全 文 ：·生物技术· 北方园艺２０１０（１８）：１５４～１５６
第一作者简介：商宏莉（１９６５－），女，硕士，副教授，现从事遗传育种
和生物技术研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｏｎｇｌｉｓｈａｎｇ０５０７＠１６３．ｃｏｍ。
通讯作者：曾宋君（１９６５－），男，副研究员，现主要从事植物遗传育
种和生物技术研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｅｎｇｓｏｎｇｊｕｎ＠ｓｃｉｂ．ａｃ．ｃｎ。
基金项目：广州市重大科技攻关计划资助项目（２００４Ｚ１－Ｅ００４１）。
收稿日期：２０１０－０５－２５
姜荷花新品种“红观音”的组织培养和快速繁殖研究
商 宏 莉１，陈 希１，２，陈 之 林２，曾 宋 君２
（１．四川师范大学 生命科学学院，四川 成都６１００６８；２．中国科学院华南植物园，广东 广州５１０６５０）
摘 要：以姜荷花新品种“红观音”球茎为外植体进行组织培养与快速繁殖研究。结果表明：
外植体经灭菌处理后接种到ＭＳ＋ＢＡ ２～３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．２～０．３ｍｇ／Ｌ培养基上，均能较好地
诱导休眠芽的生长；丛生芽在１８号培养基（花宝２号１．５ｇ／Ｌ＋ＭｇＳＯ４０．１５ｇ／Ｌ附加ＭＳ铁盐及
其维生素和其它有机物＋椰子汁１００ｍＬ／Ｌ）＋ＴＤＺ ０．５ｍｇ／Ｌ培养基上增殖效果最佳，增殖系数
可达３．７３，且玻璃芽少；生根培养基以１８号培养基＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ／Ｌ效果最好，生根率为９２％；
试管苗在以园土∶泥炭土∶珍珠岩＝１∶１∶１（Ｖ／Ｖ／Ｖ）的栽培基质中，成活率可达９５％以上。
关键词：姜荷花；观赏植物；组织培养；快速繁殖
中图分类号：Ｓ ６８２．１＋９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１０）１８－０１５４－０３
姜荷花（Ｃｕｒｃｕｍａ ａｌｉｓｍａｔｉｆｏｌｉａ Ｇａｇｎｅｐ．），姜科姜黄
属多年生草本植物。原产于泰国清迈，是一种球根类花
卉，因其苞片酷似荷花而得名［１］。姜荷花花型独特，花
色美丽、鲜艳，花期持久，是一种新型的鲜切花品种，观
赏价值高，品质优良，具有很高的经济效益，开发利用前
景广阔［２］。姜荷花通常以分株或球根进行繁殖［１，３］，也
能利用组织培养的方法进行离体快速繁殖，快速获得大
量的种苗，以满足市场的需求［３－４］。姜荷花新品种“红观
音”（Ｃ．ａｌｉｓｍａｔｉｆｏｌｉａｃｖ．Ｇｕａｎｙｉｎ）是从姜荷花中芽变出
来的新品种，花色比姜荷花红艳，观赏价值更高，但由于
数量极少，采用常规繁殖，无法在短期内获得大量的种
苗，利用组织培养离体繁殖无疑是最有效的规模化繁殖
方法。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
姜荷花新品种“红观音”是从姜荷花“清迈粉”大田
种植中芽变出来的新品种，花色比姜荷花红艳，观赏价
值更高，通过几代种植后发现其性状稳定。该试验以中
国科学院华南植物园实验基地的“红观音”的球茎为外
植体。
１．２ 试验方法
１．２．１ 初代培养 １１～１２月从大田中挖取叶片快枯黄
时的“红观音”球茎，切除球茎下部的须根和贮藏根，并
剥去外表膜被，用自来水洗净后，在超净工作台上先用
７５％酒精浸泡１ｍｉｎ后，放入０．１％的升汞溶液消毒
１０ｍｉｎ；或采用二步消毒法：即先放入０．１％的升汞溶液
消毒５ｍｉｎ，无菌水冲洗２～３次后再放入０．１％的升汞
溶液消毒５ｍｉｎ；然后再用无菌水冲洗４～５次后用消毒
滤纸吸干表面水分。在无菌条件下，将消毒过的球茎分
切成长、宽约为１．０ｃｍ、厚约０．５ｃｍ的小块，每块带１～
２个芽眼，接种于休眠芽诱导的初代培养基中。每个培
