全 文 ：第 1 3卷
19 9 1年
第 3期
8 月
育 林 农 业 大 学 学 报
J 议盯囚 过 J 口血, A砂沁以奴犷目 U川明留目 t y
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3
19 9 1
关于蔓越桔种间起源关系的
过氧化物酶同工晦研究 ’
曲路平 郝 瑞 李亚东 `
(特产园艺系)
摘哭 作者通过对过氧化物酶同工酶的研究 ,提出了大果蔓越枯 (认怕` ` 断 . “ 草训 , 资 L )和六
倍体蔓越枯 .v[ 加卯月户 ( .L & L ) 冉上咖明」起源于小果芡走盆枯〔.v
~
脚 ( 1,u r cz ) I匆比〕及
小果蔓越桔和美国蔓越桔V( .
~
脚 越 .t )平行起源的假设。
关被词 蔓越桔 种间起源关系
蔓越桔属杜鹃花科越桔亚科越桔属 (Va c
~
)
,全世界报道有四种 : 小果蔓越桔 ( .v
。妙~ , ( Tur c z ) Ho k )
,大果蔓越枯v( . “ 梦侧沁。 留 L . ) ,美国蔓越桔 ( v . ~ ~ 卿 iA t
.
)
和六倍体蔓越桔 V( . 加夕喇碎 (L . 乙 L . ) 人加kas ) . 目前美国蔓越桔在美国已有相当规模的
栽培 lj[ ,大果蔓越桔在苏联等国家也有栽培的探索图 . 我国关于蔓越桔的研究工作较少 ,
过去文献只记述我国有二种 : 小果蔓越桔和大果蔓越枯 . 作者在 1 9 8 6年研究我国长白山
蔓越桔属植物染色体数目时亦发现了六倍体蔓越桔图 。 蔓越桔植物种间的植物学形态相
似处较多 ,关于蔓越桔属植物种间起源关系有不 同的假设 ,但都基于外部形态和地理变迁
的推测 4[, 幻 。 作者通过对我国蔓越桔植物的过氧化物酶同工酶的研究和实地调查 ,提出了
一些关于蔓越桔植物种间起源关系的新观点 ,供有关人员参考 。
1 材料和方法
从长白山漫江附近的锦江甸子采集小果蔓越桔种子及大果蔓越桔和六倍体蔓越桔混
生群体种子 , 两类种子经层积处理后播种 。 从予叶下部剪取 2 0 m s 实生苗 ( `一 6 片叶 ,包
括子叶 ) ,加 0 . 6 时声 7 . 2 的 1 1/ s m o l 磷酸盐缓冲液 ,立即在冰浴条件下研成匀浆 。 在 4℃
条件下保存 12 h , 以 4 0 09 r /恤离心 10 m in ,取上清液 ,在 2 ℃条件下保存备用 。过氧化物酶同工酶的分离采用平板聚丙烯酞胺凝胶等电聚焦电泳法 . 胶浓度 5 % ,两
性 电解质 PH 3 . 5 ~ 1 0( 上海生化研究所产 ) , 正极电极液为 0 . IM H 3 P O ` , 负极为 。. IM
N a 0 H
。 电泳在 l℃条件下进行 ,整个电泳过程保持功率 25 w . 初始电流为 75 0 1A ,预电泳
2 0 m in 后电流降至约 50 n b气 ,这时在距阴极 I cm 处加样 ,加样量为 4 层 0 . S X l cm 的含
饱和试样的滤纸片。 继续电泳至 电流不再下降为止 (2 。,一 2 nIA )
. 用联苯胺染色法染色 6
而n ,蒸馏水漂洗胶板 ,保存在 7 %醋酸中 ,酶带充分变棍,时照像 ,绘图 。
. 收稿日期 : 19 9 0一的一 0 4
吉 林 农 业 大 学 学 报 一99 1年
2结果和讨论
么 1蔓越桔种间起源关系的探讨
关于蔓越桔种间的起源关系 , C a m p ( 1 9 4 4 )认为美国蔓越桔是最原始种 , 此种经过一
系列体积缩小的突变而分化出小果蔓越桔 ,从而使蔓越桔的分布地带大大北移 ,大果蔓越
桔起源于小果蔓越桔和美国蔓越桔未减数配子的结合 ;六倍体蔓越桔是大果蔓越桔的减
数和未减数配子的结合闭 。 H a s e ur p ( 1 9 4 0 )认为六倍体蔓越桔是小果蔓越桔和大果蔓越桔
未减数配子的结合困 。 A h ok as ( 1 9 7 1 )认为六倍体蔓越枯的这两种起源方式都有可能 6j[ . 他
指出如果六倍体蔓越桔是近期起源 ,可能的遗传组成如下 :
饥“ , o c口 , 洲习
” 协 C, 。心口 ,脚月
V
V
. 璐歹`佣哪
V
.
