全 文 ：岱山盐场可培养嗜盐菌的多样性
及其产酶活性筛选*
杨丹丹1 摇 黎摇 乾2 摇 黄晶晶1 摇 陈摇 敏1**
( 1杭州师范大学生命与环境科学学院, 杭州 310036; 2杭州宁大卫生检测技术有限公司, 杭州 310004)
摘摇 要摇 从岱山盐场采集样品,利用选择性培养基分离培养嗜盐菌,对盐田环境中可培养嗜
盐菌的多样性及产酶活性进行研究.共分离得到 181 株嗜盐菌菌株,通过真细菌和古生菌两
对通用引物扩增其 16S rRNA 基因,并采用限制性内切酶 Hinf I 进行 ARDRA(amplified rDNA
restriction analysis)多态性分析,共分为 21 个不同的操作分类单元( operation taxonomy units,
OTUs),其中嗜盐细菌有 12 个 OTUs,嗜盐古菌有 9 个 OTUs.选取具有不同酶切图谱的代表菌
株进行克隆测序,BLAST 比对及系统发育分析将嗜盐细菌归于 7 个属,其中嗜盐单胞菌属
(Halomonas)的菌株数占优势,是嗜盐细菌总数的 46. 8% ;嗜盐古菌归于 4 个属,盐盒菌属
(Haloarcula)的菌株数占优势,是嗜盐古菌总数的 49. 1% .对分离菌株的产酶活性进行检测表
明,岱山盐田环境蕴含丰富的产淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等生物活性酶的嗜盐菌, 其中盐盒
菌属产酶菌株数最丰富.研究结果表明,岱山盐田环境中具有较为丰富的嗜盐菌多样性,是筛
选产酶菌株的重要资源库.
关键词摇 嗜盐菌摇 核糖体 DNA扩增片段限制性内切酶分析摇 多样性摇 产酶活性
文章编号摇 1001-9332(2012)11-3103-06摇 中图分类号摇 Q938摇 文献标识码摇 A
Diversity and enzyme鄄producing activity of culturable halophilic bacteria in Daishan Saltern
of East China. YANG Dan鄄dan1, LI Qian2, HUANG Jing鄄jing1, CHEN Min1 ( 1 College of Life
and Environmental Sciences, Hangzhou Normal University, Hangzhou 310036, China; 2Hangzhou
Ningda Health Inspection and Technology Co. Ltd, Hangzhou 310004, China) . 鄄Chin. J. Appl.
Ecol. ,2012,23(11): 3103-3108.
Abstract: Soil and saline water samples were collected from the Daishan Saltern of East China, and
the halophilic bacteria were isolated and cultured by using selective media, aimed to investigate the
diversity and enzyme鄄producing activity of culturable halophilic bacteria in saltern environment. A
total of 181 strains were isolated by culture鄄dependent method. Specific primers were used to ampli鄄
fy the 16S rRNA gene of bacteria and archaea. The operation taxonomy units (OTUs) were deter鄄
mined by ARDRA method, and the representative strain of each OTU was sequenced. The phyloge鄄
netic position of all the isolated strains was determined by 16S rRNA sequencing. The results
showed that the isolated 181 strains displayed 21 operational taxonomic units (OTUs), of which,
12 OTUs belonged to halophilic bacteria, and the others belonged to halophilic archaea. Phyloge鄄
netic analysis indicated that there were 7 genera presented among the halophilic bacteria group, and
4 genera presented among the halophilic archaea group. The dominant halophilic strains were of
Halomonas and Haloarcula, with 46. 8% in halophilic bacteria and 49. 1% in halophilic archaea
group, respectively. Enzyme鄄producing analysis indicated that most strains displayed enzyme鄄produ鄄
cing activity, including the activities of producing amylase, proteinase and lipase, and the dominant
strains capable of enzyme鄄producing were of Haloarcula. Our results showed that in the environment
of Daishan Saltern, there existed a higher diversity of halophilic bacteria, being a source sink for
screening enzyme鄄producing bacterial strains.
Key words: halophilic bacteria; ARDRA; diversity; enzyme鄄producing activity.
*浙江省自然科学基金项目(Y307452)和杭州市科技发展计划项目(20101032B26)资助.
