全 文 :朱丽梅,李玉萍,罗凤霞,等. 不同品种风信子的病害调查及抗病性鉴定[J]. 江苏农业科学,2011,39(6) :212 - 214.
不同品种风信子的病害调查及抗病性鉴定
朱丽梅,李玉萍,罗凤霞,丁 蕾,奚 文
(金陵科技学院园艺学院,江苏南京 210036)
摘要:以 14 个风信子品种为研究对象,分别在贮藏期、种球收获期进行了病害的发生情况调查。结果表明:(1)
根据贮藏期、种球收获期采集的病害标本,共鉴定出 2 种病害,为风信子青霉病和曲霉病;(2)14 个风信子品种在贮藏
期和种球收获期均有青霉病发生,其中 China Pink、Sky Jacket、Red Magic 3 个品种为筛选出的对青霉病较抗病的品种,
而品种 Jane Bos、Blue Star为筛选出的较感病品种;(3)14 个风信子品种中有 7 个品种感染曲霉病,其中品种 Jane Bos
和 White Pearl为对曲霉的感病品种,China Pink、Minors、Red Magic、Blue Magic、Fondan、Purple Sensation、Gispy Princess
7个品种无曲霉病发生,为曲霉病高抗品种;(4)Jane Bos对青霉病和曲霉病 2 种病害的发病率和感病指数均较高,为
青霉病和曲霉病的感病品种,而 China Pink和 Red Magic的发病率和感病指数较低,为这 2 种病害的抗病品种。
关键词:风信子;病情指数;病害调查
中图分类号:S682. 2 + 90. 8 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2011)06 - 0212 - 02
收稿日期:2010 - 12 - 24
基金项目:国家林业局“948”项目(编号:2009 - 4 - 12) ;金陵科技学
院立项基金(编号:jit - n - 201001)。
作者简介:朱丽梅(1972—) ,女,甘肃酒泉人,博士,副教授,从事园艺
病虫害防治的教学与科研工作。E - mail:zlm@ jit. edu. cn。
风信子(Hyacinthus orientalis L.)又名五色水仙、洋水仙,
百合科风信子属。其花色鲜艳,花序端庄,株形雅致,是早春
开花的著名球根花卉之一,也是重要的盆花种类 [1]。风信子
主要通过分球繁殖生产种球,但自然生长情况下繁殖率很低。
我国栽培的种球多数从国外进口。在风信子的常规栽培中,
也常有病虫害发生,虫害主要有刺足根螨、马铃薯蚜、球根粉
螨、烟蓟马、线虫等,病害主要包括根腐病、花叶病、黄腐病、灰
霉病、菌核病、软腐病以及病毒病等[2 - 4]。近年随着栽培面积
的不断扩大,病虫害的发生日趋严重,成为限制风信子生产的
重要因素之一。为了解在南京地区栽培风信子的病害发生情
况和发生规律,以进一步研究其主要病害的防治技术,并为抗
性品种的合理布局、寻找抗病基因、抗病品种的选育以及抗病
机制的研究提供理论依据,本研究以 14 个风信子品种为调查
对象,对其进行了贮藏期、生长期和种球收获期的病害调查,
并进行了田间抗病性评价,筛选较好的抗病品种。
1 材料与方法
1. 1 材料来源
14 个风信子品种:White Pearl,China Pink,Jane Bos,Blue
Star,Delft Blue,Minors,Sky Jacket,Red Magic,Fondant Gipsx
Queen,Blue Magic,Blue Jacket,Purple Sensation,Gispy Pron-
cess,City of Harlem,均从荷兰进口。
1. 2 试验设计
1. 2. 1 风信子主要病害的鉴定 采集病害标本,对于有典型
病害症状的标本根据所表现的征状特征对病害进行初步判
断,表面有子实体的病组织用剥离法或徒手切片法制作临时
玻片在显微镜下观察其病原物的特征,对病原进行鉴定。
1. 2. 2 风信子主要病害的发生情况调查 贮藏期病害调查:
将各品种种球在 9 ℃条件下贮藏 90 d后取出,方法为每个品
