全 文 :第26卷 第6期 浙 江 林 业 科 技 Vol. 26 No.6
2 0 0 6年 11月 JOUR. OF ZHEJIANG FOR. SCI. & TECH. Nov., 2 0 0 6
文章编号:1001-3776(2006)06-0041-03
花烛低成本快速繁殖技术初探
崔月羚 1,2,卢庆延 3,徐迎春 1*,陈景东 2
(1. 南京农业大学园艺学院,江苏 南京 210095;2. 山东省济宁市园林管理局,山东 济宁,272100;
3. 山东省济宁市建筑设计研究院,山东 济宁,272100)
摘要:本试验从光照、外植体刻伤、廉价碳源、不定芽增殖与生根培养同时进行、瓶外生根等方面进行了花烛低
成本快速繁殖技术的研究,结果表明,晴天利用自然光,阴天进行日光灯照光处理可节约电能 20%;外植体进行
刻伤处理后产生愈伤组织块数及不定芽分化率明显高于正常切块;采用白砂糖 30g诱导愈伤组织及不定芽效果理
想,比使用蔗糖节约成本 90%左右;使用MS培养基+6-BA1.0 mg/L+IBA0.1 mg/L达到了不定芽增殖与生根同时
进行的目的;无根试管苗用 2号生根粉 5 000倍液浸泡 30 min后新根点发生较多,移栽成活率高。
关键词:花烛;低成本;快速繁殖;技术
中图分类号:S682.32 文献标识码:B
花烛(Anthurium andraeanum)的佛焰苞花序形状奇特,观花观叶兼宜,是珍稀、名贵的切花和盆花,具有
较高的观赏价值和经济价值,市场开发前景广阔。因传统繁殖方法花烛生长缓慢,难以扩大生产,离体培养是
其种苗生产的主要途径[1]。但昂贵的费用是制约其组织培养发展的瓶颈,在保证组培快繁质量的基础上,最大
限度地降低支出、节约能源具有非常重要的现实意义。本试验从光照、外植体刻伤、廉价碳源、不定芽增殖与
生根培养同时进行减少步骤、瓶外生根等方面进行了探讨,旨在找到可行的降低成本的技术应用于生产。
1 材料与方法
1.1 试验材料
取自山东省济宁市园林局科研所花烛组培苗材料 D1。
1.2 试验处理
1.2.1 光照处理 培养室内,靠近玻璃窗光线明亮处的无菌苗,采取阴天日光灯补光 4 ~ 6 h,晴天早晚各补光
1 h,称为处理光照。以光照强度 1 200 ~ 1 500 lx,用日光灯照光 12 h/d,称为正常光照。处理 50 d后,调查试
管苗生长分化情况,计算对试验成本的影响。
1.2.2 外植体刻伤处理 取花烛健壮幼叶用流水冲洗干净,接种室内灭菌后,一部分切成 0.6 cm×0.6 cm的正
常切块;另一部分沿叶脉横划 2 ~ 3刀,形成刻伤,称为刻伤切块。处理 45 d后,调查统计对愈伤组织诱导及
不定芽分化的影响。
1.2.3 碳源处理 分别采用白砂糖 30 g/L、35 g/L、蔗糖 30 g/L处理。处理 40 d后,调查统计对愈伤组织诱导
及不定芽增殖的影响。
1.2.4 不定芽增殖与生根培养同时进行的试验研究 在分化培养及以后的继代培养过程中,采用以下生长调节
剂组合处理:①6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,②6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,③6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1
mg/L,④6-BA2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,旨在找出继代增殖与生根同时进行的适宜生长调节剂组合配方,以简
收稿日期:2006-09-10;修回日期:2006-10-12
作者简介:崔月羚(1970-),女,山东鱼台人,高级工程师,硕士,从事观赏植物组织培养研究;*通讯作者。
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化操作程序。
培养条件采用琼脂 0.6%,pH 5.8,温度 23 ~ 25℃,以MS作为基本培养基,每 45 d继代一次。
