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当归补血汤粗多糖补气生血作用研究和组方合理性探讨



全 文 :的正性调节细胞因子 、炎性介质以及自身抗体使自身组织受到攻
击 , 产生自身免疫 [ 3] 。本研究通过体外实验观察到 CT低浓度时
对正常 SD大鼠的淋巴细胞增殖反应具有促进作用 , 随着浓度的
升高开始出现抑制作用 ,表明 CT对正常大鼠的免疫功能具有浓
度和机能依赖性的双向免疫调节作用。 本研究表明 , CT对 CIA
大鼠异常的免疫功能具有一定的改善作用 , 低浓度时(0.1 μg/
ml)对 CIA大鼠 ConA诱导的胸腺细胞低下的免疫功能具有增强
作用 , 高浓度时(100, 1 000 μg/ml)对 LPS诱导的脾细胞亢进的
免疫功能具有抑制作用。提示 CT可能通过改善 CIA大鼠异常
的免疫功能而治疗 RA,其进一步的作用和机制有待深入研究。
表 1 CT体外对正常大鼠 ConA诱导的胸腺细胞和 LPS诱导
的脾细胞增殖反应的影响( x±s)
组别 刺激剂剂量 C/μg· ml-1 胸腺细胞 脾细胞
正常 - - 0.564 ±0.07 0.919 ±0.060
conA或 LPS + - 1.017±0.077** 1.272 ±0.065**
正常 +CT + 0.1 1.14±0.114 1.405 ±0.142
+ 1 1.197 ±0.025# 1.437 ±0.052#+ 10 1.034 ±0.058 1.196 ±0.169
+ 100 0.932 ±0.151 0.705±0.109##+ 1000 0.582 ±0.053## 0.477 ±0.045##
与正常组比较 , **P<0.01;与conA或 LPS组比较 , #P<0.05, ##P<0.01 ;刺激
剂:胸腺细胞为ConA(+),脾细胞为 LPS(+)
表 2 CT体外对 CIA大鼠 ConA诱导的胸腺细胞和 LPS诱导的
脾细胞增殖反应的影响( x±s)
组别 刺激剂剂量 C/μg· ml-1 胸腺细胞 脾细胞
正常 + - 1.017 ±0.077 1.272 ±0.065
模型 + - 0.491 ±0.083** 1.673 ±0.058**
模型 +CT + 0.1 0.739 ±0.107# 1.635 ±0.109+ 1 0.552 ±0.074 1.733 ±0.021
+ 10 0.549 ±0.094 1.652 ±0.140+ 100 0.474±0.029 1.147±0.185##+ 1000 0.425±0.029 0.753 ±0.057##
与正常组比较 , **P<0.01;与模型组比较 , #P<0.05, ##P<0.01;刺激剂:胸腺细
胞为 ConA(+),脾细胞为 LPS(+)
参考文献:
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收稿日期:2008-09-19; 修订日期:2009-09-16
基金项目:河南省重点科技攻关项目(No.001170716)
作者简介:方晓艳(1974-),女(汉族),河南禹州人 ,现任河南中医学院讲
师 ,北京中医药大学在读博士研究生 ,硕士学位 ,主要从事中药药理研究
工作.
*通讯作者简介:苗明三(1965-), 男(汉族),河南新乡人 , 现任河南中医
学院教授 ,博士学位 ,主要从事中药药理研究工作.
