全 文 ：1匀9 0 ND.1 国 外 林 业 竺
心叶锻成龄木腋芽离体培养再生植株
作考 :尹阳 、 石井克明 等
译者 :赵仲望
校者 :吴克贤
译自《 日本休学会志 》 1 9 8 8 . (7 ) 3 1 5 ~317
表 1 三种培养基的组成
一 .侧 . . . . . . . . . .目甲 , 、 、 . 月 尹 . . .川. . 口, 卜一组 成 B T M W P M
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工 引 宫
林术的无性繁殖为树木的改 良规划提供
了 J我要手段 , 采用组织培养技术已获成效 ,
大 凳经价选的基因型植株 , 可以在短翔内生
产出来 。
校树是很有价值的阔叶树种 , 但是关于
股树工织培养方面的报道很少 , 由于其坚硬
的种皮和种胚不成熟 , 所以种子发芽率低且
不整齐 。首先报道极树组织培养的是 B a r k -
。 ,· , 他从美洲极 ( T I l i a a m e r e a o a L . )
的 下同组织诱导出愈伤组织 。 C五al o p a第一
个从心 耳!`缎幼树的腋芽获得了分化芽 。
水研究报告阐述了由 1弓年生的心叶柳腋
芽 离体培养再生植株 。
亚 、 试验材料和方法
试验材料取自生长在日本筑波森林植物
园和林产品研究所的两株 15 年生心叶锻 (
T i l i a e o r d a t a )
。
1 9 8 7年 5 月中旬 , 在住年
伸长的着,叶枝条上采取腋芽 。 将所取腋芽在
70 %的已醇中浸泡三分钟 , 然后在 3口%的过
氧化氢中浸泡 15 分钟进行表面消毒 , 再在超
净工作台上用无菌滤纸吸干 , 切成约10 一 1 5 ’
毫米长 , 用 1 8 x 1 8 0毫米的试管内装 20 毫升
琼脂培养基 , 经热压灭菌 , 将腋芽置于其中
培养。
三种基本培养基的组成见表 1 , lS 是修
改灼 1 0 乙和 S A I T O培养基 ; B T M是修改的
阔叶树培养基 ; W F M是修改的木本 植物培
养基 。 为了使幼苗增殖 , 所有培 养 基 都 含
2 0 9 / 1 的蔗搪和 10 %的琼脂 , 并补加不 同浓
度的 B 一气P ( 6 节氮基嗓岭 ) 。 堵养基的 P H
卜N O 。
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E D T A *
对称二苯脉
握 素
盐敌胺素
烟 酸
盐酸毗哆辛
延胡素酸
抗坏血酸
甘氨酞酸
谷氢酸
赖氨酸
L 一酪氨酸
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调到 5 . 8 , 12 0℃ 热压灭菌 20 分 钟 。 为
了生根 , 使每种培养 基 的 浓 度 减半 并 含
1 0 9 I/ 蔗糖、 三种不 同含量的叫噪一 3 丁 酸
( BI A ) 和 1。 o m g l/ 的 a 一茶 乙酸 ( N A A ) 。
用光照强度约 5。。 0勒克斯的萤允灯 , 级
1 3心叶锻戎龄木腋芽离休培养再生植株
ǐ . Jù 2
J卜仁
ù A
2 5℃及 16小 价
剩行培养 。
犷光照 , 8 小时黑暗的条件 F 根 。 补布3 . o m 盯且B A和 O。 1 In g / IN A
班 、 结呆和讨论
2 至 3 星叨 , 含 B人 P灼所有培养丛上的
芽开始分化 。 ` l 星切行 , 山腋芽发芽的幼芽
已长到约 3 一 4 匣米高 。 不同培养基和不同
浓度的 B A P上 , 幼芽的发 汀没有 太 大 差 异
(表 2 ) 。 除了含 O。 Zm g I/ B A P的 IS 培养基
外 , 所有处理的成 女率都高达 60 %以上 , 效
果最好的是补 ”州 。 O、 2 . 0和 5 . 0 m g / 1 B A P
的W PM培养生。 这些结果与幼苗阶 段 采取
的腋芽试验结毕不一致 , 在幼苗阶段 , 小剂
15培养墓效果最好 。 所有 .涪养 少巾 3 . O m g / !
