全 文 ：天 津 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
第 34卷 第 6期
2015年 12月
Vol．34 No．6
Dec．2015
摘要：[目的]探索不同辅料对于松果菊苷固体脂质纳米粒（SLN）理化性质的影响，从而对水溶性药物单体固体
脂质纳米粒的处方研究做出一点提示。[方法]采用单一变量法摸索松果菊苷 SLN中 Myrj52、山嵛酸甘油酯（Com－
pritol 888 ATO）、单硬脂酸甘油酯、大豆卵磷脂等辅料对纳米粒理化性质的影响。[结果]随 Myrj52量的增加，纳米粒
的粒径减小，Zeta电位增大，包封率增大。随 Compritol 888 ATO量的增加，包封率降低，粒径稍有增大，Zeta电位减
小。随单硬脂酸甘油酯量的增加，粒径明显增大，包封率略有减小，Zeta电位减小。随卵磷脂量的增加，粒径明显增
大，电位明显减小。包封率降低。[结论]各种辅料单独对松果菊苷 SLN的理化性质都有较大影响，此研究可以为相
似性质的药物 SLN的处方筛选提供启示。
关键词：松果菊苷；固体脂质纳米粒；辅料；理化性质
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1673－9043（2015）06－0353-04
松果菊苷固体脂质纳米粒处方筛选的研究 *
陈 静 1，2，佟 玲 1，2，刘志东 1，2，李春华 1，2，丁伶伶 1，2，郭丽丽 1，2
（1.天津中医药大学，天津市现代中药重点实验室，天津 300193；2.天津中医药大学，现代中药发现与制剂技术
教育部工程研究中心，天津 300193）
*基金项目：教育部新世纪优秀人才支持计划项目资助（NCET-
12-1068）。
作者简介：陈 静（1990-），女，硕士研究生，主要从事药物制
剂及药效研究。
通讯作者：刘志东，E-mail:lonerliuzd@163.com。
松果菊苷是一种从列当科植物肉苁蓉或管花
肉苁蓉的干燥茎中提取的苯乙醇苷类化合物 [1]，含
有多种药用有效成分，松果菊苷有很强的抗氧化活
性，可以显著减少氧化应激反应[2]。实验结果显示，
松果菊苷清除 1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）
自由基的能力是所有单体化合物中最强的[3]。固体
脂质纳米粒(SLN)是继乳剂、脂质体、微粒和毫微粒
后，用于药物控制释放的新型纳米胶团载体的给药
系统[4]，是以固态的天然或合成类脂为载体材料，将
药物包裹或内嵌于类脂核中，制成的粒径为纳米级
的固体胶粒给药系统。与脂质体和微乳相比，药物
由于被包封于 SLN的生理相容耐受性好的固体骨
架中而实现了更好的控释和缓释效果，因此 SLN有
其特殊的优越性，在新药开发中极具发展前景[4]。
白内障是一种由多种病因导致的晶状体浑浊，
是世界上主要的致盲眼病[5]。在中国和拉丁美洲也
是如此，几乎一半的盲人和视力低下都是由白内障
导致的[6-8]。随着世界人口的老龄化，这一问题已成
为全球性的、急需解决的重要问题[9-10]。在过去几十
年，很多研究致力于研究白内障的发生和发展机制[11]。
白内障的发生机制虽然还没有完全确定，氧化损伤
被公认为一个非常重要的因素[12]。因此，抗氧化剂在
抑制氧化物相关的白内障方面有很大的潜力。各种
抗氧化剂在实验研究中表现出了有效性[13-14]。
松果菊苷有很强的抗氧化活性，因此，松果菊
苷 SLN可以用于白内障的预防和治疗。本研究中，
主要对松果菊苷 SLN处方进行筛选，探索不同的辅
料对于纳米粒理化性质的影响，从而为水溶性药物
纳米粒的处方筛选提供启示。
1 材料与方法
1.1 主要仪器 紫外-可见分光光度计（瓦里安，美
国），磁力搅拌（江苏省金坛市医疗仪器厂），GM-0.33II
型沸腾隔膜真空泵（天津 Autoscience公司），CoMetro
高效液相色谱系统（CoMetro，美国），C3860A超声清
洗器（天津 Autoscience公司），低速台式离心机（长
沙湘仪离心机仪器有限公司），DELTTA320 pH 计
（METTLER TOLEDO，瑞士），Milli-Q 超纯水系统
（Millipore，美国），激光粒径测定仪（马尔文，英国），
AX205电子天平（METTLER TOLEDO，瑞士）。
1.2 主要试剂 松果菊苷提取物（天津中新药业，
