全 文 ：　 　ｗｗｗ．ｈｘｙｓｗｇｃ．ｃｏｍ　２０１５，Ｖｏｌ．３２Ｎｏ．０２化学与生物工程
　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
４０
基金项目：海南省自然科学基金资助项目（２１３０１３），２０１３年度中西部高校提升综合实力工作资金“大学生创新创业训练计划”资助
项目
收稿日期：２０１４－１０－１１
作者简介：杨璐，女，云南昆明人；通讯作者：王新广，副教授，研究方向：生物化工，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｇ－ｗａｎｇ＠１６３．ｃｏｍ。
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－５４２５．２０１５．０２．０１０
海南两种江蓠不同提取物的抗菌活性
杨　璐，蔡　寅，姚　帅，陈惠兰，陈雨田，王　捷，罗先群，王新广
（海南大学 海南优势资源化工材料应用技术教育部重点实验室，海南 海口５７０２２８）
摘　要：以４种细菌，大肠埃希菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）、金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｒｏｓｅｎｂａｃｈ）、枯草芽孢
杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、铜绿假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）和４种真菌，白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ）、番木瓜炭
疽菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｐａｐａｙａｅ　Ｐ．Ｈｅｎｎ）、芒果炭疽菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ）、芒果蒂腐菌（Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌｌａ　ｄｏｍｉｎｉ－
ｃａｎａ）作为供试菌，用圆形纸片法对海南２种江蓠（海南江蓠和细基江蓠）的乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物进行
抗菌活性比较研究。结果表明：２种江蓠提取物均具有较为广谱的抗菌能力，且不同提取物的抗菌活性物质、抗菌活性
和范围不同，海南江蓠的抗菌效果优于细基江蓠。
关键词：江蓠提取物；海南江蓠；细基江蓠；抗细菌；抗真菌
中图分类号：Ｑ　９４９．２　Ｒ　９３１．１　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１６７２－５４２５（２０１５）０２－００４０－０３
　　海洋与陆地的生境截然不同，使得海洋各种生物
之间有着密切相关的生态关系，其中的生物活性物质
和化学防御机制起着重要作用。海藻是生长在海洋中
的低等隐花植物，也是海洋食物链的基础。为了抵抗
海洋生物的大量吞食、维护自身的生存繁衍，海藻大多
能产生一些化学结构新颖、伴有多种杂原子取代、生理
活性独特的化学防御物质。对海藻天然活性物质的研
究正日益受到人们的关注，研究者已从海藻中分离提
取出多种具有抗肿瘤、抗病毒、抗细菌、抗真菌、细胞毒
和拒食杀虫活性的天然活性物质［１－５］。海藻中具有抗
菌作用的化合物主要是脂类、酚类、倍半萜类、多糖类、
卤代化合物、含硫化合物、吲哚和甾体类等活性物
质［６－１１］。由于一些人类病原菌对抗生素的耐药性不断
增强，而海藻不同溶剂提取物能够抑制许多食物腐败
菌及条件腐败菌的生长、对动植物病原菌具有杀灭作
用，因此，从海洋藻类的活性物质中找寻结构新颖、更
具抗菌生物活性的新药成为研究热点。
江蓠 为 红 藻 门 （Ｒｈｏｄｏｐｈｙｃｏｐｈｙｔａ）、红 藻 纲
（Ｆｌｏｒｉｄｅｏｐｈｙｃｅａｅ）、杉藻目 （Ｇｉｇａｒｔｉｎａｌｅｓ）、江蓠科
（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａｃｅａｅ）、江蓠属（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ）海藻。海南江蓠
枝条细小，是亚热带红藻，主要产地是中国海南及越
南；细基江蓠在我国主要分布于海南岛，也是海南海藻
栽培的主要产品，生长快，产量高，发展潜力大，制取的
琼胶被广泛应用于食品工业和医药卫生工业，经济价
值极为显著。鉴于目前国内对细基江蓠抗真菌研究鲜
有报道及海南江蓠抗真菌、抗细菌研究还未见报道，作
者在此对海南２种江蓠的乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正
丁醇提取物进行抗菌活性比较研究，以期发现有生物
活性的先导化合物，为进一步研究和开发利用江蓠奠
定基础。
１　实验
１．１　材料
海南江蓠（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓ），采集于海南
文昌；细基江蓠（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｔｅｎｕｉｓｔｉｐｃｔａｔａ），采集于海
南海口。
供试细菌：大肠埃希菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）、金黄色
葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｒｏｓｅｎｂａｃｈ）、枯草芽
孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、铜绿假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏ－
ｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ），均由海南大学生物工程系提供。
供试真菌：白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ）、番木
