全 文 ：大黄素要高于茎，可能与独尾草在长期适应环境的
过程中所形成的化学防御机制有关［１３］。总体比较，
异翅独尾草在休眠期根中芦荟大黄素含量最高，粗
柄独尾草茎中最低。
色谱条件的选择：取对照品及供试品溶液，分别
在１９０～７００　ｎｍ波长范围内进行紫外扫描，芦荟大
黄素的紫外图谱在２３５　ｎｍ和２８０　ｎｍ均有较大吸
收，结果表明以２８０　ｎｍ为检测波长时，干扰物质较
少，基线平滑，因此选择２８０　ｎｍ作为检测波长。经
实验比较，确定甲醇－０．１％磷酸（８６∶１４）为流动相进
行洗脱分离效果较好，且对照品色谱峰保留时间适
宜。
参考文献：
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［收稿日期］２０１５－０８－２６
［基金项目］国家自然基金（编号：３０７０１１３１）；中国中医科学院中药研究所新药联合创制项目（编号：２０１１ｘｙｃｚ－０４）；郑州市金水区重点攻关项目
（编号：金科２０１４－３３）；河南省中医药科研专项（编号：２０１５ＺＹ０２０１０）　［作者简介］刘长河，男，副研究员，研究方向：中药、天然药物的提取分
离；中药新药研发，电话：１３９３９０１６３１９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｃｈｈｎ３７１＠１６３．ｃｏｍ
高效液相色谱法同时测定木豆叶中球松素、木豆素Ｃ的含量
刘长河１，郝然２，刘婷２，王艳艳１，任孝德１，刘方洲１　 （１．河南省中医药研究院，河南 郑州４５０００４；２．中国中医科学院
中药研究所，北京１００７００）
［摘要］　目的：建立ＲＰ－ＨＰＬＣ法同时测定木豆叶中球松素、木豆素Ｃ的方法。方法：采用ＤｉＫＭＡ　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　ＯＤＳ　Ｃ１８色谱柱
（４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５μｍ），流动相为乙腈、０．０２％磷酸溶液梯度洗脱；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ
－１；检测波长：２９６　ｎｍ；柱温：４０℃。
结果：球松素、木豆素Ｃ在０．００２～０．０２　ｍｇ·ｍＬ－１范围内线性关系良好，ｒ＝０．９９９　４（球松素）；ｒ＝０．９９９　５（木豆素Ｃ）。球松
素平均回收率为９９．０％，ＲＳＤ为１．２９％；木豆素Ｃ平均回收率为９８．７％，ＲＳＤ为１．７２％。结论：该方法简单、准确可行，结果稳
定可靠，可为木豆叶的质量控制提供科学依据。
［关键词］　木豆叶；球松素；木豆素Ｃ；高效液相色谱法；含量测定
［中图分类号］Ｒ９２７．２　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１－５２１３（２０１６）０６－０４４０－０４　ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１６．０６．０４
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｉｎｏｓｔｒｏｂｉｎ　ａｎｄ　ｌｏｎｇｉｓｔｙｌｅ　Ｃ　ｉｎ　Ｆｏｌｉｕｍ　Ｃａｊａｎｉ　ｂｙ　ＨＰＬＣ
ＬＩＵ　Ｃｈａｎｇ－ｈｅ１，ＨＡＯ　Ｒａｎ２，ＬＩＵ　Ｔｉｎｇ２，ＷＡＮＧ　Ｙａｎ－ｙａｎ１，ＲＥＮ　Ｘｉａｏ－ｄｅ１，ＬＩＵ　Ｆａｎｇ－ｚｈｏｕ１（１．Ｈｅｎａｎ　Ｐｒｏ－
ｖｉｎｃｉａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｈｅｎａｎ　Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００４，Ｃｈｉｎａ；２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａ－
ｔｅｒｉａｌ　Ｍｅｄｉｃａ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００７００，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ＲＰ－ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｉｎｏｓｔｒｏｂｉｎ　ａｎｄ　ｌｏｎｇｉｓｔｙｌｅ　Ｃ　ｉｎ　Ｆｏｌｉｕｍ　Ｃａｊａ－