含量>90％），甲醇（天津康科德科技有限公司），
Myrj52（辽阳奥克纳米材料有限公司），山嵛酸甘油
酯（Compritol 888 ATO，GATTEFOSSE,法国），单硬脂
酸甘油酯，卵磷脂（Lipoid,美国），磷酸、磷酸二氢钾、
氢氧化钠（天津市北方天医化学试剂厂）。
DOI：10.11656/j.issn.1673-9043.2015.12.10
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1.3 乳化固化法制备松果菊苷固体脂质纳米粒 乳
化固化法制备松果菊苷固体脂质纳米粒。称取适量
表面活性剂，加入超纯水，水浴 75 ℃使溶解作为水
相。另称取松果菊苷溶于适量无水乙醇中，加热使
乙醇挥尽，使松果菊苷分散于脂质材料中构成有机
相，在搅拌下将水相注入有机相，继续搅拌浓缩至
原体积的 1/4时，倒入冰水浴 2 h。经微孔滤膜过滤
后，即得松果菊苷固体脂质纳米粒混悬液。
1.3.1 脂质材料种类及用量的选择 实验中筛选
了单硬脂酸甘油酯、Compritol 888 ATO作为脂质材
料。分别单独使用一种脂质材料和两者联合使用，
考察脂质材料与药物的相容性、纳米粒形成的过程
及其最终的理化性质，最终选择单硬脂酸甘油酯作
为脂质材料。
将松果菊苷、卵磷脂及 Myrj52用量固定，通过
改变单硬脂酸甘油酯用量，考察纳米粒形成的过
程、最终状态和放置的稳定性以及理化性质。选择
单硬脂酸甘油酯用量为 60、70、80 mg 进行单一变
量分析。
1.3.2 表面活性剂种类及用量的选择 实验中筛
选了 Myrj52、Labrasol、卵磷脂等表面活性剂。使用
Labrasol时，制得纳米粒粒径较大，稳定性较差，而
单独使用 Myrj52和卵磷脂效果不如两者联合使用，
因此最终选择将 Myrj52与卵磷脂配合使用作为表
面活性剂。
实验中将松果菊苷、单硬脂酸甘油酯及 Myrj52
用量固定，通过改变卵磷脂用量，考察纳米粒形成
的过程、最终状态和放置的稳定性以及理化性质。
选择卵磷脂用量为 200、250、300 mg进行单一变量
分析。
实验中将松果菊苷、单硬脂酸甘油酯及卵磷脂
用量固定，通过改变 Myrj52用量，考察纳米粒形成
的过程、最终状态和放置的稳定性以及理化性质。
选择 Myrj52用量为 300、400、500 mg进行单一变量
分析。
1.3.3 有机溶剂及其用量选择 松果菊苷、卵磷脂、
单硬脂酸甘油酯都能溶于乙醇等有机溶剂，且乙醇
毒性较小，因此选择乙醇溶解松果菊苷、单硬脂酸
甘油酯、卵磷脂。
1.4 松果菊苷 SLN的粒径分布及 Zeta电位 将各
组得到的松果菊苷 SLN在激光粒径测定仪上测定
其粒径、Zeta电位及多分散指数(PDI)。
1.5 松果菊苷 SLN的包封率测定 超滤法能很好
的分离纳米粒和游离药物 [15]，且简单易行，重现性
好，故采用超滤法测定松果菊苷 SLN的包封率。
按下式计算松果菊苷 SLN的包封率：
包封率（EE%）=（1－W 游/W 总）×100%
式中：W 游：纳米粒混悬液中游离药物的质量；W 总：
纳米粒混悬液中总药物的质量。
2 结果
2.1 脂质材料对松果菊苷 SLN性质的影响 将单
硬脂酸甘油酯和 Compritol 888 ATO 分别作为单一
变量来考察其对松果菊苷 SLN性质的影响，结果见
表1、表 2。
当确定松果菊苷、卵磷脂及 Myrj52的量，只改
变 Compritol 888 ATO的量时，测定松果菊苷 SLN的
粒径、电位和包封率结果发现，当Compritol 888 ATO
量为 0，即不加入 Compritol ATO888时，纳米粒的粒
径最小，且包封率最高；而 Compritol 888 ATO 的量
分别增加到 10、20 mg时，纳米粒的粒径依次增大，
分别为 57.33 nm和 62.5 nm，而且包封率依次减小，
分别为 54.3%和 50.68%。
当确定松果菊苷、卵磷脂及 Myrj52的量，只改
变单硬脂酸甘油酯的量时，测定松果菊苷 SLN的粒
径、电位、包封率及 PDI结果发现，当单硬脂酸甘油
酯的量为 60 mg时，虽然粒径和包封率结果最优，但
是 PDI显著升高，说明粒径平均大小符合要求，但
是粒径分布太宽；而单硬脂酸甘油酯的量为 80 mg
时，粒径明显增加，为 133.8 nm，而包封率降低，为
48.56%。
2.2 表面活性剂对松果菊苷 SLN性质的影响 将
