免费文献传递   相关文献

斜生栅藻对草甘膦异丙胺盐的毒性响应



全 文 :第 36卷
我国《地表水环境质量标准》的标准值主要是参
考美国各州、日本、前苏联、欧洲等国家及地区的水质
基准值和标准值来确定,没有考虑本国水生态系统的
区域性特征[1-3]。因此从维护我国水生态系统的长远利
《环境科学与技术》编辑部:(网址)http://fjks.chinajournal.net.cn(电话)027-87643502(电子信箱)hjkxyjs@126.com
收稿日期:2013-02-21;修回 2013-10-25
基金项目:环保公益性行业科研专项(201009033)
作者简介:邱伟建(1987-),男,硕士研究生,主要研究方向为生态毒理,(电子信箱)qwj-1000@163.com;*通讯作者,(电话)025-58731089(电子信箱)
chenmd@nuist.edu.cn。
Environmental Science & Technology
第 36卷 第 12期
2013年 12月
Vol. 36 No.12
Dec. 2 0 1 3
邱伟建,陈敏东,葛顺,等.斜生栅藻对草甘膦异丙胺盐的毒性响应[J].环境科学与技术,2013,36(12):24-28. Qiu Wei-jian,Chen Min-dong,Ge
Shun,et al. Acute and chronic response ofScenedesmus obliquus to glyphosate-isopropylammonium[J].EnvironmentalScience&Technology,2013,36(12):
24-28.
斜生栅藻对草甘膦异丙胺盐的毒性响应
邱伟建 1, 陈敏东 1*, 葛顺 2, 宋玉芝 1, 龚旋 1, 周军英 3, 单正军 3
(1.南京信息工程大学环境科学与工程学院,江苏省大气环境监测与污染控制高技术重点实验室,江苏 南京 210044;
2.江苏省环境监测中心,江苏 南京 210036; 3.环保部南京环境科学科学研究所,江苏 南京 210042)
摘 要:为了解有机磷农药毒死蜱污染对本土水生敏感性物种斜生栅藻的毒性效应,在实验室条件下采用静态毒性实验。研究了草
甘膦异丙胺盐对斜生栅藻 96 h急性毒性效应,并在急性试验基础上分析了不同浓度草甘膦异丙胺盐存在 14 d后斜生栅藻叶绿素含
量、可溶性蛋白以及丙二醛含量。结果表明:草甘膦异丙胺盐的 96 h EC50为 619.12 mg/L,属低毒农药;草甘膦异丙胺盐对斜生栅藻叶
绿素 a抑制作用显著,故叶绿素 a可作为毒性评价敏感性指标;斜生栅藻在前期短时间低浓度胁迫作用下能促进可溶蛋白、MDA含
量的上升,但在后期长时间高浓度的胁迫作用下,对斜生栅藻产生实质性的损伤至死亡,以胁迫作用后期可溶蛋白含量和 MDA含量
的下降体现出来。
关键词:草甘膦异丙胺盐; 斜生栅藻; EC50; 叶绿素 a; 可溶蛋白; MDA
中图分类号:X503.2 文献标志码:A doi:10.3969/j.issn.1003-6504.2013.12.006 文章编号:1003-6504(2013)12-0024-05
Acute and Chronic Response of Scenedesmus obliquus to
Glyphosate-isopropylammonium
QIU Wei-jian1, CHEN Min-dong1*, GE Shun2, SONG Yu-zhi1,
GONG Xuan1, ZHOU Jun-ying3, SHAN Zheng-jun3
(1.Jiangsu Key Laboratory of Atmospheric Environment Monitoring and Pollution Control,School of Environmental
Science and Engineering,Nanjing University of Information Science & Technology,Nanjing 210044,China;
2.Jiangsu Province Environmental Monitoring Centre, Nanjing 210036, China;
3.Nanjing Institute of Environmental Science,Ministry of Environment Protection,Nanjing 210042,China)
Abstract:In order to understand the effect of pollution by chlorpyrifos of organophosphorus pesticide on the Scenedesmus
obliquus,96 h acute response of Scenedesmus obliquus to chlorpyrifos was investigated on the indoor condition using static
toxicity test. Based on the acute environment and chronic environment,analysis was done to show the content of Chlorophyll
a,solute protein and MDA in Scenedesmus obliquus when they were exposed to different concentrations of chlorpyrifos after
14 d. Results showed that 96 h EC50 of glyphosate -isopropylammonium was 619.12 mg/L which belongs to lowly toxic
pesticide. Since glyphosate-isopropylammonium’s impact on the Chlorophyll a of Scenedesmus obliquus is obvious,it could
be used as a sensitive indicator of toxicity evaluation. Low concentration of glyphosate-isopropylammonium could promote
the content of solute protein and MDA in the early experiments,while under long time and high concentration duress in the
later experiments,Scenedesmus obliquus have produced substantial injury to death that shows by the content of solute protein
and MDA decrease.
