全 文 ：中国兰花—墨兰微体快繁技术研究
钟士 传 ,王侠 礼
(山东临沂师范学院农林学院 ,临沂 276003)
　　摘　要:利用墨兰新芽进行离体培养 ,研究了添加在培养基中不同激素组成 、浓度 、培养条件等因素对原
球茎的形成 、萌芽 、生根 、移栽的影响。结果表明:适于墨兰原球茎形成的培养基为 MS+BA1.2 mg/ L+
NAA0.02 mg/ L+蔗糖 30 g/ L+琼脂 7 g/ L+活性炭 2 g/ L;适于萌芽和生根的培养基为 MS+BA1.0 mg/ L
+NAA0.5 mg/ L+蔗糖 30 g/ L+琼脂 7 g/ L+活性炭 2 g/ L 。
关键词:墨兰;微体快繁;原球茎;培养基
中图分类号:S682.31　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2004)01-0056-02
　　墨兰(Cymbidium Sinense)又名报岁兰 , 为国兰四大品系
之一。它色 、香 、姿 、韵俱佳 , 花期一般自冬季至早春 ,盛花期
为 1～ 3 个月 ,花期正值春节前后 , 故名。 墨兰利用传统的分
株繁殖方式 ,增殖系数极低 , 利用组织培养方式进行快繁可在
短时间内生产大量试管苗 ,满足市场需求。
1　材料与方法
1.1　供试材料
本试验所用材料为墨兰变种金边墨兰(Var margicdo ra-
tum hay),将 6 cm ～ 13 cm(厘米)长的新芽从茎部切离下来 ,
除去根和外包叶 2～ 3 片。洗净后切取 2 cm ～ 3 cm(厘米)长 ,
在无菌室内用 70%酒精浸 2 s～ 3 s(秒), 再用 10%次氯酸钠
溶液消毒 10 min(分钟), 然后用无菌水冲洗 3 ～ 5 次 , 切取茎
尖接于培养基上。原球茎诱导用改良 MS +NAA8 mg/ L(毫
克/升)+10%CM+活性炭 2 g/ L(克/升)+蔗糖 30 g/ L(克/
升)+琼脂 7 g/ L(克/升),培养 2 个月左右可分化出原球茎 ,
将原球茎切割后进行继代培养。
1.2　培养条件
培养温度为 23 ℃±2 ℃, 光照强度 1 000 Lx(勒克斯)左
右 ,光照时间 10 h(小时)光照/14 h(小时)黑暗。
1.3　试验设计
1.3.1　继代培养试验　以 MS 为基本培养基 , 附加蔗糖
30 g/ L(克/升), 琼脂 7 g/ L(克/升), 活性炭 0.2%, 设置 BA
0.2 mg/ L(毫克/升)、0.8 mg/ L(毫克/升)、1.4 mg/ L(毫克/
升)、2.0 mg/ L(毫克/升);NAA0.02 mg/ L(毫 克/升)、
0.1 mg/ L(毫克/升)、0.2 mg/ L(毫克/升)、0.4 mg/ L(毫克/
升),共 16 个处理 , 5 次重复 ,培养 24 d(天),调查原球茎形成
数。
1.3.2　萌芽诱导试验　用 L8(27)设计 BA , 大量元素 , NAA ,
IAA不同浓度试验 ,重复 3 次 , 培养 50 d(天), 调查萌芽率。
2　结果与分析
2.1　BA 与 NAA 不同浓度配比对墨兰原球茎形成的影响
试验采用 4×4 全组合设计 , 结果见表 1。经分析 , BA 与
NAA配合各水平间差异达到极显著水平(F0.01 =2.7 F=
16.14＊＊);二者互作效应也达到显著水平(F0.05=2.08 F=
收稿日期:2003-09-05
表 1　BA、NAA 不同浓度配比对墨兰原球茎形成的影响
NAA(mg/ L) BA(mg/ L)
0.2 0.8 1.4 2.0
0.02 3.6 6.8 5.4 5.1
0.1 4.4 4.6 4.2 2.7
0.2 4.4 4.8 4.8 2.9
0.4 3.5 4.1 3.3 3.1
2.51＊)。多重比较表明 , 以 NAA0.02 、BA0.8 时增殖倍数最
高 ,墨兰原球茎形成数量可达 6.8 个。同时还可以看出 , 当
NAA浓度为 0.02 mg/ L(毫克/升)时 , BA 浓度与墨兰原球茎
