全 文 ：蝴 蝶 兰 花 梗 腋 芽 的 离 体 培 养 `
王 怀 宇 陈 明 昭
(广州市园林科学研究所 )
材物名称: 蝴蝶兰 ( Pha la n o 夕5 1: h夕乙r d` )
材料类别: 花梗腋芽及花序顶端。
培养条件: 蝴蝶兰开花约一个月后 , 剪取其花
梗顶端及各个花梗腋芽 , 用漂粉精溶液分两级消毒
后 , 切成 2一3厘米长的切段 (每段带一腋芽 ) , 基部
向下插于培养基上 。
诱导花梗腋芽启动的培养基 ( A l) 】:
H y p o n e x ( 7
一
6
一
9 ) 3克 蔗塘 3 5克
胰蛋白陈 2克 琼脂 巧克
水 1 0 0 0毫升 p H = 5 . 0
芽增殖培养基 ( B ) :
M S + B A 5m g / l + N A A 5m g / l
长根培养基 : 同 ( A )培养基 。
培养温度为 2 5℃ 士 1℃ , 光强 1 5 0 0 l u x , 光 照
12 小时 /日。
生长与分化情况 : 接种后七天左右 , 腋芽膨大
并向外伸长 。 30 天后长出小叶。 5 天后约有四一五
片叶。 此时 , 花梗组织及植株基部均变黑色 , 所分
泌出的物质使培养基变成黑色 , 但培养基面上的幼
苗仍生长良好 。 将幼苗切离花 梗 , 转 M S + B A S 十
N A A S 培养基 , 约 50 天左右 , 苗基部膨大并长 出
丛生芽 , 将幼芽切离 , 或将每个幼芽切成两半 , 继
续接种于增殖培养基 , 50 天后又可长出新的丛 生
芽 。 幼苗切出后转长根培养基 , 45 天左右长出肥壮
的根 , 此时可移植到由获根 、 砖头碎块等组成的基
质上 。
新进展 : 蝴蝶兰的花梗腋芽离体培养目前国内
未见报道 。 本试验所用培养基及培养程序与国外有
所不同 。
惫义和用途 : 蝴蝶兰为一观赏价值很高的热带
兰 , 是有发展前途的花卉植物。 本试验所用材料为
国内稀有的名贵观赏品种 (白花 ) 。 如用传统的分株
繁殖 , 速度极慢。 如能通过组织或器官培养方法诱
导植株再生 , 对名贵品种的扩大繁殖有促进作用 。
此外 , 用花梗腋芽为材料不损害母株 , 甚至不影响
花的观赏 。
【习 加古舜治 ,
2 1 6一 2 2 1
〔幻 服部庆俊 ,
参 考 文 献
19 78 园芸植物 O 器官己组织 O 培养
1 9 8 1 《新花卉 》 ( 1 1 0 ) : 4 0一 42
2 0 5 5年 7月 2 2 日收到 。
骨 参加工作的还有温佑兴同志 。
风信子 、 水仙 、 唐曹蒲组织培养中胚状体的发生
李 洲
(湖北沙市中山公园 )
风 信 子 ( H y a c in t h “ 5 o r ie n t a l is ) 百 合 科 ; 水
仙 ( N a r e i : s u s t a 二 e t t a : a r · e h i n e n s i s ) 石蒜 科 ; 唐
富蒲 ( G l a d io lo s h y b r i d o s )莺尾科 ; 研究这三种球
茎类植物是否具有象有性过程产生的合子一样的全
能性 , 这种全能性并且在适宜的条件下能表现出来 ,
这对于建立无性繁殖系和形态发生的机理研究是很
有意义的 , 而且对于解决大量球茎贮藏困难更具有
特别重大经济价值 。
风信子 、 水仙 、 唐营蒲均切取全展嫩叶白色部
位 0 . 3一 O , 5 厘米 2的小块作外植体 。 用 0 . 1一 O , 2 %
H g C 12 表面消毒 15 分钟后 , 再用无菌水冲洗 数 次 。
蔗糖用量为2 % , 琼脂用量为 。 · 8 % 。 p H S . 4一 5 . 8 。
10 8 5年。月 1 6日收到
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1984. 01. 015
培养温度白天为2 5℃ , 夜晚为 16 一 18 ℃ 。 辅助光照
10 小时 , 光强度为 1 50 一 2 00 hi x 。 基本培养基是
M S 和 N 6( 培养基中用药量单位均为毫克 /升 ) 。