**通讯作者. E鄄mail: mchen63@ 163. com
2012鄄01鄄20 收稿,2012鄄08鄄17 接受.
应 用 生 态 学 报摇 2012 年 11 月摇 第 23 卷摇 第 11 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
Chinese Journal of Applied Ecology, Nov. 2012,23(11): 3103-3108
摇 摇 嗜盐菌(Halophiles)是指生长需要盐,且在一定
盐浓度的环境中生长最佳的微生物[1] . 嗜盐菌的地
理分布相当广泛,常见于盐湖、死海、盐碱地、盐田和
盐矿等高盐环境中,属于极端环境微生物[2] . 长期
的选择压力使嗜盐菌演化形成适应环境胁迫的特殊
细胞结构、生理机能、遗传基因和适应机制,能产生
多种嗜盐功能酶及具有其他特殊性质的生物活性物
质[3],是研究生物进化、生命起源和生物多样性的
重要材料,同时在工业生产中有着广泛的应用[4-5],
成为近年来微生物学研究的热点.
我国幅员辽阔,各种高盐环境十分丰富,为嗜盐
菌研究提供了得天独厚的条件.目前,国内的研究大
多集中在对新疆、内蒙古、云南、西藏等西部地区广
泛存在的天然盐湖、盐碱湖等高盐环境中嗜盐古菌
的调查[6-8],而对我国沿海地区的盐田等人工高盐
环境中包括中度嗜盐菌在内的真细菌的研究相对较
少.岱山地处我国东南沿海舟山群岛,是浙江省最大
的产盐县,自宋朝起就以出产“贡盐冶而闻名,岛上
有盐田 2333郾 3 hm2,为研究盐田环境嗜盐菌的多样
性提供了极好的条件. 本文从岱山盐田采集环境样
品,从中分离培养嗜盐菌,通过 16S rRNA 基因测序
的方法,研究盐田环境中可培养嗜盐菌的多样性,并
从中筛选具有较高产酶活性的菌株,这不仅可以丰富
我国的嗜盐微生物物种资源库和基因库,而且对嗜盐
菌资源的开发利用具有重要的理论和实践意义.
1摇 材料与方法
1郾 1摇 样品来源
2010 年 4 月和 8 月从舟山市岱山盐场(30毅14忆
N,122毅11忆 E)采集卤水及盐田周边土壤样品共 6
份,装于无菌塑料离心管中,4 益暂时保存. 带回实
验室后立即用于菌种分离. 其中盐田土壤样品盐度
为 36,pH 7郾 89;卤水样品盐度为 201郾 1,pH 7郾 2.
1郾 2摇 培养基
RM培养基:MgSO4·7H2O 20郾 0 g·L-1,柠檬酸
钠 3郾 0 g · L-1, KCl 2郾 0 g · L-1,无水 CaCl2 0郾 2
g·L-1,细菌蛋白胨(L 37) 10郾 0 g·L-1,NaCl 视情
况添加(分离筛选时 NaCl 浓度分别设置为 5% 、
10% 、15% 和 25% ), pH 7郾 0,固体培养基加琼脂
15郾 0 g·L-1 . Gibbons 培养基:酸水解酪蛋白 5郾 0
g·L-1,酵母浸出物 10郾 0 g· L-1,胰蛋白胨 5郾 0
g·L-1,柠檬酸钠 3郾 0 g · L-1, KCl 2郾 0 g · L-1,
MgSO4·7H2O 20郾 0 g·L-1,NaCl 100郾 0 g·L-1,pH
7郾 2 ~ 7郾 4.固体培养基加琼脂 15郾 0 g·L-1 .
1郾 3摇 菌株的分离培养
样品直接按十倍稀释法稀释,取适当浓度稀释
液涂布平板.将平板用保鲜膜包好,倒置于 37 益光
照培养箱内培养,约 7 ~ 14 d 后挑取不同形态的单
菌落,反复划线分离 3 ~ 4 次直至获得纯菌株,试管
斜面 4 益保存.
1郾 4摇 菌体 DNA的提取、PCR扩增及 ARDRA分析
1郾 4郾 1 菌体 DNA的提取摇 参见文献[9].