Key words:glyphosate-isopropylammonium;Scenedesmus obliquus;EC50;Chlorophyll a;solute protein;MDA
第 12期
益来看,根据区域水体的实际水质特性与水生态系统
的结构特征制定相应的区域性水生态基准或标准[4],
开展我国水质基准的研究已迫在眉睫[5-6]。
目前,越来越多的农药污染的报道已引起人们对
水环境的关注,特别是近几年来发生比较多的有机磷
农药污染[7-8]。这无疑为中国空白的水质基准研究敲响
警钟,尤其是农药的水环境基准研究。
斜生栅藻(Scenedesmus obliquus Kütz)属于绿藻
纲、绿球藻目、栅藻科、栅藻属,是典型代表藻种,广泛
存在于我国的水体中,斜生栅藻对毒物易敏感、个体
小,实验室易获取,繁殖能力强,此外,斜生栅藻可以
在短时间内通过化学物质对其作用,充分反映化学物
质的毒性效应,避免其多世代及种群水平的影响评价,
是一种标准的实验室测试生物[9-10]。本文通过对长江
三角洲流域广泛使用的农药进行调查研究,研究内容
主要包括农药生产及使用状况调查、流域农药暴露水
平的模型预测和实际监测。本文笔者通过重点流域
(长江三角洲流域)农药生产及使用状况调查、流域农
药暴露水平的模型预测和实际监测,从而为本实验选
取一种高效低毒有机磷农药 -草甘膦异丙胺盐
(glyphosate-isopropylammonium),利用该种有机磷农
药对斜生栅藻进行急性毒性试验,在急性实验的基础
上,通过急性半致死浓度的计算,获取慢性毒性浓度,
从而开展完善系统的慢性毒性效应研究。本实验的主
要目的是为有机磷农药筛选以及选取本土水生生物
的筛选提供理论和数据支持,为下一步开展有机磷农
药对水生生物的毒性评价和水生态基准的制定提供
参考依据。
1 材料和方法
1.1 试验材料
斜生栅藻取材于中国科学院水生生物研究所,编
号(FACHB416),经实验室纯化扩培几代后,选取对
数生长期的藻种进行试验。
草甘膦异丙胺盐体积分数 30%,由江苏省南京环
境科学研究所提供。
1.2 试验方法
1.2.1 急性毒性试验
本实验急性试验方法依照 OECD [11] 标准方法进
行,选取 BG-11培养液作为培养基,在恒温光照培养
箱中进行受试藻液的扩培,主要环境参数为光照强度
2 500 lx,光暗比 1∶1,温度(25±1)℃[12-13],每天定时摇
动 3次(早中晚各一次)。进行急性毒性试验时采用国
际通用的“瓶法”,即在 500 mL三角锥形瓶中无菌接
入 200 mL左右处于对数生长期的试验藻液,起始密
度为 4×106 mL-1。根据前期预试验的结果,确定试验
的浓度范围,实验中设置 5个等差浓度梯度和一个空
白对照,每组处理浓度设置 3个平行样,将相应的农
药浓度添加至锥形瓶中,其浓度分别为 0、300、600、
900、1 200、1 500 mg/L。
(1)EC50测定。急性实验 EC50测定过程中,对受试
浓度组中的栅藻定时取样,每次取 2份,每 24 h取样
一次,连续取样 5 d,分别记为 0、24、48、72、96 h。原始
取样 1 mL,对原始藻液加水稀释定容至 10 mL,利用
浮游计数框[14-15]测定初始藻细胞密度。此外对各时间
