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超声波提取紫露草总黄酮及其鉴别
廖 莉 1 孙婷婷 2 裴正玲 2 李 容 2 潘乔丹 2 黄锁义 2
（1.北海广播电视大学，广西 北海 536000；2.右江民族医学院，广西 百色 533000)

【摘 要】为充分利用紫露草植物资源，避免资源的浪费，探讨紫露草总黄酮的提取及鉴别方法。采用超声波乙醇浸提法
从紫露草中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用分光光度法测定含量。测得样品中总黄酮的含量
C=0.1562mg/ml，回收率为 97.4%，其纯度和产率均较高。该方法采用全物理过程，无任何污染，是提取紫露草黄酮类物质的有
效途径。
【关键词】超声波提取；紫露草；总黄酮；鉴别
【中图分类号】O624.42+1；O6-332 【文献标识码】A 【文章编号】1008-1151(2011)04-0129-01

紫露草（Tradescantia reflexa）别名紫花鸭草，为鸭
跖草科多年生宿根草本，原产于北美，我国引种栽培。紫露
草茎通常簇生，紫露草性喜凉爽，湿润气候，耐寒性较强，
适应性广，耐旱、耐贫瘠、耐盐碱，几乎没有病虫害。最常
见的是适应性非常强的开蓝紫色花的品种。我国各地均有栽
培。紫露草性味淡、甘、凉，可以活血、利水、消肿、散结、
解毒。能治疗痈疽肿毒、结核、淋病等疾病。
近年来，超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、
生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道，表明其
具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表
明，利用超声波产生的强此振动、高的加速度、强此的空化
效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，
从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免
高温对提取成分的影响。但超声技术应用于提取紫露草叶中
黄酮类物质的研究尚未见报道，本文报道用超声波提取紫露
草总黄酮及鉴别。
（一）仪器与试剂
1.仪器
KQ5200DB 型数控超声波清洗器（超声工作频率 40KHz）；
UV-755B 紫外可见分光光度计；ZF-I 型三用紫外分析仪；
SHB-III 循环水式多用真空泵。
2.试剂
95%乙醇 AR；亚硝酸钠 AR；硝酸铝 AR；氢氧化钠 AR；三
氯化铝 AR；盐酸 AR；氨水 AR；冰醋酸 AR；乙酸乙酯 AR；芦
丁标准品；新鲜紫露草。
（二）方法与结果
1.总黄酮成分提取
取新鲜紫露草，烘干，粉碎。称取紫露草粉末 6g，加 80ml
95%乙醇，超声波提取 2.5 h，抽滤。滤渣再加 80ml 95%乙醇，
超声波提取 2.5h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤
液仅剩 5～7ml 为止，放置 100ml 容量瓶中，用 60%乙醇稀释
至刻度，得样品液。
2.测定方法依据
以芦丁为对照品测定木瓜叶中总黄酮的含量，加入铝离
子试剂，同时控制适宜 pH 值，使黄酮化合物与铝盐形成络合
物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。
3.定量实验—总黄酮的含量测定
（1）波长的选择。取样品液适量，在 0.30ml 5%亚硝酸
钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白
参比液在 420～700nm 波长范围测定螯合物的吸光度，螯合物
于 510nm 波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。
（2）标准曲线的绘制。分别精密吸取芦丁对照液
（0.10mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml
于 10.00ml 容量瓶中，分别加入 5%亚硝酸钠溶液 0.30ml，摇
匀，静置 6min；再加 10%硝酸铝溶液 0.30ml，摇匀，静置 6min；
再加 4%氢氧化钠溶液 4.00ml，用 60%乙醇稀释至刻度，摇匀，
静置 12min，以试剂作空白，于 510nm 处测定吸光度，见表 1。
表 1 紫外可见分光光度计测定吸光度
C（mg/ml） 0.00 0.005 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05
吸光度 0.000 0.060 0.122 0.250 0.365 0.485 0.603

根据上表得回归方程：A=-2.9069×10-3+12.05C，r=0.9999。
（3）提取物含量的测定。精密吸取样品液 0.50ml，置
10.00ml容量瓶，按标准曲线的制备方法测定其吸光度A=0.097，
根据回归方程：A=-2.9069×10-3+12.05C，计算样品中总黄酮
的含量 C=0.1562mg/ml。
（4）回收实验。精密量取样品液 1.00ml，加入标准芦丁
对照品 1.00ml（0.10mg/ml），同前样品测定方法操作测定吸
光度，求出回收率为 97.4% 。
4.定性实验—总黄酮的鉴别
（1）颜色反应。紫外光下呈色反应：取该样品溶液点在
滤纸上，在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧
光斑点。
浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水
上方熏 0.5min，立即在紫外光下观察，呈极明显的黄褐色荧
光斑点。
三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加 1%三氯化
铝乙醇溶液，吹干。在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈黄
色荧光斑点。 （下转第 128 页）
2011 年第 4期 大 众 科 技 No.4，2011
（总第 140 期） DA ZHONG KE JI (Cumulatively No.140)
【收稿日期】2010-01-06
【作者简介】廖莉（1965－），女，广西北海人，北海广播电视大学讲师，从事教学科研等工作；黄锁义，右江民族医学院
化学教研室教授，硕士研究生导师。
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从表1几种食物中硒含量可以看出，硒含量在百万分之几
到百分之零点几，各种食物中的硒含量差别较大，而且硒含
量也是非常极微的量。蛋类、水产品硒含量相对较高。应保
持每日食物的多样性。要按照合理比例，广泛摄入各类食物，
包括谷类、动物性食品、蔬菜和水果、豆类、蛋类、奶类制
品和油脂，才能保持膳食平衡，满足人体的营养功能需要。
表2为正常人每日所需硒的推荐供给量。
表 2 正常人每日所需硒（Se）的推荐供给量
年
龄
段
Se
（µg）
年龄
段
Se
（µg）
年龄
段 Se（µg）
年龄
段
Se
（µg）
年龄
段
Se
（µg）
1～
7岁
25 7～14
岁
35 14～
18岁
45 18
岁～
50 孕妇
乳母
65