种每次随机取种球 10 个,共 3 次重复,每次均分别调查种球
的青霉病和曲霉病的病斑面积,每个种球的病斑面积按 0 级、
1 级、3 级、5 级、7 级、9 级分级记录。
种球收获期调查:将各品种种球于 12 月中旬种于田间,
在南京地区经过 1 个生长季节,5 月中旬地上部分枯萎后,于
5 月下旬将鳞茎从田间挖出,病害的调查方法同贮藏期。
0 级:无病;1 级:叶片病斑较少,病斑面积占整片叶面积
5%以下;3 级:病斑较多,病斑面积占整片叶面积 5% ~ 30%;
5 级:病斑较多,病斑面积占整片叶面积 > 30% ~ 50%;7 级:
病斑很多或融合成大斑,病斑面积占整片叶面积 > 50% ~
70%;9 级:病斑很多或融合成大斑,病斑面积占整个面积的
70%以上。
病情指数的计算公式如下:
病情指数 =∑(各级病球数 ×各级代表值)/(调查总球
数 ×最高级代表值)× 100
1. 3 田间抗病性鉴定
1. 3. 1 鉴定方法 在鉴定方法上采用以病情指数为基
础[5 - 7],以相对抗性指数进行抗(耐)感划分。其中相对抗病
性指数 = 1 -相对病情指数,相对病情指数 =鉴定品种(平均
病指)/对照品种(平均病指) ,以病情指数最高者为对照
品种。
1. 3. 2 品种抗病性评价 将抗病性鉴定的品种分为 4 个级
别:高抗(HR)、中抗(MR)、中感(MS)、高感(HS) ;相对抗性
指数:高抗(HR)为 0. 90 ~ 1. 00、中抗(MR)为 0. 70 ~ 0. 89、中
感(MS)为 0. 40 ~ 0. 69、高感(HS)为 < 0. 40。
2 结果与分析
2. 1 田间病害发生情况以及主要病害表现症状
根据对 14 个风信子品种的病害普查结果(表 1)可知,其
中主要病害为发生在鳞茎上的青霉病和曲霉病,生长期间叶
部无明显病害发生。其中青霉病发生最重,在贮藏期 14 个品
—212— 江苏农业科学 2011 年第 39 卷第 6 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2011.06.112
种中 13 个品种发病,平均发病率为 42. 05%;种球经田间生
长再收获后,14 个品种全部发病,青霉病的平均发病率上升
为 83. 98%。与青霉病害的发生相比,各品种风信子的曲霉
感染均较轻,在贮藏期 14 个品种的风信子有 7 个品种发病,
平均发病率为 3. 02%;种球收获后,14 个品种只有 3 个品种
有曲霉感染,但 White Pearl 品种的发病率较高,为 100%,14
个品种的平均发病率为 8. 79%。
表 1 不同品种风信子病害的发病率
品种名称
青霉病发病率(%)
贮藏期 种球收获期
曲霉病发病率(%)
贮藏期 种球收获期
White Pearl 60. 7d 80c 7. 1b 100a
China Pink 31. 4f 100a 0e 0d
Sky Jacket 43. 3e 60d 3. 3d 0d
Jane Bos 66. 7c 90b 7. 7b 20b
Blue Star 94. 3a 85bc 2. 5d 0d
Delft Blue 2. 4k 80c 5c 0d
Blue Jacket 0k 90b 10a 3c
Minors 90b 40e 0e 0d
Red Magic 16. 7h 100a 0e 0d
Blue Magic 6. 7j 6. 7f 0e 0d
Fondan 33. 3f 90b 0e 0d
Purple Sensation 26. 7g 90b 0e 0d
Gispy Princess 61. 2 100a 0e 0d
City of Harlem 13. 3i 80c 6. 7b 0d
注:同列不同字母表示差异显著,P < 0. 05。
2. 2 不同品种风信子贮藏期和种球收获期青霉病的发病情
况以及抗性评价
从表 2 可知,14 个品种在贮藏期和种球收获期均有青霉
病发生,贮藏期的平均病情指数为 21. 54,种球收获期的平均
病情指数为 30. 11,说明各品种风信子经田间生长后,种球青
