全 文 ：［6］ 周春华，陈 鹏，陶 俊，等． 银杏叶聚戊烯醇研究进展
［J］． 中成药，2009，31 (9) :1417-1419．
［7］ Tomas R，Jaroslav V． Chromatography of long chain alcohols
(polyprenols) from animal and plant source［J］． J Chroma-
togra A，2001，936(1-2) :95-110．
［8］ 孙 磊，李春斌，白 静，等． 正交设计法在银杏叶聚戊
烯醇提取工艺中的应用［J］． 中国现代应用药学杂志，
2006，23(5) :361-363．
［9］ Box G E P and Hunter W G． Statistics for experimerits:an in-
troduction to design［C］ / /Data analysis odel building． New
York:Wiley，1990．
［10］ 费荣昌． 试验设计与数据处理 ［M］． 无锡:江南大学出
版社，2001:59-63．
［11］ 董 媛，朱靖宇，王虎义，等． 响应面法优化蛹虫草菌丝
体多糖超声波提取工艺的研究［J］． 时珍国医国药，2009，
20(4) :880-883．
［12］ Kasankala L M，Xue Y，Yao W L． Optimization of gelatine
extraction from grass crap (Catenopharyngodon idella)fish skin
by response surface methodology［J］． Bioresour Technol，
2007，98(17) :3338-3343．
［13］ 王桃云． 大豆荚壳中异黄酮类化合物的提取分离、结构鉴
定及其生物活性研究 ［D］． 扬州:扬州大学，2011．
［14］ 王振宇，李宏菊，郭庆启． 响应面法对红松油提取工艺参
数的优化［J］． 中国粮油报，2009，24(4) :78-81．
［15］ 杨 磊，唐晓溪，赵春建，等． 响应面法优选桃儿七中的
鬼臼毒素的超声提取工艺［J］． 化工进展，2009，28(2) :
297-303．
［16］ 杨克迪，陈 钧，欧阳臻，等． 高效液相色谱 /大气压化
学电离质谱分析银杏叶中聚戊烯醇化合物［J］． 分析化学，
2003，31(8) :937-940．
［17］ 王成章． 银杏叶聚戊烯醇 GP 的分离和衍生物合成机理及
生物活性研究 ［D］． 北京:中国林业科学研究院，2007．
［18］ Bamba T，Fukusaki E，Nakazawa Y，et al． Analysis of long-
chain polyprenols using supemriticsl fluid chromatography and ma-
trix-assisted laser desorption ionization time-of-fright mass spec-
trometry［J］． Chromagraphy A，2003，995(1-2):203-207．
［19］ Bamba T，Fukusaki E，Kajiyama S， et al． High-resolution
analysis of polyprenols by supercritical fluid chromatography
［J］． Chromatography A，2001，911(1) :l13-117．
大孔吸附树脂纯化山橿总黄酮的工艺研究
陈随清， 陈磊磊， 魏雅磊， 尚朝利
(河南中医学院，河南 郑州 450008)
收稿日期:2012-05-28
基金项目:河南省科技创新人才计划项目 (114200510014) ;国家科技重大专项 (2012ZX09103201-024)
作者简介:陈随清 (1965—) ，男，教授，博士。研究方向:中药品种整理及质量标准研究。Tel: (0371)65676686，E-mail:
suiqingchen@ sohu． com
摘要:目的 研究大孔吸附树脂纯化山橿总黄酮的工艺条件及参数。方法 采用紫外分光光度法测定总黄酮回收率，
HPLC法测定球松素回收率，并结合收膏率，将数据加权处理后综合评价。结果 DM130 型树脂能达到较好的纯化效
果，纯化条件为树脂柱径高比 1 ∶ 8，4 倍柱体积浓度为 0. 05 g /mL 的上样液，按体积流量 1. 0 mL /min 上样，纯水除
杂，4 倍量 70%乙醇洗脱，纯化物的球松素质量分数达到 9. 0%，总黄酮质量分数达到 50. 0%以上。结论 DM130 型
树脂在确定的条件下纯化山橿总黄酮的效果良好，且纯化过程未改变样品主要有效成分的组成。
关键词:山橿;大孔吸附树脂;总黄酮;球松素;纯化工艺