养瓶１块，每处理接种２０块材料，观察休眠芽诱导情况。
休眠芽诱导培养基为：①ＭＳ＋ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ（单位下
同）＋ＮＡＡ ０．１；②ＭＳ＋ＢＡ ２．０＋ＮＡＡ ０．２；③ＭＳ＋ＢＡ
３．０＋ＮＡＡ ０．３；④ＭＳ＋ＢＡ ５．０＋ＮＡＡ ０．５。
１．２．２ 继代与增殖 不同种类基本培养基对姜荷花增
殖的影响：将诱导出的不定芽丛切成单芽或带２～３个
芽的小块，分别接种于ＭＳ和１８号培养基２种不同的基
本培养基附加不同激素的培养基中（表１）进行增殖。１８
号培养基的成分为花宝２号１．５ｇ／Ｌ＋ＭｇＳＯ４０．１５ｇ／Ｌ
附加ＭＳ铁盐及其维生素和其它有机物。每瓶接种２０
个材料，每处理接种５瓶，３次重复。培养３０ｄ后，统计
芽的增殖系数与生长情况。不同植物生长调节剂及其
组合对姜荷花增殖的影响：以１８号培养基为基本培养
基，将带有１～２芽的材料分别接种至含有不同种类和
浓度组合的植物生长调节剂的培养基中（表２）。每瓶接
种２０个材料进行增殖。每瓶接种２０个材料，每处理接
种５瓶，３次重复。培养３０ｄ后，统计芽的增殖系数与生
长情况。
１．２．３ 生根培养 将继代增殖培养中芽苗高度＞５ｃｍ
的幼苗切成单芽，接种于下列生根培养基上：１／２ＭＳ；
１／２ＭＳ＋ＮＡＡ ０．５；１／２ＭＳ＋ＮＡＡ １．０；１／２ＭＳ＋ＮＡＡ
２．０；１８号培养基；１８号培养基＋ＮＡＡ ０．５；１８号培养基＋
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北方园艺２０１０（１８）：１５４～１５６ ·生物技术·
ＮＡＡ １．０；１８号培养基＋ＮＡＡ ２．０。每瓶接种１５株，每处
理接种５瓶，３次重复。培养３０ｄ后，统计苗的生根率、
生根条数和根长。
１．２．４ 培养条件 以上所有培养基均附加３０ｇ／Ｌ蔗
糖，６．５ｇ／Ｌ琼脂固化，ｐＨ ５．２～５．４。培养温度为（２５±
２）℃；光照强度３０～４０μｍｏｌ·ｍ
－２·ｓ－１，光照时间１２ｈ／ｄ。
１．２．５ 练苗与移栽 当试管苗高度＞８ｃｍ，有２～４片
叶子和１～３条根时，将材料移至温室中，自然光练苗
４～７ｄ，然后取出试管苗，将根部粘附的培养基洗净，分
别移栽至下列基质中：①园土∶泥炭土∶珍珠岩＝
１∶１∶１（Ｖ／Ｖ／Ｖ）；②蘑菇渣∶木糠∶泥炭土＝１∶１∶
１；③细陶∶泥炭土＝１∶２。各栽种１００株，浇透水，置于
温室内，注意保温保湿。３０ｄ后统计成活率。
１．２．６ 统计和分析 试验数据分析采用ＳＰＳＳ软件进
行变量分析（ＡＮＯＶＡ），以Ｄｕｎｃａｎ’ｓ新复极差在０．０５水
平上进行差异显著性分析。
２ 结果与分析
２．１ 初代培养
采用０．１％的升汞二步消毒法能明显的提高消毒的
成功率。采用０．１％的升汞消毒１０ｍｉｎ时，消毒后污染
率约为５５％，诱导出芽的成功率约为３５％。而采用二步
法消毒时，消毒后污染率约为４０％，诱导出芽的成功率
约为５５％。在所用的４种休眠芽诱导培养基中，①号培
养基诱导的速度较慢，２０ｄ左右出芽，出芽后生长也较
慢，无丛生芽。②、③号培养基无明显差异，１０ｄ左右出
芽，出芽后生长较快，有少量丛生芽。④号培养基出芽
速度也较快，１０ｄ左右能出芽，但随后的单芽生长快，丛
生芽少。因此可采用ＭＳ＋ＢＡ ２～３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．２～
０．３ｍｇ／Ｌ为姜荷花新品种“红观音”的休眠芽诱导培
养基。
２．２ 继代与增殖
２．２．１ 不同种类基本培养基对姜荷花增殖的影响 将
不定芽丛接种到不同的增殖培养基上，５～７ｄ后基部均
开始膨大，１０～１４ｄ后能长出新芽，原芽苗也明显增高，
但不同培养基上还是表现出较大差异（表１）。在２种培
养基的对比中，在以基本培养为１８号的培养基上，姜荷
花的芽苗叶色较绿，生长状态较好；而 ＭＳ培养基上，虽
