全 文 ：北方园艺２０１１（２０）：１３７～１３９ ·生物技术·
第一作者简介：刘爽（１９８０－），女，黑龙江伊春人，硕士，讲师，现主
要从事园林方面的教学研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｓｈｕａｎｇａａａ＠
１６３．ｃｏｍ。
收稿日期：２０１１－０７－１８
风信子离体快繁技术研究
刘 　 爽，孙 余 丹，李 叶 青
（湛江师范学院 生命科学与技术学院，广东 湛江５２４０４８）
　　摘　要：利用离体快繁技术，以风信子的鳞茎为外植体，添加不同浓度６－ＢＡ和ＮＡＡ进行不
定芽的诱导、不定芽的继代和生根培养。结果表明：鳞片的初代最佳诱导培养基为：ＭＳ＋６－ＢＡ
１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．３ｍｇ／Ｌ，诱导率达到８０％；最佳继代培养基为：ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．２ｍｇ／Ｌ；生根诱导最佳培养基：１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．３ｍｇ／Ｌ，生根率可达９０％。
关键词：风信子；鳞茎；不定芽；６－ＢＡ；ＮＡＡ
中图分类号：Ｓ　６８２．２＋９　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－０００９（２０１１）２０－０１３７－０３
　　风信子（Ｈｙａｃｉｎｔｈｈｕｓ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ　Ｌ．）又名西洋水
仙、五色水仙，为百合科风信子属多年生具鳞茎的草本
植物，花有紫、白、红、蓝等颜色，香气清雅，是世界著名
的观赏花卉。我国风信子也已进入家庭和公共场所空
间，需求量在逐年增加。
风信子在自然条件下利用种子繁殖可以避免病毒
积累，但是实生苗的培育大约需要４ａ，移栽后，需１～
２ａ才能开花［１］；通过分球繁殖，数量有限；鳞片扦插易
腐烂，成活率低，且易造成退化［２］。采用离体快繁技术
进行风信子的快速繁殖，很好地解决了其鳞茎的季节
性休眠、环境适应难、品种退化、分球繁殖系数低等问
题，从而满足市场的大量要求。目前，国内对风信子也
进行了不少的研究，但仍未取得很好的成效。该试验
利用风信子的鳞茎进行离体快繁研究，由鳞茎分化生
芽生根，为其快繁提供一定的参考。
１　材料与方法
１．１　试验材料
１．１．１　外植体的选择　风信子的鳞茎数量相对较多，
受季节性的影响较小，是非常适合器官发生的外植
体［３］，在直接器官发生和间接器官发生途径上均较容
易得到再生植株，故该研究选择了鳞茎为风信子的外
植体。该试验选用的风信子品种是：白花卡耐基
（Ｃａｒｎｅｇｉｅ）风信子晚花种。
１．１．２　培养基和培养条件　直接诱导不定芽培养基：
（１）ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ、（２）ＭＳ＋
６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．２ｍｇ／Ｌ、（３）ＭＳ＋６－ＢＡ
１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．３ ｍｇ／Ｌ、（４）ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０
ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．６ｍｇ／Ｌ、（５）ＭＳ＋６ＢＡ　５．０ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ；不定芽继代培养基：（６）ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０
ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．２ｍｇ／Ｌ；生根诱导培养基：（７）１／２ＭＳ＋
ＮＡＡ　０．０５ｍｇ／Ｌ、（８）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ、（９）１／
２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．３ｍｇ／Ｌ、（１０）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ、
（１１）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ。培养条件为：培养室的
温度（２５±２）℃，光照强度为２　０００ｌｘ，光照时间在１２～
１４ｈ／ｄ左右。生根培养时适当减少一定量的光照强度
和光照时间。
１．１．３　仪器与试剂　主要仪器：电子天平、卧式高压
蒸汽锅、超净工作台；试剂：７５％酒精、０．１％升汞、琼
脂、蔗糖、ＭＳ母液、ＮＡＡ、６－ＢＡ。
１．２　试验方法
鳞茎的消毒灭菌：取健壮无病毒的鳞茎，首先流水
冲洗４５ｍｉｎ，在超净工作台中用７０％～７５％的乙醇浸
泡５ｍｉｎ，然后用０．１％氯化汞消毒８ｍｉｎ后，用无菌水
漂洗２次，去掉鳞茎的外皮和外部２～３层鳞片后，切
去少许顶部及基部，剥开一层一层的鳞片，将鳞片置于
０．１％氯化汞继续消毒１０ｍｉｎ，最后用无菌水冲洗５
次，待接种［４］。培养方法：将鳞片剪成１ｃｍ×１ｃｍ大
小的方块，接种到不定芽培养基上（鳞茎外植体近轴面
向上），诱导不定芽的形成。待到外植体萌发产生较密
