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环翠楼高丽红参中有效成分的分离鉴定



全 文 :人参研究 GINSENG RESEARCH 2016 年第 2 期
环翠楼高丽红参中有效成分的分离鉴定
姜志辉 1 李桂荣 2 姜鸿骁 3 历 娜 2 张崇禧 4*
(1. 环翠楼红参生物科技股份有限公司,威海 264211;
2.山东药品食品职业学院,威海 264210;3.山东大学(威海)商学院,威海 264200;
4. 山东大学(威海)海洋学院,威海 264209)
摘 要:目的 对环翠楼高丽红参进行化学成分研究。方法 利用 D101大孔树脂吸附-低压硅胶干柱层析对
环翠楼高丽红参醇提液进行分离,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构。 结果 从环翠楼
高丽红参中分离得到二个化合物,经核磁、质谱、紫外和红外光谱法鉴定为人参皂苷-Rh2,人参皂
苷-Rg3。 结论 人参皂苷-Rh2,人参皂苷-Rg3是高丽红参中特有的抗癌有效成分。
关键词:环翠楼高丽红参;人参皂苷-Rh2;人参皂苷-Rg3
Separation and Identification for Active ingredients from the
Huancuilou Korea Red Ginseng
JIANG Zhi-hui1 LI Gui-rong2 JIANG Hong-xiao3 LI Na2 ZHANG Chong-xi4*
(1.Huancuilou Red Ginseng Biotechnology joint stock Co., LTD,Shandong Weihai 264211;
2.Shandong Pharmaceutical Food Vocational College,Shandong Weihai 264210;3. School of Business,Shandong University at Weihai;
4.Marine College of Shangdong University at Weihai Shandong Weihai 264209)
Abstract:OBJECTIVE To investigate the Active ingredients from the Huancuilou Korea Red Ginseng.
METHODS To separate the Active ingredients of the Huancuilou Korea Red Ginseng by D101-
macroreticular resin- dry columniation and silica gel column chromatography,and to identify their
structures on the basis of physical and chemical quality and spectral analysis. RESULTS two
compounds were isolated. And their structures were identified by nuclear magnetic resonance
spectroscopy and masss pectrometry as the ginsenoside-Rh2,ginsenoside-Rg3.CONCLUSION The
ginsenoside-Rh2,ginsenoside-Rg3 were a Anti-cancer active ingredients from the Huancuilou
Korea Red Ginseng.
Key words:the Huancuilou Korea Red Ginseng; Ginsenoside-Rh2;Ginsenoside-Rg3
人参来源于五加科人参属植物人参 Panax gin-
seng C.A.Mey.的干燥根,主产于我国东北,尤以吉林
省产量最大,质量最佳,是我国传统的珍贵药材。人参
根据加工方法不同,分为鲜人参、生晒参、红参等产
品。 人参是百草之王,人参性平,有大补元气、复脉固
脱、补脾益肺、生津、安神、益智功能。
红参是人参的熟用品,红参的加工方法是用人参
经过浸润、清洗、分选、蒸制、烘干等工序加工而成。红
参在蒸制过程中,因为热处理会发生化学反应,成分
上发生变化,生成红参特有的生理活性物质。 研究表
明人参加工成红参后其药理作用发生了明显变化,并
且和生晒参相比,其化学成分的含量和种类也发生了
明显的变化。 而加工成红参后,其性温,具有大补元
气、复脉固脱、益气摄血的功能,具有抑制癌细胞增
长、抗氧化的作用。久服红参可以提高人体免疫力、抗
疲劳、抗辐射、抑制肿瘤、调整人体内分泌系统。 在癌
症手术后,红参还能够减轻放化疗后产生的许多副作
用。 红参作为滋补保健药物比鲜人参、生晒参更为安
全;同时红参增强免疫力和抗衰老、抗癌作用以及提
高肌体抗缺氧的能力强于生晒参 [1~4] 。 本实验对环翠
楼高丽红参的有效成分进行了研究,从其中分离得到
2个单体化合物并对其结构进行了鉴定。
1 材料与仪器
材料:环翠楼高丽红参系由产自韩国的高丽园参
作者简介:姜志辉,男,副主任药师,主要从事食品、保健食品和药品研究。
* 通讯作者:张崇禧,男,教授,博士,主要从事生药学研究。 Email:zcx_11@126.com.