1.2.4 不同生根剂对试管苗瓶外生根的影响 对无菌苗进行不同时间和不同浓度的生根剂处理:2 号生根粉 5
000倍浸 30 min、2号生根粉 2 000倍浸 5 min、复合萘乙酸浸 12 h,以不进行任何处理为对照,处理 30 d后比
较其瓶外生根的效果。
2 结果与讨论
2.1 不同光照条件对花烛试管苗生长的影响(表 1)
由表 1表明,两种光照条件下花烛无
菌苗分化率均接近 100%,且都生长健壮。
但采用处理光照电力消耗比正常低 20%,
不影响试管苗正常的生长分化。因此完全
可采用处理光照,即合理利用自然光替代人工辅助光照。
2.2 刻伤对愈伤组织诱导及不定芽分化的影响(表 2)
由表 2可知,与对照相比,30 d后刻
伤切块明显增厚,叶表面特别是伤口周围
颗粒状突起较多。由表 2可知,进行刻伤
处理的切块产生愈伤组织块数明显高于正常切块,进一步培养发现不定芽分化率也显著高于正常切块。
叶片刻伤后,增加了外植体的表面积,能够与培养基更充分地接触,刺激伤口尽快形成愈伤组织,进一步
分化不定芽。正常切块首先从受伤的叶片边缘开始形成愈伤组织,进一步由外向内发生愈伤组织,切块逐渐肿
大,形成切块包,再进行分化。因此刻伤切块诱导愈伤组织及分化不定芽的能力显著高于正常切块。这一点与
高遐虹的观点一致[2]。
2.3 不同碳源对愈伤组织诱导及不定芽增殖的影响(表 3)
由表 3表明,两种碳源(食用白砂糖
和分析纯蔗糖)培养下愈伤组织诱导率、
不定芽增殖倍数情况差别很小,不影响诱
导增殖效果,但同比节约成本达到 90%。
在一般生产性快繁过程中完全可以用食用白砂糖替代分析纯蔗糖。
2.4 不定芽增殖与生根培养同时进行的试验研究(表 4)
由表 4 可知,在生长素 IBA 或 NAA
浓度不变的情况下,分裂素 6-BA 浓度越
小,生根苗越多,增殖芽数量相对少一些;
反之,6-BA浓度越大,生根苗越少,增殖
芽数量则相对较多。分裂素 6-BA 浓度相
同时,生长素 IBA0.1 mg/L效果好于 NAA0.1 mg/L。细胞分裂素的浓度对芽的增殖影响非常显著[3]。细胞分裂
素/生长素的器官发生调节模式表明,相对高浓度的细胞分裂素有利于芽的发生[4],相对高浓度的生长素有利于
根的发生,本研究再次证实了细胞分裂素/生长素的器官发生调节模式。
花烛生长缓慢,组培周期长,使用MS+6-BA1.0 mg/L+IBA0.1 mg/L在分化培养及以后的继代培养过程中,
能够较好地促进不定芽的增殖,平均每个培养基可产生不定芽 12个,根、茎、叶齐备的生根壮苗 8个,可直接
进行炼苗移栽。实现了继代增殖与生根同步化,打破了组培繁殖中继代与生根分步进行的常规,简化了操作程
序,缩短了培养时间,提高了繁殖速度,从而极大地节省了人力物力财力,降低了试管苗成本,为本研究中的
表 1 不同光照条件对花烛试管苗生长分化及试验成本影响
处理 分化率/% 生长情况 电力成本核算比率/%
处理光照 99.12a 健壮,正常 80.2
正常光照 99.80a 健壮,正常 100
注:表中数字后标注不同的字母表示在 0.05水平上差异显著,下表同。
表 1 不同光照条件对花烛试管苗生长分化及试验成本影响
处理 分化率/% 生长情况 电力成本核算比率/%
处理光照 99.12a 健壮,正常 80.2
正常光照 99.80a 健壮,正常 100
表 3 不同碳源浓度对愈伤组织诱导及不定芽增殖的影响
碳源及浓度/g·L-1 愈伤组织诱导率/% 不定芽增殖倍数 成本核算比率/%
白砂糖 30 98.1a 16.1 10.1
白砂糖 35 96.2a 15.8 11.3
蔗糖 30 99.2a 16.9 100.0
表 4 不同生长调节剂组合对不定芽增殖及生根的影响
生长调节剂浓度组合/mg·L-1 不定芽增殖倍数 生根苗/个
6-BA 1.0+IBA 0.1 12.4a 8
6-BA 2.0+IBA 0.1 15.7a 1
6-BA 1.0+NAA 0.1 10.3a 4
6-BA 2.0+NAA 0.1 12.1a 0
6期 崔月羚,等:花烛低成本快速繁殖技术初探 43
