全 文 ：作者简介:李军(1982-),男 ,山西大同人 ,助讲 ,主要从事教学和科研工作。 　　收稿日期:2008-08-25
风信子内生菌代谢产物的活性检测
李　军 1　廖　彪 2　秦宝福3
(1宁夏职业技术学院生物工程系 ,宁夏银川　 750002;2陕西安康学院化学与化工系 ,陕西安康　 725000;
3西北农林科技大学生命科学学院 , 陕西杨凌　 712100)
摘　要:对风信子内生菌代谢产物抑菌活性的检测结果表明:风信子内生菌的代谢产物对细菌和真菌均有一定的抑
菌活性。其中发酵液提取物对枯草芽孢杆菌有一定的抑菌活性 , 对苹果干腐和烟草赤星的抑菌率分别是 94.8%和
93.8%,而菌体提取物对蜡状芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌都有较高的活性 , 对苹果干腐 、烟草赤星和苹果轮纹的抑菌率
均在 80%以上。
关键词:风信子;内生菌;抑菌活性
中图分类号　Q946.92　　　文献标识码　A　　　文章编号　1007-7731(2008)21-54-02
ActivityDetectionofMetabolicProductfromHyacinthEndophyticFungus
LiJun1 etal.　(1 DepartmentofBioengineering, NingxiaTechnicalCollage, Yinchuan750002, China;2 CollegeofLife-
sciences, NorthwestA＆FUniversity, Shaanxi712100, China)
Abstract:TheactivityofmetabolicproductfromHyacinthendophyticfunguswasdetected.Theresultsshowedthatthemeta-
bolicproductofendophyticfungushadthebio-activitytothebacteriumandfunguses.Thefermentationbrothextractsofthe
fungushadantibacterialactivityagainstB.subtilis, ofwhichantifungalratewereseparately94.8%and93.8%againstBak-
erirwehmandFltgernariaalternata.Meanwhile, Themyceliumextractsofthefungushadperfectbio-activityagainst
B.subtilisandB.cereus, ofwhichantifungalratetoBakerirehm、FltgernariaalternataandMacrophomkawatsukaiwereover
80%.
Keywords:hyacinth, endophyticfungus, antifungalactivity
　　风信子学名(hyacinthusorientalist),别名:洋水仙 、五色
水仙 ,百合科 ,风信子属。原产于南欧 、非洲南部和亚西亚
一带 ,荷兰栽培最多 ,我国各地均有栽培 。可用于春季布
置花坛及草坪边缘的优良宿根花卉 ,也可盆栽 、水养或切
花 。它还具有一定的保健功效 ,可以舒解压力 ,消除沮丧 ,
振奋精神。适用于闻香 、泡澡 ,配合单方精油或基础油使
用 ,更增加香气和功效 [ 1] 。除此之外 ,它还可以消除异味 ,
抑制细菌生长和增加人体免疫 。
植物内生菌这一多样性十分丰富却尚未开发的微生
物类群是一巨大资源。它是生活于植物组织间隙的微生
物(主要是真菌和细菌)[ 2] 。其中一些内生菌可能会产生
在微生物 -宿主关系中发挥作用的生理活性物质(如:抗
细菌 ,抗真菌 ,抗病毒物质等)[ 3] 。鉴于这些代谢产物在自
然界中所起的重要作用 ,对于它们在医药 、农业 、工业领域
的应用越来越受到人们的关注 [ 4] 。因此 ,本文对风信子内
生菌产生的活性物质进行检测 ,确定活性物质的抑菌活
性 ,从而为活性物质的进一步纯化 、成份鉴定及生产应用
打下良好的基础。
1　材料与方法
1.1　材料　抗性菌:采用西北农林科技大学生命科学学
院微生物实验室保存的风信子内生真菌。
1.2　活性物质的粗提
1.2.1　菌体中活性物质的提取　风信子内生真菌进行发
酵 ,发酵液过滤后菌体浸入丙酮中 ,超声波破碎仪将菌体
破碎至浑浊 ,后用滤纸进行过滤得到菌体内含物 。
1.2.2　发酵液中活性物质的提取 --有机溶剂萃取法　
过滤后滤瓶中的发酵液 ,用等体积的三氯甲烷萃取上清
液 ,分 3次进行 ,后将有机相经过旋转蒸发仪在 45℃减压
浓缩处理得到原来 70%的三氯甲烷粗提物。
1.3　抑菌活性的检测方法
对细菌的抑菌活性检测方法纸碟法 [ 5] 。
对真菌的抑菌活性检测方法生长速率法 [ 6] 。
相对抑菌率(%)=(对照组的菌落直径 -待测组的
菌落直径)/(对照组的菌落直径 -0.7)×100
表 1　提取物对细菌抑制的透明圈直径及抑菌效果　单位:cm