1郾 4郾 2 PCR 扩增 摇 采用细菌通用引物为 P0 (5忆鄄
GAGAGTTTGATCCTGGCTCAG鄄3忆)和 P6(5忆鄄CTACG鄄
GCTACCTTGTTACGA鄄3忆) [10] . 古菌引物为 22F (5忆鄄
ATTCCGGTTGATCCTGC鄄3忆) 和 1540R (5忆鄄AGGAG鄄
GTGATCCAGCCGCAG鄄3忆) [11] . PCR反应条件参见文
献[9-10].
1郾 4郾 3 ARDRA分析摇 取 5 滋L 的 16S rRNA 基因的
PCR产物,分别加入 1 滋L Hinf I、2 滋L 相应缓冲液
和 12 滋L 去离子水,使酶切反应体系为 20 滋L. 于
37 益恒温 3 ~ 4 h.酶切产物用 2郾 0%琼脂糖凝胶电
泳检测,稳定电压 90 V,电泳 30 min.
1郾 5摇 16S rRNA基因扩增产物测序
选取具有不同 ARDRA 酶切图谱的代表菌株,
将 PCR产物送上海桑尼生物公司测序.
1郾 6摇 系统发育树的构建及分析
将得到的 16S rRNA 基因序列在 GenBank 中进
行 Blastn 比对,利用 EzTaxon 查找与该菌株相似性
较高的模式菌株的 16S rRNA 基因序列[11] . 采用
MEGA 5郾 0 软件包中的 Kimura 2鄄Parameter model及
Neighbor鄄Joining法进行聚类分析和构建系统发育进
化树.重复取样 1000 次进行自展值( bootstrap val鄄
ue)分析,以评估系统进化树的拓扑结构稳定性[12] .
1郾 7摇 嗜盐菌多样性分析
定义嗜盐菌 16S rRNA 基因序列相似性小于
98%作为不同的分类单元[13-15],采用 Shannon 指数
(H)计算多样性[16]:
H = - 移P i ln P i
式中:P i 为属于第 i 个种的个体占全部个体总数的
比例.当群落中只有 1 个居群存在时,Shannon 指数
达最小值 0;当群落中有 2 个以上的居群存在,且每
个居群仅有一个成员时,Shannon指数达到最大值.
1郾 8摇 产酶菌株的筛选
将菌种点接于相应的产酶培养基平板上,37 益
光照培养箱中培养 1 ~ 2 周,采用相应的方法观察菌
落周围是否出现透明圈.
4013 应摇 用摇 生摇 态摇 学摇 报摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 23 卷
2摇 结果与分析
2郾 1摇 嗜盐菌的分离
从盐田采集样品共 6 份,其中 S1、S2、S3 和 S4 为
土壤样品,W1 和 W2 为卤水样品(表 1). 共筛选分
离到 181 株嗜盐菌菌株.通过最适生长 NaCl 浓度试
验发现,其中 124 株为中度嗜盐菌,57 株为极端嗜
盐菌.筛选得到的嗜盐菌菌落直径约 1 ~ 5 mm,大多
数菌落表面湿润、有光泽、边缘整齐,部分菌落中间
隆起.其中中度嗜盐菌菌落颜色多为黄色、白色、褐
色,少数有红色;而极端嗜盐菌菌落颜色多呈现深红
色、橘红色、粉红色,少数为白色.
2郾 2摇 嗜盐菌多样性分析
纯化后的菌株分别用细菌通用引物和古菌引物
进行 16S rRNA基因的 PCR扩增,限制性内切酶 Hinf
表 1摇 分离自不同样品的嗜盐菌统计表
Table 1摇 Statistics of isolates from samples
样品
Sample
中度嗜盐菌
Moderately
halophilic bacteria
极端嗜盐菌
Extremely
halophilic bacteria
总计
Total
S1 32 19 51
S2 23 15 38
S3 28 0 28
S4 25 0 25
W1 5 9 14
W2 11 14 25
总计 Total 124 57 181
I对 PCR产物进行酶切分析.结果显示,嗜盐细菌可
分为 12 个 OTUs,嗜盐古菌分为 9 个 OTUs(图 1).
