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擎天凤梨离体培养快繁试验



全 文 :擎天凤梨离体培养快繁试验
桂意云 , 林 纬 , 陶 劲 , 黎起秦
(广西大学农学院 , 南宁  530005)
摘 要: 用擎天凤梨短缩茎做外植体培养 ,通过固液培养对照试验 ,结果表明:在外植体诱导时 ,最佳培养基为 M S
(固 )+ 6 BA 2. 0mg· L- 1 (单位下同 )+ N AA 0. 1;继代增殖培养以 M S(液 )+ 6 BA 1. 0+ IBA 0. 1为优 ,培养 30d,
其增殖倍数可达 5. 8; M S(固 )+ 6 BA 0. 1+ IBA 3. 0为较好的生根培养基。
关键词: 擎天凤梨 ;离体培养 ;快繁
中图分类号: S685. 99; Q943. 1  文献标识码: B     文章编号: 1002— 8161( 2005) 06- 0509- 02
Experiments on the culture in vitro and rapid propagation of Guzmania l ingulata
GUI Yi yun, LIN Wei, TAO Jing , L I Qi qin ( Ag ricultural Colleg e, Gangx i Univ e rsity , Nanning 530005)
Abstract: Th e tissue culture of Guzmania lingulata was studied by compa rison o f liquid and so lid media culture
with the stem o fGuzmania lingulata as the explants. Th e results show ed that the best medium fo r inducing stem
w as M S( so lid medium )+ 2. 0mg / L 6 BA+ 0. 1mg /L NAA. The optimal medium fo r subcultur e multiplica tion
cultur e wa s MS( liquid medium)+ 1. 0mg /L 6 BA+ 0. 1mg /L IBA and the coefficient o f multiplica tion was 5. 8
after culturing fo r 30 day s. The medium good fo r inducing roo ts f rom shoo ts w as M S( solid medium)+ 0. 1mg / L 6
BA+ 3. 0 mg /L IBA.
Key words: Guzmania lingulata ; culture in v itro; rapid propaga tion
  凤梨科植物属于景天酸植物 ,观赏凤梨是近年
来颇受消费者喜爱的一种高档盆栽植物 ,在各地迅
速掀起栽培热潮。观赏凤梨开花期长 ,又集美化环境
和净化空气于一体 ,而且比同是景天酸植物的兰科
植物更易于护养。因此 ,市场需求量特别大。而生产
上通常采用子株或吸芽分株及播种方法进行繁殖 ,
繁殖速度慢。为提高其繁殖速度 ,满足日益增长的市
场需求 ,作者在前人研究的基础上 ,通过对擎天凤梨
栽培种 ( Guzmania l ingulata ` Amaranth’ )进行固
液培养对比试验 ,旨在筛选出一种较为实用的培养
方案 ,同时为其他种的观赏凤梨作固液培养提供部
分理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
用擎天凤梨短缩茎做外植体 ,以 MS为基本培
养基。
1. 2 方法
收稿日期: 2005 05 24
基金项目: 广西农业重点科技项目 (桂农业发 [2002 ]72号 )
作者简介: 桂意云 ,女 , 1980年生 ,在读硕士生 ,植物学专业。
通讯作者: 林伟
  取擎天凤梨短缩茎 ,用自来水洗净后 ,再用蒸馏
水洗 2~ 3次 ,然后用 75%酒精浸泡 3~ 4s,再用
0. 1%升汞消毒 10min,接着用蒸馏水冲洗 5~ 6次 ,
将短缩茎切成小块 ,即可接种。
1. 2. 1 将已消毒的短缩茎接种到固体培养基: M S,
琼脂含量为 5g· L- 1 ,加入不同种类和不同浓度激
素。
1. 2. 2 将已消毒的短缩茎接种到液体培养基: M S,
不加琼脂 ,加入不同种类和不同浓度激素。
1. 2. 3 每种培养基附加白糖 30g· L- 1 , p H值调至
5. 8。培养过程中光照 15h· d- 1 ,光照度 2500lx,培养
温度控制在 28± 2℃范围内。
其中 ,在作外植体诱导时 ,加入的激素为 6 BA
( 2. 0mg· L- 1 )、 NAA( 0. 1mg· L- 1 ) ;在作继代培养
时 ,加入的激素为 6 BA( 1. 0mg· L- 1 )、 NAA( 0. 1
