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玉竹不同品系多糖含量分析比较



全 文 :人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 2 期
玉竹不同品系多糖含量分析比较
路 放 杨世海 * 田文志*
(吉林农业大学中药材学院·吉林 长春·130118)
奚广生 *
(吉林农业科技学院中药学院·吉林 吉林·132101)
摘 要:目的 通过对八个品系供试玉竹多糖进行比较分析,为玉竹种质资源的搜集、玉竹的育种和规模化
栽培提供基础资料。方法 本试验在相同条件下对八个品系供试玉竹进行了栽培,进行了多糖含量
提取及测定。 结果 吉竹一号叶腋紫、 吉竹一号茎紫在本地栽培后的多糖总量含量最高, 分别为
15.49%和 15.03%。 结论 吉竹一号叶腋紫和吉竹一号茎紫与其它六个品系玉竹相比更适合在吉林
地区进行种植。
关键词:玉竹;玉竹多糖;含量测定
Content of Polysaccharide in Different Polygonatum Odoratum
LU Fang YANG Shihai* TIAN Wenzhi*
(College of Chinese Medicinal Material,Jilin Agricultural University,Changchun 130118)
XI Guang-sheng*
(Department of Chinese Traditional Medicine,Jilin Agricultural Science and Technology College,Jilin 132101)
Abstract:Objective By conducting comparative analysis of polysaccharide of eight strains of Polygonatum
odoratum, this test aims to lay a foundation for collecting germplasm resources, breeding
Polygonatum odoratum in the late period and cultivating it in a large scale. Method The test
extracted and measured polysaccharide content by cultivating eight strains of Polygonatum odoratum
under the same conditions. Results JiZhu No.1 of purple axil (JZPA) and JiZhu No.1 of purple stem
(JZPS) showed the highest polysaccharide content after local cultivation, which was respectively
15.49% and 15.03%. Conclusions: Compared with the other six strains, JZPA and JZPS were more
suitable for planting in Jilin Province.
Key words: Polygonatum odoratum;Polygonatum polysaccharide;Content determination
玉竹(Polygonatum odoratum (Mill) Druce)为百合
科黄精属多年生草本植物,是我国传统中药,是一种
生理活性显著,药用食用均可,具有着生津止渴、养阴
润燥、治疗热病消炎等疗效,有着极大开发价值的药
用植物资源,是卫生部公布的药食兼用 87 种植物之
一[1~4]。 玉竹入药主要成分为多糖、黄酮、甾体皂苷、生
物碱、氨基酸、多种矿质元素等,其中多糖为玉竹药材
主要药效物质和质量控制指标 [5]。 玉竹多糖具有降血
糖、抗氧化应激作用,对四氧嘧啶糖尿病大鼠的胰岛
细胞损伤有明显的保护作用[6]。 随着对玉竹开发利用
的不断扩展,需求量日益增大,据调查,我国医药行业
对于玉竹的需求量约 3000~4000 吨, 出口量约300~
500 万吨,出品创汇每年近 1 亿美元[7],然而多年连续
采挖,使得野生资源十分匮乏[8~9]。所以,将野生玉竹变
成高产、优质的家种尤显重要。 为解决玉竹筛选这一
问题,本试验对八个品系三年生的供试玉竹进行了多
糖提取及测定,为玉竹种质资源的搜集以及后期玉竹
的育种和规模化栽培提供基础资料。
1 材料与方法
1.1 试验地自然条件
基金项目:吉林省科学技术厅项目:“玉竹种质资源收集与优良品种选育研究”,项目编号:2010906。
作者简介:路放,女,硕士研究生,主要从事中药资源与生物技术研究。
* 通讯作者:杨世海,男,博士,教授,博士生导师。 E-mail:jlyangs@163.com.
奚广生,男,教授,主要从事中药资源研究。 zyxyxgs@126.com.