摇 摇 根据 ARDRA 分析结果,从每个 OTU 中选取代
表菌株进行 16S rRNA 基因序列的测定. 嗜盐细菌
16S rRNA基因序列相似性及系统发育分析结果分
别见表 2 和图 2.结果表明,分离得到的 124 株嗜盐
细菌分属于 2 个不同的分支. 第 1 分支为变形菌门
(Proteobacteria),包括嗜盐单胞菌属(Halomonas)、
假单胞菌属(Pseudomonas)、海杆菌属(Marinobact鄄
er)、产微球茎菌属(Microbulbifer)和 Idiomarina 属共
5 个属.第 2 个分支属于厚壁菌门(Firmicutes),包括
喜盐芽孢杆菌属(Halobacillus)和 Piscibacillus属共 2
个属.其中:有 58 个菌株为嗜盐单胞菌属,占筛选到
的嗜盐细菌总数的 46郾 8% ;有 28 株菌株为喜盐芽
孢杆菌属,占筛选到的嗜盐细菌总数的 22郾 6% . 嗜
盐细菌的 Shannon指数(H)为 1郾 527.
图 1摇 限制性内切酶 Hinf I 酶切嗜盐菌 16S rRNA 的琼脂糖
凝胶电泳图
Fig. 1摇 Agarose gel electrophoresis of amplified 16S rRNA gene
digested with Hinf I from halophiles郾
Mr:2000 bp DNA标准分子量 2000 bp DNA ladder; 1 ~ 12:嗜盐细菌
ARDRA类型 ARDRA patterns of bacteria; 13 ~ 21:嗜盐古菌 ARDRA
类型 ARDRA patterns of archaea郾
表 2摇 岱山盐场可培养嗜盐菌测序比对结果
Table 2摇 Results of the best march to known species of the halophilic strains isolated from Daishan Saltern
类群
Microbe group
代表菌株
Representative
strain
基因登录号
GenBank
accession No郾
最近缘物种(基因登录号)
Closest relatives in NCBI
(GenBank accession No郾 )
最大相似度
Max郾 identity
(% )
变形菌门 ZSTA103 JQ068935 Halomonas ventosae AI12T(AY268080郾 1) 98郾 4
Proteobacteria DSTB302 JQ068932 Halomonas alimentaria YKJ鄄16T(AF211860郾 1) 97郾 9
ZSFB101 JQ068939 Halomonas shengliensis SL014B鄄85T(EF121853郾 1) 99郾 8
DSFBL206 JQ068934 Halomonas xinjiangensis YIM91125T(EF674852郾 1) 97郾 1
DSTB403 JQ068933 Pseudomonas halophila DSM 3050T(AB021383郾 1) 99郾 7
ZSTB204 JQ068936 Marinobacter flavimaris SW鄄145T(AY517632郾 1) 98郾 9
ZSTB201 JQ068938 Microbulbifer halotolerans YIM 91118T(EF674853郾 1) 99郾 5
DSTB203 JQ068931 Idiomarina fontislapidosi F23T(AY526861郾 1) 98郾 1
厚壁菌门 ZSTC202 JQ068937 Piscibacillus salipiscarius RBU1鄄1T(AB194046郾 2) 98郾 9
Firmicutes ZSTB206 JQ068929 Halobacillus alkaliphilus FP5T(AM295006郾 1) 99郾 5
DSTB101 JQ068930 Halobacillus faecis IGA7鄄4T(AB243865郾 1) 99郾 3
ZSFA201 JQ068940 Halobacillus trueperi DSM 10404T(AJ310149郾 1) 99郾 5
广古菌门 DSTD103 JQ068942 Halorubrum coriense Ch2T(L00922郾 1) 99郾 0
Euryarchaeota DSTD307 JQ068944 Halorubrum lipolyticum 9鄄3T(DQ355814郾 2) 97郾 8
DSFD110 JQ068947 Haloterrigena thermotolerans PR5T(AF115478郾 1) 99郾 7
DSTD201 JQ068943 Haloferax alexandrinus TMT(AB037474郾 2) 99郾 3