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州区。 M挂 o
M i
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M i
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M扛。 N区。
电泳结果表明 ,小果蔓越桔幼苗和四倍体与六倍体蔓越桔混生幼苗的过氧化物酶同
工酶各有 6 条酶带 , 出现于 L 和 H : 两个区段 ,酶带在酶谱的位置完全吻合 (图 1 ) 。 已有研
究证明 , 异源多倍体的同工酶带较双亲各自的酶带多川 . 蔓越桔过氧化物酶同工酶酶谱的
吻合表明 : 其多倍体的同源起源可能性很大 。 此结果使我们有如下两个推测 :
第一 , 四倍体和六倍体的蔓越桔完全由小果蔓越桔起源 . 采用 A ho kas 的表达方式可
表示如下 :
犷.
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。。 。 , 洲 .
.V 盯梦哪。甲
.V 加尹分 .杯`
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六倍体蔓越桔的后一种结合方式 (即完全由四倍体蔓越桔起源 )的可能性更大 。 据我
们调查 ,在漫江的同一产地 ,小果蔓越桔的花期较大果蔓越桔的花期早 10 天左右 ( rE vi 的
试验为 6 天困川运g e ur p 的观察为 1一 2 周 s[] ) , 前者的花 已萎蔫 , 后者的花才始放或未开
放 。
第二 ,小果蔓越桔和美国蔓越桔是平行起源于不同地理纬度而形态相似的两个种 。有
三种现象支持这个推测 。 l) 在其它越桔属植物中 ,没有抗寒力差异如此之大 (小果蔓越桔
能抗 < 一 45 ℃低温 ,美国蔓越桔抗低温 > 一 30 ℃ ) ,但起源于相同地点的同倍体间突变类
型 , 其它植物中也未见实例报道 ; 2) 如果小果蔓越桔和美国蔓越桔几经接触闭 , 使二者未
减数配子相结合的这一机率很低 (0 . 0 1 9 6% )l[ 〕的事件发生 ,而至今未发现二者减数配子
结合的机率相对高的二倍体杂种 (已经证
是一个很难解释的间题 , 3) 大果蔓越桔所
植物中同倍体的种间可以自由杂交 l[ 〕 )
介于小果和美国蔓越桔的一些中间性状
(如花梗上苞片的位置 ,花梗有毛或近似无毛 )也可能通过突变或染色体加倍由小果蔓越
桔获得 . 所以 ,我们认为小果蔓越桔和美国蔓越桔平行起源的假设是可能的 。
2
.
2 越桔属与蔓越桔属 (浇 ,co ~ )的关系蔓越桔属是否作为一个独立的属 ,早期学者就有争议 。 石汤以“ ( 1 9 4 4 )研究认为 ,蔓越桔
第 13 卷 第 3 期 曲路平等:关于荃越枯种间起源关系的过氧化物酶同工酶研究
属应归于越桔属 , 因为 : 1) 在蔓越桔和越桔之间存在中间的形态类型 (如 V . 。勺 . ~
, 叭
诚红 由. 等 ) , 因此没有重要的分类特征把蔓越桔与越桔的所有种截然分开 ; 2) 由 hs 诫 :
等把蔓越桔 V( .