形成数量的关系可用一元二次回归方程描述(见图)。根据
BA 效应函数方程式可求出墨兰原球茎形成最多时 BA 的浓
度为 Xmax=-b/2c=1.22 mg/ L(毫克/升)。因此 , 墨兰原球
茎繁殖最适宜的培养基配方为 MS +BAl.2 mg/ L(毫克/升)
+NAA0.02 mg/ L(毫克/升)+蔗糖 30 g/ L(克/升)+琼脂
7 g/ L(克/升)+活性炭 2 g/ L(克/升)。
BA 浓度与墨兰原球茎形成的关系图
2.2　BA 、大量元素 、NAA、IAA 不同浓度配比对墨兰原球茎
萌芽率的影响
用 L8(27)正交表设计四因素正交试验 , 培养 50 d(天),
结果见表 2。结果表明 , 生长素 NAA 和细胞分裂素 BA 是影
响墨兰原球茎萌芽的重要因素。细胞分裂素和—定浓度的生
长素共同诱导芽的萌发与生长。墨兰原球茎在配方为 MS+
BA1.0 mg/ L(毫克/升)+NAA0.5 mg/ L(毫克/升)+IAA0.5
mg/ L(毫克/升)+蔗糖 30 g/ L(克/升)+琼脂 7 g/ L(克/升)
+活性炭 2 g/ L(克/升)的培养基上培养 50 d(天), 萌发率可
达 70%以上。
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·生物技术·　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　北方园艺 2004(1):56 ～ 57
　　表 2 墨兰原球茎萌芽结果分析
处理
因素
BA 大量元素 NAA IAA 萌芽率(%)
1 1 0 1 1/2MS 1 0 1 0 70.0
2 1 1 2 0.5mg/L 2 0.5mg/L 72.1
3 1 2 MS 1 2 71.1
4 1 2 2 1 87.8
5 2 1mg/L 1 1 1 71.3
6 2 1 2 2 89.3
7 2 2 1 2 71.8
8 2 2 2 1 74.0
K1 3.01 302.7 284.2 303.1 主次因子
K2 306.4 304.7 323.2 304.3 —※
R 5.4 2 39 1.2 NAA BA大量元素 IAA
2.3　试管苗的生根与移栽
2.3.1　生根　墨兰萌芽后 , 在长芽的同时也开始生根。据试
验 ,2002 年 2 月 3 日开始萌芽 , 至 3 月 10 日生根率可达
89.5%, 根长 0.5 cm(厘米)左右 , 每株有2 ～ 3 条根系 ,这时株
高达 2 cm(厘米)以上 , 经 50 d ～ 60 d(天)的培养 , 株高可达
4 cm(厘米)以上 , 有 2 片展开叶 , 每株有 3 ～ 4 条根 , 根长达
2 cm ～ 3 cm(厘米), 且较粗壮。对于无根苗可转入 BA+NAA
2.0 mg/ L(毫克/升)+活性炭 0.3%+蔗糖 20 g/ L(克/升)+
琼脂 7 g/ L(克/升)的培养基中 , 根 、茎能成比例的正常生长。
2.3.2　移栽　当试管苗长至 5 cm ～ 10 cm(厘米)高时 , 打开
培养瓶盖 ,炼苗 2 d～ 3 d(天), 然后从瓶中取出生根苗小心洗
净粘在根部的培养基 , 晾干后栽植到通气 、透水 、灭过菌的细
砂苗床中。移栽前期将空气湿度保持在 80%～ 90%, 透光率
50%,环境温度控制在 22 ℃～ 26 ℃。经 2 ～ 3 个月的管理 ,
即可定植于富含腐殖质 , 排水良好的微酸性介质中。移栽成
活率可达 87%左右。
3　讨论
3.1　继代增殖培养时 ,将原球茎切开 , 有利于提高增殖倍数 ,
培养 24 d(天)增殖 6.8 倍 , 若不切开接种 ,影响增殖倍数 , 但
对萌芽有利。
3.2　原球茎诱导萌芽与诱导生根为同一种培养基 , 在诱导萌
芽培养基上培养 50 d(天), 萌芽率达 70%以上 , 萌芽苗的生
根率可达 89.5%左右。
3.3　为保证试管苗有较高的移栽成活率 , 应保持较高的空气