ｎｉ．ＭＥＴＨＯＤＳ　ＤｉＫＭＡ　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　ＯＤＳ　Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ（４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５μｍ）ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ．Ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ
（ｓｏｌｖｅｎｔ　Ａ）－０．０２％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ（ｓｏｌｖｅｎｔ　Ｂ）ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｉｎ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｍｏｄｅ，ａｔ　ａ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ａｔ　２９６　ｎｍ　ａｎｄ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｔ　４０℃．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｗａｓ　ｓｈｏｗｎ　ｉｎ　ｒａｎｇ　ｏｆ　０．００２－０．０２　ｍｇ·ｍＬ－１
ｆｏｒ　ｐｉｎｏｓｔｒｏｂｉｎ（ｒ＝０．９９９　４）ａｎｄ　ｌｏｎｇｉｓｔｙｌｅ　Ｃ （ｒ＝０．９９９　５）．Ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｐｉｎｏｓｔｒｏｂｉｎ　ａｎｄ　ｌｏｎｇｉｓｔｙｌｅ　Ｃ　ｗｅｒｅ
·０４４· 中国医院药学杂志２０１６年３月第３６卷第６期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｍａｒ　２０１６，Ｖｏｌ　３６，Ｎｏ．６
９９．０％ （ＲＳＤ＝１．２９％）ａｎｄ　９８．７％ （ＲＳＤ＝１．７２％）．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ　ｆｅａｓｉｂｌｅ．Ｔｈｅ　ｒｅ－
ｓｕｌｔｓ　ａｒｅ　ｓｔａｂｌｅ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ，ａｎｄ　ｃａｎ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ａ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｆｏｌｉｕｍ　Ｃａｊａｎｉ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ｆｏｌｉｕｍ　Ｃａｊａｎｉ；ｐｉｎｏｓｔｒｏｂｉｎ；ｌｏｎｇｉｓｔｙｌｅ　Ｃ；ＨＰＬＣ；ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
　　木豆叶为豆科植物Ｃａｊａｎｕｓ　ｃａｊａｎ（Ｌ．）Ｍｉｌ－
ｓｐ．的干燥叶。为广东、广西、海南地区习用中药，具
有活血化瘀，消肿止痛，补肾健骨，祛腐生肌之功效。
现代研究表明木豆叶具有抗炎［１］、降脂［２］、抗骨质疏
松［３］、抗股骨头坏死［４－５］等作用。木豆叶［６－７］主要含
球松素、牡荆苷、异牡荆苷等黄酮类及木豆素Ｃ、木
豆素Ａ等芪类成分，球松素、牡荆苷、异牡荆苷的含
量测定［８－１５］均有报道，但木豆素Ｃ的含量测定方法
未见报道。本文利用高效液相色谱法同时测定了木
豆叶中的球松素、木豆素Ｃ含量，为更好控制木豆
叶的质量提供科学依据。
１　材料
１．１　仪器　ＷＡＴＥＲＳ２６９５／２９９６液相色谱系统
（美国 ＷＡＴＥＲＳ公司，ＤＡＤ二极管阵列检测器、
ＥＭＰＯＷＥＲ工作站）；ＸＡＤ２０５ＤＵ 电子分析天平
（德国 ＭＥＴＴＬＥＲ　ＴＯＬＥＤＯ 公司）；ＤＱ－２５０ＤＥ
数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
１．２　试药　木豆叶３批，１批于２０１４年６月购于
