全 文 ：·1328· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第9期2005年9月
补气生血方药的提取方法比较
孙秀梅，张兆旺，张 华，惠建国
(山东中医药大学，山东济南250014)
摘要：目的优选补气生血方药提取工艺。方法 以黄芪甲苷、人参二醇、阿魏酸、甜菜碱、干浸膏为指标，在药材
粒度、溶剂量、煎提温度、滤过、浓缩等条件相同的前提下，对半仿生提取法(SBE法)、水提取法(WE法)、半仿生提
取醇沉法(SBAE法)、水提取醇沉法(WAE法)进行比较研究。结果五个指标综合评价Y值为：SBE法>WE
法>SBAE法>wAE法。结论补气生血方药的提取方法以SBE法最佳。
关键词：补气生血方药；提取方法；半仿生提取
中图分类号：R284．2；R286．02文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)09—1328—03
ComparisonofextractingmethodsforInvigoratingQiandPromotingBloodFormula
SUNXiu—mei，ZHANGhao—wang，ZHANGHua，HUIJian—guo
(ShandongUniversityofTraditionalChineseMedicine，Jinan250014，China)
Keywords：InvigoratingQiandPromotingBloodFormula；extractingmethods；semi—bionic
extraction
补气生血方药由黄芪、人参、当归、枸杞4味药
构成，补气生血，提高机体免疫力，有较高临床应用
价值。为进一步探讨该方药采用半仿生提取(SBE)
是否较目前普遍采用的提取方法更佳，本实验根据
SBE法理论，在优选的提取工艺及药材组合方式、
醇沉较佳体积分数基础上，以黄芪甲苷、人参二醇、
阿魏酸、甜菜碱、干浸膏为指标，对该方药的4种提
取方法进行比较研究。
1仪器与药品
Beckman高效液相色谱仪(美国Beckman公
司)，CS一930薄层扫描仪(日本岛津)，pHS--3C型
精密pH计(上海雷磁仪器厂)，MAll0型电子分析
天平(上海第二天平仪器厂)，NECPOWERMATE
433型微机(美国Waters公司)，LXJ一Ⅲ型离心沉
淀机(上海医疗器械厂)，721—100型分光光度计
(上海第三分析仪器厂)。
药材经张兆旺教授鉴定，黄芪为豆科植物膜荚
黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch．)Bunge．的
干燥根，人参为五加科植物人参PanaxginsengC．
A．Meyer的干燥根，当归为伞形科植物Angelia
sinensis(Oliv．)Diels的干燥根，枸杞为茄科植物宁
夏枸杞LyciumbarbarumL．的干燥成熟果实。黄芪
甲苷、人参二醇、阿魏酸对照品购自中国药品生物制
品检定所，甜菜碱对照品购自北京市昌平石鹰化工
厂，其余试剂均为分析纯。
2方法和结果
2．1水提取(WE)液的制备：精取处方比例的1．0·
20目粗粉共120g，当归和人参合煎，黄芪和枸杞各
单煎，分别加水浸泡0．5h，用“双提法”提取3次，3
次煎提水的量分别为10、6、6倍，提取时间依次为
145、70、40rain，3次煎液分别滤过，2000r／min离
心20rain。合并上清液，浓缩并定容至500mL(相当
于原药材0．24g／mL)。
2．2水提取醇沉(wAE)液的制备：取WE液250
mL，浓缩到100mL，缓慢加入乙醇至乙醇的体积分
数达到80％，搅匀并静置，2～6。C冷藏24h，离心。
上清液回收乙醇至无醇味，蒸馏水定容至250mL。
2．3半仿生提取(SBE)液的制备：按照2．1项下条
件，只将3次煎液用水的pH分别调为3．50、6．50、
8．oo。依法制得SBE液。
2 4半仿生提取醇沉(SBAE)液的制备：取2．3项
下SBE液250mL，依2．2项下方法制得SBAE液。
2．5供试品溶液的制备：精取各样品液20．0mL，分
别以乙醚萃取，取水层，以正丁醇萃取，正丁醇液用
5％碳酸氢钠溶液和蒸馏水分别洗涤，挥干正丁醇，残
渣以甲醇定容至2mL，得供试品溶液A。～A。。
收稿日期：2004—12—30
基金项目：山东省医药科研课题(991205908)
作者简介：孙秀梅(1948一)，女，山东济南人，教授，博士生导师，主要从事中药新药研究与中药炮制原理研究。
Tel：(0531)82613413E—mail：sunxiumei8@163．tom
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第9期2005年9月·1329·
精取各样品液20．2mL，分别加浓硫酸5mL
和乙醇25mL，水浴回流4h，放至室温后用石油醚
萃取，萃取液石油醚蒸干，残余物用氯仿定容至2
mL，得供试品溶液B。～B。。
精取各样品液20．0mL，蒸发皿中水浴蒸至近
干，加硅藻土6g，搅匀，烘干，研细，以醋酸乙酯一甲
酸(19：1)100mL索氏提取2h，提取液水浴蒸干，