卵磷脂和 Myrj52分别作为单一变量来考察其对松
果菊苷 SLN性质的影响，结果见表 3、表 4。
表 1 不同量的 Compritol 888 ATO对松果菊苷 SLN粒径、
电位、包封率的影响
Compritol 888 ATO(mg) 粒径(nm) Zeta电位(mV) EE(%)
0 53.21 -7.32 59.37
10 57.33 -17.4 54.30
20 62.50 -18.2 50.68
表 2 不同量的单硬脂酸甘油酯对松果菊苷 SLN粒径、电
位、包封率及 PDI的影响
单硬脂酸甘油酯(mg) 粒径(nm) Zeta电位(mV) EE(%) PDI
60 26.0 -6.07 51.09 0.448
70 97.3 -15.5 50.29 0.146
80 133.8 -19.9 48.56 0.144
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表 3 不同量的卵磷脂对松果菊苷 SLN粒径、电位、包封率
及 PDI的影响
卵磷脂(mg) 粒径(nm) Zeta电位(mV) EE(%) PDI
200 053.21 -7.32 59.37 0.645
250 081.95 -23.5 55.40 0.281
300 126.90 -32.4 53.89 0.199
表 4 不同量的Myrj52对松果菊苷 SLN粒径、电位、包封
率及 PDI的影响
Myrj52(mg) 粒径(nm) Zeta电位(mV) EE(%) PDI
500 86.92 -22.40 46.42 0.223
600 53.35 -15.28 59.37 0.276
700 52.89 -7.32 55.50 0.247
确定松果菊苷、单硬脂酸甘油酯及 Myrj52的
量，只改变卵磷脂的用量时，测定松果菊苷 SLN的
粒径、电位、包封率及 PDI结果发现，当卵磷脂的量
为 200 mg时，虽然粒径较小，为 53.21 nm，包封率较
高，为 59.37%，但是 PDI也明显增高到 0.645，这说
明纳米粒的平均粒径虽然符合要求，但是分布宽，
有大量较大的粒子，而当卵磷脂的用量增加到 300mg
时，虽然 PDI 减小到 0.199，但粒径达到 126.9 nm，
包封率也降低至 53.89%。
确定松果菊苷、单硬脂酸甘油酯及卵磷脂的
量，只改变 Myrj52的用量时，测定松果菊苷 SLN的
粒径、电位、包封率及 PDI结果发现，Myrj52的量为
500 mg 时，纳米粒的粒径较大(＞80 nm)，而包封率
低，为 46.42%；Myrj52的量增加到 700 mg 时，纳米
粒的粒径减小至 52.89 nm，但包封率也降低，为55.5%。
3 讨论
SLN的制备方法很多，制备的方法不同，对SLN
的粒径，包封率等理化性质均有较大影响。薄膜-超
声分散法制备 SLN 时如超声时间过长（15 min 以
上），则可能产生金属的污染问题[16]。用高压匀质法
制备的粒子粒径较大，大约在 200 nm左右，而且因
为高压匀质机的最小进料体积为 100 mL，每次辅料
用量大，辅料价格昂贵，因此此方法不够经济实用。
乳化超声分散法制备的粒径也较大，大约在 120 nm
左右，很难通过此方法得到小粒径的纳米粒。其中
乳化固化法制备的纳米粒粒径小，在 20 nm左右，
故综合松果菊苷的理化性质，最终选用乳化固化法
来制备。
纳米粒在溶液中的行为类似于荷电胶体粒子，
即各粒子荷电较少时，粒子间斥力相应减弱，各粒
子间易聚集和融合。Zeta电位与纳米粒的稳定性密
切相关，测定 Zeta电位可预测纳米粒的稳定性[17]。
一般来说，高 Zeta电位值体系因各粒子间斥力较大
而体系较为稳定[18-19]，因此，除粒径包封率外，电位
对于纳米粒的稳定性也有很大的影响。
Compritol 888 ATO具有生理相容性，且可生物降
解的特点[20]，但在本实验中，选择 Compritol 888 ATO
作为脂质材料时得的 SLN粒径及包封率不理想，但
选用适当量的单硬脂酸甘油酯作为脂质材料时制
得 SLN粒径及包封率均较好，而且 PDI也符合要求。
本实验选用卵磷脂及 Myrj52配合使用作为表
面活性剂。实验中发现，卵磷脂用量对纳米粒粒径影
响较大，卵磷脂用量过大时，制得纳米粒混悬液粒
径较大。减小卵磷脂用量粒径逐渐变小，包封率也
增高，但是减小到一定程度，PDI增大，不符合要求。
可以采用超速离心法、葡聚糖凝胶柱色谱法和