瓜炭疽菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｐａｐａｙａｅ　Ｐ．Ｈｅｎｎ）、芒果炭
疽菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ）、芒果蒂腐菌
（Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌｌａ　ｄｏｍｉｎｉｃａｎａ），均由海南大学生物工程系
杨　璐等：海南两种江蓠不同提取物的抗菌活性／２０１５年第２期 　４１　
提供。
１．２　方法
１．２．１　江蓠提取物的制备及预处理
２种江蓠采集后，观察藻体的形态学特征，并进行
物种鉴定。
挑除藻中杂物，清洗藻体表面盐分，于４５℃烘干，
粉碎，过４０目筛，保存于干燥瓶中，备用。
取全藻粉末，用９５％乙醇于５０℃ 水浴提取３次，
真空旋转蒸干溶剂，得乙醇粗提物浸膏。加１０倍蒸馏
水，搅拌，得到混悬液。按有机溶剂极性由小到大的顺
序依次进行石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，获得石油
醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物，分别真空旋转蒸干。
将各溶剂提取物配成０．１ｇ·ｍＬ－１溶液进行抗菌
活性实验。
１．２．２　抗菌活性实验
采用圆形纸片法进行抗菌活性实验：用接种环从
已经活化好了的菌种试管内刮取一环菌于５ｍＬ的无
菌水中，充分振荡摇匀后，得到菌悬液。取经高压湿热
灭菌过的圆形滤纸片（直径为５ｍｍ）浸渍于各提取物
溶液中，两片准确重叠，待溶剂挥发后，贴于涂布细菌
或真菌菌悬液的培养皿上，置于恒温培养箱中倒置培
养（细菌３７℃培养１８～２４ｈ；真菌２８℃培养４８～
７２ｈ）。测量抑菌圈直径，同时做空白对照实验，每个
样品做３个平行样，结果取平均值。
２　结果与讨论
２．１　抗细菌活性比较研究
海南２种江蓠不同提取物的抗细菌活性见表１。
表１　 海南２种江蓠不同提取物的抗细菌和抗真菌活性
Ｔａｂ．１　 Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｎｄ　ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｔｗｏ　Ｈａｉｎａｎ　Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ
　　　病原菌
抑菌圈直径／ｍｍ
细基江蓠
乙醇　　　　石油醚　　　乙酸乙酯　　　正丁醇　
海南江蓠
乙醇　　　　石油醚　　　乙酸乙酯　　　正丁醇　
细菌
大肠埃希菌 ６　 ８　 ８　 ７　 １０　 ９　 ７ 　　　　—
金黄色葡萄球菌 — １０　 ６　 ７　 １５　 １３　 １０ 　　　　—
枯草芽孢杆菌 ６　 ６　 ９　 ６　 １２　 １２　 １１ 　　　　—
铜绿假单胞菌 — — ７　 ７　 １０　 １１　 １１ 　　　　８
真菌
白色念珠菌 １１　 ８　 ７　 １０　 １３　 １１　 ８ 　　　　６
番木瓜炭疽菌 １２　 ９　 １０　 １１　 １４　 １１　 １０ 　　　　７
芒果炭疽菌 １０　 ７　 ６　 １０　 １１　 ８　 ６ 　　　　６
芒果蒂腐菌 ８　 ７　 ６　 ９　 １１　 ９　 ８ 　　　　６
　　由表１可看出：（１）海南２种江蓠不同提取物均具
有较为广谱的抗细菌能力，对革兰氏阳性菌和革兰氏
阴性菌均有抗菌作用。（２）细基江蓠的乙酸乙酯和正
丁醇提取物对４种受试细菌均有抗菌作用，其中细基
江蓠石油醚提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌作用最
强。（３）海南江蓠的乙醇、石油醚、乙酸乙酯提取物对
４种受试细菌均有抗菌作用，乙醇提取物的抑菌圈直
径最大，石油醚提取物次之，说明海南江蓠乙醇提取物
和石油醚提取物对受试细菌的抑制作用最强。（４）海
南江蓠抗菌效果总体优于细基江蓠。（５）细基江蓠乙
醇提取物对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌无抗菌活
性，但经过石油醚、乙酸乙酯萃取后，却出现了抗金黄
色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的活性，这可能是由于乙
醇提取物中多种成分共同起作用或者具有抗菌活性的
功能基团被其它化合物屏蔽了的缘故［６］。徐年军
等［１２］曾报道通过薄层层析分离、刮取特征带分析，可
检测到粗提物中被屏蔽的低活性组分。可见，不同江
蓠使用不同的有机溶剂提取得到的活性物质及其抗菌
能力是不同的。
２．２　抗真菌活性比较研究
海南２种江蓠不同提取物的抗真菌活性见表１。
由表１可看出：（１）２种江蓠不同提取物均具有较
广谱的抗真菌能力，但抗菌范围与抗菌能力不同，海南
江蓠的抗菌效果总体优于细基江蓠。（２）２种江蓠乙
醇提取物对同种供试真菌的抑菌圈直径均最大，说明
２种江蓠乙醇提取物对受试真菌的抑制作用最明显。
此外，海南江蓠石油醚提取物能使番木瓜炭疽菌
的菌丝生长稀疏，但最外围较为茂密；番木瓜炭疽菌的
菌丝生长对海南江蓠乙醇提取物敏感并且受抑制后产
生清晰的抑菌圈。倒置显微镜下观察发现，海南江蓠
　 杨　璐等：海南两种江蓠不同提取物的抗菌活性／２０１５年第２期４２　
乙醇提取物对番木瓜炭疽菌孢子的萌发有抑制作用。
细基江蓠乙醇提取物、乙酸乙酯提取物对芒果炭疽菌
有微弱的抑制活性，产生的抑菌圈不明显。
２．３　讨论
（１）海南２种江蓠一年四季均能生长，但抗菌实验
表明，抗菌活性最强的是夏季季风期。这是因为，江蓠
在此季节可分泌相比于冬季更多的抗菌活性物质。
（２）本实验是在体外的培养皿内完成的，需要进一
步在活体实验中验证。
（３）江蓠抗菌活性物质种类繁多，不同的物质有不
同的抗菌能力和范围。本实验仅对４种细菌和４种真
菌进行了抗菌活性研究，在抗菌活性物质筛选中应该
进一步扩大筛选的靶目标。
（４）本实验研究的是不同溶剂提取物的抗菌活性。
可采用硅胶柱层析、凝胶Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０柱层析、制
备薄层层析和高效液相色谱等技术手段分离、纯化海