点取样的藻液定量稀释后用显微镜观测藻细胞,并对
其计数,以 TRIMMED SPEARMAN-KARBER方法计
算 24、48、72、96 h各时间节点的 EC50。
1.2.2 慢性毒性试验
根据上文中急性毒性试验测算的 EC50,以急性试
验数据 1/2Q(96 h EC50)[16]为慢性试验最高浓度值,慢
性试验中设置 5组农药梯度和一组空白对照组,每组
设 3个平行样,试验过程中向锥形瓶中添加农药至相
应浓度,分别为 0、64.323、128.646、192.969、257.292、
321.615 mg/L。
(1)叶绿素 a含量测定。在叶绿素 a含量测定过
程中,对受试藻液每隔 48 h定时取样 1次,每次取样
4份,每份 5 mL,共计取样 8次,连续 14 d,对取样试
管分别标记为 0、2、4、6、8、10、12、14 d。通过玻璃纤维
滤膜(47 mm)对藻液进行抽气过滤。经过反复多次过
滤后,将滤膜对折后放入 10 mL离心管,将离心管编
号后放入超低温冰箱(-80 ℃)保存,此样品在此条件
下可保存 3个月。叶绿素 a含量的测定选取热乙醇萃
取法[17]。
(2)可溶蛋白含量测定。可溶蛋白含量测定的取
样方法同上,将藻液在冷冻离心机上冷冻离心,离心
参数为 12 000 r/min,-20 ℃,离心时间为 20 min,离心
后弃上清液,在离心管中加入 pH为 7.8的磷酸缓冲液
5 mL,在自制冰浴条件下超声破碎[18-19],破碎后完成
后再次利用上述离心参数,离心 20 min,取上清液为粗
酶液。此粗酶液由于时效性较短,因此在可溶蛋白含
量的测定中现制现用,可溶蛋白测试方法选用G-250
染色法[20]。
(3)MDA含量测定。可溶蛋白含量测定的取样及
制取方法同“1.2.2”(1)节,注意将磷酸缓冲液替换为
10%的三氯乙酸。此粗酶液由于时效性较短,所制取的
粗酶液现制现用,丙二醛(MDA)含量测定选用硫代巴
比妥酸法[20]。
试验过程中应对斜生栅藻进行称重,先对藻液进
行鲜重测定,采用滤膜差重法对烘干后的滤膜进行干重
邱伟建,等 斜生栅藻对草甘膦异丙胺盐的毒性响应 25
第 36卷
测定,按照鲜藻含水量约为 90%换算成藻的鲜重[21]。
2 结果与分析
2.1 草甘膦异丙胺盐对斜生栅藻急性毒性效应
2.1.1 草甘膦异丙胺盐对斜生栅藻生长的影响
用不同质量浓度草甘膦异丙胺盐分别处理藻类
培养液,以藻细胞密度为指标做生长曲线结果见图 1。
由图 1可见,对于农药草甘膦,在低浓度 300 mg/L胁
迫作用下,斜生栅藻受一定程度的抑制作用,且生长
缓慢低于空白组;当浓度达到 600 mg/L时,藻细胞的
生长速度缓慢,几乎于零增长状态,同时随着农药浓
度的增大,当浓度达到 1 200 mg/L、1 500 mg/L时藻
细胞逐渐呈负增长状态,这可能是因为高浓度处理组
以接近藻细胞负荷的极限,以至藻细胞功能无法完全
恢复。此外在显微镜观察藻细胞形态结构过程中,发
现当药物农药高时,可以观察到部分藻细胞体积增大,
子细胞出现畸形分裂,出现人字形和裤型,这种现象
与其他作者在有机锡和 DBP对栅藻细胞形态所产生
的影响有相似之处,说明 3种农药均使斜生栅藻的生
长与分裂产生一定的解偶联作用[22-23]。
以 TRIMMED SPEARMAN-KARBER分析计算,
