全 文 ：不同因子对华北绣线菊离体培养启动的影响
李晶 ,孙海滨 ,刘强
(黑龙江省林业科学研究所 ,哈尔滨 150081)
摘　要:以华北绣线菊叶片 、茎段及休眠芽为试材 ,利用组织培养技术 ,对影响华北绣线菊离体培养因子
进行了筛选 ,建立稳定的华北绣线菊离体培育体系。结果表明:采用茎段作为外植体诱导植株最佳 ,诱
导率达 52.5%;最佳取材时期为休眠后期;MS+BA0.5mg/L +NAA0.05mg/L 适合华北绣线菊启动分
化 ,分化苗生长势强 ,绿苗生长健壮。
关键词:华北绣线菊;离体培养;影响因素
Influence of Different Factors on Spiraea f ri tschiana
Schneid Leaves to Start of in Vitro Culture
Li Jing ,Sun Haibin ,Liu Qiang
(Forestry Research Institute of Heilongjiang Province ,haerbin , 150081)
Abstract:In this paper , S piraea f ritschiana Schneid leaves , stems , and dormant buds as the test materi-
al , the use of tissue culture technology , Spiraea in no rth China on the impact of facto rs in vitro were
screened to est ablish a s table S pi raea in north China in vitro cultivation system.The result s showed that:
The stem segments as explants induced induction rate of plants as the best 52.5%;the best drawn the
late dormant period;MS + BA 0.5mg/L + NAA 0.05mg/L to start for Spiraea f ri tschiana Schneid
dif ferentiation , differentiation seedling g rowth potential st rong , robus t growth of g reen seedlings.
Key words:S piraea f ritschiana ;Schneid cluture;Vit ro factors
萘乙酸是一水平较好 ,应该是 5 mg/kg 。
5　结论
阿司匹林 、激动素 、磷酸二氢钾 、萘乙酸对油松种
子的发芽势 、发芽率和油松的成苗率影响均有不同 ,根
据实际工作需要做出不同选择。
5.1　发芽势越高越好 ,实际生产可以按照以下配比:
阿司匹林 ,应选 0.2%,激动素应选 10mg/kg ,磷酸二
氢钾应选 0.4%,萘乙酸 ,应选 5 mg/kg 。
5.2　发芽率越高越好 ,实际生产按以下配比进行:阿
司匹林 ,应选 0.1%,激动素应选 10mg/kg ,磷酸二氢
钾应选 0.2%,萘乙酸 ,应选 5 mg/kg 。
5.3 　成苗率可以按照以下配比:阿司匹林 , 应选
0.1%,激动素应选 5 mg/kg ,磷酸二氢钾应选 0.4%,
萘乙酸 ,应选 5 mg/kg 。
5.4　不同物质包衣对油松种子的发芽生长均有不同
程度的影响 ,对种子的生理影响 、发芽后苗木的生长情
况及生理指标变化有待进一步研究。
参 考 文 献
[ 1] 　史锋厚 , 喻方圆 ,沈永宝 , 等.低温贮藏对油松种子的影
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[ 2] 　吴俊林 ,张社奇 , 薛迎利.干旱胁迫条件下激光辐照对
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[ 3] 　林平 ,彭祚登 , 任云卯.水分胁迫对油松种子园自由授
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[ 6] 　史锋厚 ,朱灿灿 ,沈永宝 , 等.PEG 6000 渗透处理对油
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[ 7] 　朱灿灿 ,史锋厚 , 沈永宝 , 等.PEG 处理对油松种子萌
发的影响[ J] .种子 , 2007 , 26(8):63-67.