中图分类号:R284. 2 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2013)02-0272-06
Purification of total flavonoids from Lindera reflexa with macroporous adsorp-
tion resin
CHEN Sui-qing， CHEN Lei-lei， WEI Ya-lei， SHANG Chao-li
(Henan College of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou 450008，China)
山橿 Lindera reflexa Hemsl． 系樟科 Lauaceae山
胡椒属植物，其根性温、味辛，具有行气止痛、健
脾消积、活血消肿等作用［1-2］。在河南省民间用于
治疗慢性胃炎，胃溃疡，有很长的应用历史，以山
272
2013 年 2 月
第 35 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2013
Vol． 35 No． 2
橿为主要原料生产的中成药制剂 “胃痛宁片”，临
床疗效确切［3］。现有文献研究表明，山橿主要含
有黄酮类，生物碱类和挥发油类等成分［4］;本实
验室前期研究证明，以球松素为代表的黄酮类成分
为主要有效部位之一［5］，并优化了总黄酮部位的
提取工艺。本实验进一步对山橿提取物中的总黄酮
进行了纯化研究，实验中考察了大孔吸附树脂进行
纯化的工艺参数，结果处理时综合分析了收膏率，
总黄酮收率和球松素收率 3 个指标，用综合得分进
行评价，最终确定的工艺能够得到纯度较高的山橿
总黄酮，为山橿的进一步开发研究提供了实验
依据。
1 材料、试剂与仪器
山橿药材 (2010 年采自于河南省新县，经河
南中医学院陈随清教授鉴定为樟科 Lauraceae 山胡
椒属植物山橿 Lindera reflexa Hemsl． 的根) ;球松
素 (由本实验室从山橿中分离得到，用 HPLC法测
定其纯度达到 99. 05%)。
甲醇为色谱纯 (天津市四友精细化学品有限
公司) ;其他试剂为分析纯 (天津市化学试剂三
厂) ;大孔吸附树脂:HPD-450、HPD-600、D101
(沧州宝恩吸附材料科技有限公司) ，DM130、
860021 (山东鲁抗立科药物化学有限公司) ，HP20
(日本三菱化学株式会社)。
高效液相色谱仪 LC-20AT (日本岛津公司) ，
紫外检测器 SPD-20A (日本岛津公司) ，色谱工作
站 CBM-102 (日 本 岛 津 公 司) ，电 子 天 平
(BS224S，北京赛多利斯仪器系统有限公司)。
2 方法与结果
2. 1 对照品和样品溶液的制备
对照品溶液的制备 精密称取干燥的球松素标
准品，加甲醇溶解分别配制成0. 22 mg /mL，1. 005
mg /mL的对照品溶液。
样品溶液的制备 取山橿药材粗粉适量，分别
加入 12 倍量 70%乙醇超声提取 3 次，每次 1. 0 h，
回收乙醇，浓缩;称取浸膏，加甲醇超声溶解，滤
过，定溶，即得。
2. 2 总黄酮的测定
2. 2. 1 检测波长的考察 分别取适量对照品溶液
和样品溶液，在 200 ～ 600 nm波长范围扫描，对照
品和样品最大吸收波长都在 286 nm 处，确定
286 nm作为总黄酮紫外检测波长，见图 1。
图 1 200 ～ 600 nm紫外吸收光谱图
Fig. 1 Ultraviolet absorption spectrum of 200-600 nm
2. 2. 2 线性关系考察 取质量浓度 0. 22 mg /mL
的对照品溶液，稀释配制成质量浓度 2. 20、4. 40、
8. 80、11. 00、13. 20、17. 60 μg /mL 的标准品溶
液，分别连续 3 次测定吸光度，以对照品浓度为横
坐标，平均吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，结果
表明球松素质量浓度在 2. 20 ～ 17. 60 μg /mL 之间
线性关系良好，线性方程为 Y = 0. 081X + 0. 008，
r = 0. 999 4。
2. 2. 3 样品中总黄酮的含量测定 按 2. 1 项下样
品溶液制备方法，精密称取 0. 1 g 浸膏，甲醇超声
溶解并定容至 50 mL，再精密吸取 0. 1 mL 定容至
10 mL，于 286 nm测定吸光度，计算样品溶液中的
总黄酮量。
2. 2. 4 方法学考察 通过精密度，稳定性，重复
性的考察，表明该方法对总黄酮的测定稳定、
可行。
回收率考察 精密称取适量的山橿药材样品 6
份，分别加入一定量的球松素标准品，按 2. 1 项下
方法制备样品溶液，2. 2. 3 项方法测定，计算平均
回收率为 99. 78%，RSD为 2. 94%，表明该方法回
收率良好。结果见表 1。