一项关键技术。这与蔡能的研究一致[5]。该技术同时也证明花烛比较容易生根。
2.5 不同生根剂对试管苗瓶外生根的影响
在本试验增殖培养过程中,有部分无菌苗个体较大,设计不同生根剂进行浸泡处理,结果表明(见表 5),
对照处理材料移栽 30 d时生根状况一般;2号生根粉浸泡处理后无菌苗新根点明显增加,完全能够满足上盆需
要。其中 2号生根粉 5 000倍浸 30 min处理明显优于 2号生根粉 2 000倍浸 5 min处理方案,诱导出根突后,根
系生长迅速,新根点较多,植株生长势较旺盛;
复合萘乙酸处理效果一般。综上所述,瓶外生
根在质量上基本能满足生产的需要。
瓶外生根法省去了做生根培养基所需药
品、工时和其他消耗,简化了培养程序,缩短
了培养周期,利于器皿等物品的周转。充分利用试管苗,提高了移栽成活率,避免了浪费。在实际生产中应用
广泛。瓶外生根率低于瓶内生根,关键原因可能与生长调节剂种类、浓度、环境温湿度等有关[6],有待于进一
步研究。
3 结论
在本试验中,幼叶进行刻伤处理,合理利用自然光,白砂糖代替蔗糖,瓶外生根,不定芽增殖和大苗生根
培养同时进行的技术措施,都较大幅度地降低了成本,加快了组培进程。
参考文献:
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Quick and Low Cost Breeding Technique for Anthurium andraeanum
CUI Yue-ling1,2,LU Qing-yan3,XU Ying-chun1,CHEN Jing-dong2
(1. Nanjing Agriculture University College of Horticulture, Nanjing 210095, China;
2. Jining Garden Administration of Shandong, Jining 272100, China; 3. Jining Construction Designing Academy of Shandong, Jining 272100, China)
Abstract: Study on quick and low cost breeding technique for Anthurium andraeanum demonstrated that natural
lighting at fine days and fluorescent lamp lighting at cloudy days could save about 20% electric energy, that wound
callus and adventitious bud differentiation rate of explant had evidently much more than that of normal cut, and that
induction of wound callus and adventitious bud by 30g of refined sugar had better result than that by cane sugar. MS+
6-BA1.0 mg/L+IBA0.1 mg/L could breed adventitious bud and rooting. Seedless seedling soaked 30 minutes in
5000-fold of ABT2 had high transplanting survival rate.
Key words: Anthurium andraeanum; low cost; quick breeding; technique
表 5 不同生根剂对试管苗瓶外生根的影响
生根情况 处理
20 d 30 d 40 d
对照 1~2个新根点 一般 可上盆
2号生根粉 2 000倍浸 5 min 2~3个新根点 可上盆,较好
2号生根粉 5 000倍浸 30 min 3~4个新根点 好,可上盆
复合萘乙酸浸 12 h 1~2个新根点 一般 可上盆