DSTD402 JQ068945 Haloarcula japonica JCM 7785T(AB355986郾 1) 99郾 5
DSTD101 JQ068941 Haloarcula salaria HST01鄄2RT(FJ429317郾 1) 98郾 8
DSFD108 JQ068946 Haloarcula quadrata 801030 / 1T(AB010964郾 1) 99郾 2
DSFD405 JQ068950 Haloarcula amylolytica BD鄄3T(DQ854818郾 2) 99郾 2
DSFD111 JQ068948 Haloarcula argentinensis arg鄄1T(D50849郾 1) 99郾 0
501311 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 杨丹丹等: 岱山盐场可培养嗜盐菌的多样性及其产酶活性筛选摇 摇 摇 摇 摇
图 2摇 基于 16S rRNA基因序列构建的岱山盐场嗜盐细菌的
系统发育进化树
Fig. 2 摇 Phylogenetic tree of halophilic bacteria strains isolated
from Daishan Saltern based on 16S rRNA gene sequence郾
摇 摇 嗜盐古菌 16S rRNA 基因序列相似性及系统发
育分析结果分别见表 2 和图 3.分离得到的 57 株嗜
盐古菌属于广古菌门 ( Euryarchaeota) 盐古菌纲
(Halobacteria)盐古菌目(Halobacteriales)盐古菌科
图 3摇 基于 16S rRNA基因序列构建的岱山盐场嗜盐古菌的
系统发育进化树
Fig. 3 摇 Phylogenetic tree of halophilic archaea strains isolated
from Daishan Saltern based on 16S rRNA gene sequence郾
(Halobacteriaceae)的 4 个属,即盐盒菌属、盐红菌属
(Halorubrum)、盐富饶菌属(Haloferax)和盐陆生菌
属(Haloterrigena),其中盐盒菌属有 28 个菌株,占筛
选到的嗜盐古菌总数的 49郾 1% . 嗜盐古菌的 Shan鄄
non指数(H)为 1郾 156.
2郾 3摇 产酶活性菌株筛选
对 181 株嗜盐菌进行产酶活性测定,共得到 62
株具产酶活性的菌株,分布在喜盐芽孢杆菌属等
表 3摇 嗜盐菌产酶活性分析
Table 3摇 Enzyme鄄producing activities of the halophiles strains
类群
Microbe
group
耐盐范围
NaCl range
(% )
分离总株数
Number of
isolate
产淀粉酶株数
Number of
amylase鄄
producing strain
产蛋白酶株数
Number of
proteinase鄄
producing strain
产脂肪酶株数
Number of
lipase鄄
producing strain
喜盐芽孢杆菌属 Halobacillus 2 ~ 20 28 9 16 8
嗜盐单胞菌属 Halomonas 2 ~ 15 58 4 1 1
海杆菌属 Marinobacter 2 ~ 15 8 1 1 0
Idiomarina 0郾 5 ~ 15 11 2 2 1
产微球茎菌属 Microbulbife 2 ~ 15 8 2 0 0
盐盒菌属 Haloarcula 15 ~ 35 28 19 0 20
盐陆生菌属 Haloterrigena 15 ~ 35 3 2 0 0
盐红菌属 Halorubrum 15 ~ 35 17 0 0 2
盐富饶菌属 Haloferax 15 ~ 30 9 0 0 7
总计 Total 170 39 20 39
6013 应摇 用摇 生摇 态摇 学摇 报摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 23 卷
9 个属中(表 3). 其中产淀粉酶菌株 39 株,产蛋白
酶菌株 20 株,产脂肪酶菌株 39 株,未能筛选到有明
显产纤维素酶活性的菌株. 在 62 株产酶菌株中,能
同时产淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶的菌株有 3 株,同时
产脂肪酶与蛋白酶菌株 5 株,同时产淀粉酶和蛋白
酶的 7 株,同时产淀粉酶和脂肪酶的 18 株.从种属
分布来看,产淀粉酶菌株主要分布于盐盒菌属,共
19 株,占产淀粉酶菌株总数的 48郾 7% ;产脂肪酶菌
株同样主要分布于盐盒菌属,共 20 株,占产脂肪酶
菌株总数的 51郾 3% ;产蛋白酶菌株主要归于喜盐芽
孢杆菌属,共 16 株,占产蛋白酶菌株总数的 80% .