残渣以甲醇定容至2mL，得供试品溶液C。～C。。
精取各样品液20．0mL，分别用盐酸调pH1．0，
加活性炭0．5g，煮沸15min，抽滤，滤液加新配制
2％雷氏盐溶液20mL，混匀后5～10℃冷藏3h。用
G。垂熔玻璃漏斗抽滤。滤渣用少量冰水洗涤，抽干，
丙酮溶液并定容至5mL，得供试品溶液D。～D。。
2．6对照品溶液的制备：精取黄芪甲苷5．50mg、
人参二醇1．40mg、阿魏酸1．70mg、甜菜碱8．80
mg，分别用甲醇、氯仿、甲醇、乙醇定容至5、2、2、2
mI。，即得。
2．7黄芪甲苷的测定[1]
2．7．1线性关系的考察：分别取黄芪甲苷对照品溶
液0．1、0．2、0．4、0．6、0．8、1．0mI。，用甲醇定容至1
mL。用Phenomenex—C18柱，流动相为乙腈一水(1：
2．32)，体积流量为1．0mL／min，检测波长为203
nm，灵敏度0．08AUFS，室温下进样20弘L测定，得
回归方程为Y一2519．70859X+8868．31233，
r一---0．9994，线性范围2．2～22．0肛g。
2．7．2测定：精取供试品溶液A。～A。各1．0mL，
稀释至2．0mL，微孔滤膜滤过，进样20弘L，测定，
将所测峰面积代人工作曲线，计算黄芪甲苷的质量
浓度，结果见表1。
表1 4种方法提取液中各指标成分及标准化处理结果
TableComprehensivevaluationofeachmarker
componentextractedbyfourmethods
andstandardizedtreatment
黄芪甲苷／ 人参二醇／ Mill／ 甜菜碱／ 干浸膏／ 综合
提取液(g．一1)(g．一1)(g．1)(g．mL-1)(g,mL-1)mL mL mL mL g mL 评价y( · 一1)(g·一1)(g· 1)(g
40．6318
9．6148
-15．1850
—35．0930
2．8人参二醇的测定‘2]
2．8．1线性关系的考察：在同一块CMC—Na硅胶
G薄层板上分别点人参二醇对照液2．0、4．0、8．0、
12．0、16．0、20．0弘L，用氯仿一乙醚(1：1)展开15
cm，挥干溶剂，喷10％硫酸乙醇，105℃烘3rain显
色，测定吸收曲线在535nm处有最大吸收。色谱扫
描条件：五。一535nm，^，一770nm；S。=3，狭缝1．20
1Tim×1．201Tim；灵敏度中；双波长反射式锯齿形扫
描。得回归方程：y=1775．71033x一964．7264，
，．=0．9987，线性范围1．4～14．0pg。
2．8．2测定：精取供试品溶液B。～B。各20．0肛L
及人参二醇对照品溶液4．0、10．0pL点于同一薄层
板上，展开，显色，扫描，结果见表1。
2．9阿魏酸的测定[3]
2．9．1线性关系的考察：精取阿魏酸对照品溶液
2．0、4．0、6．0、8．0、10．0、12．0肚L，分别点于同一块
CMC—Na薄层板上，用苯一冰醋酸一甲醇(15：1：
1．5)展开15Crll，挥干溶剂，于365nm下观察定位
(在对照品相应位置有相同蓝色荧光斑点)，测定吸
收曲线，320nm处有最大吸收。色谱扫描条件：九一
320nm，A。一370rllTl；S。一3；狭缝1．21Tim×1．2
mm；灵敏度中；双波长反射式锯齿形扫描。得回归
方程：Y一38088．47193X+393 8．88867，r一
0．9990，线性范围1．7～10．2pg。
2．9．2测定：精取供试品溶液C。～C。各26．0tA。，
阿魏酸对照品溶液6．0、12．0肛L，分别点于同一薄
层板上，展开，定位，扫描，测得结果见表1。
2．10甜菜碱的测定[4]
2．10．1线性关系的考察：精取甜菜碱对照品溶液
2．0、3．0、4．0、5．0、6．0、7．0弘L，点于同一块CMC—
Na薄层板，丙酮一无水乙醇一盐酸(10：6：1)展开10
cm，挥干溶剂，改良碘化铋钾显色，测定吸收曲线，
500nlTl处有最大吸收。色谱测定条件：A。一500nm，
AR一600nm；S。一3；狭缝1．2mm×1．2mlXl；灵敏
度中；双波长反射式锯齿形扫描。得回归方程：y=
684．39338X一3363．5552，，．一0．9992，线性范
围8．8～30．8弘g。
2．10．2测定：精取供试品溶液D，～D。各6．0肛L，
甜菜碱对照品溶液2．0、6．0tLL，点于同一块CMC—
Na薄层板，展开，显色，扫描，结果见表1。
2．11干浸膏的测定：精取供试品溶液各2．0mL，
置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，烘箱中105
℃烘干至恒重，测定结果见表1。
2．12结果处理：将黄芪甲苷、人参二醇、阿魏酸、甜
菜碱、干浸膏5个指标的数据按公式X矿一(xⅡ一
X，)／s．进行标准化处理。xij为样品液i中成分歹的
质量浓度，X，为4种方法提取液i中成分J的质量
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万方数据
·1330· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第9期2005年9月
