全 文 :1999 年第 6期
总 125期
山东林业科技
Shandong Forestry Science and Technology
No.6 , 1999
文章编号:1002-2724(1999)06-0001-04
收稿日期:1999-07-12*本文为山东省科委资助项目“切花植物引种选育及开发技术研究”的部分内容。
火鹤花微体快繁试验报告*
赵兰勇1 杜 鹏2 刘建华3 郎益钦4 丰 震1
(1.山农大林学院 ,泰安 271018;2.山东省北方果树苗木繁育场组培中心;
3.东营市园林局;4.临朐县沂山林场)
摘 要:对火鹤花微体快繁从外植体的建立 、继代培养 、生根培养到移栽方法 ,进行了一系
列研究 ,初步探明了影响微体快繁效果的主要因素。结果表明 ,火鹤花外植体消毒以 0.1%
HgCl2 液消毒 10min;外植体培养基以 MS+6-BA1mg/L+IBA 0.5mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂5.5
g/L ,pH=6.1;继代培养基以 MS+6-BA1.5 ~ 2.0mg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖 25 ~ 35g/L+琼脂
6g/L ,pH=6.1;生根培养基以 1/2MS为佳;移栽基质以 1/2MS培养基+珍珠岩为好;工厂化生
产以细河砂:蛭石=2∶1为基质并浇豆饼水较为经济合理 。
关键词:火鹤花 微体快繁 外植体 继代培养
中图分类号:723.1+32 文献标识码:A
火鹤花 Anthurium scherzerianum 为天南星
科安祖花属 ,是近年从国外引进的名贵花卉 ,
既可观花又可观叶 ,盆栽 、切花均可 。常规分
株繁殖方法速度太慢 ,种苗远远不能满足市
场需求 ,因此 ,探讨火鹤花微体快繁技术 ,具
有重要意义。
1 材料和方法
1.1 外植体的建立
取温室内火鹤花刚长出的嫩茎梢 ,去掉
周围小叶片 ,用自来水冲洗 0.5h 后 ,于超净
台上用95%酒精冲洗 ,转入 0.1%HgCl2 溶液
中消毒10min ,用无菌水冲洗 4 ~ 5次 ,放入盛
有滤纸的灭菌培养皿中 ,然后剥取 0.5 ~ 1.0
cm 茎尖(或腋芽分生组织)做为外植体 ,或直
接用消毒的单芽茎段做外植体 ,接种于MS+
6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖 30g/L+
琼脂5.5g/L 的初代培养基上。培养基配制
时 pH值调到 6.1 ,分装于广口瓶中 ,厚度离
瓶底为 1.5 ~ 2.0cm为准 ,瓶口用塑料薄膜包
扎封口 , 在 1.1 -1.2kg/cm2 压力下灭菌
20min ,培养条件为:荧光灯照光 ,每天 14-
16h ,光照强度为 1000-2000Lx ,温度为 26±
2℃。
1.2 继代培养
用广口瓶每瓶分装培养基厚度为 1.5 ~
2.0cm ,接 3 ~ 4个外植体 ,继代培养基为 MS
+6-BA 1.5 ~ 2.0mg/L+IBA 0.5mg/L+蔗
糖30g/L+琼脂 6g/L。培养基制备 、灭菌及
培养条件同前 。
1.3 生根培养
取继代培养瓶中生长 25 ~ 35d 的 、长度
大于2cm 的小嫩茎 ,接种于生根培养基中 ,每
瓶4 ~ 6 个 。生根培养基为 1/2 MS +IAA
2mg/L+蔗糖 20g/L+琼脂 6g/L , pH=6.1 ,其
它同前。
1
1.4 移栽方法
生根培养 40d 左右 ,将培养瓶置于温室
进行强光锻炼 5 ~ 6天 ,然后去掉封口薄膜 , 3
天后小心将苗取出 ,冲去根上附着的培养基 ,
移入盛有河砂:蛭石=2∶1并消过毒的种植
床或小营养钵中 ,并浇 1/2MS 营养液 ,用薄
膜覆盖保湿 , 2 周后去膜 ,为防止病害发生 ,
适时喷 0.1%多菌灵药液(15 ~ 20d1次),生
长30d后移入盆中培养 。
1.5 处理结果调查
1.5.1 初代培养调查:污染率 、正常分化率。
1.5.2 继代培养调查:新梢数 、有效新梢数。
有效新梢数:平均每株分化的长度大于 2cm
的新梢数 。
1.5.3 生根培养调查:所有处理苗的生根
率。
1.5.4 移栽培养调查:移栽成活率 ,苗生长
状况 ,根生长状况。
苗 、根生长状况分级为:正常生长中生长
快为优 ,生长中等为良 ,生长缓慢为差 ,不正
常生长为极差。
2 结果与分析
2.1 外植体的建立
2.1.1 消毒时间对外植体存活的影响
为了达到外植体诱芽的最好效果 ,对外