2. 3 球松素检测方法
2. 3. 1 HPLC色谱条件 选择 phenomenex luna 5 μ
C18色谱柱 (250 mm × 4. 60 mm) ，检测波长 297
nm;柱温为 30 ℃;体积流量为 1. 0 mL /min;进样
量为 10 μL;流动相条件按表 2 梯度洗脱，能达到
372
2013 年 2 月
第 35 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2013
Vol． 35 No． 2
较好的分离效果，见图 2。
表 1 回收率试验结果
Tab. 1 Results of recovery tests
编
号
样品总
黄酮含
量 /mg
添加球
松素量 /
mg
测得的
总黄酮
量 /mg
回收率 /
%
平均值 /
%
RSD /
%
1 11. 65 22. 530 97. 58
2 11. 72 23. 086 101. 94
3 11. 53 11. 15 22. 901 101. 98 99. 78 2. 94
4 11. 68 23. 025 101. 75
5 11. 98 22. 654 95. 73
6 11. 63 22. 716 99. 43
表 2 梯度洗脱程序
Tab. 2 Gradient elution program
时间 /min 流动相 (甲醇 ∶ 水)
0 ～ 15 25 ∶ 75 ～ 70 ∶ 30
15 ～ 50 70 ∶ 30 ～ 100 ∶ 0
50 ～ 65 100 ∶ 0
65 ～ 85 (平衡色谱柱) 100 ∶ 0 ～ 25 ∶ 75
A. 球松素
A. pinostrobin
图 2 山橿 HPLC色谱图
Fig. 2 HPLC chromatogram of Lindera reflexa Hemsl．
2. 3. 2 线性关系考察 取 1. 005 mg /mL 球松素标
准品溶液，分别精密吸取 2、5、10、15、20μL 注
入高效液相色谱仪，按 2. 3. 1 项 HPLC 条件测定峰
面积。以进样量为横坐标，峰面积均值为纵坐标，
绘制标准曲线，结果表明，球松素进样量在2. 01 ～
20. 10 μg 范围内线性关系良好，线性方程为Y =
2 896 600X + 50 479，r = 0. 999 7。
2. 3. 3 样品中球松素测定 按 2. 1项下样品溶液制备
方法，精密称取 0. 1 g 浸膏，甲醇超声溶解，滤过，
定容至 50 mL，0. 45 μm滤膜过滤;按 2. 3. 1项 HPLC
条件进行测定，计算样品中球松素的量。
2. 3. 4 方法学考察 通过精密度，稳定性，重复
性的考察，表明该测定方法稳定、可行。
回收率考察，精密称取适量的山橿药材样品 6
份，分别加入一定量的球松素标准品，按 2. 1 项下
方法制备样品溶液，按 2. 3. 1 项 HPLC 条件进行测
定，计算样品中球松素的回收率。平均回收率为
99. 33%，RSD 为 2. 69%，表明该方法回收率良
好。结果见表 3。
表 3 回收率试验结果
Tab. 3 Results of recovery tests
编号
样品球松
素 /mg
添加球松
素 /mg
测得球松
素 /mg
回收率 /
%
平均值 /
%
RSD /
%
1 7. 81 15. 50 98. 59
2 7. 80 15. 47 98. 25
3 7. 81
7. 80
15. 71 101. 26
99. 33 2. 694 7. 80 15. 81 102. 67
5 7. 81 15. 29 95. 88
6 7. 80 15. 69 101. 08
2. 4 综合评价方法
为了把多个量纲不同的统计指标，转化成无量
纲的相对评价值，并综合这些评价值得出一个整体
评价，本实验选用了多指标综合评价方法。
运用多指标综合分析时，首先对各变量按相应
的方法作标准化变换，消除原变量量纲、数量级的
不同带来的影响［6］，本实验选择 Z-score 法对指标
进行变换，公式如下:
Zij =
xij － xj
Sj
，i = 1，2，…，n;j = 1，2，…，p
其中 xj =
Σ ni = 1xij
n ，s
2
j =
Σ ni = 1 (xij － xj)2
n － 1 。
经过变换后的数据均值为 0，方差为 l。
数据标准化后，根据各指标对结果的不同影响
程度，采用主观赋权法，对不同指标分别赋予不同
的权重系数:球松素回收率权重系数 0. 4，收膏率
和总黄酮回收率权重系数同为 0. 3，指数系数设定
为 100，计算综合得分。
综合评分公式为:
Y = (0. 3 × ZX1 + 0. 3 × ZX2 + 0. 4 × ZX3)×
100，ZX为标准化的数据。
2. 5 工艺条件考察
2. 5. 1 树脂预处理 树脂先用 95%乙醇浸泡 12 h
后，湿法装柱，用 95%乙醇清洗至乙醇洗脱液与
水混合 (1 ∶ 5)不呈白色混浊，蒸馏水洗至无醇