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 2 期路 放等:玉竹不同品系多糖含量分析比较
试验地位于吉林农业科技学院九站校区试验基
地,东经 126°28′,北纬 43°57′,海拔 187m。 属温带山
区气候, 昼夜温差大, 平均气温 5.6℃, 相对湿度为
56%,年平均降水量为 849mm。试验地地势较平坦,土
地条件良好,周围开阔,日照充足,适合玉竹生长。
1.2 试验材料
于 2010年秋季对大玉竹叶腋紫、大玉竹茎紫、大
圆叶叶腋紫、大圆叶茎紫、小圆叶叶腋紫、小圆叶茎
紫、吉竹一号叶腋紫、吉竹一号茎紫八个品系玉竹进
行栽培。畦作,长 30m,宽 1.2m,高 0.3m。栽培密度,行
距 20cm,株距 10cm。 栽培密度为 1.0kg/m2。
试验中选用试剂为 : 无水葡萄糖 (中检所-
110833);乙醇、浓硫酸、苯酚(分析纯,上海试剂厂);蒸
馏水(吉林农业大学制水中心)。
试验中选用试验仪器为:电热鼓风干燥箱(上海
博讯实业有限公司医疗 设备厂 , 型号 :GZX -
9140MBE);双光束紫外可见分光光度计(北京普析通
用仪器有限责任公司,型号:TU-1900);电子天平(北
京赛多利斯科学仪器有限公司 , 型号 :BSA124S-
CW);高速万能粉碎机(瑞安市百信药机器厂,型号:
LG-08A);旋转蒸发仪(西安禾普生物科技有限公司,
250mL);电热恒温水浴锅(上海博讯实业有限公司医
疗设备厂,型号:HHS-11-4)。
1.3 试验方法
1.3.1 产量测定
2013 年 10 月 20 日在玉竹紫黑果期进行采挖,
采挖时采用对角线式采集方法测量不同玉竹的地下
部分产量。
1.3.2 多糖含量测定
2013 年 5 月 20 日开始,采集田间移栽三年大玉
竹叶腋紫、大玉竹茎紫、大圆叶叶腋紫、大圆叶茎紫、
小圆叶叶腋紫、小圆叶茎紫、吉竹一号叶腋紫、吉竹一
号茎紫八个品系供试玉竹根茎,每隔 30 天采集一次。
并采集八个品系供试玉竹一年生,两年生,三年生根
茎。 洗净,50℃烘干,粉碎过 40目筛子,备用。 采用紫
外-可见分光光度法进行玉竹多糖测定。
1.3.2.1 对照品溶液的配制
精密称取无水葡萄糖对照品 60mg, 加蒸馏水溶
解,转移至 100ml容量瓶中定容,摇匀,即得。
1.3.2.2 供试品溶液的配制
精密称取干燥后的玉竹样品粗粉 1g, 置圆底烧
瓶中,加水 100ml,于 80℃热水中浸提 3 次,每次 1h,
滤液用脱脂棉过滤,合并 3 次滤液,减压浓缩,移至
100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀。 精密量取样品溶液
2ml,加 80%乙醇 10ml,搅拌,离心 (1500r/min,1h),取
沉淀加水溶解,置 50ml 量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,
得供试品溶液。
1.3.2.3 标准曲线绘制
精密量取对照品溶液 1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、
3.0ml,分别置 50ml 量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。
精密量取上述各溶液 2ml,置具塞试管中,分别加 4%
苯酚溶液 1ml,混匀,迅速加入 7.0ml 浓硫酸,摇匀,于
40℃水浴中保温 30min, 取出, 置冰水浴中 5min,取
出,另精密量取蒸馏水 2.0ml 加入苯酚试液和浓硫酸
同上操作作为空白对照,照 2010 年版《中华人民共和
国药典》紫外-可见分光光度法 (附录 VA),于 490nm
波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,质量为横坐
标, 绘制标准曲线 (图 1), 求得的回归方程为: A =
0.3357C + 0.0338,R2 = 0.9976。
图 1 标准曲线
Figure 1:The standard curve
1.3.2.4 玉竹多糖含量测定
精密量取供试品溶液 2ml,按照 1.3.2.3 项,自“加
4%苯酚溶液 1ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上
读出样品溶液中玉竹多糖含量(mg),按无水葡萄糖重