云南红河县木豆叶专业种植、批发合作社（批号
１４０１），另外２批于２０１４年６月购于海南省海口市
（批号１４０４），广东省潮州（批号１４０５）。经河南省中
医药研究院张留记研究员鉴定为豆科植物木豆Ｃａ－
ｊａｎｕｓ　ｃａｊａｎ（Ｌ．）Ｍｉｌｓｐ．的干燥叶；球松素对照品
（批 号 １１０７２５０１）、木 豆 素 Ｃ 对 照 品 （批 号
１１０７３４１２）均为北京翔远同创科技有限公司产品，纯
度均≥９８％，供含量测定用；乙腈为色谱纯；试验用
水：二次纯化水；其余试剂均为分析纯（ＡＲ）。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　色谱柱：ＤｉＫＭＡ　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　ＯＤＳ
Ｃ１８（４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５μｍ）；流动相为乙腈（Ａ）－
０．０２％磷酸溶液（Ｂ），梯度洗脱（０～１０　ｍｉｎ，２０％Ａ；
１０～８０　ｍｉｎ，２０％～８０％Ａ）；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；
检测波长：２９６　ｎｍ；柱温：４０℃；进样量：１０μＬ。结
果见图１。
２．２　溶液的制备
２．２．１　对照品溶液的制备　精密称取球松素对照
品５　ｍｇ、木豆素Ｃ对照品５　ｍｇ，分别置于２５　ｍＬ量
瓶中，加乙醇至刻度，摇匀。即得对照品贮备液。精
密吸取上述对照品贮备液各１　ｍＬ，置于１０　ｍＬ量
瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，制成含球松素、木豆素Ｃ
各０．０２　ｍｇ·ｍＬ－１的混合对照品溶液，即得。
Ａ．对照品（球松素Ｒｔ＝３９．９３４　ｍｉｎ；木豆素Ｃ　Ｒｔ＝５３．７３９　ｍｉｎ）；Ｂ．
供试品（球松素Ｒｔ＝３９．９５２　ｍｉｎ；木豆素Ｃ　Ｒｔ＝５３．７５８　ｍｉｎ）
Ａ．ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ（ｐｉｎｏｓｔｒｏｂｉｎ　Ｒｔ＝３９．９３４　ｍｉｎ；ｌｏｎｇｉｓｔｙｌｅ　Ｃ
Ｒｔ＝５３．７３９　ｍｉｎ）；Ｂ．ｓａｍｐｌｅｓ（ｐｉｎｏｓｔｒｏｂｉｎ　Ｒｔ＝３９．９５２　ｍｉｎ；ｌｏｎｇｉ－
ｓｔｙｌｅ　Ｃ　Ｒｔ＝５３．７５８　ｍｉｎ）
图１　ＨＰＬＣ色谱图
Ｆｉｇ　１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ
２．２．２　供试品溶液的制备　取木豆叶，粉碎成细粉，
取约０．５　ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，加乙醇１００
ｍＬ，称定，超声处理３０　ｍｉｎ，放冷，用乙醇补足减失的
量，摇匀，用０．４５μｍ微孔滤膜滤过，即得。
２．３　方法学考察
２．３．１　线性关系　精密吸取球松素、木豆素Ｃ混
合对照品溶液（０．０２　ｍｇ·ｍＬ－１）１．０，２．０，３．０，４．０，
５．０ｍＬ，分别置于１０　ｍＬ量瓶中，加乙醇至刻度，摇
匀，制成质量浓度分别为０．００２，０．００４，０．００６，
０．００８，０．０１　ｍｇ·ｍＬ－１的对照品溶液。吸取各份对
照品溶液及“２．２．１”项下混合对照品溶液（０．０２　ｍｇ
·ｍＬ－１）１０μＬ，分别按上述色谱条件进样检测，计算
得峰面积（Ｙ）和球松素、木豆素Ｃ质量浓度（Ｘ）的
回归方程。球松素回归方程为：Ｙ＝６．６６０　３４７×１０６
Ｘ－３．１１０　５３４×１０３，ｒ＝０．９９９　４；木豆素Ｃ回归方
程为：Ｙ＝８．７２５　８５５×１０６　Ｘ－９．９５３　２５２×１０３，ｒ＝
０．９９９　５。结果表明球松素、木豆素 Ｃ在０．００２～
０．０２　ｍｇ·ｍＬ－１范围内线性关系良好。
２．３．２　精密度试验　精密吸取混合对照品溶液
（０．０２　ｍｇ·ｍＬ－１）１０μＬ，重复进样５次，记录峰面
积。结果，球松素峰面积ＲＳＤ为０．５２％；木豆素Ｃ
峰面积ＲＳＤ为０．７５％。结果表明，仪器精密度良
好。
２．３．３　稳定性试验　取同一批木豆叶（批号１４０１）
样品，称取０．５　ｇ，依法制备供试品溶液，进样１０
μＬ，测定２５　ｈ内供试品溶液稳定情况。重复测定６
次。结果球松素峰面积ＲＳＤ＝２．０２％；木豆素Ｃ峰
面积ＲＳＤ＝２．０９％。表明球松素、木豆素Ｃ在选定