~ ,
, 佣 )与越桔 ( V .磁一山 . 和 V . 。呐二 )成功地进行了杂交 ; 3) 蔓越桔和越桔都有同样的染色体基数和表现有二倍体 、 四倍体和六倍体一 系列变化类型 l3[ 。 国
内外许多学者也都采用了这种分类法 .s[ 。〕。
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图 1 蔓越桔 、 笃斯越桔、 红豆越桔过氧化物酶同工酶图谱
小果蔓越枯 2 四倍体和六倍体蔓越枯 3 红豆越桔 4 四倍体笃斯越枯 5 二倍体笃斯越枯
为 了探讨二属间的关系 , 我们研究同工酶时 , 同样条件下电泳了笃斯越桔 V( . 诫沙
。~ )和红豆越桔 V(
. 。访一诚泊 l )幼苗试样 ,发现三种类之间有三条共有酶带 (图 l ) ,这个
现象作者认为支持了两属间无本质区别的提法 。 在本文中也采用 了越桔属这一统称 。 吴
安仁等通过柑桔类植物过氧化物同工酶酶谱的研究 ,认为金柑属 、 积属和柑桔属都分别具
有属的特征带阂 。 是否本文这几种植物的三条共有酶带为越桔属植物的特征带有待深入
研究 。
参 考 文 献
1 G al et at J G
.
nI .J J创nj kC (. 妇 ) Ad v an . 加 F r过 t Br 以过山 g , nI d访n a : P ur d比 U n i v e面 t y rP 闭 , 1 9 7 5 : 1 5 4~ ] 9 6
2 V a k址倒的 e e v a Z M et 公 . H o rt . A以 r . 1 9 8 5 , 5 5 : 2 4 9 4
3 曲路平等 国内新纪录种— 六倍体蔓越枯及其利用· 吉林农业大学学报 , 19 9) , ] 3( 1) : 28 ~ 30
4 C勃m P W 凡 加U. T切r e y 致月 . cl u b , 1 9 4 4 , 7 1 : 4 2 6 ~ 4 37
5 比即川 P O . H以陷出砚朋 , 19 4 0 , 2 6: 3 9 9~ 4 1 0
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H份峨迪 , 1 9 7 1 , 6 6 : 12 3~ 1 35
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VO I
.
13 卜 1 0.3 E G L NS IH A巴刃卫人C 喀 9 3
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, 肛 a in 讹电ht ep r isP ke , Pl a n t he 吵 t a n d s P止 e l en s ht hs ou ld be OC sn i der ed at 钾 r -
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ID E N T I凡C A T I O N O F A N E VV B A C T E F J A L R O U N D
S P口 r O F C U C U] M B E R S
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A n e w b a c t e ir a l le 时 spo t o f e u c u m be r s w as f ou dn in J Uin P r o v in c e u n d e r Pl as 血 or gr e e -n
h o u , co dn i t ion
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沉如 ( B r y a n ) D ye . hT is 扭 a n ew d l s e 别姆 in J il i n
讲 o v 二n C e .
K e y W or 山 : C u c u m be r , b a c te r at , r o u dn s po t , 叉 d林幼。伽哪
A S T U D Y O N O F J G IN R砍 , A T 10 N S B E I .场呢E N S P E cI E S
O F G R A N B E RJ I[ E S B Y P E R以心D A S E IS O Z Y M E[
Qu L卯 in g e t a l ·
T ll e pe r o x id ase is
o z y m e in t h e se ed l in gs o f so m e Va e南~ s pe ic es 、犷a ` a n a ly s司 b y 助 l 如 -
e l ec t or f o c us in s m e th o d
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o t o肛aj m o f ht e e猫汀m e , ht e h刀为ht e s is ht a t
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L a n d V
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ha g叶。杯《 L . &. L . ) A h o kaS w er e o ir g ir la edt 加m V . 二汤。 -
ca 尹那 s ( uT r cz ) H o o k 吝 a n d V . 仍添 o ca ,洲吕 ( T ur cz ) Ho k an d V . 彻你~ 脚掀 A i t
.
w e er o r ig in a t de
se 阵 r a te ly . T h e t h e o r y 15 d i f fe r e n t f r o m th e o ht e sr .
K e y W
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: e ar n be ir es
, o r诬g i n r e l a it on
C H R O M ( ) S OM E N U M B[ E R S O F S EV E R A L M E[ D I C IN A L P L A N T S
T o lg o r
T h e e h r o m o so m e un m b
e sr o f s ix s ep c i e s m e id c a l P】a n ts ` 加 d y e e l ls
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r
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A m o n g t h em
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t he hc r o m Q` o 们n e n u m be sr o f s 阅加沁阅 “ ” 了闭邵 乃加丙.
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e r e名u l st rP vo id e a t h oe er ti ca l ve i d en ce f or int
r o d u c ln s
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, a n d s tr a in se l e e t in g of m
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·
a c l lm a ti n s
, e las i行in g , d i f f er e n t ia t -