作 者 :鲍涵
期 刊 :广州中医药大学 2012年 10期 页码:75
关键词:毛冬青药材;Ilexoside E;Pubescenoside A;心肌细胞;缺氧/复氧;
摘 要 :目的: 通过体外培养大鼠乳鼠心肌细胞,构建心肌缺氧/复氧损伤模型,在细胞水平模拟大鼠心肌缺血/再灌注损伤,研究毛冬青药材不同部位与成分对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。 方法: 取出生1-3天以内的SD大鼠乳鼠心肌组织,用0.1%胰蛋白酶和0.04%II型胶原酶消化,将心肌细胞收集到含10%马血清和7%胎牛血清的DMEM培养基中,用差速贴壁分离法和5-溴脱氧尿苷相结合分离、纯化心肌细胞。采用α-actin抗体进行免疫组化染色鉴定心肌细胞,用台酚蓝染色检查心肌细胞成活率。采用CCK-8结合Caspase-3/7检测不同缺氧/复氧时间细胞凋亡RFU值,建立缺氧/复氧...