浓度的平均值，S，为成分』的标准偏差，即S，=
EX．(xiJ一蜀)2肠一1]“2，X矿为标准化后的值，将X矿
加权求和，即得综合评价指标y值。处理结果见表
l。可见y由大到小的顺序是SBE液>WE液>
SBAE液>WAE液。
y=(黄芪甲苷+人参二醇+阿魏酸+甜菜碱)×8+干
浸膏×2
3小结与讨论
以黄芪甲苷、人参二醇、阿魏酸、甜菜碱、于浸膏
为指标，对补气生血方药的4种提取方法进行比较，
根据SBE法理论，确定综合评价指标的关系式，综
合评价指标值大小顺序为：SBE液>WE液>
SBAE液>WAE液，提示补气生血方药的提取以
SBE法为佳。SBE法符合口服药物经人体胃肠道转
运吸收的原理，且有效成分的量高，生产成本低。如
再减少服用量，可采用SBAE法，其提取成分较
WAE的量高。本实验进一步验证SBE法的科学性
和可行性。
本实验采用了多指标成分及干浸膏为考察对
象，综合优选提取工艺，体现了中药提取的“有成分
论，不唯成分论，重在机体的药效学反应”这一SBE
法观点，同时也有利于单体成分控制制剂质量。
数据处理时，将5个指标成分测定结果进行标
准化处理，以消除因各指标单位和量纲的不同及变
量范围相差悬殊所造成的影响，以标准化处理以后
所得的综合评价指标值为指标，评判4种提取方法
的优劣，较各指标成分直接相加更科学更合理。
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Gouqiziextract[J]．ChinaJChinMaterMed(中国中药杂
志)，1997，22(10)：608—610．
毛细管气相色谱法测定复方莪术油软胶囊中莪术醇
巩克民1，任洁1，唐淑含1，唐百灵1，赵怀清H，金明月2
(1．沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳 110016；2．辽宁大生药业有限公司，辽宁沈阳110003)
摘 要：目的 建立复方莪术油软胶囊中莪术醇的毛细管气相色谱测定方法。方法 色谱条件为OV一1毛细管色
谱柱，程序升温，火焰离子化检测器，内标正二十烷。结果组分与内标分离良好，莪术醇在0．10～o．80mg／mL线
性关系良好(r一0．9999)，平均加样回收率为99．69％，RSD为0．82％。结论该法定量准确、可靠、重现性好，可以
用于复方莪术油软胶囊中莪术醇的质量评价。
关键词：复方莪术油软胶囊；莪术醇；毛细管气相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)09—1330—03
DeterminationofcurcumolinCompoundEzhuOilSoftCapsulesbyCGC
GONGKe—rainl。RENJiel，TANGShu—hanl，TANGBai—lin91，ZHAOHuai—qin91，JINMing—yue2
(1．SchoolofPharmacy，ShenyangP arm ceuticalUn versity，Shenyang110016，China；2．Liaoning
DashengPharmaceuticalLimitedCorporation，Shenyang110003，China)
Keywords：CompoundEzhOilSoftCapsule；curcumol；capillarygaschromatography(CGC)
复方莪术油软胶囊是由莪术油、陈皮油混匀而
制成的软胶囊，具有行气破瘀、消积止痛等功效，主
治积滞胀痛，血瘀腹痛，血滞经闭‘1’2|。莪术醇为该制
剂中重要活性成分。因此本实验建立以正二十烷为
内标，采用毛细管气相色谱法测定该制剂中莪术醇，
从而更加有效地控制复方莪术油软胶囊的质量。
收稿日期：2004—11—13
作者简介：巩克民(1979一)，男，山东泰安人，在读硕士研究生，2002年毕业于天津医科大学药学院，研究方向为中药材和中成药质量评
价方法以及中药药动学。
*通讯作者赵怀清Tel：(024)23843711—3679E—mail：zhaohql955@sina．corn
万方数据
补气生血方药的提取方法比较
作者： 孙秀梅， 张兆旺， 张华， 惠建国， SUN Xiu-mei， ZHANG Zhao-wang， ZHANG Hua，
HUI Jian-guo
作者单位： 山东中医药大学,山东,济南,250014
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(9)
被引用次数： 3次

参考文献(4条)
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2.杨光义.叶方.王刚.郝新才 半仿生提取法在中药新药研究中的应用[期刊论文]-中国药师 2010(8)
3.黄红娜.张丹参.郑晓霞.薛贵平.李超.张力 甜菜碱的提取、分离及测定含量方法的研究进展[期刊论文]-医学综
述 2009(22)


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