. 1 Thousand-bud weight and indicators components content
高且银花期与大白期和金花期差异不显著,而木犀
草苷含量也较高,且金花期与银花期和大白期差异
极显著,再结合花香强弱,判定红银花大白期和银
花期采收最佳,其次为金花期. 这与目前个别的企
业规模化种植红银花并在大白期和银花期采收,生
产高档金银花茶饮是吻合的.
3 结论与讨论
许多文献表明,金银花指标成分含量差异较
大,究其原因是金银花的品种及其生长环境、栽培
措施、采收时间及烘干方法不同等综合因素造成
的.本研究采集了金银花的 1 个变种红白忍冬 7 个
不同花期的花蕾样品,并参照文献[5]方法及参考
相关文献,采用高效液相色谱法测定其成分,尽量
保证各样品的客观条件基本平行,使测定结果客
观、真实地反映不同花期之间成分含量的差异[7].
文献[5]规定绿原酸和木犀草苷为金银花检
测指标成分,并规定金银花中绿原酸含量不得少于
1. 5%,木犀草苷含量不得少于 0. 05% . 本研究结
果中 7 个花期样品绿原酸含量为 1. 025% ~
3. 910%,木犀草苷含量为 0. 078% ~ 0. 178%,红
白忍冬所有花期均高于文献[5]规定的最低含量,
李建军等[8]比较了封丘优良忍冬大毛花主栽品种
和红白忍冬红银花不同部位指标成分的含量,结果
表明红白忍冬花蕾绿原酸和木犀草苷含量均高于
封丘大毛花,说明红白忍冬红银花是一个具有开发
价值的优质品种.
本试验根据其千蕾质量、绿原酸和木犀草苷含
量综合分析,确定大白期和银花期为红白忍冬最佳
采收期,这与文献[8]描述的采收期是相符合的.
之前通过研究发现封丘大毛花的最佳采收期为二
白期和大白期,这可能是由于种质资源以及用途不
同,造成了红白忍冬的采收花期与道地产区主栽品
种封丘大毛花的差异,另外通过比较可以发现红白
忍冬各个花期绿原酸含量均比封丘大毛花高;幼蕾
期、三青期、二白期、淍花期的木犀草苷含量也比封
丘大毛花的高.这为制定红白忍冬采收标准化操作
规程和资源综合开发利用提供了理论支撑.
参考文献:
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(责任编辑:朱秀英)