I B A的生根效果均比 0 . 03 或 0 . 3二 g l/ 为好 。
在含有 3 . o m g 1/ I B八和 o . l m g八 N A A 的 1 / 2
1 5
, 1 / Z B T M和 1 / ZW 工, M培养基 L! , , 生根率
分别为 6 3 . 6 、 2 5 . 0 、 4 8 . 1% (表 3 ) , 这个
结果与 C h a lu p a所报道的不同 ,他观察到 ,在
表 3 培养基和浓度对分化芽发根的影
响 ( N A A的浓度为 o . l m g / 1) 带
} I B 人 m : ` l培养基
0
.
0 3 , 0
.
3 一 3 . 0
写 * *O了ù日f上,Jl沙O曰6弓山峥月州2 15 {
表 2 幻养基及 B 八F浓度对 15 年生心
叶锻的腋芽分化的影晌半
1 / 2
1 / 2
B T \lI
W P M
4
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7
0
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0
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O
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. . . J . 翻 . . . . 山卜 闷 .
B A P m 〕 , 1
* 经四星期培养后所得数据
* * 百分数是从每种处理力 21 ~ 3 株培养芽计算 ;补导
O
·
5 1 1
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O
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含有。 . 3 m g 1/ I B A和 0 . ] m g / IN A A的 W P M
培养基上 , 80 ~ 1 0 ;百的幼苗生根。 这 可 能
是由于在本实践中激素的拮抗作用使培养出
的苗和芽内源生长素总量发生变化所致 。
根发育后 , 将 〕、植株移栽到含等量泥炭
蜓石的盆中 。
实验证明 , 用心叶锻成龄木的腋芽进行
离体培养 , 促其快速增殖是可能的 。 成熟 阶
段的树木 , 一般比幼树阶段进行繁殖较为可
行和实用 , 因为成龄树在重要品质方面 , 是
否具有优 良遗传性 , 更有可能确定 。
一内乙一n曰
` .ó毛培养基
I S
B T M
W尸M
42
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1
8 0
.
9
77
.
8
* 经 4 星期士 口万于得数据
* * 百分数是从每种处理的切~ 23 殊培养芽计算所得
量的 B A P ( 0 . 2一 1 . o m g l/ ) 能 促 使 取 样
腋芽成苗最好 。 但本结果与 L e 。 等对栋树 (
Q u e r c u s ) 所 一炸灼报 j亘相似 , 即用大剂量的
B A P
, 能获得高成苗率 。 这可能是 由于幼苗
阶段与成熟阶段之间的生理条件不同所致 。
为了进一步增殖 , 经 4 个 星 期 的 培养
后 , 将分化的幼苗置于含有 0 . 2m g / I B A P的
培养基上进行继代培养 , 一株初始苗平均产
生 出5 . 2个新芽或茎 汀, 将其分离后 ,又可在
含有 o . Zm g /’1 B A P 的W F么工培养基上继代 。
就是说 , 每 4 个星期 ,幼苗的增殖可达 5 倍 。
为了发根 ,将长 3厘米以上的无根苗转移
到生根培养基上 , 生根培养基的浓度是原培
养墓浓度的一半 , 含有 1 0二叮 l蔗搪 , 二种浓
度 (0 。 03 、 。 . 3和 3 . 知 1灯 l) 的 f吕A , 和 0 . 1
m g / 1的 N人 A 。 先在苗茎墓部形戊白色愈伤
纵织 , 3一 1 个星期内通过愈伤 组 织 形 成
(上接第 4 1页 )
催化剂的主要特点是每次再仗用 时 活 性 增
加 。 这可能是 由于每次氢化反应中这种催化
剂与更多的氢接触 , 因此再用时活性一次比
一次强 。
经 2 个月储序后 , 催化剂很快脱活 化 ,
长期储存后催化剂明显脱活化的原因尚不太
清楚 , 但却是事实 。 采用一般的分法活化末
能使催化刘再土 。