作者简介:武亚敬(1978-),河北永清人 , 硕士 , 主要从
事林业培育技术和病虫害研究。 E-mail:wy jscau@163.com
*通讯作者:张金香 , 男 , 正高工 ,主要从事林业培育技术研
究。 E-mail:w yjscau@163.com
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第 5期(总第 108) 中 国 林 副 特 产 No.5(GSNO.108)
2010年 10月 Fo rest By-Product and Speciali ty in China Oct.2010
DOI :10.13268/j.cnki.fbsic.2010.05.015
　　华北绣线菊(S piraea f r itschiana Schneid)蔷薇
科 ,绣线菊属 ,多年生落叶灌木。分布于我国河南 、河
北 、山西 、江西等省。华北绣线菊花色雅致 ,耐寒 ,耐
旱 ,耐修剪 ,观赏性好 ,生态适应性强 ,枝繁叶茂 ,小花
密集 ,花色艳丽 ,花期长 ,适于园林绿化应用 ,是良好的
园林观赏植物。
我国拥有丰富的绣线菊属植物资源 ,但是 ,目前国
内很少开展对绣线菊属植物资源的研究工作[ 1] 。肖
芳[ 2]对三种绣线菊引种及抗旱适应性做了深入研究;
赵沛基[ 3]对椭圆叶绣线菊的组织培养进行了研究;张
立磊[ 4]进行彩叶植物金叶绣线菊组织培养研究;李云
峰[ 5]开展了日本绣线菊组织培养研究。
开展华北绣线菊的组织培养技术的研究 ,系统地
掌握其生长发育规律及其物候特点 、生物学特性及繁
殖方法 ,可为其园林植物育种 、扩繁及园林应用提供理
论指导。
1　试验材料与方法
1.1　材料采集及消毒
华北绣线菊试材采自黑龙江省森林植物园生长健
壮的母树 ,采集时期分为休眠初期 、休眠中期和休眠后
期。外植体类型分为叶片 、茎段和休眠芽。接种前将
外植体剪取长约 10cm 的茎段 ,先用洗涤剂作表面清
洗 ,然后放在超净工作台进行灭菌处理后 ,剪取长度约
1.0cm ,并剪去茎段两端多余部分 ,无菌水冲洗并放在
滤纸上吸干表面水分备用。
1.2　试验方法
将消毒好的外植体 ,接种到 MS 、WPM 、LS 、N6 培
养基上 ,并附加 BA 、KT 、2 , 4-D 和 NAA 、IAA , pH 值
5.8 ～ 6.0 ,蔗糖 2%。
1.3　培养条件
采用光照培养 ,光源采用日光灯 ,培养室内白天温
度为 24 ～ 28℃,照明 12 ～ 14h ,光照强度 15 ～ 20μmol/
m
2 · s ,湿度 50%～ 60%。
2　结果与分析
2.1　基本培养基对华北绣线菊分化的影响
将华北绣线菊茎段分别接种在 MS 、WPM 、LS 和
N6培养基中 ,光照培养 ,附加相同的激素及碳源。培
养基是决定组织培养成败的重要因子 ,基本培养基对
芽分化诱导率存在极显著差异。
表 1　不同基本培养基对启动分化的影响
基本培养基 接种材料数 启动时间 诱导率/ %
MS 21 15 85.35
w pm 23 14 68.42
Ls 18 16 42.38
N6 20 13 65.00
　　由表 1 可以看出 ,不同基本培养基对华北绣线菊
启动分化影响显著 ,对于华北绣线菊而言 , MS 作为诱
导分化基本培养基效果最好 ,诱导率可达 85.35%,其
它培养基诱导率明显低于 MS 培养基 ,因此诱导分化
采用MS 作为基本培养基。
2.2　激素种类和浓度对华北绣线菊分化的影响
选择相同基本培养基 ,添加不同种类及浓度的细
胞分裂素及生长素 , 培养 15d左右 ,观察芽分化情况 ,
20d后统计诱导率。
表 2　不同激素种类 、浓度对启动分化的影响
生物调节剂 接种材料数 分化材料数 诱导率/ % 生长势
BA2.0+NAA0.05 20 13 65.00 +
BA2.0+NAA0.1 20 12 60.00 +
BA2.0+IAA0.1 20 14 70.00 +
BA1.0+NAA0.05 20 10 50.00 ++
BA1.0+NAA0.1 20 11 55.00 ++
BA1.0+IAA0.1 20 9 45.00 ++
BA0.5+NAA0.05 20 11 55.00 +++
BA0.5+NAA0.1 20 10 50.00 +++
BA0.5+IAA0.1 20 8 40.00 ++
KT1.0+NAA0.05 20 5 25.00 ++
KT1.0+NAA0.1 20 2 10.00 ++
K T1.0+IAA0.05 20 3 15.00 ++
KT2.0+NAA0.05 20 2 10.00 +
KT2.0+ NAA0.1 20 2 10.00 +
K T2.0+IAA0.05 20 2 10.00 +
2 , 4-D+ BA1.0 20 0 0
2, 4-D+KT 1.0 20 0 0
　　注:生长势:+++为优 , ++为中 , +为差
由表 2可以看出 ,当附加不同种类和浓度的生物
调节剂 ,培养 20d左右发现 ,附加 2 , 4-D 的培养基产生
愈伤组织 ,未出现分化的迹象;附加 BA 和 KT 的培养
基出现不同程度的分化 ,以附加 BA 的培养基分化效
果较好 ,当 BA 为 1 ～ 2mg/L时 ,分化系数较大 ,可达 5
～ 6 诱导率高 , 但分化苗生长势较弱 , 苗较纤细。