确定各时间(24、48、72、96 h)的 EC50值及其 95%置
信区间,如表 1所示。
由表 1可知,随着试验时间的延长,农药 EC50值
呈下降趋势,说明随暴露时间延长,斜生栅藻的抗药
性降低,可能存在藻细胞受损,恢复功能逐渐丧失,
农药对其产生了长期毒性。
2.2 草甘膦异丙胺盐对斜生栅藻慢性毒性效应
2.2.1 草甘膦异丙胺盐对斜生栅藻叶绿素 a的影响
用不同质量浓度草甘膦分别处理藻类培养液,经
暴露 14 d,以叶绿素 a含量为指标做生长曲线结果见
图 2。由图 2可见,在以草甘膦异丙胺盐染毒 2 d,叶
绿素 a含量有下降的趋势,但现象不明显,几乎与同
时间的对照样齐平;随着染毒时间的延长,叶绿素 a含
量表现出明显的下降趋势,当农药浓度=61.912 mg/L,
叶绿素 a已受到极大的抑制,染毒 4 d抑制率达 50%,
随着染毒时间的延长,染毒 14 d的抑制率能达到75%,
表现出明显的时间抑制效应;以同一天时间来看,随着
农药浓度的增大,叶绿素 a仍持续下降且趋于平衡,
表现出一定的浓度-剂量抑制效应,同时染毒条件
下,叶绿素 a的含量值始终保持 2 000~5 000 mg/m3,
表明斜生栅藻叶绿素 a不能得到很好恢复,联系图 1
的生长曲线可以发现:草甘膦异丙胺盐严重影响了栅藻
的光合作用,从而抑制了叶绿素 a的生成,且在叶
绿素 a这一指标上更能很好的体现毒性抑制作用。
2.2.2 草甘膦异丙胺盐对斜生栅藻可溶蛋白的影响
经暴露 14 d,以可溶蛋白含量为指标做生长曲线
结果见图 3。由图 3可知:在处理 2 d后,斜生栅藻的可
溶蛋白含量与对照组相比,均有显著增高,整体呈先
上升的趋势,当草甘膦浓度为 309.56 mg/L时,可溶蛋
白含量为 15.16 mg/g达到最高点;处理 4 d变化趋势
与 2 d相似,也整体呈上升趋势,且也在 309.56 mg/L
浓度时,可溶蛋白含量达到最高点为 15.52 mg/g,表
现出很好的浓度诱导效应,这与卢晶等[24]发现四羟甲
表 1 草甘膦异丙胺盐对斜生栅藻的半数致死浓度
Table 1 Scenedesmus obliquus’EC50 of the glyphosate-
isopropylammonium
t/h EC50 /mg·L-1 95%置信区间
24 >1 500 -
48 999.55 976.86~1 022.78
72 860.92 840.32~882.03
96 619.12 608.45~629.98
26
第 12期
基硫酸鏻促进铜绿微囊藻可溶性蛋白含量升高一致;
随着处理时间的延长,在浓度未达到 309.56 mg/L 时,
可溶蛋白含量已达到最高点,在高浓度时表现出下降
的趋势;当处理时间 14 d后,可溶蛋白含量相对 12 d
开始下降,研究认为可能这是在草甘膦长时间的胁迫
作用下产生的毒性效应,如果继续延长暴露时间,可能
得到的胁迫现象会更明显(注:以草甘膦异丙胺盐处
理斜生栅藻 6 d的样品损毁,无数据)。
2.2.3 草甘膦异丙胺盐对斜生栅藻MDA的影响
用不同质量浓度草甘膦异丙胺盐分别处理藻类
培养液,经暴露 14 d,以 MDA含量为指标做生长曲
线结果见图 4。由图 4可知,在处理 2 d后,斜生栅藻