量计算。
1.3.3 数据分析
利用 Excel2010 进行数据录入, 采用 SPSS 13.0
进行制图, 组间用 LSD 法进行多重比较、 显著性分
析,统计结果用均数±标准差。
2 结果分析
2.1 三年移栽玉竹根茎中多糖含量比较
采用紫外-可见分光光度法测玉竹多糖含量,5
月至 10月采挖的玉竹根茎作为样品, 测出不同供试
玉竹的多糖含量(%)。
图 A 中▲为大玉竹叶腋紫■为大玉竹茎紫; 图 B 中▲为
大圆叶叶腋紫■为大圆叶茎紫;
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 2 期
多糖含量(%) 根茎干重(kg/m2) 多糖总量
大玉竹叶腋紫 8.11±0.2862 c 1.14±0.0265 e 9.24±0.1218 g
大玉竹茎紫 8.84±0.0854 b 1.22±0.0557 d 10.78±0.3893 f
大圆叶叶腋紫 7.76±0.0866 cd 1.93±0.0400 a 14.98±0.3508 b
大圆叶茎紫 7.42±0.2524 d 1.76±0.0300 b 13.05±0.2623 c
小圆叶叶腋紫 8.87±0.3195 b 1.27±0.0400 cd 11.26±0.1179 e
小圆叶茎紫 9.21±0.0781 b 1.32±0.0300 c 12.16±0.2899 d
吉竹一号叶腋紫 11.92±0.3143a 1.30±0.0361 c 15.49±0.2577 a
吉竹一号茎紫 11.65±0.0854 a 1.29±0.0200 c 15.03±0.2137 b
图 C 中▲为小圆叶叶腋紫■为小圆叶茎紫; 图 D 中▲为
吉竹一号叶腋紫■为吉竹一号茎紫
图 2 不同月份不同品系玉竹根茎多糖含量
Figure 2Polysaccharide content of the curve changes rhizome
如图 2 所示: 图 A、B、D 中 8 月至 9 月多糖含量
均呈增加趋势,9 月至 10 月多糖含量均呈降低趋势,
初步确定 9 月份为图 A、B、D 中六个品系供试玉竹的
最佳采收期; 图 C中 8月至 10月多糖含量均呈下降
趋势,初步确定 8月为图 C中两个品系供试玉竹的最
佳采收期。
2.2 不同年限玉竹多糖比较
图 3 不同年生不同品系玉竹多糖含量
Figure 3 Determination of Polysaccharides Column
如图 3所示,大玉竹叶腋紫、大玉竹茎紫、小圆叶
叶腋紫和小圆叶茎紫四个品系供试玉竹多糖含量均
为:三年生>两年生>一年生,表明此四个品系玉竹在
栽培和经济范围之内可以尽可能大的延长采收时间,
以创造更大价值;大圆叶叶腋紫、大圆叶茎紫、吉竹一
号叶腋紫和吉竹一号茎紫多糖含量均为一年生含量
最高,因此,这四个品系玉竹可以适当缩短栽培时间,
提高经济产值。
2.3 不同供试玉竹产量品质比较
根据不同供试玉竹多糖含量和根茎干重,计算玉
竹多糖总量。
玉竹多糖总量(%okg/7.2m2)=多糖含量×根茎干重
表 1 综合评价分析
Table 1 comprehensive evaluation and analysis
注:P<0.05
从结果可以看出,八个品系供试玉竹多糖含量及
多糖总量都存在显著性差异, 吉竹一号综合品质较
好。 同时, 吉竹一号叶腋紫、 茎紫的折干率分别为
44.73%和 42.58%;大圆叶叶腋紫、茎紫的折干率分别
为 27.47%和 26.83%;小圆叶叶腋紫、茎紫的折干率
分别为 35.44%和 29.05%;大玉竹叶腋紫、茎紫的折
干率分别为 24.33%和 36.03%;吉竹一号在折干率上
也优于其他供试玉竹。
3 结论与讨论
我国玉竹资源分布广泛, 各地均有栽培品种,本
文所取供试玉竹,其采收期多糖含量均满足《中华人
民共和国药典》 规定的玉竹多糖含量不少于 6.0%的
规定,均可入药。 吉竹一号供试玉竹虽然每平方米的
产量和干重并不明显优于其它供试玉竹,但其折干率
优于其他品系,其多糖总量也高于其他品系,其多糖
总量分别为吉竹一号叶腋紫最高,为 15.49%,其次为
吉竹一号茎紫,为 15.03%。 综上所述,吉竹一号较适
合在本地栽培,具有多糖含量高,产量高,品质好等优
点,可用于人工种植,扩大培养,提高经济效益。
*吉林省白石山林业局
参 考 文 献
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