湿度 , 经常喷水 ,所用水最好是软水或雨水 ,定植时不施基肥 ,
随着小苗对外界环境的适应 , 定期补施营养液 , 并喷 50%多
菌灵 800 ～ 1 000 倍液防止杂菌感染。
参考文献:
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培养的影响[ J] .中国农学通报 , 2000.3
菇艹娘高产栽培技术
曹 丽 萍
伴随着种植业结构调整步伐的加快 , 黑龙江省绥化市绥
胜镇看准时机 ,把小菇艹娘产业作为突破口。使全镇种植面积
达333 hm2(公顷)以上 , 667 m2(平方米)产 1 000 kg(公斤),
按 2003 年市场平均价格 1.5 元/kg(公斤)计算 , 667 m2(平方
米)收入 3 000元 , 去掉成本 667 m2(平方米)纯收入在 1 200
元左右 ,与玉米 、大豆等作物相比 , 效益十分可观。农民在种
植过程中摸索了一整套比较完整的高产技术 , 它的栽培也由
原来的直播到覆膜直播 ,又到现在的扣大棚 , 使它的收获期提
前 ,产量也直线上升。其具体做法如下。
1　选用良种是前提　当地农户基本上都是自家留种 , 遵循在
无病株上选取大小均匀 ,外观色泽一致 , 品质优良的植株进行
采种。品种为大黄菇艹娘 、小黄菇艹娘 。
2　选茬整地是基础　为防止地下害虫 , 种植菇艹娘一般应选
前茬是玉米 、谷子和黄豆茬的地块 , 进行秋季根茬还田 , 起垄
镇压。
3　加强育苗期管理是关键　扣棚:一般在 3 月下旬开始扣
棚 ,棚高 2 m(米)左右 , 棚室大小按种植面积而定(每667 m2
(平方米)用苗 3 000 株左右), 采用聚乙烯膜双层覆盖 , 将棚
室内苗床整平。营养土配制:取无除草剂残留的玉米茬垄台
土为宜 ,过筛除去其中杂物 , 667 m2(平方米)用土量为 2 m3
(立方米)左右 , 拌入二铵 10 kg ～ 12.5 kg(公斤), 硫酸钾
1.5 kg ～ 2.5 kg(公斤),硫酸锌 0.25 kg～ 0.5 kg(公斤), 加水
适量 , 使营养土坚而不实 , 松而不散为宜。装筒:选直径为
8 cm(厘米), 高为 10 cm(厘米)的纸筒或塑料筒 , 667 m2(平方
米)用量 3 000 个左右 , 将营养土装入筒中 3/ 4 处蹲实 ,留出
1/4 以便下籽。下籽:4 月 5 日(清明节)前后下籽 , 667 m2(平
方米)用量 0.05 kg(公斤),每筒下籽量为 4 ～ 6 粒 , 下籽前要
将育苗筒浇足水 , 下籽后将筒内覆上 1 cm(厘米)厚的细土。
棚室管理:要保证苗筒不缺水 , 适当调节棚室内的温度 ,大约
一周后出苗 , 两叶龄前温度要控制在 38 ℃～ 40 ℃,三叶龄后
温度要控制在 35 ℃以内 , 要及时间苗 , 使每个筒留 1 ～ 2 棵
苗 , 5 月初要适时蹲苗 ,待秧苗长出 5 片真叶后可炼苗 ,准备
定植。
4　要适时定植　在 5 月 20 日前后 , 终霜期过后即可定植 , 按
株距 50 cm(厘米),行距 65 cm(厘米)定植 ,移栽时坐水 , 撤掉
外筒 、留单苗 、覆膜 , 并适量使用甲拌磷防地下害虫。
5　加强田间管理是高产的保障　及时清除杂草 , 生育期用甲
托 、代森锰锌镁等杀菌剂防治病害 ,用杀虫剂大功臣等防治虫
害 , 同时增施磷酸二氢钾进行叶面补肥。
6　适时收获　菇艹娘一般在秧苗移栽 30 d(天)左右 , 当发现
果实外皮变黄即有果实成熟。采用随熟 、随收 、随卖 , 这时上
市价格较高 , 可增加经济收入 , 一般每隔一日摘一次 , 直至秧
苗拉秧时结束。
(黑龙江省绥化市北林区农业技术推广中心 ,152062)
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北方园艺 2004(1):56～ 57　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　·生物技术·