的 MDA含量与对照组相比,均有显著增高,整体呈
先上升后下降的趋势,在 C=123.824 mg/L时,MDA达
到该时间段的最高值为 58.64 μmol/g;而处理 8~14 d,
MDA下降趋势非常显著甚至在高浓度时降至低于空
白组,研究认为这可能是长时间的农药处理已经对斜
生栅藻产生了实质性的伤害,这一点与前面草甘膦异
丙胺盐对可溶蛋白实验结果是相似的(注:以草甘膦
异丙胺盐处理斜生栅藻 6 d的样品损毁,无数据)。
3 讨论
本文选取的受试藻液-斜生栅藻初始密度约为
4×106 mL-1,经纯化培养 96 h后藻细胞密度增加至原
初始密度的 4倍,藻细胞密度可达到 1.5×107 mL-1,说
明栅藻在培养过程中仍处于对数期生长,繁殖条件利
于斜生栅藻的生长,有利于试验的开展。牟文等以藻细
胞初始密度约 3.9×106 mL-1进行重金属对斜生栅藻的
毒性研究[25],研究表明藻细胞初始密度较低时会导致
后期其他生化指标测定的数据不理想。因此选取合适
生长期的栅藻细胞进行试验,有助于实验数据的准确
性和稳定性。
国内外关于斜生栅藻对农药的毒性响应的研究报
告屡见不鲜,有机磷农药对藻细胞的损害主要表现为
细胞的杀灭性,变异性以及生长抑制。本文中计算 96 h
的半致死浓度 EC50[26],参照《水和废水监测分析方法》
中规定,藻类生长抑制实验对毒物的毒性分级标准为
96 h-EC50<1 mg/L时为极高毒,在 1~10 mg/L之间为
高毒,在 10~100 mg/L 之间为中毒,>100 mg/L 时为低
毒[27]。故本文所选择的有机磷农药-草甘膦异丙胺盐属
于低毒。
EC50被认为是最精确的毒性效应值,但是它仅仅
能反映不同毒物的毒性大小或者不同受体对毒物的
耐受性大小[28],越来越多的研究表明,低于引起生长
率或死亡率变化的浓度就已可能对生物体造成严重
影响,可以通过别的敏感性指标表现出来。
有机磷农药的毒性主要为抑制靶标生物神经系
统突触上乙酰胆碱酯酶活性,引起突触传递受阻[16],
而斜生栅藻为浮游植物不具备神经系统,其伤害机理
有别于动物。叶绿素是各种浮游藻类中广泛存在的天
然色素,其中叶绿素 a存在于所有的浮游藻类中,大约
占有机物干重的 1%~2%,是估算浮游植物生物量的重
要指标[29],同时叶绿素含量也是客观反映植物利用光
照能力的一种重要指标,往往作为判断植物光合能力
强弱,反映环境胁迫状况的依据[30],从实验中发现除
草剂草甘膦异丙胺盐对斜生栅藻叶绿素 a的抑制非
常明显,可以说叶绿素 a不仅可以作为评价藻类生物
量的重要指标,还可以作为敏感性毒性评价指标。
蛋白质作为细胞代谢过程中的重要催化剂,在细
胞生命活动中扮演者不可替代的角色。此外,蛋白质
是组成生命体组织细胞的重要结构物质,因此机体内
蛋白质含量的变化情况能够反映细胞内代谢活动是
否正常[31]。实验过程中,各组受试藻液在早期染毒处
理过程中,与对照组相比,均表现为显著活跃,因此农
药对栅藻细胞在早期影响中起促进作用,促进藻细胞
蛋白抗毒代谢平衡。试验后期可溶蛋白含量的下降也
说明了农药的高浓度及长时间胁迫导致细胞代谢异
常和功能丧失,甚至导致藻细胞的死亡失活。
MDA作为脂质过氧化反应的产物之一,可以用
来度量过氧化反应的程度[32]。研究认为前期短时间处
理条件下,草甘膦异丙胺盐诱导斜生栅藻细胞产生的