色谱条件下，于２５　ｈ内稳定。
２．３．４　重复性试验　取同一批木豆叶（批号１４０１）
·１４４·中国医院药学杂志２０１６年３月第３６卷第６期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｍａｒ　２０１６，Ｖｏｌ　３６，Ｎｏ．６
样品，称取 ６ 份，每份０．５　ｇ，精密称定，分别按
“２．２．２”项下方法，制备供试品溶液，并按“２．１”项下
方法测定。结果，样品中球松素平均含量＝２．４　ｍｇ
·ｇ－１，ＲＳＤ＝２．０８％；木豆素Ｃ平均含量＝５．１　ｍｇ·
ｇ－１，ＲＳＤ＝１．９４％。表明方法重复性良好。
２．３．５　加样回收率试验　取同一批木豆叶（批号
１４０１，已测定含量为球松素２．４　ｍｇ·ｇ－１、木豆素Ｃ
５．１　ｍｇ·ｇ－１）样品适量，称取６份，每份约０．２５　ｇ，精
密称定，分别精密加入球松素、木豆素Ｃ对照品，按
“２．２．２”项下方法，制备供试品溶液，并按“２．１”项下
方法测定，计算，结果见表１，表２。结果球松素平均
加样回收率为９９．０％，ＲＳＤ为１．２９％；木豆素Ｃ平
均加样回收率为９８．７％，ＲＳＤ为１．７２％。表明回收
率好，方法可行。
表１　球松素回收率试验（ｎ＝６）
Ｔａｂ　１　Ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔ　ｆｏｒ　ｐｉｎｏｓｔｒｏｂｉｎ（ｎ＝６）
称样量
／ｇ
样品中球松
素量／ｍｇ
球松素加
入量／ｍｇ
测得球松
素总量／ｍｇ
测得球松素
加入量／ｍｇ
回收率
／％
０．２５０　４　 ０．６０１　 ０．６２　 １．２１７　 ０．６１６　 ９９．４
０．２５１　１　 ０．６０３　 ０．６２　 １．２２２　 ０．６１９　 ９９．８
０．２５１　８　 ０．６０４　 ０．６５　 １．２６２　 ０．６５８　 １０１．２
０．２５０　９　 ０．６０２　 ０．６５　 １．２４３　 ０．６４１　 ９７．６
０．２５１　２　 ０．６０３　 ０．６０　 １．１９２　 ０．５８９　 ９８．２
０．２５１　９　 ０．６０５　 ０．６０　 １．１９１　 ０．５８６　 ９７．７
表２　木豆素Ｃ回收率试验（ｎ＝６）
Ｔａｂ　２　Ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔ　ｆｏｒ　ｌｏｎｇｉｓｔｙｌｅ　Ｃ（ｎ＝６）
称样量
／ｇ
样品中木豆素
Ｃ含量／ｍｇ
木豆素Ｃ
加入量／ｍｇ
测得木豆素
Ｃ总量／ｍｇ
测得木豆素
Ｃ加入量／ｍｇ
回收率
／％
０．２５０　４　 １．２７７　 １．３０　 ２．５９３　 １．３１６　 １０１．２
０．２５１　１　 １．２８１　 １．３２　 ２．６０９　 １．３２８　 １００．６
０．２５１　８　 １．２８４　 １．３８　 ２．６４５　 １．３６１　 ９８．６
０．２５０　９　 １．２８０　 １．４２　 ２．６５９　 １．３７９　 ９７．１
０．２５１　２　 １．２８１　 １．３５　 ２．５８８　 １．３０７　 ９６．８
０．２５１　９　 １．２８５　 １．４６　 ２．７１０　 １．４２５　 ９７．６
２．４　样品测定　取木豆叶样品３批，各精密称取３
份，按“２．２．２”项下方法，制备供试品溶液，并按
“２．１”项下方法进行含量测定。结果见表３。
表３　样品含量测定结果（ｍｇ·ｇ－１，珚ｘ±ｓ，ｎ＝３）
Ｔａｂ　３　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｓａｍｐｌｅｓ（ｍｇ·
ｇ－１，珚ｘ±ｓ，ｎ＝３）
批号 产地 球松素 木豆素Ｃ
１４０１ 广西红河 ２．４０８±０．０４　 ５．１１４±０．０６
１４０４ 广东潮州 ２．９４６±０．０６　 ６．３７５±０．０４
１４０５ 海南海口 ３．２８３±０．０５　 ６．９２７±０．０３
３　讨论
利用本实验所用 ＷＡＴＥＲＳ高效液相色谱仪
ＤＡＤ检测器在１９０～４００　ｎｍ波长范围内扫描，球松
素在２８９　ｎｍ处有最大吸收；木豆素Ｃ在３００　ｎｍ有
最大吸收，本实验用２９６　ｎｍ测定，二者均有较大吸
收。
球松素、木豆素Ｃ均为脂溶性成分，在提取溶
剂选择上，曾选用甲醇、乙醇比较提取率，发现两者
提取率基本一致。本实验选择毒性小的乙醇作为提
取溶剂。由于木豆叶中含有大量的脂溶性色素，在
提取球松素、木豆素Ｃ的同时，也将大量色素提取
出来，提取溶液显深绿色，利用本实验的梯度洗脱系