杨光圻教授等通过多年研究，确定硒的安全量和生理需
要量为40～240 µg/d，已获得世界公认，已被FAO、WHO、IAEA
三个国际组织所采用。
食物是人体摄入硒的重要来源，但很多食物中的硒含量
较低，且不易吸收。饮食中的硒，人体利用度约为80%。含硒
高的动物内脏胆固醇也非常高，不宜经常食用。因此，而日
常饮食中的硒不足以满足人体的正常需要，补硒尤为重要。
由于无机硒毒性大，有机硒毒性小，生物利用率高，故利用
生物技术处理粮食作物、蔬菜、水果、中药材将是未来开发
的热点。已研制出一些富硒功能性食品（如富硒酵母、富硒
食用菌、富硒藻类、高硒蛋等）和含硒药物（如硒蛋氨酸、
硒力口服液、金施尔康、奥硒康、含硒中草药制剂等）。
（四）结束语
硒的功能活性和作用机理与摄入硒的化学形态密切相
关。近年来，应用于硒及硒的化学形态研究的联用技术越来
越多，己在环境样品、食物样品中硒化合物及元素的形态和
价态分析得到应用，但是由于食物中的硒元素含量较低，且
基体较为复杂，干扰影响大，须采用分离技术及联用技术以
减少干扰，以进一步提高检测方法的灵敏度和重现性，有望
得到很低的检出限。再有要减少样品前处理的污染和损失是
元素形态分析的一个共同问题，现采用微波消解样品预处理
技术，可以大大提高方法的准确度。
与其它分析技术相比，氢化物发生-原子荧光光谱法的应
用，在氢化物发生装置中形成气态氢化物，大大降低基体干
扰，具有仪器结构简单、灵敏度高、气相干扰少和可多元素
同时分析等优点。
HPLC-ICP-MS在线联用不但具有最高的灵敏度，同时也可
获得最低的检出限。ICP-MS的一个重要进展是用动态反应池
(DRC)和碰撞池(CCT)技术来检测 80Se，这在硒的化学形态研
究中的应用，具有灵敏度高、选择性好、可多元素同时测定
等优点，但是仪器价格及运行费用较高。而AAS、ICP-AES虽
然能够方便地与液相色谱仪联用，但基线、噪声和检出限均
较高。
作为分离技术，HPLC可以提供多种分离模式，这也会促
进该技术在硒的化学形态研究领域中的广泛应用。液相色谱
仪与原子荧光光谱仪联用法（HPLC-AFS），可同时测定多种
不同形态的化合物，具有较高的灵敏度及较低的价格和运行
费用等优点。

【参考文献】
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（上接第 129 页）
乙酸镁反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加 1%乙酸镁甲
醇溶液，吹干，紫外光下呈黄色斑点。
盐酸-镁粉反应：取乙醇提取液 1ml 于试管中加镁粉，再
加入浓盐酸数滴（1次加入），在泡沫处呈紫红色。
（2）纸层析。取样品溶液 10µl 点在滤纸上。用正丁醇∶
醋酸∶水=4∶1∶5（体积比）为展开剂，上行展开 5h，取出
晾干。喷 1%氯化铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可见荧光
斑点。
（三）讨论
1.实验结果表明，本实验方法工艺简单，回收率为 97.4%，
利用本文所提供的超声波提取、纯化方法而得到的黄酮类物
质其纯度较高。超声波可以强化乙醇浸提法，达到省时、高
效、节能的目的，此方法采用全物理过程，无任何污染，是
一条理想的提取黄酮类物质的途径，具有广阔的应用前景。
2.黄酮类化合物是一大类天然产物，广泛存在于植物界，
是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄
酮醇，其它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、
查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。天然来源的生物黄酮
分子量小，能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障，能进入脂
肪组织，进而体现出如下功能：消除疲劳、保护血管、防动
脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、抗脂肪氧化、抗衰老、
活化大脑及其他脏器细胞的功能。
黄酮类化合物具有抗癌、抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗
炎镇痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、
抗氧化、抗衰老、抗辐射等作用。近年来，世界上掀起了植
物药开发的热潮，植物药以其天然低毒的特点倍受青睐，而
黄酮类化合物以其广谱的药理作用引人瞩目。紫露草分布广
泛，本文实验结果表明，紫露草中含有较为丰富的黄酮。因
此，紫露草具有广泛开发和利用价值，值得综合利用，加强
资源开发。

【参考文献】
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