~ 1. 0mg· L- 1 )以及 IBA( 0. 1 mg· L- 1 ) ;在作生根
培养时 ,加入的激素为 6 BA( 0. 1mg· L- 1 )、 IBA
( 2. 0~ 3. 0mg· L- 1 )。
2 结果与分析
2. 1 外植体诱导
将短缩茎切块接种到诱导培养基上 ,经 25d培
·509·广西农业科学  2005年第 36卷第 6期
养 ,均有不定芽产生。
在擎天凤梨外植体诱导时 ,以固体培养基 MS
(固 )+ 6 BA 2. 0+ N AA 0. 1为佳。在此培养基中 ,
外植体产生的芽点数多 ,而且产生的不定芽大小适
中。液体培养 MS(液 )+ 6 BA 2. 0+ N AA 0. 1产生
的不定芽较大 ,但产生的芽点数相对较少 ,不利于工
厂化生产。
2. 2 芽的继代培养
将 1cm左右高的不定芽切下 ,接种到继代培养
基上 ,培养 30d后 ,统计增殖倍数 ,以及分化的不定
芽生长状况。 结果见表 1。继代培养时 ,从增殖倍数
以及产生不定芽的形态特征来看 ,无论是 6 BA与
NAA组合还是与 IBA组合 ,液体培养都优于固体
培养。但从激素组合及配比来看 , 6 BA与 NAA组
合 ,其对比浓度相近增殖倍数大。在相同条件下 , 6
BA浓度不变 , N AA、 IBA浓度较低的情况下 , IBA
优于 NAA,芽较粗壮色泽浓绿 ,效果更好。同时 ,在
不同激素 NAA、 IBA的固液培养对照中 ,含 IBA的
固液对照培养增殖倍数增加非常明显 ,丛生苗的生
长状况良好。从表 1中可得出 , M S(液 )+ 6 BA 1. 0
+ IBA 0. 1可作为擎天凤梨继代培养中一种较好的
培养基配方。
表 1 不同态培养基对擎天凤梨继代培养的影响
培养基 接种株数 (株 ) 增殖倍数 效果
MS(固 )+ 6 BA 1. 0+ N AA 0. 1 150 1. 8 叶色黄绿 ,不定芽粗 ,长势较好
MS(液 )+ 6 BA 1. 0+ N AA 0. 1 150 2. 7 叶色淡黄 ,不定芽细小 ,长势一般
MS(固 )+ 6 BA 1. 0+ N AA 0. 5 150 2. 0 叶色黄绿 ,不定芽中等粗 ,长势较好
MS(液 )+ 6 BA 1. 0+ N AA 0. 5 150 3. 0 叶色黄绿 ,不定芽中粗 ,长势较好
MS(固 )+ 6 BA 1. 0+ N AA 1. 0 150 4. 3 叶色浅绿 ,不定芽中等粗 ,长势较好
MS(液 )+ 6 BA 1. 0+ N AA 1. 0 150 4. 3 叶色淡黄 ,不定芽中等粗 ,长势较好
M S(固 )+ 6 BA 1. 0+ IBA 0. 1 150 2. 1 叶色黄绿 ,不定芽中等粗 ,长势好
M S(液 )+ 6 BA 1. 0+ IBA 0. 1 150 5. 3 叶色深绿 ,不定芽粗 ,长势好
2. 3 根的诱导
将长至 3cm左右的不定芽切下 ,转入生根培养
基中培养。 20d左右即可长出根 ,成为完整的再生苗
(见表 2)。 MS(固 )+ 6 BA0. 1+ IBA3. 0为较好的
生根培养基。从试验配方来看 ,无论是固体或液体培
养基 , 6 BA与 IBA的浓度对比大 ,有利于根的生
成。在采用液体培养基进行生根培养过程中 ,我们发
现 ,不定芽在继代增殖阶段一般都已长至 3cm左右 ,
在将不定芽放入液体培养基中由于难以控制重心 ,
一般都倒浮在液体培养基中 ,尽管培养瓶中作液体
培养的培养液不多 ,但仍会导致部分不定芽因缺氧
而死。因此 ,在作生根培养时 ,如不是用小试管诱导
生根 ,一般不适合用液体培养基培养。
表 2 不同态培养基对擎天凤梨生根培养的影响
基本培养基 6 BA( mg· L- 1) IBA(mg· L- 1 ) 接种株数 (株 ) 效果
M S(固 ) 0. 1 2. 0 150 苗壮 ,叶色浓绿 ,根多而较粗 ,平均根数为 3,效果较好
M S(液 ) 0. 1 2. 0 150 苗细而畸形 ,根细而长 ,效果差
M S(固 ) 0. 1 3. 0 150 苗壮 ,叶色浓绿 ,根多而较粗 ,平均根数为 5,效果好
M S(液 ) 0. 1 3. 0 150 苗细而畸形 ,根细而长 ,效果差
2. 4 移栽
打开瓶盖 ,在阳光不能直射的地方炼苗 2~ 3d,
取出再生苗 ,将培养基小心洗净后移栽到疏松、透
气、不积水的沙质土和腐殖土中 ,均能良好生长。其
成活率可达 92% 。
3 讨论
从擎天凤梨的整个组织培养过程来看 ,根据不
同阶段的培养特性 ,可选择固体或液体培养基作优
化培养。固体培养基尽管可以很好地固定培养物 ,但
被吸收的营养成分主要在培养物周围 ,培养时间越
长 ,培养物周围的营养消耗越大 ,因而影响培养物的
生长。而用液体培养 ,培养基再适当辅以振荡能很好
地均衡培养基中的营养成分 ,有利于培养物的生长。
但在试验过程中 ,固液培养基交替使用是否会引起
变异还需进一步的研究证实。
在擎天凤梨的整个组织培养阶段均需要较强的
光照。如果光照不足 ,丛生苗的短缩茎变长 ,有的甚
至可达几厘米 ,有些丛生苗严重弯曲成畸形 ,具体原
因仍有待研究。
(责任编辑 张进忠 )
·510· 广西农业科学  2005年第 36卷第 6期