芽苗生长健壮，但长出的新叶普遍为浅绿色，甚至发黄。
在不同的６－ＢＡ（１．０～５．０ｍｇ／Ｌ）中同时添加 ＮＡＡ
０．２ｍｇ／Ｌ时，在１８号培养基上增殖系数总体呈上升趋
势并表现出差异显著性，而在 ＭＳ培养基中，添加６－ＢＡ
２．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ ０．２ｍｇ／Ｌ时，与基本培养基相比，均
表现出显著性差异。
表１ 不同基本培养基对姜荷花增殖系数的影响
基本培养基 ６－ＢＡ／ｍｇ·Ｌ－１ ＮＡＡ／ｍｇ·Ｌ－１ 增殖系数 丛生芽生长情况
１８号 １．０ ０．２ １．６６４８±０．１５８７ｃｄ 芽稀少，苗很细长，叶色较绿
１８号 ２．０ ０．２ ２．１６１７±０．０８０２ｂｃ 芽正常，抽芽慢，苗较细，叶色较绿
１８号 ３．０ ０．２ ２．８４６６±０．２５６６ａ 芽正常，苗生长健壮，叶色较绿
１８号 ５．０ ０．２ ２．８９８０±０．２５６０ａ 芽正常，苗生长健壮，叶色较绿
ＭＳ １．０ ０．２ １．５２９８±０．０９２２ｄ 芽稀少，苗细长，叶色浅绿
ＭＳ ２．０ ０．２ ２．３３０７±０．１３１０ｂ 芽正常，苗生长健壮，叶色浅绿
ＭＳ ３．０ ０．２ １．９５２８±０．１０９０ｂｃｄ 芽正常，苗生长健壮，叶色浅绿
ＭＳ ５．０ ０．２ １．９７２９±０．１１０９ｂｃｄ 芽正常，苗生长健壮，叶色浅绿
表２ 不同植物生长调节物质对姜荷花增殖系数的影响
６－ＢＡ／ｍｇ·Ｌ－１ ＴＤＺ／ｍｇ·Ｌ－１ ＮＡＡ／ｍｇ·Ｌ－１ 增殖系数 丛生芽生长情况
１．０ － － １．９６１９±０．０６６４ｅｆ 芽稀少，抽芽慢，苗纤细
２．０ － － ２．１４２６±０．１６１０ｄｅｆ 芽正常、数量较少，苗较细长
３．０ － － ２．６０６８±０．３０８７ｃｄｅ 芽正常，苗生长正常
５．０ － － ２．６３５９±０．３００８ｃｄｅ 芽正常，苗生长正常
１．０ － ０．２ １．６６４８±０．１５８７ｆ 芽稀少，苗纤细
２．０ － ０．２ ２．１６１７±０．０８０２ｄｅｆ 芽正常，数量较少，苗生长正常
３．０ － ０．２ ２．８４６６±０．２５６６ｂｃｄ 芽正常，数量较多，苗生长健壮
５．０ ０．２ ２．８９８０±０．２５６０ｂｃｄ 芽正常，数量较多，苗生长健壮
－ ０．２ － ２．１７８５±０．０３５２ｄｅｆ 芽正常，数量较少，苗纤细
－ ０．５ － ３．７２７４±０．０６７９ａ 芽数量很多，主芽生长较慢
－ １．０ － ３．２３０６±０．１２３１ａｂｃ 芽数量很多，少数芽玻璃化
－ １．５ － ３．７６１１±０．３９９３ａ 芽数量很多，但部分玻璃化
－ ０．２ ０．２ ２．７７５２±０．０３０７ｂｃｄ 芽正常，数量较多，苗较细长
－ ０．５ ０．２ ３．４２９３±０．３７７０ａｂ 芽数量较多，苗生长正常
－ １．０ ０．２ ３．０８１９±０．３１７０ａｂｃ 芽数量较多，部分玻璃化
－ １．５ ０．２ ２．４８２３±０．２４７６ｃｄｅ 芽数量多，大部分玻璃化
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２．２．２ 不同植物生长调节剂及其组合对姜荷花增殖的
影响 由表２可知，姜荷花离体快繁在增殖培养中使用
ＴＤＺ的效果优于６－ＢＡ。采用６－ＢＡ时，随着浓度的增
加，芽的增殖系数增加，添加生长素ＮＡＡ ０．２ｍｇ／Ｌ，有利
于芽苗的良好生长。而使用ＴＤＺ时，尽管能明显地提
高增殖率，但浓度过高时，丛生芽会产生玻璃化，以１８号
培养基附加ＴＤＺ ０．５ｍｇ／Ｌ的效果最好。而在此培养基
上再添加生长素ＮＡＡ ０．２ｍｇ／Ｌ，有利于丛生芽的良好
生长，为获得可供生根丛生芽的增代增殖时，可选择１８
号培养基附加ＴＤＺ ０．５ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ ０．２ｍｇ／Ｌ作为继代
增殖培养基。
２．３ 生根培养
姜荷花试管苗在所用的８种不同的生根培养基中