南２种江蓠化学成分，得到单体化合物，为抗菌活性研
究奠定基础。
３　结论
以４种细菌和４种真菌作为供试菌，用圆形纸片
法对海南２种江蓠（海南江蓠和细基江蓠）的乙醇、石
油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物进行抗菌活性比较研
究。结果表明：２种江蓠提取物均具有较为广谱的抗
菌能力，且不同提取物的抗菌活性物质、抗菌能力和范
围不同，海南江蓠的抗菌效果优于细基江蓠。为热带
植物病原真菌和细菌病害的防治提供了新的参考。
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Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　Ｔｗｏ　Ｈａｉｎａｎ　Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ
ＹＡＮＧ　Ｌｕ，ＣＡＩ　Ｙｉｎ，ＹＡＯ　Ｓｈｕａｉ，ＣＨＥＮ　Ｈｕｉ－ｌａｎ，ＣＨＥＮ　Ｙｕ－ｔｉａｎ，ＷＡＮＧ　Ｊｉｅ，ＬＵＯ　Ｘｉａｎ－ｑｕｎ，ＷＡＮＧ　Ｘｉｎ－ｇｕａｎｇ
（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｉｎ　Ｈａｉｎａｎ　Ｓｕｐｅｒｉｏｒ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｈａｉｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｉｋｏｕ５７０２２８，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｆｏｕｒ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉｕｍ （Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ，Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｒｏｓｅｎｂａｃｈ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ，
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ａｎｄ　ｆｏｕｒ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｆｕｎｇｕｓ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ，Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｐａｐａｙａｅ　Ｐ．Ｈｅｎｎ，Ｃｏｌ－
ｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ，Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌｌａ　ｄｏｍｉｎｉｃａｎａ）ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｔｅｓｔ　ｂａｃｔｅｒｉａ，ｔｈｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ
ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ，ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ，ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ，ｎ－ｂｕｔａｎｏｌ　ｆｒｏｍ　ｔｗｏ　Ｈａｉｎａｎ　Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｈａｉｎ－
ａｎｅｎｓｉｓ，Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｔｅｎｕｉｓｔｉｐｃｔａｔａ）ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｂｙ　ｃｉｒｃｕｌａｒ　ｐａｐｅｒ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ，ｔｗｏ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ
Ｇｒａｃｉｌａｒｉａｅｘｔｒａｃｔ　ｂｏｔｈ　ｈａｄ　ｍｏｒｅ　ｂｒｏａｄ－ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ａｎｄ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ，ａｎ－
ｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｗｅｒｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ，ｔｈｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｈａｉｎ－
ａｎｅｎｓｉｓ　ｗａｓ　ｂｅｔｔｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｔｅｎｕｉｓｔｉｐｃｔａｔａ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｇｒａｃｉｌａｒｉａｅｘｔｒａｃｔ；Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓ；Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｔｅｎｕｉｓｔｉｐｃｔａｔａ；ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ；ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