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2016 年第 2 期
的新鲜根经韩国红参加工工艺和中国红参加工技术
加工而成。
试剂:氯仿、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯、苯、丙酮等
均为北京化工厂分析纯 A.R.;柱层析用硅胶及薄层析
用硅胶, 均为青岛海洋化工厂产品; 大孔吸附树脂
D101 为南开大学化工厂产品 ; 洗脱剂系统为 A:
CHCl3-MeOH(9:4)均相 ; B:CHCl3-(CH3)2CO(8:3)均
相 ;C:CHCl3-MeOH-H2O(65:35:10)下层 ;D:CHCl3-
MeOH-EtOAc-H2O(2:2:4:1)下层;E:n-BuOH-EtOAc-
H2O(4:1:5)上层;F:CHCl3-MeOH-H2O(7:3:0.5)下层;
G:n-BuOH-(CH3)2CO(4:1)均相;H:C6H6-EtOAc (1:1)
均相;I:C6H6-(CH3)2CO(3:1)均相;J:CHCl3-MeOH-
H2O(20:1:1)均相。
仪器 :Finnigan TRACE 2000 型质谱仪 ;Bruker-
AM400MHz 核磁共振波谱仪;TMS 为内标; 尼高力
Nexus470 型傅里叶变换红外光谱仪(KBr 压片);北京
泰克仪器有限公司 X-4 型数字显示显微熔点测定
仪,未校正;旋转蒸发器 RE-52A(上海亚荣生化仪器
厂);上海精密实验设备有限公司真空干燥器;北京医
用离心机厂 LD5-2A 型低速离心机; 常熟市衡器厂
LA-114型万分之一电子天平。
2 提取与分离
图 1 从红参中提取分离单体化合物的流程
Fig.1 The flow Chart of extraction for the compounds from the
Red Ginseng
3 结构鉴定
3.1化合物 1的结构鉴定
无色针状结晶(MeOH-H2O),溶于甲醇,mp.218~
220℃,在 TLC板上展开后喷雾 10%H2SO4 试剂呈现紫
红色;Liebermann-Burchard 反应呈阳性;Molish 反应
呈阳性,提示为三萜皂苷类化合物。
部分水解未检出糖,全水解检出葡萄糖。 TLC 检
识苷元 Rf 值与对照品人参二醇 Rf 值一致。 全水解只
检出葡萄糖,提示分子中只含有葡萄糖分子。
由 EI-MS谱中 m/z 622[M]+ 、621[M-H]-、459[M-
H-162]-,可知其分子量为 622,与人参皂苷-Rh2 相
符。其苷元分子量为 460,且为二醇型苷元。全水解只
检出葡萄糖 , 提示分子中只含有一个葡萄糖分子
(622-460=162)(数据归属见表 1)。
表 1 化合物 1 的 EI-MS 数据归属
Tab.1 EI-MS data of Compound 1
化合物 1 与对照品人参皂苷-Rh2 同板三种不同
溶剂(B、C、E)共薄层,二者的 Rf 值、颜色均一致。 与
对照品混合熔点不下降。因此化合物 1鉴定为人参皂
苷-Rh2(Ginsenoside-Rh2)。
图 2 化合物 1的 EI-MS 谱
Fig.2 EI-MS spectrum of compound 1
姜志辉等:环翠楼高丽红参中有效成分的分离鉴定
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m/z 碎片归属
622 [M]+
621 [M-H]-
459 [M-H-162]-,
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2016 年第 2 期
3.2化合物 2的结构鉴定
化合物 2,无色针晶(乙醇),溶于甲醇,mp.298~
303℃, 在 TLC板上展开后, 喷雾 10%H2SO4 的显色
剂,105℃烘烤呈紫红色,Liebermann-Burchard 反应呈
阳性,Molish反应呈阳性,提示为三萜皂苷类化合物。
部分水解未检出糖,全水解检出葡萄糖。 TLC 检识苷
元 Rf值与对照品人参二醇 Rf值一致。
由 EI-MS谱中,m/z 784 [M]+ 、783 [M-H]-、621
[M-H-162]-、459 [M -H-2×162]-, 可知其分子量为
784,与人参皂苷 Rg3的分子量相等,其苷元分子量为
460,为二醇型苷元。 全水解只检出葡萄糖,提示分子
中只含有两个葡萄糖分子 (783-459=162×2)(数据归
属见表 2)。
表 2 化合物 2 的 EI-MS 数据归属
Tab. 2 EI-MS data of Compound 2
化合物 2 与对照品人参皂苷-Rg3 同板三种不同
溶剂(B、C、E)共薄层,二者的 Rf 值、颜色均一致,且
与对照品混合熔点不下降,因此化合物 3 鉴定为人参
皂苷-Rg3(Ginsenoside-Rg3)。
图 3 化合物 2的 EI-MS 谱图
Fig.3 EI-MS spectrum of compound 2
4结果与讨论
4.1 本试验采用有机溶剂提取、大孔吸附树脂层析、硅
胶柱层析和低压硅胶干柱层析等植物化学方法和技
术手段从环翠楼高丽红参中分离得到了 2 个单体化
合物。
4.2 通过物理常数、化学方法和波谱分析[质谱(MS)、
红外光谱(IR)、核磁共振(NMR)]的方法鉴定了化合
物的结构,分别为人参皂苷 Rh2和 Rg3。
4.3 日本学者北川勳早年研究证明: 人参皂苷 Rh2 和
Rg3是红参特有成分,具有抗癌活性。
参考文献
[1]杨秀伟.红参化学、药理与临床研究进展[J].中
成药研究,1984,(5):30~33.
[2]Helms S. Canner prevention and therapertics:
Panax Ginseng[J].Altern Med Rev(United States),2004,9
(3):259~274.
[3]国家药典委员会编.中国药典[S].北京.中国医
药科技出版社,Vol I.2015:06,153~154.
[4]金若敏,毛平,郁玉明,等.红参、活性参与生晒
参几种药理作用的比较研究 [J].中药通报,1983,8(1):
34~40.
m/z 碎片归属
784 [M]+
783 [M-H]-
621 [M-H-162]-
459 [M-H-2×162]-
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