均能生根，生根率达８２．７％～９２％，通过数量分析，生根
率、平均根数、根长均未表现出显著性差异。但苗芽在
１８号基本培养基上的生长状况比在 ＭＳ为基本培养基
的效果好，其中１８号培养基＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ／Ｌ的生根率
最高，可达９２．０％。
表３ 不同培养基对姜荷花生根率的影响
基本培养基
ＮＡＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
平均根数
平均根长
／ｃｍ
生根率
／％
１８号 ０ １．５１ ４．２６ ８４．０
１８号 ０．５ １．５６ ３．６５ ９２．０
１８号 １．０ １．６７ ４．７５ ９０．７
１８号 ２．０ １．７３ ４．０３ ８９．３
ＭＳ ０ １．２７ ３．７７ ８２．７
ＭＳ ０．５ １．３６ ３．６５ ９０．７
ＭＳ １．０ １．６９ ４．０４ ８５．３
ＭＳ ２．０ １．７６ ３．９６ ８２．７
２．４ 练苗和移栽
由于姜荷花在华南地区１０～１１月时会休眠，规模
化生产时最好选择在３～４月份出瓶，如果出瓶太晚，退
冬休眠时未形成球茎，小苗极易死亡。移栽后，提供充
足的水分维持基质和空气湿度，在使用的３种栽培基
质，在①、②、③号混合基质中成活率分别为９５％、９２％、
９０％。因此规模化生产时采用园土∶泥炭土∶珍珠
岩＝１∶１∶１为移栽基质。目前，利用离体培养技术已
生产出了１ ０００株试管苗。
３ 讨论
以姜荷花的球茎为外植体时，由于球茎生长在大田
中，消毒后污染率较高，该试验采用了０．１％的升汞二步
法消毒，明显地降低了外植体的污染率及外植体休眠芽
诱导的成功率。在培养基的选择上，采用以花宝２号为
主要无机成分并附加椰子汁１００ｍＬ／Ｌ时，丛生芽的增
殖和试管苗的生根壮苗效果明显好于ＭＳ基本培养基。
植物生长调节剂是植物组织培养中的关键物质，在
组织培养中起着重要的调节作用。在该研究中，ＴＤＺ在
为０．５ｍｇ／Ｌ，无论是单独作用，还是与０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ
共同作用，均表现出较好的效果，这与Ｎｈｕｔ等［５］认为
ＴＤＺ比６－ＢＡ的活性更强的结果相一致。但当ＴＤＺ浓
度为１．０ｍｇ／Ｌ和１．５ｍｇ／Ｌ时，丛生芽会出现玻璃化，
因此，在使用ＴＤＺ加快其繁殖速度时，要严格控制其
浓度。
参考文献
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ａｐｏｗｅｒｆｕｌ ｔｏｏｌ ｉｎ ｏｒｎａｍｅｎｔａｌ ｐｌａｎｔ ｍｉｃｒｏｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
［Ｍ］／／Ｎｈｕｔ Ｄ Ｔ，Ｌｅ Ｂ Ｖ，Ｔｒａｎ Ｔ Ｖ Ｋ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｉｎ Ｃｅｌ Ｌａｙｅｒ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｓｙｓ－
ｔｅｍ．Ｄｏｒｄｒｅｃｈｔ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ：Ｋｌｕｗｅｒ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，２００３：
２４７－２８４．
Ｉｎ ｖｉｔｒｏＲａｐｉｄ Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｕｒｃｕｍａ ａｌｉｓｍａｔｉｆｏｌｉａｃｖ．Ｒｅｄ Ｇｕａｎｙｉｎ
ＳＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｌｉ １，ＣＨＥＮ Ｘｉ １，２，ＣＨＥＮ Ｚｈｉ－ｌｉｎ２，ＺＥＮＧ Ｓｏｎｇ－ｊｕｎ２