当归补血汤粗多糖补气生血作用
研究和组方合理性探讨
方晓艳 ,苗明三*
(河南中医学院 ,河南 郑州 450008)
摘要:目的 探讨当归补血汤粗多糖补气生血作用机理和组方的合理性。方法 用放血与环磷酰胺并用所致气血双虚模
型大鼠为研究对象 , 观察药物对血清白细胞介素 -2(IL-2)、白细胞介素 -6(IL-6)、促红细胞生成素(EPO)水平的影
响。结果 当归补血汤粗多糖及单味药多糖可不同程度提高放血与环磷酰胺并用致气血双虚模型大鼠血清 IL-2、IL-
6、EPO的水平 ,以当归补血汤粗多糖的作用最好。结论 当归补血汤粗多糖可提高机体的免疫功能和造血功能 , 全方组
方具有合理性。
关键词:补气生血; 气血双虚; 免疫功能; 造血功能
中图分类号:R289.5  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2010)01-0093-02
  当归补血汤多糖(Dangguibuxuetang.polysaccharide)为经典
名方当归补血汤(黄芪∶当归 =5∶1)的提取物 , 当归补血汤是
一首补气生血方剂 , 主要治疗劳倦内伤 、气弱血虚 、阳浮外越等
证 , 在临床上的应用非常广泛。现代研究提示 , 当归补血汤对机
体的免疫功能和造血功能有促进作用 [ 1 ~ 3] , 但对其补血作用的物
质基础及机理研究还少见报道 , 我们先前的研究提示 ,当归补血
汤多糖有较好的免疫兴奋作用 [ 4] 。本文报道当归补血汤及单味
药粗多糖对血虚大鼠细胞因子的影响 ,探讨当归补血汤粗多糖的
补气生血机理及组方的合理性。
1 材料与仪器
1.1 动物 大鼠 , Wistar品种 ,由河南省医学实验动物中心提供。
1.2 药品 当归补血汤粗多糖 , 由河南中医学院药物化学学科提
供;当归补血口服液 ,郑州市协和制药厂生产 , 批号 010301;环磷
酰胺 , 上海华联制药有限公司生产 , 批号 010312;IL-1放免试剂
盒 , 由中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所提供 , 批
号 020126;IL-6放免试剂盒 ,由中国人民解放军总医院科技开
发中心放免研究所提供 , 批号 020126;EPO放免试剂盒 , 由中国
人民解放军总医院科技开发中心放免研究所提供 ,批号 020126。
1.3 仪器 FT-613自动计数 125I放射免疫测量仪 , 北京核仪器
厂生产 。
2 方法 [ 5]
2.1 分组与给药 取大鼠 54只 , 体质量 180 ~ 200 g, 雌雄各半 ,
随机均分为 9组 , 其中 8组分别灌服大 、中 、小剂量的当归补血汤
粗多糖水溶液(200, 100, 50 mg/kg),黄芪粗多糖水溶液(85 mg/
kg), 当归粗多糖水溶液(15 mg/kg), 芪归粗多糖水溶液(100mg/
kg,黄芪粗多糖∶当归粗多糖 =5∶1), 当归补血口服液(3.3ml/
kg), 及同体积生理盐水 ,连续 14 d。模型组及给药组大鼠于给药
的第 1日 , 每鼠尾部放血约 1 ml, 隔日放血 1次 , 连续放血 5次 ,
模型组及给药组大鼠于给药的第 2日 , 每鼠腹腔注射环磷酰胺
40 mg/kg, 隔日注射 1次(以后的剂量为 20 mg/kg), 连续注射 6
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.1 时珍国医国药 2010年第 21卷第 1期
次。另设一完全空白对照组 , 灌服并注射同体积的生理盐水。于
最后 1次给药后 2h, 大鼠腹主动脉取血 ,离心 ,取血清 ,低温冰箱
保存 , 备测白细胞介素 -2(IL-2)、白细胞介素 -6(IL-6)、促
红细胞生成素(EPO)。
2.2 统计学方法 实验结果以 x±s表示 , 数据分析用 SPSS10.0
forwindows统计软件 , 组间比较采用单因素方差分析。
3 结果
当归补血汤粗多糖及单味药粗多糖对大鼠气血双虚模型血
清中 IL-2, IL-6, EPO的影响见表 1。
结果表明 , 与空白对照组比较 , 模型组大鼠血清 IL-2水平
明显降低(P<0.05), IL-6, EPO水平显著降低(P<0.01),说明
造大鼠气血双虚模型成功。
与模型组比较 ,当归补血汤粗多糖大剂量组和当归补血口服
液组能显著升高气血双虚大鼠血清中的 IL-2水平(P<0.01),
黄芪多糖组能明显升高 IL-2水平(P<0.05), 其余各组对 IL-
2水平的升高无显著性差异(P>0.05);除当归补血口服液组外 ,