供试
细菌
菌体的提取物 发酵液提取物
编号Ⅰ 编号 Ⅱ
Ⅰ 1 Ⅰ 2 Ⅰ 3 平均值
对照组
均值
抑菌
效果 Ⅱ 1 Ⅱ 2 Ⅱ 3
平均
值
对照组
均值
抑菌
效果
枯 3.8 3.1 2.9 3.3 2.5 有 3.1 2.6 2.8 2.9 1.0 较好
蜡 0 0 0 0 0 无 2.9 2.5 3.0 2.8 0 较好
　　注:枯草芽孢杆菌为 “枯 ” ,蜡状芽孢杆菌为 “蜡 ”。
2　结果与分析
2.1　对细菌抑菌活性的检测结果　对细菌的抑菌活性检
测中 ,表 1的结果显示 ,发酵液提取物对枯草芽孢杆菌的
抑制效果较好 ,而对蜡状芽孢杆菌基本没有抑菌活性。菌
体内的丙酮提取物对枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌的抑
54 安徽农学通报 , AnhuiAgri.Sci.Bul.2008, 14(21)
DOI :10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2008.21.019
菌效果都较好 。表明风信子内生菌的代谢产物对细菌的
抑菌效果很强 。
表 2　对第一次植物病原菌所测的菌落直径及抑菌率　单位:cm
供试
细菌
菌体的提取物 发酵液提取物
编号Ⅰ 编号 Ⅱ
Ⅰ 1 Ⅰ 2 Ⅰ 3 平均值
对照组
均值
抑菌
效果 Ⅱ 1 Ⅱ 2 Ⅱ 3
平均
值
对照组
均值
抑菌
效果
A 0.9 0.9 1.0 0.9 4.6 94.8 1.3 1.4 1.2 1.3 4.2 82.9
B 2.3 2.3 2.1 2.2 4.1 55.9 1.6 1.4 1.2 1.4 3.3 73.1
C 1.5 2.0 1.7 1.7 3.1 58.3 1.5 1.4 1.9 1.6 4.1 73.5
D 1.7 0.7 0.7 1.8 2.3 93.8 1.3 1.0 1.1 1.1 3.9 87.5
E 2.8 2.0 2.1 2.3 4.2 54.4 1.2 1.1 1.3 1.2 3.2 80.0
F 2.0 2.4 2.0 2.2 4.3 61.8 1.6 1.2 1.0 1.2 3.6 81.6
注:A苹果干腐 , B南瓜枯萎 , C辣椒疫霉 , D烟草赤星 , E苹果轮纹 , F
西瓜枯萎
2.2　植物病原菌的活性检测结果　对植物病原真菌的抑
菌活性检测中 ,由表 2可看出 ,发酵液提取物对苹果干腐 、
烟草赤星的抑菌活性较高 ,均在 93%以上 ,对其他病原菌
的抑菌活性在 60%左右。而菌体内提取物对南瓜枯萎 、
辣椒疫霉的抑菌活性都在 70%以上 ,对其他病原菌的抑
菌活性均在 80%以上 ,表明菌体内提取物的抑菌活性都
较好 ,具有广谱的抑菌效果 。部分结果如图 1, 2。
3　讨论
植物内生菌不仅能够参与植物次生成分的合成或对
植物次生代谢产物进行转化 , 而且还能够独立产生丰富
的次生代谢产物 , 是天然产物的重要来源 [ 7] 。本研究利
用纸碟法和生长速率法测定代谢产物对病原菌的抑菌活
性 ,结果显示发酵液的提取物对苹果干腐和烟草赤星的抑
菌率最高 ,分别为 94.8%和 93.8%;菌体内丙酮提取物对
苹果干腐 ,烟草赤星 ,苹果轮纹 ,西瓜枯萎的抑菌率都在
80%以上。菌体内丙酮提取物整体上比发酵液的抑制活
性相对要好 ,它可以产生广谱的抑菌效果 ,应用范围较广 。
而发酵液提取物只是对某些菌的抑菌效果特别好 ,可能对
某些菌具有特效抑制作用。这为风信子内生菌中活性物
质的分离纯化 、成分鉴定及实际应用等提供了一定依据 。
参考文献
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(责编:张琪琪)
(上接 190页)“严管林 、慎用钱 ,质为先 ”的要求 ,建立健
全工程建设目标责任制 ,不断创新建设制度 ,提高工程管
理水平 。
3.2.5　强化保护与治理措施 ,增加科技含量　实施全面
管理 , 做好病虫害预测和防治 , 高效低毒防病虫 。建立
森林火灾监测和防火体系 , 严防森林火灾 。建立健全生
态网络及科技推广网络 , 加强林业科研 , 积极推广先进
科技成果 , 切实将科技进步与创新贯穿于公益林建设全
过程。
总之 ,为了发挥生态公益林最大的生态效益 ,需因地
制宜编制公益林经营管理方案 ,实行科学经营管理。采取
多种营林措施 ,改变目前林分的现状 ,实现林分的生物多
样性 ,营造乔 、灌 、草相结合的多层次结构和完整的林相 ,
增强群体的稳定性和抗逆性 ,提高公益林的生态防护功
能 。根据生态公益林建设存在的问题 ,采取合理的经营管
理对策 ,使公益林经营管理逐步实现规范化 、制度化。经
营管理生态公益林要遵循长期 、持续 、稳定的原则 ,经营思
路是 “统一规划 、分类经营;长期管护 ,合理利用;生态效益
为主 ,三大效益兼顾 ”。
参考文献
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(责编:陶学军)
55安徽农学通报 , AnhuiAgri.Sci.Bul.2008, 14(21)