集的不定芽后，分割成适当的小块，培养在继代培养基
中，培养２个星期左右得到较为健壮的幼苗，将其转接
到生根培养基中进行生根培养。
２　结果与分析
２．１　不定芽的诱导
当细胞分裂素浓度等于生长分裂素时，随着生长
分裂素浓度的提高，鳞片再生不定芽的频率增高，平均
分化不定芽的数量也增加。当细胞分裂素浓度高于生
长素浓度且大约等于生长素的５倍时，鳞片分化不定
芽的频率最高，平均分化不定芽的数量也最多。当细
胞分裂素浓度低于生长素浓度时，随着生长素浓度的
提高，鳞片再生不定芽的频率降低，平均每块鳞片分化
不定芽的数量也减少。不同培养基的激素浓度不同对
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·生物技术· 北方园艺２０１１（２０）：１３７～１３９
芽的诱导的影响结果如表１所示。
接种到培养基（３）中的鳞片小块，培养１个月后，
鳞片上开始出现白色突起（即小鳞茎），３周后开始分
化，产生较密集的丛生芽，诱导效果很好，２０块外植体
中１６块都长出小芽，诱导率达８０％（图１）；接种到培
养基（１）、（２）中的鳞茎培养的时间相对较长，而且形成
的小鳞茎也稀疏，诱导率也相对较低；接种到（４）、（５）
的鳞茎分化较快，诱导率也相对较高，但是（５）分化出
较多的愈伤组织，不利于芽的产生，使得芽稀少（图２）。
由此可见，风信子鳞片诱导不定芽的最佳培养基（３）
ＭＳ＋６－ＢＡ　１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．３ｍｇ／Ｌ。
　　表１ 不同培养基对不定芽的诱导情况
不同培养基／ｍｇ·Ｌ－１ 外植体数／块 分化数／块 诱导率／％ 芽分化的情况
（１）ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５＋ＮＡＡ　０．１
（２）ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０＋ＮＡＡ　０．２
（３）ＭＳ＋６－ＢＡ　１．５＋ＮＡＡ　０．３
（４）ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０＋ＮＡＡ　０．５
（５）ＭＳ＋６－ＢＡ　５．０＋ＮＡＡ　１．０
２０
２０
２０
２０
２０
７
１５
１６
１４
１８
３５
７５
８０
７０
９０
４０ｄ开始分化形成稀少的不定芽
３２ｄ开始分化稀疏的不定芽
３０ｄ开始分化较密而多的不定芽
２８ｄ开始分化较密的不定芽
２０ｄ开始分化愈伤和稀少的不定芽
２．２　不定芽继代扩繁
目前关于风信子继代扩繁的研究比较少，繁殖系
数也比较低。Ｐａｅｋ认为，不定芽继代的最佳培养基是
ＭＳ＋ＩＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ［５］，吕燕波等认
为适于芽生长培养基 ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
２．０ｍｇ／Ｌ［６］，而赵秀芳则认为 ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ　０．２ｍｇ／Ｌ是不定芽继代培养的最佳培养基，通
过试验结果比较，赵秀芳的培养基得到相对较好的效
果，故该试验的不定芽继代扩繁选择了培养基为（６）
ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．２ｍｇ／Ｌ。将诱导出的
不定芽丛切成带２～３个芽的小块，接种于继代培养基
（６）中，蔗糖３０ｇ／Ｌ，琼脂５ｇ／Ｌ。培养４周后，继代培
养基（６）上的不定芽生长快且健壮，高于２ｃｍ的苗数
也很多，２０块外植体带芽小块中就有１５块上的不定芽
数增加１～２个，诱导率达到７５％（图３）。
２．３　生根培养
将健壮的幼苗接种在生根培养基（９）中，培养３周
后分化出根，且较为粗壮，７周后观察到根的长度可达
２～３ｃｍ，平均每株再生苗有３～４条不定根，生根率达
到９０％（图４）；接种到培养基（７）、（８）中，幼苗的根较
稀少而且很细弱；接种到培养基（１０）中，幼苗的根较多
但细弱（图５）；接种到培养基（１１）中，幼苗的根稀少且
细弱。所以最佳生根培养基为：（９）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ
０．３ｍｇ／Ｌ，蔗糖２０ｇ／Ｌ，琼脂７ｇ／Ｌ（表２）。
　　表２　 不同培养基对风信子生根的诱导情况
不同培养基／ｍｇ·Ｌ－１ 外植体数 长根块数 长根率／％ 长根的情况
（７）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．０５
（８）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．１
（９）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．３
（１０）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５
（１１）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　１．０
２０
２０
２０
２０
２０
１２
１４
１８
１６
１４
６０
７０
９０
８０
７０
根稀少
根较稀疏
根数多且较长
根较多但细弱
根较稀少且细弱
图１　鳞茎诱导培养的不定芽　　图２　鳞茎诱导不定芽的愈伤组织和不定芽　　图３　鳞茎继代培养的不定芽
图４　鳞茎不定芽诱导生根　　　　图５　鳞茎不定芽诱导生根　　　　　图６　鳞茎诱导不定芽的小鳞茎