其余各给药组均能显著升高气血双虚大鼠血清中的 IL-6水平
(P<0.01);除当归补血汤粗多糖小剂量组能明显升高血清中
EPO水平(P<0.05), 其余各给药组均能显著升高血清中 EPO
水平(P<0.01)。
表 1 当归补血汤粗多糖对大鼠气血双虚模型血清中 IL-2、IL-6、EPO的影响( x±s)
组别 剂量 IL-2/ng· L-1· 103 IL-6 /pg· L-1· 103 EPO/ng· L-1· 103
空白对照 5.797±0.631 52.89±8.17 3.744±0.727
模型 4.799±1.209* 11.33±2.79** 1.391±0.219**
当归补血口服液 3.3ml 6.403±0.840■■ 18.73±6.54 4.331±1.120■■
当归补血汤粗多糖(大) 200mg· kg-1 6.071±0.852■■ 46.97±7.51■■ 4.886±1.235■■
当归补血汤粗多糖(中) 100mg· kg-1 5.576±0.765 43.90±8.15■■ 3.464±0.834■■
当归补血汤粗多糖(小) 50mg· kg-1 4.972±0.748 41.19±10.51■■ 2.808±1.272■
黄芪多糖 85mg· kg-1 5.879±0.427■ 43.17±6.07■■ 3.132±1.021■■
当归多糖 15mg· kg-1 4.974±0.987 38.65±5.42■■ 2.935±0.874■■
芪归多糖 100mg· kg-1 5.479±1.127 40.70±9.94■■ 3.476±0.647■■
  与空白对照组比较 , **P<0.01, *P<0.05;与模型组比较, ■■P<0.01, ■P<0.05;n=6
4 讨论
现代医学认为中医理论所谓的 “正气存内 , 邪不可干 ”是指
机体的免疫功能良好 , 若气虚则机体免疫功能下降。中医理论认
为 “气为血之帅 , 血为气之母” , 若气虚则血生化无源 , 骨髓造血
功能减退 , 血细胞生成减少 , 表现为血虚证 , 与现代医学中 “贫
血”非常相似。
IL-2是一种广谱的免疫增强剂 , 有抗肿瘤 、抗微生物感染 ,
引起移植排斥及免疫调节等作用。 IL-2最重要的作用是诱导 T
淋巴细胞增殖(从 G0期进入 S期)和分化。 IL-6由多种细胞产
生 , 对免疫应答 、急性期反应 、造血和神经系统有多方面作用。由
IL-6刺激产生的骨髓细胞集落容易在致死性放射线照射小鼠
中重建骨髓。目前 , IL-6作为治疗血小板减少药物的Ⅲ期临床
实验正在进行。 EPO的作用是维持红细胞造血前体细胞的存活
并促进其分裂 , 诱导晚期爆式红系祖细胞(BFU-E)和红系祖细
胞(CFU-E)生长成为成熟的红细胞 , EPO对红细胞的血红素化
很重要 , 输入 EPO可增加正常小鼠 、贫血小鼠和红细胞增多症小
鼠的红细胞压积 , EPO能使未成熟骨髓网织红细胞在成熟前释
放 , 进一步增加血液中的红细胞 [ 6] 。故检测这些细胞因子的水平
可用来解释药物对机体免疫系统和血液系统的作用机制 , 探讨药
物的补气生血作用机制。
实验结果提示 , 当归补血汤粗多糖大剂量组和黄芪多糖组能
升高血虚大鼠血清中的 IL-2水平(P<0.01), 即提高了机体的
免疫功能 , 其他给药组仅有升高 IL-2水平的趋势 , 这可能是当
归补血汤多糖大补元气 ,增强机体抗御外邪能力的机理之一 , 同
时也说明了黄芪为补气之要药 , 证明了传统医学中的 “补气”与
现代医学的提高免疫力的统一性;当归补血汤粗多糖比单味药多
糖能显著升高血虚大鼠血清中的 EPO水平 ,促进红细胞的生成 ,
说明了古人组方的合理性 ,同时也体现了中医治疗疾病的特色;
而复方多糖组和单味药多糖组均能升高血虚大鼠血清中的IL-6
水平 ,以上结果说明复方多糖和单味药多糖促进造血功能的机理
不完全相同 ,即选择性的靶作用点可能不同。黄芪多糖组对各项
细胞因子的改善作用都比当归多糖组好 , 说明对于气血双虚模
型 ,气随血脱 ,故在治疗时 , 宜重用黄芪大补脾肺之气 ,以裕生血
之源 ,同时也印证了李东垣所谓的 “血不自生 , 须得阳气之助 , 血
自旺矣”的理论 , 芪归多糖组对各项细胞因子的改善作用都没有
当归补血汤粗多糖大剂量组好 , 说明当归补血汤粗多糖补气生血
作用的发挥不是黄芪多糖和当归多糖的简单相加 , 更加证明了前
人组方的科学性。
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