3摇 讨摇 摇 论
本研究对于筛选到的可培养嗜盐菌菌株建立系
统发育树,结果表明,这些菌株分属于 3 个不同的分
支.第 1 分支为变形菌门(Proteobacteria) 酌鄄变形菌
纲(Gammaproteobacteria)的交替单胞菌目 (Altero鄄
monadales)、假单胞菌目(Pseudomonadales)和海洋
螺菌目(Oceanospirillales).其中大部分菌株属于海洋
螺菌目盐单胞菌科(Halomonadaceae)的嗜盐单胞菌
属;有部分属于假单胞菌目假单胞菌科(Pseudomona鄄
daceae)的假单胞菌属;还有属于交替单胞菌目交替
单胞菌科(Alteromonadaceae)的海杆菌属和产微球茎
菌属,以及 Idiomarinaceae科的 Idiomarina属.
第 2 个分支属于厚壁菌门(Firmicutes).包括了
芽孢杆菌纲(Bacilli)芽孢杆菌目(Bacillales )芽孢
杆菌科(Bacilloceae)的喜盐芽孢杆菌属和 Piscibacil鄄
lus属的成员.
第 3 个分支的菌株属于极端嗜盐古菌,分属于
广古菌门(Euryarchaeota)盐古菌纲(Halobacteria)盐
古菌目 (Halobacteriales)盐古菌科 (Halobacteriace鄄
ae)的盐盒菌属、盐红菌属、盐富饶菌属以及盐陆生
菌属.
因此,从系统发育分析来看,岱山盐场分离的可
培养嗜盐菌显示出较明显的多样性,嗜盐细菌和极
端嗜盐古菌均有发现,且种类丰富.结合已报道的研
究结果分析,嗜盐单胞菌属、喜盐芽孢杆菌属、盐红
菌属等在我国不同地域的盐田环境中都有分
离[6,17-19],说明是分布较为广泛的嗜盐菌类群.但与
此同时,不同地域盐田独特的环境条件也造就了独
特的嗜盐菌分布特点,例如,本研究中分离的海杆菌
属、Piscibacillus 属、 Idiomarina 属、盐富饶菌属和盐
陆生菌属等嗜盐菌类群在其他盐场嗜盐菌研究中还
未见报道.此外,一些菌株与其系统发育关系最密切
的已知物种典型菌株之间的 16S rRNA 基因序列都
有一 定 差 异, 例 如, DSFBL206 与 标 准 菌 株
Halomonas xinjiangensis YIM91125T 的相似度仅为
97% .这些结果都揭示了岱山盐场独特的嗜盐菌资
源及多样性.
1985 年 Kushner等[20]提出,根据嗜盐菌对最适
生长 NaCl 浓度的不同,可将嗜盐菌分成生理上不同
的两类, 即生长最适 NaCl 浓度为 0郾 5 ~ 2郾 5
mol·L-1的中度嗜盐菌,以及生长最适 NaCl 浓度为
2郾 5 ~ 5郾 2 mol·L-1的极端嗜盐菌.一般来说,中度嗜
盐菌是真细菌,极端嗜盐菌大多属于古生菌.早期对
嗜盐菌的研究主要集中在嗜盐古菌,因为它们具有
一些独特的生理特征,如:高度盐化的原生质;对盐
有特殊要求的蛋白质;独特的电光能驱动的质子和
氯离子泵;细菌视紫红质等[21] .现在,人们已开始关
注对中度嗜盐菌的研究,因为与极端嗜盐菌相比,中
度嗜盐菌的分布更为广泛,对营养要求较低,更易于
适应环境,也更具应用价值[3] . 与此同时,对中度嗜
盐菌的研究可以利用以细菌为基础发展起来的分子
生物学方法和手段,通过对它们的研究来解答有关
耐盐机理等方面的问题变得更加容易[22] .在对岱山
盐田环境样品进行嗜盐菌分离时,我们设置了从
5%到 25%的不同 NaCl浓度的培养基,由此不仅分
离到了极端嗜盐菌,还分离了大量的中度嗜盐菌或
耐盐细菌,其目的是扩大分离范围,以便从中筛选包
括中度嗜盐菌在内的更多的具潜在应用价值的嗜盐
菌菌株.
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作者简介摇 杨丹丹,女,1985 年生,硕士研究生.主要从事环
境微生物研究. E鄄mail: sdyangdandan@ 163. com
责任编辑摇 肖摇 红
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