超滤法等来测定松果菊苷固体脂质纳米粒的包封
率，常用的葡聚糖凝胶柱色谱法重现性不好，超速
离心法需要的仪器昂贵，且离心时间较长。故最终
选择超滤法。超滤是一种膜分离技术，它的特点是
使用不对称多孔膜，根据分子的大小来分离溶液中
的大分子物质与小分子物质。超滤法是一种温和
的、非变性的物理方法，比其他分离方法效率更高、
更灵活。对于微粒分散体系，粒径及其分布的测定
十分重要，粒径的不同可影响纳米粒的体内分布、
靶向性及其稳定性。
通过测定纳米粒的粒径、Zeta电位、包封率及
PDI这些理化指标对松果菊苷固体脂质纳米粒的制
备处方进行了筛选，探索了不同的辅料对固体脂质
纳米粒理化性质的影响，对相似性质药物的固体脂
质纳米粒的处方筛选提供了启示。
参考文献：
[1] Wu CR, Lin HC, Su MH. Reversal by aqueous extracts of
Cistanche tubulosa from behavioral deficits in Alzheimer’s
disease-like rat model: relevance for amyloid deposition and
central neurotransmitter function [ J ] . BMC Complement
Altern Med, 2014, 14(1):202.
[2] Tai BH. Total Peroxynitrite scavenging capacity of
phenylethanoid and flavonoid glycosides from the flowers of
buddlejaofficinalis [J]. Biol Pharm Bull, 2009, 32 (12):
1952-1956.
[3] Pellati F, Benvenuti S, Magro L, et al. Analysis of phenolic
compounds and radical scavenging activity of Echinaceaspp[J].
J Pharm Biomed Anal, 2004, 35(7):289.
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Research of prescription screening of echinacoside solid lipid nanoparticles
CHEN Jing1,2, TONG Ling1,2, LIU Zhi-dong1,2, LI Chun-hua1,2, DING Ling-ling1,2, GUO Li-li1,2
（1.Tianjin State Key Laboratory of Modern Chinese Medicine, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine,
Tianjin 300193,China; 2.Engineering Research Center of Modern Chinese Medicine Discovery and Preparation
Technique, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China）
Abstract: [Objective] Explore the impact of different excipients for physical and chemical properties of
echinacoside solid lipid nanoparticles （SLN）, and thus made little tips for the study of water -soluble drugs
prescription monomer SLN. [Methods] Fumble Myrj52, Compritol 888 ATO, glyceryl monostearate, soy lecithin and
other accessories affecting the physicochemical properties of echinacoside SLN using a single variable method.