植体进行同种药剂不同时间的消毒处理 ,试
验结果列表1。
经分析可知 , 用 0.1%的 HgCl2 浸泡
10min ,消毒效果最好。消毒时间过短 ,污染
率高;消毒时间过长 ,外植体被杀死 。
表 1 不同时间用 0.1%HgCl2 对火鹤花茎尖消毒的效果
消毒时间(min) 4 6 8 10 15
接种数(瓶) 10 10 10 10 10
污染率(%) 90 60 30 10 全部杀死
2.1.2 不同的无机盐浓度对外植体诱芽的
影响
采用MS大量元素和 1/2MS 大量元素 2
种浓度对火鹤花外植体诱芽的对比试验结果
见表 2。
表 2 不同无机盐浓度对火鹤花外植体诱芽的影响
无机盐浓度 试验瓶数 芽数(个) 愈伤组织(cm)
1/ 2MS 10 6.4±1.2 1.5×1.4
MS 10 11.2±1.6 1.9×1.7
注:生长 30天后的平均值。不同处理皆加 6-BA1mg/L 、
IBA0.5mg/ L。
从对比结果可以看出 ,高浓度无机盐对
诱芽效果较好 ,经 1个月培养可产生 11.2±
1.6个芽 ,在低无机盐浓度的培养基上芽的
诱导率几乎减少 1/2 ,说明火鹤花外植体诱
芽从无机盐水平上适用MS大量的培养基。
2.1.3 不同的激素浓度对火鹤花外植体诱
芽的影响
以 6-BA相同浓度 , IBA不同浓度进行
试验 ,结果列入表 3。
表 3 不同激素水平对火鹤花诱芽的影响
试验瓶数 6-BA(mg/L)IBA(mg/L) 芽数(个) 愈伤组织(cm)
10 1 0.25 5.5±1.7 1.5×1.2
10 1 0.5 10.8±0.7 1.8×1.7
10 1 1 4.3±1.3 1.6×1.4
注:生长 30天后的平均值。
对比试验结果可以看出:IBA 为 0.5mg/
L浓度时诱芽效果最好 ,平均芽数达到 10.8
±0.7个。浓度过高或过低时诱芽均减少 。
2.2 新梢继代增殖
2.2.1 培养基蔗糖浓度对火鹤花继代苗增
殖的影响
在MS+6-BA 1.5mg/L+IBA0.5mg/L+
琼脂 6g/L pH=6.1的基本培养中 ,加入不同
量的化学纯糖 ,继代苗增殖效果如图 1。
从图 1可以看出 ,有效新梢数 、新梢数与
蔗糖浓度呈抛物线相关 ,在 0 ~ 30g/L 范围内
成正相关 ,在 30g/L 以上呈负相关 ,培养基蔗
糖含量在 25 ~ 35g/L范围内 ,增殖效果最好 。
蔗糖浓度太低 ,培养基碳源供应量不足 ,蔗糖
浓度太高 ,对火鹤花增殖有抑制作用。
用市售食用蔗糖做同样试验 ,结果与上
述相同 ,为节约成本 ,大量繁殖时可用相同浓
度的市售蔗糖代替试剂蔗糖。
2
图 1 蔗糖浓度对火鹤花继代苗增殖的影响
2.2.2 琼脂浓度对火鹤花继代苗增殖的影
响
在MS+6-BA1.5mg/L +IBA0.5mg/L+
蔗糖 30g/L pH=6.1 的基本培养基中加入
不同量的琼脂进行比较 ,其中第一处理不加
琼脂 ,以聚氨脂海绵小块做支持物 ,进行液体
培养 ,结果与蔗糖的影响趋势相同 ,如图 2所
示 ,均为抛物线型。
图 2 琼脂浓度对火鹤花继代苗的影响
从图 2可以看出 ,琼脂浓度为 6g/L 时 ,
新梢数与有效新梢数达到最大值 ,低于 5g/L
时 ,叶色浅 ,叶片大而略卷曲 ,高于 10g/L时 ,
分化新梢数急剧下降 ,个别茎尖干枯 、叶片变
黄。原因是培养基中琼脂浓度低时 ,培养基
太软 ,造成继代体下沉 ,影响正常分化;琼脂
浓度高时 ,培养基硬度太大 ,继代体不能很好
与培养基结合 。所以培养基中琼脂浓度以
6g/L 为宜 。
2.2.3 细胞分裂素对火鹤花继代苗增殖生
长的影响
在继代培养基中 ,不加细胞分裂素(对
照)及分别添加不同浓度的 ZT 、KT 和 6-BA
做比较 ,结果见图 3。可以看出 6-BA对火
鹤花分化增殖的促进作用最有效 ,其次是
ZT ,KT最差。随着 ZT 和 KT 浓度的增加 ,新
梢数有所增加 ,但有效新梢数增加不明显 ,且
生长状况出现异常 ,继代苗叶片大而卷曲 ,故
对火鹤花继代苗增殖不宜用 ZT 和 KT。从 6
-BA 的影响看 ,6-BA 的浓度愈高 ,新梢数
愈多 ,但有效新梢数却先升后降 ,且高浓度 6
-BA条件下出现较多的玻璃苗 ,综合考虑以
添加 1.5 ~ 2.0mg/L 的6-BA为好。
图 3 细胞分裂素对火鹤花继代苗增殖生长的影响
2.2.4 生长素对火鹤花继代苗增殖生长的
影响
试验设计继代培养基中加入不同浓度的
IBA处理 ,并以不加生长素作为对照 , 结果
(见表 4)表明:各处理的分化新梢数低于对
照 ,但有效新梢数则高于对照 ,原因是生长素
3