霉病发生情况普遍重于贮藏期,且不同品种间病情指数有显
著差异。其中贮藏期发病最重的为 Minors,其病情指数为
81. 21,最轻的为 Delft Blue,其病情指数为 0. 7,以 Minors为对
照,其相对抗病指数为 0. 99。种球收获期再查,青霉病发生
最重的为 Jane Bos,其病情指数为 80,最轻的为 China Pink,其
病情指数为 11. 1。14 个品种中 China Pink、Sky Jacket、Red
Magic 3 个品种在贮藏期和种球收获期的病情指数均小于
20,相对抗病指数为 HR 或 MR,为筛选出的对青霉病较抗病
的品种;而品种 Jane Bos在贮藏期和种球收获期的病情指数
则分别为 50. 62 和 80,Blue Star贮藏期和种球收获期的病情
指数分别为 64. 44 和 47. 2,与其他品种相比为筛选出的较感
病品种;Blue Magic、Delft Blue、Blue Jacket、Fondan、Purple
Sensation 5 个品种在贮藏期的病情指数均小于 20,相对抗病
指数大于 0. 7,表现较抗病,但种球收获期病情指数均大于
20,相对抗病指数均小于 0. 7,表现较感病。
2. 3 不同品种风信子贮藏期和种球收获期曲霉病的发病情
况以及抗性评价
从表 3 可知,表中 14 个品种在贮藏期和种球收获期均只
有部分品种感染曲霉病,不同品种间病情指数有显著差异。
品种 Jane Bos贮藏期和种球收获期的病情指数分别为 6. 0 和
20,White Pearl分别为 5. 6 和 11. 1,与其他品种相比为筛选出
的较感病品种,其中 White Pearl在种球收获期曲霉病发病率
最高,为 100%;China Pink、Minors、Red Magic、Blue Magic、
Fondan、Purple Sensation、Gispy Princess 7 个品种均无曲霉病
发生,为对曲霉病高抗的品种。
表 2 不同品种风信子贮藏期和种球收获期青霉病发生情况
品种名称
贮藏期
感病
指数
相对抗
病指数
抗性
评价
种球收获期
感病
指数
相对抗
病指数
抗性
评价
White Pearl 32. 94d 0. 59 MS 8. 89h 0. 89 MR
China Pink 15. 56e 0. 81 MR 11. 10gh 0. 86 MR
Sky Jacket 6. 30h 0. 92 HR 20e 0. 75 MR
Jane Bos 50. 62c 0. 38 HS 80a 0 HS
Blue Star 64. 44b 0. 21 HS 47. 20b 0. 41 MS
Delft Blue 0. 7i 0. 99 HR 44. 44b 0. 44 MS
Blue Jacket 7. 03h 0. 91 HR 30cd 0. 63 MS
Minors 81. 21a 0 HS 13. 33fg 0. 83 MR
Red Magic 5. 56h 0. 93 HR 16. 67ef 0. 79 MR
Blue Magic 0. 74i 0. 99 HR 30cd 0. 63 MS
Fondan 11. 1f 0. 86 MR 30cd 0. 63 MS
Purple Sensation 10. 37fg 0. 87 MR 30cd 0. 63 MS
Gispy Princess 6. 81h 0. 92 HR 33. 3c 0. 58 MS
City of Harlem 8. 15gh 0. 90 HR 26. 67d 0. 67 MS
注:同列不同字母表示差异显著,P <0. 05。
表 3 不同品种风信子贮藏期和种球收获期曲霉病发生情况
品种名称
贮藏期
感病
指数
相对抗
病指数
抗性
评价
种球收获期
感病
指数
相对抗
病指数
抗性
评价
White Pearl 5. 6b 0. 28 HS 11. 1b 0. 45 MS
China Pink 0d 1 HR 0d 1 HR
Sky Jacket 0. 4d 0. 95 HR 0d 1 HR