　　　（添加０．３ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ培养基）　　　　　　（添加０．５ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ培养基）
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北方园艺２０１１（２０）：１３７～１３９ ·生物技术·
３　小结与讨论
３．１　外植体分化途径
不同的激素及其组合直接影响着风信子外植体的
分化途径，在基本培养基 ＭＳ中，风信子鳞片不用添加
任何的激素便可长出小鳞茎，但不定芽的生长需要添
加一定浓度的激素，先形成愈伤后进一步诱导小鳞茎
也是比较困难，因为愈伤组织不利于芽的产生；所以该
试验外植体分化途径为：鳞片直接形成小鳞茎，再由小
鳞茎诱导形成芽（图６）。
３．２　继代扩繁的途径
风信子继代扩繁的繁殖系数较低，途径有以下３
种：①以小鳞茎继代；②以不定芽继代；③不定芽发育
成小鳞茎方式继代。风信子以小鳞茎方式进行继代
时，无论添加激素６－ＢＡ还是ＮＡＡ，抑或是它们的组
合，小鳞茎只是在重量上增加了，数量上没有明显的增
加；不定芽发育成小鳞茎方式继代时，在不定芽转接到
添加了ＧＡ或ＮＡＡ的培养基中，１个月后不定芽才发
育成细小的鳞茎，这种方法扩繁的时间很长，而且系数
也很低，不能够达到快繁的目的；所以该试验选择以不
定芽直接继代的方式扩繁。
３．３　生根诱导途径
不定芽生根诱导的途径有２条：一条是试管（瓶）
内生根，另一条是试管（瓶）外生根。试管内生根有利
于难生根植物生根。因为风信子是需要较长时间才能
开花、较难生根的植物，所以该试验研究选择试管内生
根。通过不同浓度的６－ＢＡ和ＮＡＡ组合配比对风
信子鳞茎的鳞片诱导不定芽的试验结果进行分析，其
中培养基（２）、（３）、（５）的诱导率都达到７５％以上，最早
诱导出芽的是培养基（５），但不定芽的长势和数量都比
培养基（３）的差很多。因此培养基（３）ＭＳ＋６－ＢＡ
１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．３ｍｇ／Ｌ最适合于风信子不定芽的
诱导，即６－ＢＡ和ＮＡＡ组合配比倍数大约为５倍时最
好，６－ＢＡ和ＮＡＡ的浓度过低或过高都不利于不定芽
的形成。
对风信子小鳞茎生根的研究中可以得出，使用
ＮＡＡ的浓度在０．３～０．５ｍｇ／Ｌ生根率达到８０％以
上，而且根数也比较多，但是ＮＡＡ的浓度为０．３ｍｇ／Ｌ
时根的长度最长，也比较粗壮。也就是说，浓度为
０．３ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ最适合风信子鳞茎生根的诱导，ＮＡＡ
的浓度过高或过低都不利于根的形成。
参考文献
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ＬＩＵ　Ｓｈｕａｎｇ，ＳＵＮ　Ｙｕ－ｄａｎ，ＬＩ　Ｙｅ－ｑｉｎｇ
（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　５２４０４８）
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６－ＢＡ　ａｎｄ　ＮＡＡ，ｄｉｒｅｃｔｌｙ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｓｈｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｓｈｏｏｔ　ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｏｏｔ　ｏｆ　ｔｒａｉｎｉｎｇ．Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｓｃａｌｅｓ　ａｔ　ｂｅｓｔ　ａｎｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｖｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗａｓ　ＭＳ＋６－ＢＡ　１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．３ｍｇ／Ｌ，ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ　ｏｆ　８０％；Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｎ　ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．２ｍｇ／Ｌ；Ｔａｋｅ　ｒｏｏｔ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ：１／２ｂｅｓｔ　ＭＳ　ｗｉｔｈ　ＮＡＡ　０．３ｍｇ／Ｌ，ｒｏｏｔｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｃｏｕｌ　ａｍｏｕｎｔ　ｔｏ　９０％．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｃｏｍｍｏｎ　Ｈｙａｃｉｎｔｈｕｓ；ｓｃａｌｅ；ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ；６－ＢＡ；ＮＡＡ
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