表 4 IBA对火鹤花继代增殖的影响
试验瓶数6-BA(mg/L)IBA(mg/L)新梢数(个)有效新梢数(个)
10 1.5 0(对照) 16.7 2.7
10 1.5 0.1 15.3很好 3.1差
10 1.5 0.5 12.1好 4.7好
10 1.5 1.0 10.5差 5.5很好
注:MS培养基。生长30天后的平均值。
能明显促进生长 ,但抑制分化 。从新梢数和
有效新梢数 2方面综合考虑 ,火鹤花继代培
养中 IBA浓度以0.5mg/L 为好 。
2.3 生根培养
在生根培养中 ,分别采用 MS 大量元素
和1/2MS大量元素2种浓度 ,结果表明:生长
30天后 ,采用 1/2MS 大量元素的处理 ,生根
率达到95%,根生长状况优;而采用MS 大量
元素的处理 ,生根率仅 65%,根生长状况差。
2.4 试管苗移栽
4种基质对火鹤花试管苗移栽影响的对
比试验结果表明:浇 1/2MS 营养液的条件
下 ,珍珠岩基质移栽火鹤花试管苗成活率为
95%,苗木和根的生长状况均为优;蛭石 、河
沙和细河沙∶蛭石=2∶1的基质 ,试管苗移栽
成活率分别为 75%、80%和 85%,苗木生长
状况均为良 ,根生长状况后者优 ,前两者也均
为良 ,以珍珠岩为基质效果最好。
浇豆饼肥水的条件下 ,珍珠岩基质移栽
成活率 80%,根生长状况良 , 苗木生长状况
良;蛭石基质移栽成活率 65%,根生长状况
良 ,苗木生长状况良;河砂基质移栽成活率
85%,根生长状况良 ,苗木生长状况优;细河
砂:蛭石=2∶1的基质移栽成活率 90%,根生
长状况优 ,苗木生长状况优 。以混合基质细
河砂∶蛭石=2∶1效果最好 ,以蛭石为差。
综合分析 ,工厂化生产从经济效益方面
考虑 ,应采用混合基质 ,浇豆饼肥水为佳 。
3 结论
试验证明 ,火鹤花外植体用 0.1%HgCl2
溶液消毒 10min , 外植体培养基以 MS+6-
BA1mg/L+IBA0.5mg/L +蔗糖 30g/L+琼脂
5.5g/L , pH =6.1;继代培养基以 MS +6-
BA1.5 ~ 2.0mg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖 25 ~
35g/L+琼脂 6g/L , pH=6.1;生根培养基以
1/2MS+ⅠAA2mg/L+蔗糖 20g/L+琼脂 6g/
L ,pH=6.1为佳。工厂化生产火鹤花苗以细
河砂∶蛭石=2∶1并浇豆饼水最为经济。
参考文献:
〔1〕 谭文澄等.观赏植物组织培养技术.中国林业出版社 ,北京:1991
〔2〕 杨增海.园艺植物组织培养.农业出版社 ,北京:1987
〔3〕 龙雅宜.切花生产技术.金盾出版社 ,北京:1994
Researches on Rapid Microculture of Anthutium Scherzerianum
Zhao Lan -yong et al .
Abstract The establishment of explant , subculture , rooting and transplanting of Anthurium scherzerianum
were studied extensivels.The main factors effecting microculture were discovered.The results showed the
best methed of discontamination is 0.1%HgCl2 solution for 10 minutes.The best ingredients are Ms+6
-BA 1mg/L+IBA 0.5mg/L+sucrose 30g/L+agar 5.5g/L with pH=6.1 for explant cualture;MS+6
-BA 1.5-2.0mg/L+IBA 0.5mg/L+sucrose 25-35g/L+agar 6g/L with pH=6.1 for subculture;
1/2MS for rooting;1/2MS+pear/ rockfor transplanting;fine river sands:vermiculite=2∶1 as the material
for industrial production.
Key words Anthurium scherzerianum;microculture;erplant subculture.
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