大量亲电子自由基,已超过了细胞自身的自由基清除
能力,过多的自由基攻击生物膜上所含有的大量不饱
和脂肪酸诱发脂质过氧化反应,生产 MDA;而后长时
间胁迫处理,使膜的通透性不断增加,膜上的受体和供
体被破坏,细胞代谢因此发生紊乱,同时破坏膜的正
常结构,使膜的结构损伤,对斜生栅藻造成了实质性的
伤害,实验中以MDA含量的下降体现出来,这与上文
长时间胁迫作用下可溶蛋白含量下降是一致的。
本实验全过程均是在实验室模拟条件下进行,只
邱伟建,等 斜生栅藻对草甘膦异丙胺盐的毒性响应 27
第 36卷
是对斜生栅藻个体水平进行分析,未全面考虑基因水
平,下一步试验开展应把藻细胞分子水平纳入到试验
范围。
4 结论
(1)草甘膦异丙胺盐的96 EC50为 619.12 mg/L,
为低毒农药。
(2)草胺磷异丙胺盐对叶绿素 a的抑制效果非常
明显,叶绿素 a可作为毒性评价敏感性指标。
(3)长时间高浓度的胁迫作用,对斜生栅藻产生
实质性的损伤至死亡,以胁迫作用后期可溶蛋白含量
和MDA含量的下降体现出来。
[参考文献]
[1] 孟伟,吴丰昌.水质基准的理论与方法学导论[M].北京:科
学出版社,2010.
[2] 霍守亮,陈奇,席北斗,等.湖泊营养物基准的制定方法研
究进展[J].生态环境学报,2009,18(2):743-748.
[3] 赵娜,朱琳,冯鸣凤.不同 pH条件下 Cr6+对 3种藻的毒性
效应[J].生态毒理学报,2010,5(5):657-665.
[4] 周启星,罗义,祝凌燕.环境基准值的科学研究与我国环境
标准的修订[J].农业环境科学学报,2007,26(1):1-5.
[5] 孟伟,张远,郑丙辉.水环境质量基准、标准与流域水污染
物总量控制策略[J].环境科学研究,2006,19(3):1-6.
[6] 吴丰昌,孟伟,宋永会,等.中国湖泊水环境基准的研究进
展[J].环境科学学报,2008,28(12):2385-2393.
[7] N L Scholz,N K Truelove,J S Labenia,et al. Dose-addi-
tive inhibition of chinook salmon acetylcholinesterase activity
by mixtures of organophosphate and carbamate insecticides
[J]. Environmental Toxicology and Chemistry,2006,25
(5):1200-1207.
[8] Central Valley Regional Water Quality Control Board
(CVRWQCB). The Water Quality Control Plan for the Cali-
fornia Regional Water Quality Control Board Central Valley
Region[R]. The Sacramento River Basin and the San Joaquin
River Basin, 2007.
[9] 葛会林,刘树深,朱祥伟,等.微板吸光法测定 9种农药对
斜生栅藻的抑制毒性[J].生态毒理学报,2008,3(6):606-
612.