风信子诱导胚状体的基本培养基是 M S , 附 加
I A A 3
,
B A Z
,
C H 1 0 0
, 诱导小苗培养基是 M S , 附
加 N A A O . 2 , B A Z , C H 1 5 o , 根皮普 7 。 水仙诱导 胚
状体培养基是 N 6 , 附加 I A A 3 , B A Z , C H s o o ; 诱导
小苗培养基是 M S , 附加 N A A o . 2 , B A Z , C H z s o , 根
皮普 1 . 5 。 唐富蒲诱导胚状体及小苗培养基 N 6 , 附
加N A A I , B A O . 5 , 及 C M i o毫升。
外植体在附加喇噪乙酸、 蔡 乙酸的 M S 和 N 6
培养基上生长迅速 。 经过 3一 5周培养 , 从体细胞发
生胚状体有两个途径 : 风信子和水仙是由叶脉上直
接分化出玉白色胚状体 。 在解剖镜下可以清楚地看
到球形胚等不同发育阶段的胚状体 。当胚状体由白
色转变成绿色后可以看到明显的子叶原基 。 .这种途
径分化率高 。 另一途径如唐首蒲首先由叶片切 口处
产生愈伤组织 , 其中一部分愈伤组织再分化出胚状
体。 如果培养时间过长 , 愈伤组织不断增殖 , 分化
胚状体的能力下降。 这种途径诱导频率较低 。
这三种球茎类植物叶片离体培养再生植株形态
发生 , 是由胚状体的一端分化出具有许多根毛的胚
根 , 当胚状体转变成绿色后另一端的子叶原基长成
了叶 , 形成了完整植株 。 它们均不经过小球茎阶段 。
这种形态发生过程完全同合子胚植株形态发生过程
是一样的 。
有机天然物对于胚状体的形戍 、 生长 、 发育是
有显著作用的 。 ( 1) 水解酪蛋白 ( CH )是一种 含有
多种氨基酸的混合物 。 对于风信子 、 水仙器官培养
中外植体发生胚状体是必要 的物质 。 ( 2) 椰 子乳
( CM )对于唐营蒲外植体发生胚状体 , 在我们 试验
中是不可缺少的成份 , 甚至是水解酪蛋白所不能代
替的 。 我们曾经做过培养基中不添加椰子乳培养唐
首蒲叶片试验 , 结果诱导不出胚状体 , 连愈伤组织
都很难诱导 。 ( 3) 根皮普是一种天然的酚类化合物 ,
适当的浓度在水仙和风信子的培养中 , 对于胚状体
的生长发育和子叶原基叶绿素的形 成有 显著的 作
用 , 并且能加速再生植株的生长速度 、 缩短培养时
间。
所取外植体年龄和种类 , 是决定能否发生胚状
体的重要因素。 取用嫩叶基部 (分生区 )易诱导出胚
状体。 唐首蒲若取用花轴诱导出的是小球茎 , 而不
能直接诱导出胚状体 。
光照强度是胚状体能否发生和胚状体能否发育
成再生植株的重要因子 。 1 5 00一 20 0 lu x 光强度才
能使白色的外植体转变成绿色 , 只有在绿色叶片上
的叶脉才能发生胚性细胞团 。 而在弱光照射下的外
植体上连愈伤组织很难发生 , 胚状体就更难形成了。
在弱光下即或形成少量的胚状体 , 由于胚根在弱光
下很易分化出来 , 在弱光下较长时间培养后 , 根系
大量生长 , 遮盖了胚状体另一端的叶原基 , 而叶原
基在弱光下叶绿素不能很快形成 , 迟迟长不出叶 ,
所以很难长成完整植株 。 我们在其他的试验中 , 很
多次发现先分化根多的胚状体往往不能长出完整植
株。 因此 , 我们在试验球茎类植物时 , 在胚状体长
出根后 , 增加光照强度或光照时数 , 争取较短时间
内长出叶 , 较快地形成了完整植株 。
培养温度 、 昼夜温差是不影响胚状体形成的 。
但 25 ℃ 恒温则是胚状体形成 、 生长 、 发育的最宜温
度 , 也是胚状体长出苗的最适温度 。
外植体培养时间不宜过长 。 风信子 、 水仙叶片
培养 2一 3周内容易直接诱导出胚状体。 唐艺蒲叶片
培养 3一5周诱导胚状体频率最高 。 胚状体发生后 ,
培养时间长了 , 胚状体长出大量根之后是很难长出
叶的 , 有时还会出现畸形子叶。 如唐芭蒲的愈伤组
织经过三个月培养后 , 胚状体分化出的叶片是扭曲
的 .
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