BA0.5+NAA0.05适合华北绣线菊启动分化 ,分化苗
生长势强。
2.3　外植体类型对华北绣线菊分化的影响
外植体类型的选择是进行组织培养建立无菌体系
以及植株再生的关键。在同一植物体的各个不同部位
的组织 、器官中 ,其形态发生的能力也有所不同 ,这会
影响到繁殖效果。本试验采用叶片 、茎段和休眠芽作
试材 ,分别接种到相同的培养基中 ,观察启动分化情
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2010年 中　国　林　副　特　产 第 5期
况。
表 3　不同外植体类型对启动分化的影响
外植体
类型
接种
材料数
分化
材料数
诱导
天数/ d
分化率
/ %
叶片 28 0 30 0
茎段 26 21 18 52.50
休眠芽 31 19 25 48.71
　　由表 3 可以看出 ,不同的外植体类型对芽分化影
响显著。尽管所有的植物细胞都具有“全能性” ,但不
是任何细胞都能表现出来 ,所以接种时要选择容易分
化的部位作为试验材料。对于华北绣线菊而言 ,采用
茎段或休眠芽都可以获得再生植株 ,但以茎段诱导为
最好。
2.4　不同取材时期对华北绣线菊分化的影响
外植体取材时期是组织培养成功的主要因素之
一 ,本试验取材时期为休眠初期 、休眠中期和休眠后期
三个时期 ,外植体类型为茎段。休眠初期在 11月中旬
进行 、休眠中期在 1月中旬进行 、休眠后期在 3月中旬
进行。
由表 4可以看出 ,华北绣线菊茎段培养的最佳取
材时期为休眠后期 ,不仅启动时间短 ,而其分化率较
高 ,启动时间为 18d ,而其它时期启动时间需要 1 个月
左右。休眠初期 、休眠中期由于枝条内部营养积累及
生理成熟度较低 ,需要较长时间打破休眠 ,因此导致诱
导时间长 ,分化率低下;休眠后期也就是生长初期 ,植
株开始生长活动植物体将要复苏 ,因此导致诱导时间
较短。
表 4　不同取材时期对启动分化的影响
取材
时期
取材
时间
外植体
类型
接种材
料数
分化材
料数
诱导
天数/ d
分化
率/ %
休眠初期 11月 茎段 36 15 30 41.67
休眠中期 1月 茎段 39 23 27 58.97
休眠后期 3月 茎段 40 25 18 62.50
2.5　不同消毒试剂对华北绣线菊分化的影响
首先从生命力旺盛的母株上选取试材 ,杀死材料
表面的细菌及微生物 ,减少污染的影响 ,但同时又不能
对材料造成伤害。消毒试剂种类及浓度的选择是组织
培养的关键 ,既不能对外植体杀伤过大 ,又要消毒彻
底 ,降低污染。
本文采用 70%～ 75%乙醇溶液 、0.1%氯化汞 、漂
白饱和溶液等消毒试剂对材料进行了不同浓度 ,不同
时间的消毒处理 ,接种 7d后 ,对材料的杀伤率及污染
率进行了观测及调查。
表 5　不同消毒试剂对花粉愈伤组织诱导的影响
消毒
试剂
消毒剂
浓度
消毒
时间
杀伤率
/ %
污染率
/ %
酒精 75% 5s 0 25.8
10s 0.1 21.6
20 s 0.2 10.3
氯化汞 0.1% 3 min 1.5 11.6
5 min 2.3 12.6
10min 3.4 13.2
乙醇+氯化汞 75%+0.1% 10s+3 min 2.1 9.6
10s+5 min 3.8 8.2
10 s+10min 5.2 7.6
漂白粉 饱和溶液 10 min 0.8 12.5
15min 1.2 10.8
25min 1.8 9.4
　　由表 5可以看出 ,对 70%～ 75%乙醇溶液对外植
体的杀伤率虽然较低 ,但污染率较高;由于华北绣线菊
外植体较幼嫩 ,氯化汞是一种重金属化合物 ,对外植体
的杀伤率较高 ,容易对材料产生毒害作用 ,因此不适宜
作为华北绣线菊的表面消毒剂。华北绣线菊表面消毒
最好的方法是采用漂白粉饱和溶液 ,消毒 15min ,无菌
水冲洗 3 ～ 4次 ,效果较好。
3　结论
3.1　选择休眠后期的茎段作为试材 ,不仅诱导时间
短 ,而且诱导率较高。
3.2　不同的外植体类型对芽分化影响显著 ,外植体类
型采用茎段培养 ,成功率较高。
3.3　MS 作为诱导分化基本培养基 ,附加 BA0.5mg/L
和 NAA0.05 mg/L ,诱导分化较好 ,诱导率达 55%,并
且分化苗生长健壮。
参 考 文 献
[ 1] 　金雅琴 , 李冬林.我国绣线菊属植物资源及其开发利用
[ J] .金陵科技学院学报 , 2004.
[ 2] 　肖芳.三种绣线菊引种及抗旱适应性研究[ J] .河北农
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[ 3] 　赵沛基 , 甘烦远 , 沈月毛.椭圆叶绣线菊的组织培养
[ J] .植物生理学通讯 , 2004(1).
[ 4] 　张立磊 , 李保印等.彩叶植物金叶绣线菊组织培养研究
[ J] .经济林研究 , 2005(1).
[ 5] 　李云峰 , 王玉贤.日本绣线菊组织培养[ J] .植物生理学
通讯 , 1987(2).
作者简介:李晶(1963-),女 , 园林研究室主任 , 研究员 ,
从事园林植物方面的研究。主持或参加国家 、省科技重大 、
重点攻关项目 9 项 ,发表论文 20 余篇。
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2010年 李晶等:不同因子对华北绣线菊离体培养启动的影响 第 5期