（１．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｉｃｈｕａｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ ６１００６８；２．Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ Ｂｏｔａｎｉｃａｌ Ｇａｒｄｅｎ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０６５０）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｒａｐｉｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｕｒｃｕｍａ ａｌｉｓｍａｔｉｆｏｌｉａｃｖ．Ｒｅｄ Ｇｕａｎｙｉｎ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｗｈｅｎ ｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄ
ｃｏｒｍｓ ｔｈａｔ ｗｅｒｅ ｃｕｔ ｉｎｔｏ ｐｉｅｃｅ ｗｉｔｈ １～２ｄｏｒｍａｎｃｙ ｂｕｄｓ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ ２～３ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ａｎｄ ０．２～
０．３ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，ｂｕｄｄｉｎｇ ａｎｄ ｃｌｕｓｔｅｒ ｂｕｄｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｉｎｄｕｃｅｄ．Ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅｓ ｗｅｒｅ ３．７３ｉｎ Ｈ１８（Ｈａｐｏｎｅｘ １．５ｇ／Ｌ
ａｎｄ ＭｇＳＯ４０．１５ｇ／Ｌ ｉｎｓｔｅａｄ ｏｆ ｍａｃｒｏ－ｅｌｅｍｅｎｔ ａｎｄ ｍｉｃｒｏ－ｅｌｅｍｅｎｔ ｏｆ ＭＳ）＋ｃｏｃｏｎｕｔ ｍｉｌｋ １００ｍＬ／Ｌ＋ＴＤＺ ０．５ｍｇ／Ｌ．
Ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｒｏｏｔｉｎｇ ｗａｓ Ｈ１８ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ０．５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｒａｔｅ ｗａｓ ９１．４３％．Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｔｅｓｔ－ｔｕｂｅ
ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｏｎ ｈｕｍｕｓ∶ｓｐｈａｇｎｕｍ∶ｐｅｒｌｉｔｅ＝１∶１∶１（Ｖ／Ｖ／Ｖ），ｔｈｅｉｒ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｏｆ ｗａｓ ｏｖｅｒ ９５％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｃｕｒｃｕｍａ ａｌｉｓｍａｔｉｆｏｌｉａ；ｏｒｎａｍｅｎｔａｌ ｐｌａｎｔｓ；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｒａｐｉｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
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