统，可以将木豆叶中的其余成分完全分离，但是为了
降低色素对分离度影响，延长了色谱峰的保留时间。
球松素代表了脂溶性的黄酮类成分，木豆素Ｃ为脂
溶性的芪类代表性成分，并且是芪类中含量最高的，
同时由于购得的木豆素、木豆素Ａ等对照品纯度仅
有９０％左右，达不到含量测定要求，因此本实验仅
测定了２种成分。
实验中测定了木豆叶样品中β－谷甾醇的含量，
发现β－谷甾醇在２０　ｍｉｎ左右出现，并能与其他成分
很好分离，但是经过多批次、不同产地木豆叶实验，
发现β－谷甾醇在不同产地样品中含量差别较大，部
分样品几乎测定不到，这可能与木豆叶的不同产地
及采收期有关，以后需要进一步研究，找出β－谷甾醇
含量差别的影响因素。积累研究数据来决定β－谷甾
醇含量测定项是否纳入标准。
木豆叶为广东省药材标准收录，夏、秋两季采
收。本实验所用木豆叶６月采收，测定结果表明，海
南省海口产样品中球松素、木豆素Ｃ含量较高，可
能与海口样品为野生品有关。本实验未测定比较秋
天采收样品中球松素、木豆素Ｃ的含量。后续还需
进行产地、年限、生长期、采收期的研究，增加含量测
定成分数量，以便更准确、全面建立木豆叶的标准。
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［收稿日期］２０１５－０９－１７
［基金项目］大学生创新创业训练计划（编号：２０１４１０６１０１２４）　［作者简介］向宇成，男，本科，研究方向：肿瘤靶向给药系统，电话：
１３５４１３２６９７０，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｎｇｙｕｃｈｅｎｇａｌｐｈａ＠１６３．ｃｏｍ　［通讯作者］杨青青，女，博士研究生，研究方向：靶向给药系统的构建及其作用机制，肿
瘤靶向给药系统，药物新剂型及新制剂，Ｅ－ｍａｉｌ：２４０２８０６５１＠ｑｑ．ｃｏｍ
正电化修饰的ＨＰＭＡ聚合物 －阿霉素接合物的制备表征及对肿瘤细胞
摄取的影响
向宇成，杨涛，王思维，杨璨羽，杨青青　 （四川大学华西药学院 靶向药物与释药系统教育部重点实验室，四川 成都
６１００４１）
［摘要］　目的：制备２种正电化修饰的Ｎ－（２－羟丙基）甲基丙烯酰胺（ＨＰＭＡ）聚合物－阿霉素接合物并表征，分别考察２种接
合物的正电基团含量对肿瘤细胞摄取的影响。方法：制备侧链带伯胺基的 ＨＰＭＡ聚合物－阿霉素接合物（ｐＨＰＭＡ－ＤＯＸ－ＡＰ－
ＭＡ）和侧链带胍基的 ＨＰＭＡ聚合物－阿霉素接合物（ｐＨＰＭＡ－ＤＯＸ－ＧＰＭＡ），对其药剂学性质如正电基团含量，载药量，Ｚｅｔａ
电位和分子量进行表征，进一步考察不同正电基团含量的接合物对 ＭＣＦ－７细胞摄取和毒性的影响。结果：通过自由基聚合反
应，２种接合物成功合成。其中ｐＨＰＭＡ－ＤＯＸ－ＡＰＭＡ伯胺基含量为０．４４～１．５７　ｍｍｏｌ·ｇ－１，载药量为７．１５％～９．２５％；ｐＨＰ－
ＭＡ－ＤＯＸ－ＧＰＭＡ胍基含量为０．１１～０．５４　ｍｍｏｌ·ｇ－１，载药量为７．５５％～９．０７％；相对分子质量分别为３３～３８　ｋＤａ和３２～３７
ｋＤａ。通过ＢＣＡ法和 ＭＴＴ法研究分别发现在ｐＨＰＭＡ－ＤＯＸ－ＡＰＭＡ中的伯胺基团含量为１．５７０　ｍｍｏｌ·ｇ－１及ｐＨＰＭＡ－ＤＯＸ－
ＧＰＭＡ中的胍基含量为０．２６０　ｍｍｏｌ·ｇ－１时，肿瘤细胞对阿霉素的摄取量显著增加，二者的ＩＣ５０与ｐＨＰＭＡ－ＤＯＸ相比显著降
低（Ｐ＜０．０５）。结论：成功制备了２种正电化修饰的 ＨＰＭＡ聚合物－阿霉素接合物；适当的正电化修饰对阿霉素的肿瘤细胞
摄取有促进作用。
［关键词］　ＨＰＭＡ；正电基团；阿霉素；细胞摄取
［中图分类号］Ｒ９４４　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１－５２１３（２０１６）０６－０４４３－０５　ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１６．０６．０５
Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ－ｌｏａｄｅｄ，ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｃｈａｒｇｅｄ　ＨＰＭＡ　ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａ－
ｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ　ｏｎ　ｃｅｌｕｌａｒ　ｕｐｔａｋｅ　ｉｎ　ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｓ
ＸＩＡＮＧ　Ｙｕ－ｃｈｅｎｇ，ＹＡＮＧ　Ｔａｏ，ＷＡＮＧ　Ｓｉ－ｗｅｉ，ＹＡＮＧ　Ｃａｎ－ｙｕ，ＹＡＮＧ　Ｑｉｎｇ－ｑｉｎｇ（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｄｒｕｇ
Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｄｅｌｉｖｅｒｙ　Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｗｅｓｔ　Ｃｈｉｎａ　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ
Ｃｈｅｎｇｄｕ　６１００４１，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅ　ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ－ｌｏａｄｅｄ　ＨＰＭＡ　ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ　ｗｉｔｈ　ｔｗｏ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｈａｒｇｅｄ
ｇｒｏｕｐｓ　ａｎｄ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅｉｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ａｎｄ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｃｏｐｏｌｙｍｅｒｓ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｅｎｓｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｈａｒｇｅｄ　ｇｒｏｕｐｓ　ｏｎ
ｕｐｔａｋｅ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｔｗｏ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ－ｌｏａｄｅｄ，ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｃｈａｒｇｅｄ　ＨＰＭＡ　ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ　ｗｅｒｅ
ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｓｕｃｈ　ａｓ　ｄｒｕｇ　ｌｏａｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ，Ｚｅｔａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｗｅｉｇｈｔ　ｗｅｒｅ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，
ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｈａｒｇｅｄ　ｇｒｏｕｐｓ　ｏｎ　ＭＣＦ－７　ｃｅｌ　ｕｐｔａｋｅ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｓｔｕｄｉｅｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ　ｗｅｒｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ　ｖｉａ　ｒａｄｉ－
ｃａｌ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ．Ｄｒｕｇ　ｌｏａｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ｏｆ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｗｉｔｈ　ｐｒｉｍａｒｙ　ａｍｉｎｅ　ａｎｄ　ｇｕａｎｉｄｉｎｅ　ｗｅｒｅ　７．１５％－