[Results] With increasing of Myrj52 amount, the nanoparticles particle size decreased, zeta potential increased,
encapsulation rate increased; with increasing of amounts of Compritol 888 ATO, encapsulation efficiency decreased
slightly, zeta potential decreases; with increasing of amounts of glycerol monostearate, particle size increased
significantly, encapsulation efficiency decreased slightly, zeta potential decreased; with increasing amounts of
lecithin, particles size increased significantly, significantly reduced the potential entrapment rate. [Conclusion]
Various accessories alone has a greater impact on physicochemical properties of echinacoside SLN, this study
provides inspiration for prescription screening of water-soluble drug SLN.
Key words: echinacoside; solid lipid nanoparticles; excipients; physical and chemical properties
[4] Müller RH, Mader K, Gohla S. Solid lipid nanoparticles
(SLN) for Controlled drug delivery-a review of the state of
the art [J]. Eur J Pharm Biopharm, 2000, 50(1):161-177.
[5] Hiratsuka Y, Ono K, Kanai K. The present state of blindness
in the world[J]. Nippon Ganka Gakkai Zasshi, 2001, 105(6):
369-373.
[6] Huang S, Zheng Y, Foster PJ, et al. Prevalence and causes
of visual impairment in Chinese adults in urban southern
China the Liwan eye study[J]. Arch Ophthalmol, 2001, 127
(10): 1362-1367.
[7] Liang YB, Friedman YB, Wong DS, et al. Prevalence and
causes of low vision and blindness in a rural Chinese adult
population: the Handan eye study[J]. Ophthalmology,2008,
115(11):1965-1972.
[8] Limburg H, Von -Bischhoffshausen FB, Gomez P, et al.
Review of recent surveys on blindness and visual
impairment in Latin America[J]. Br J Ophthalmol, 2008, 92
(3): 315-319.
[9] Resnikoff S, Pascolinil D, Etya’ale D, et al. Global data on
visual impairment in the year 2002 [J]. Bull would Health
Organ, 2004, 82(11):844-851.
[10] 青 美，张明媚，陈雪艺.白内障住院患者 984例病因构
成及相关因素分析[J].国际眼科杂志,2010,10(2):256-259.
[11] Cuo SS, Radhakrishnan R, Redemann CT. Adhesion of
positively charged liposomes to mucosal tissues [J] .
Liposome Res,1989,1(3):319-337.
[12] Lou MF. Redox regulation in the lens [J]. Prog Retin Eye
Res, 2003, 22(5): 657-682.
[13] Call MK, Grogg MW, Del Rio-Tsonis K, et al. Lens regener－
ation inmice: implications in cataracts[J]. Exp Eye Res, 2004,
78(2): 297-299.
[14] Varma SD, Hegde KR, Kovtun S. Inhibition of selenite -
induced cataract bycaffeine[J]. Acta Ophthalmol, 2010, 88
(7): e245-e249.
[15] 张丽红，张志荣.丹参总酚酸长循环脂质体的研究[D].成
都：四川大学,2007.
[16] Mehnert W, Mader K. Solid lipid nanoparticles production,
charac-terization and applications[J]. Adv Drug Deliv Rev,
2001, 47(223):165-196.
[17] Pan Y, Li YJ, Zhao HY, et al. Bioadhesive polysaccharide in
protein delivery system; chitosan nanoparticles improve the
intestinal absorption of insulin in vivo[J]. Int J Pharm, 2002,
249(1-2):139-147.
[18] Florence AT, Sakthivel T, Toth I. Oral uptake and translo-
cation of a polylysine dendrimer with a lipid surface [J].
Controlled Release, 2000, 65(1-2): 253-259.
[19] Jung T, Kamm W, Breitenbach A, et al. Biodegaradable
nanoparticles for oral delivery of peptides: Is there a role for
polymers to affect mucosal uptake[J]. Eur J Pharm and Bio,
2000, 50(1): 147-160.
[20] Liu ZD, Zhang XH, Li JW, et al. Effects of Labrasol on the
corneal drug delivery of baicalin[J]. Drug Delivery, 2009,16
(7): 399-404.
（收稿日期：2015-06-29）
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