Jan Bos 6. 0b 0. 23 HS 20a 0 HS
Blue Star 1. 9c 0. 76 MR 0d 1 HR
Delft Blue 1. 7c 0. 78 MR 0d 1 HR
Blue Jacket 7. 8a 0 HS 3. 3c 0. 84 MR
Minors 0d 1 HR 0d 1 HR
Red Magic 0d 1 HR 0d 1 HR
Blue Magic 0d 1 HR 0d 1 HR
Fondan 0d 1 HR 0d 1 HR
Purple Sensation 0d 1 HR 0d 1 HR
Gispy Princess 0d 1 HR 0d 1 HR
City of Harlem 2. 2c 0. 72 MR 0d 1 HR
注:同列不同字母表示差异显著,P <0. 05。
3 结论与讨论
风信子是一种在我国广泛栽培的花卉,但其种球主要从
国外进口。关于这类花卉的生物学特性、组织培养技术均有
较多的研究,但在国内尚无关于该花卉的病虫害发生情况报
道。本试验以金陵科技学院栽培的 14 个品种不同色系的风
信子为研究对象,在其贮藏期和种球收获期进行了病害调查,
并统计分析数据,结果表明: (1)贮藏期、生长种球收获期采
集的病害标本,共鉴定出 2 种主要病害,为风信子青霉病和曲
霉病。(2)14 个风信子品种在贮藏期和种球收获期均有青霉
病发生,China Pink、Sky Jacket、Red Magic 3 个品种为筛选出
的对青霉病较抗病的品种;而品种 Jane Bos、Blue Star为筛选
(下转第 214 页)
—312—朱丽梅等:不同品种风信子的病害调查及抗病性鉴定
陈 芳,韩德铎,郑 宇,等. 枯草芽孢杆菌 B579 抑真菌作用的初步研究[J]. 江苏农业科学,2011,39(6) :214 - 216.
枯草芽孢杆菌 B579 抑真菌作用的初步研究
陈 芳1,2,韩德铎1,郑 宇2,张艳春2,骆健美2,王 敏2
(1.聊城大学生命科学学院,山东聊城 252059;2.工业微生物教育部重点实验室 /天津科技大学生物工程学院,天津 300457)
摘要:通过平板对峙培养试验考察了从植物根围分离的 1 株生防枯草芽孢杆菌———B579 对 8 株主要植物病原菌
的抑制作用。试验结果表明,B579 对所有供试病原菌均有不同程度的抑制作用;酸沉醇溶法所得生防菌拮抗粗提物
对枯萎病菌分生孢子萌发和芽管生长均有显著的抑制作用;当拮抗粗提液添加量为 20%时,孢子萌发的抑制效果达
到 94. 0%,芽管生长的抑制效果达到 75. 4%;病原菌的菌丝经拮抗粗提液处理后变得细弱、枯萎,并逐渐破裂。
关键词:枯草芽孢杆菌;抑菌作用;枯萎病;抗菌代谢物
中图分类号:Q939. 9 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2011)
櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄
06 - 0214 - 03
(上接第 213 页)
出的较感病品种。(3)14 个风信子品种中只有部分品种有曲
霉病发生,不同品种间感病指数有显著差异。其中品种 Jane
Bos、White Pearl 为对曲霉的感病品种,China Pink、Minors、
Red Magic、Blue Magic、Fondan、Purple Sensation、Gispy Princess
7个品种均无曲霉病发生,为对曲霉病高抗的品种。(4)无论
是青霉病还是曲霉病,Jane bos 品种的发病率和病情指数均
较高,为对这 2 种病害的感病品种,而 China Pink、Red Magic
品种的发病率和感病指数较低,为对这 2 种病害的抗病品种。
参考文献:
[1]刘建敏,耿凤梅,魏洪杰. 风信子的栽培与花期控制技术[J]. 北
方园艺,2007(3) :124 - 125.
[2]周秀涛,邓晓梅,姚文岳,等. 风信子鳞茎带毒率测定及无毒苗繁
殖方法[J]. 上海农业学报,1996,12(1) :28 - 31.
