全 文 ： 畜牧与兽医 2012年 第44卷 增刊

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2-APB预处理明显抑制hsBAFF刺激或联合anti-IgM共刺激的B淋巴细胞CaMKII磷酸化增加，用
CaMKII特异抑制剂KN93预处理，观察到KN93明显抑制hsBAFF刺激或联合anti-IgM共刺激的B
淋巴细胞CaMKII、Akt、mTOR介导的S6K1和4E-BP1磷酸化以及细胞增殖增加。提示：hsBAFF
升高[Ca2+]i关联CaMKII磷酸化，这激活mTOR通路促进B淋巴细胞增殖。本研究为hsBAFF有效
地发挥免疫调节作用提供了理论依据。
4-26 生理阶段对小鼠乳腺组织中免疫相关酶活性的影响
闫威，刘凤娟，王艳玲，杨国宇，王月影，钟凯，朱河水
（农业部动物生化与营养重点实验室；河南农业大学牧医工程学院，河南 郑州 450002）
乳腺的免疫机制非常复杂，在这一领域还有许多问题有待解决，深入了解乳腺的免疫机制
以及乳腺炎发病过程中的免疫机理将对乳腺炎的防治产生重大影响。在妊娠、泌乳和干乳阶段，
乳腺的结构和功能也发生了巨大变化，乳腺的免疫状况也会发生变化，进而进行适应性调整。
本文以昆明小鼠为研究对象，利用化学比色法研究了妊娠、泌乳和干乳三个生理阶段对乳腺免
疫相关酶活的影响。结果发现，XOD酶活在妊娠前中期比较稳定，末期显著升高，泌乳早期显
著下降，随后开始升高，一直维持到干乳2 d，随后开始下降，干乳末期恢复到泌乳末期水平；
POD活性在妊娠期显著下降，整个泌乳期比较稳定，干乳期活性开始升高；TNOS和iNOS活性
在妊娠期均呈下降的变化趋势，泌乳早中期的变化比较稳定，泌乳末期活性升高，干乳期TNOS
活性持续升高，iNOS活性变化不大。提示乳腺在不同的生理阶段改变酶活，以适应乳腺发育和
重塑的需要。NAGase酶活在妊娠和泌乳早中期呈下降的变化趋势，泌乳12 d达最低水平，随后
开始上升，干乳2 d后开始显著上升，干乳末期恢复到妊娠前水平；AKP活性在妊娠期和泌乳期
比较稳定，仅在妊娠和泌乳12 d显著升高，整个干乳期的酶活较高。提示乳腺通过改变NAGase
和AKP的活性，为自身免疫保护加强提供警示。
4-27 篦齿蒿提取物对ɑ-萘异硫氰酸酯
致小鼠肝损伤的保护作用
裴大为，王纯洁，敖日格乐
（内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古 呼和浩特 010018）
为了观察篦齿蒿提取物对ANIT（α-萘异硫氰酸酯）致小鼠肝损伤的保护作用。取健康昆明
系小鼠130只，随机分为13组，每组10只，分别为正常组（生理盐水）；阳性对照组（茵栀黄颗
粒）；模型组（生理盐水）；蓖齿蒿提取物组。连续给药7 d，末次给药后2 h，模型组和各给药
组给予ANIT（100 mg·kg-1）香油溶液灌胃，正常组给予同体积的香油。攻毒后继续给药1 d，48
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h后小鼠眼前房采血，分离血清，观察血清肝功能指标、SOD和MDA指标、肝组织病理学变化。
结果：篦齿蒿水提物、石油醚、乙酸乙酯高低剂量组血清中ALT、AST、TBIL、ALP、GGT活
性显著低于模型组（ANIT模型组）（P<0.05或P<0.01）；其肝组织中SOD活力极显著高于模型
组（P<0.01）；MDA含量显著低于模型组（P<0.05或P<0.01）；对ANIT所致肝损伤模型小鼠的
肝组织有减轻损伤和促进修复作用；水母液、正丁醇提取物对之无影响。说明篦齿蒿水提物、
乙酸乙酯和石油醚提取物具有退黄降酶作用，并能改善和修复肝组织损伤。

4-28 重组大肠杆菌不耐热肠毒素的表达
及对小鼠胚胎稳定性的影响
韩冬梅 1，仲飞 1，李秀锦 2，王淼 3，李文艳 1，王璐 1
（1．河北农业大学 动物医学院，农业部动物疫病病原生物学华北区观测实验站，河北 保定 071001；
2．燕山大学 环境与化学工程学院，河北 秦皇岛 066004；
3．河北保定市畜牧水产局，河北 保定 071051）
为研究大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）对小鼠胚胎稳定性的影响，运用大肠杆菌表达系统制
备了具有生物活性的重组大肠杆菌LT，用重组LT通过腹腔注射处理妊娠小鼠，分析了LT对小鼠
胚胎稳定性的影响。首先采用PCR方法从产毒大肠杆菌菌株44815基因组中扩增LT的A亚基和B
亚基基因，将其插入到pET-20b（+）原核表达载体pelB信号肽的下游，分别构建成LTA和LTB
分泌型表达载体，将载体分别转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS，在IPTG的诱导下进行表达，
利用Ni-NTA琼脂糖凝胶从细菌周质释放液中提取和纯化重组LTA和LTB蛋白；利用细胞毒性实
验检测重组蛋白的生物活性。然后用制备的重组LT注射妊娠6 d的小鼠，连续注射3 d后，统计小
鼠的胚胎存活率。同时用ELISA方法检测小鼠血清中与胚胎稳定性有密切关系的Th1型细胞因子
（IFN-γ、IL-2）和Th2型细胞因子（IL-4、IL-10）及IL-β的表达水平。结果表明，采用分泌性表
达策略实现了重组LT在大肠杆菌中的高效分泌表达，LTA和LTB的表达量分别达68 mg/L和
62mg/L。表达的重组LT具有明显的细胞毒性作用；用LT处理妊娠小鼠，胚胎的存活率为32 %，
明显低于对照组；小鼠血清中Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2 的含量明显高于对照组（P<0.01），
分别为对照组的2倍和3倍。同时细胞因子IL-1β为对照组的2倍（P<0.01）。而稳定胚胎发育的
Th2型细胞因子IL-4、IL-10没有明显变化（P>0.05）。以及由此可见大肠杆菌性肠炎引起妊娠家
畜流产与LT有关，LT对胚胎稳定性的影响除与LT的直接毒性有关外，同时与LT介导的免疫调
节异常有关。