[10]于彩虹,李浩,张显涛,等.乙酰甲胺磷对斜生栅藻的毒性
及细菌降解研究[J]. 环境工程学报,2010,4(10):2397-
2400.
[11] OECD. OECD Guidelines for Testing of Chemicals,No. 201:
Freshwater Alga and Cyanobacteria,Growth Inhibition Test
[S]. Paris:Organisation for Economic Cooperation and De-
velopment,2004.
[12]许海,杨林章,刘兆普.铜绿微囊藻和斜生栅藻生长的氮营
养动力学特征[J].环境科学研究,2008,21(1):69-73.
[13]张莹,李宝珍,屈建航,等.斜生栅藻对低浓度无机磷去除和
生长情况的研究[J].环境科学,2010,31(11):2661-2665.
[14]刘娅琴,邹国燕,宋祥甫,等.富营养水体浮游植物群落对
新型生态浮床的响应[J]. 环境科学研究,2011,24(11):
1233-1241.
[15]苏玉萍,林慧,钟厚璋,等.富营养化山仔水库沉积物微囊藻
复苏的受控因子[J].生态学报,2011,31(20):6167-6173.
[16]周启星,孔繁翔,朱琳.生态毒理学,科学出版社[M].北京:
科学出版社,2005.
[17]陈宇炜,陈开宁,胡难辉.浮游植物叶绿素 a测定的热乙醇
法及其测定误差的探讨[J].湖泊科学,2006,18(5):550-
552.
[18]陈伟平,陈必链,张艳燕.三种微藻细胞破碎方法的比较[J].
生物技术,2008,18(1):55-58.
[19]孙利芹,王长海,江涛.紫球藻细胞破碎方法研究[J].海洋
通报,2004,23(4):71-74.
[20]李合生.植物生理生化实验原理合技术[M].北京:高等教
育出版社,2001.
[21]张宝玉,李夜光,李中奎,等.温度、光照强度和 pH对雨生
红球藻光合作用和生长速率的影响[J].海洋与湖沼,2003,
34(5):558-565.
[22]何炜,梁淑轩,杜道彬,等.有机锡对斜生栅藻(Scenedesmus
obliquus)的毒性影响试验研究[J]. 农业环境科学学报,
2007,26(S):75-78 .
[23]胡芹芹,熊丽,田裴秀子,等.邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对
斜生栅藻的致毒效应研究[J].生态毒理学报,2008,3(1):
87-92.
[24]卢晶,钟国华.四羟甲基硫酸鏻去除铜绿微囊藻效果及其
机制研究[J].环境污染与防治,2010,32(6):60-64.
[25]牟文,熊丽,胡芹芹,等. HgCl2对斜生栅藻生理生化特性的
影响[J].生态毒理学报,2009,4(6):854-859.
[26]生秀梅,熊丽,李小明,等.两种新型农药对斜生栅藻的毒
性研究[J].武汉植物学研究,2004,22(2):153-157.
[27]国家环境保护总局.水和废水监测分析方法[M].北京:中国
环境科学出版社,2002:715-721
[28]赵娜,朱琳,冯鸣凤.不同 pH条件下 Cr6+对小球藻和斜生
栅藻的毒性效应[J].东南大学学报:医学版,2010,29(4):
382-286.
[29]戴荣继,佟斌,黄春. HPLC测定饮用水中藻类叶绿素含量
[J].北京理工大学学报,2006,26(1):87-89.
[30]刘碧云,周培疆,李佳洁,等.丙体六六六对斜生栅藻生长
及光合色素和膜脂过氧化影响的研究[J].农业环境科学学
报,2006,25(1):204-207.
[31]秦洪伟,陈柳芳,鲁楠,等.氧氟沙星对斜生栅藻的毒性效
应[J].环境化学,2011,30(4):885-886.
[32]何桢,胡晓静,牟文,等.三聚氰胺对斜生栅藻的毒性研究
[J].农业环境科学学报,2010,29(8):1455-1459.
28