[3]邵秀玲,甘琴华,赵文军,等. 利用实时荧光 PCR 技术检测风信
子黄腐病菌[J]. 植物检疫,2009,23(5) :25 - 27.
[4]李 军,廖 彪,秦宝福. 风信子内生菌代谢产物的活性检测
[J]. 安徽农学通报,2008,14(21) :54 - 55.
[5]曾华兰,叶鹏盛,何 炼,等. 茄子品种资源抗黄萎病性鉴定评价
[J]. 西南农业学报,2008,21(3) :655 - 657.
[6]温晓涵,张喜春. 引进番茄品种抗晚疫病苗期鉴定及抗性品种筛
选[J]. 中国农学通报,2010,26(4) :189 - 194.
[7]周锡康,郭媛贞. 大麦品种对白粉病抗病性鉴定及抗源筛选[J].
植物保护学报,1997,24(1) :39 - 43.
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是普遍存在于土壤和植
物微生态系统中的优势微生物种群,由于它具有能产生抗逆
性强的芽孢、便于培养、易于定殖和抗菌防病能力强等特点而
逐步成为研究的热点。国内外许多性状优良的野生菌株已被
成功地应用于多种植物病害的生物防治[1 - 2],并取得了显著
的防病效果。枯草芽孢杆菌在生长代谢过程中能够产生不同
种类的拮抗物质,包括非核糖体合成的脂肽类抗生素(li-
popeptide antibiotics)、核糖体合成的细菌素(bacteriocin)[3]及
抗菌蛋白[4]。它们通常对植物病原真菌具有显著的抑菌活
性,对细菌、病毒和寄生虫也有一定的抑制效果,而传统的化
学农药防治对生态环境和人类健康都可能产生严重的危害。
因此,枯草芽孢杆菌抗菌物质在医学、农业和食品上具有广阔
的应用前景。
枯草芽孢杆菌 B579 从天津近郊蔬菜种植区根围土分离
所得,温室盆栽试验表明,它对黄瓜枯萎病有显著的抑制作
收稿日期:2011 - 01 - 24
基金项目:天津市自然科学基金(编号:09JCZDJC19100) ;聊城大学
博士科研启动基金(编号:3010)。
作者简介:陈 芳(1980—) ,女,山东惠民人,博士,讲师,主要从事微
生物制药研究。E - mail:chenfang20045@ 163. com。
通信作者:王 敏,博士,教授,主要从事微生物制药研究。E - mail:
minw@ tust. edu. cn。
用,并能促进植物生长[5];由发酵上清液所得拮抗粗提物对
温度、酸碱度等都表现出较高的稳定性[6]。本试验进一步考
察 B579 对几株主要主要病原菌的抑制作用、拮抗粗提物的
代谢及其对病原菌菌丝和分生孢子的抑制作用,为拮抗物质
的实际应用提供理论依据,为生态农业的发展奠定理论基础。
1 材料与方法
1. 1 供试菌种
枯草芽孢杆菌 B579;枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、立
枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、蔓枯病菌(Mycosphaerella melo-
nis)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)、黑斑病菌(Alternaria alterna-
ta)、褐斑病菌(Cercospora momordicae) (本研究室保存) ;炭疽
病菌(Gloeosporium)和茄交病菌(Fusarium solani) (华东理工
大学生物反应器工程重点实验室惠赠)。
1. 2 培养基
细菌培养基为 LB 培养基,病原菌培养基为马铃薯葡萄
糖琼脂培养基(PDA)。
1. 3 平板对峙培养试验
抑菌试验采用牛津杯法,病原菌的培养用 PDA 培养基。
病原菌点接于培养皿的中心,在其外围约 2 cm的位置接种生
防菌悬液(约 106 /mL)和对照处理(无菌水)各 0. 1 mL,置
28 ℃培养箱中培养。待对照处理的菌丝生长边缘超过牛津
杯的外缘,用测微尺测量菌丝生长边缘与牛津杯之间的宽度
—412— 江苏农业科学 2011 年第 39 卷第 6 期