９．２５％ａｎｄ７．５５％－９．４６％，ａｎｄ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｐｒｉｍａｒｙ　ａｍｉｎｅ　ａｎｄ　ｇｕａｎｉｄｉｎｅ　ｗｅｒｅ　０．４４－１．５７　ｍｍｏｌ·ｇ－１　ａｎｄ０．１１－０．５４　ｍｍｏｌ·ｇ－１，
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｗｅｉｇｈｔｓ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ　ｗｅｒｅ　３３－３８　ｋＤａ　ａｎｄ　３２－３７　ｋＤａ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ　ｗｉｔｈ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｅｎｓｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｈａｒｇｅｄ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ＢＣＡ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｎｄ　ＭＴＴ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｃｅｌｕｌａｒ－ｕｐｔａｋｅ　ａｎｄ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ
ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ａ　ｎｏｔａｂｌｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｗｉｔｈ　１．５７０　ｍｍｏｌ·ｇ－１　ｉｎ　ｐｒｉｍａｒｙ　ａｍｉｎｅ　ａｎｄ　０．２６０　ｍｍｏｌ·ｇ－１　ｉｎ　ｇｕａｎｉｄｉｎｅ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　
Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ－ｌｏａｄｅｄ，ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｃｈａｒｇｅｄ　ＨＰＭＡ　ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ　ｈａｖｅ　ｂｅｅｎ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｙ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ．Ｃｅｌｕｌａｒ　ｕｐｔａｋｅ　ｏｆ
ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ－ｌｏａｄｅｄ　ＨＰＭＡ　ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ　ａｒｅ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｂｙ　ｒａｔｉｏｎａｌ　ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｈａｒｇｅｄ　ｇｒｏｕｐｓ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ＨＰＭＡ　ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ；ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｈａｒｇｅｄ　ｇｒｏｕｐ；ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ；ｃｅｌｕｌａｒ　ｕｐｔａｋｅ
·３４４·中国医院药学杂志２０１６年３月第３６卷第６期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｍａｒ　２０１６，Ｖｏｌ　３６，Ｎｏ．６