味，备用。
2. 5. 2 大孔吸附树脂型号的选择 根据树脂的极
性、粒径和孔径等参数，选用经过预处理的三个厂
家的六个型号的树脂，加入样品液进行静态吸附考
察，分别计算干膏的吸附率和解吸率，运用紫外分
光光度法测定总黄酮的吸附率和解吸率，用 HPLC
法测定球松素的吸附率和解吸率，并综合分析法计
算综合得分，比较综合得分，DM130 型适于山橿
总黄酮的纯化，结果见表 4。
472
2013 年 2 月
第 35 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2013
Vol． 35 No． 2
表 4 不同型号树脂吸附洗脱结果
Tab. 4 Results of different types of resin adsorption elution tests
树脂型号
收膏 X1 总黄酮 X2 球松素 X3
吸附率 /% 解吸率 /% 吸附率 /% 解吸率 /% 吸附率 /% 解吸率 /%
综合评价得分 (Y)
HPD450 47. 07 93. 65 67. 97 83. 21 75. 19 79. 58 62. 09
HPD600 47. 65 80. 86 52. 87 85. 14 61. 85 76. 93 － 38. 117
D101 46. 89 88. 48 71. 21 75. 23 48. 00 62. 25 － 101. 07
860021 75. 88 57. 04 85. 17 74. 85 69. 35 60. 56 － 11. 79
DM130 47. 56 94. 61 70. 45 89. 42 74. 61 85. 22 120. 16
HP20 46. 39 76. 84 65. 03 87. 98 31. 95 88. 61 － 31. 29
2. 5. 3 上样浓度的考察 S 样品液稀释至质量浓
度为 0. 02、0. 033、0. 05、0. 1 g /mL，分别通过
DM130 树脂上样，洗脱，检测，计算洗脱液收膏
率，总黄酮回收率和球松素回收率。综合评价结
果，选取上样质量浓度为 0. 05 g /mL。结果见表 5。
表 5 不同上样浓度测定结果
Tab. 5 Determination results of different concentrations
of samples
上样质量浓
度 /(g·mL －1)
收膏率
X1 /%
总黄酮回
收率 X2 /%
球松素回
收率 X3 /%
综合评价
得分 (Y)
0. 02 42. 62 62. 08 68. 62 21. 29
0. 033 42. 35 61. 54 68. 32 － 17. 73
0. 05 43. 18 62. 63 67. 29 72. 83
0. 1 43. 13 60. 42 54. 25 － 76. 38
2. 5. 4 上样流速的考察 取质量浓度 0. 05 g /mL
样品液，分别按 0. 5、1. 0、1. 5、2. 0 mL /mim 的
体积流量进行上样，洗脱，检测，计算洗脱液收膏
率，总黄酮回收率和球松素回收率。综合评价，选
取上样流速为 1. 0 mL /mim。结果见表 6。
表 6 不同上样流速测定结果
Tab. 6 Measurement results of different samples
flow velocity
上样流量 /
(mL·min －1)
收膏率
X1 /%
总黄酮提
取率 X2 /%
球松素提
取率 X3 /%
综合评价
得分 (Y)
0. 5 43. 58 70. 38 54. 57 10. 47
1. 0 42. 13 67. 85 59. 79 45. 17
1. 5 41. 04 65. 42 58. 82 － 10. 83
2. 0 39. 24 62. 95 60. 01 － 44. 81
2. 5. 5 上样径高比的考察 样品液 0. 05 g /mL，体
积流量1. 0 mL /min，分别通过径高比为1 ∶ 4、1 ∶ 6、
1 ∶ 8、1 ∶ 10的树脂柱进行上样，洗脱，分别检测，
计算洗脱液收膏率，总黄酮回收率和球松素回收率。
综合评价，选取径高比为 1 ∶ 8。结果见表 7。
2. 5. 6 树脂最大上样量的考察 取 DM130 型树脂
40 mL，样品液 0. 05 g /mL 按体积流量1. 0 mL /min
进行上样。分份收集流出液，每 10 mL 收集一份，
共收集 20 份，薄层 (乙酸乙酯 －石油醚 = 1 ∶ 5)
展开后，喷三氯化铝显色，紫外荧光检视球松素显
表 7 不同径高比考察结果
Tab. 7 Investigation results of different diameter ratio
上样径高比
收膏率 X1 /
%
总黄酮回收
率 X2 /%
球松素回收
率 X3 /%
综合评价
得分 (Y)
1 ∶ 4 43. 87 71. 09 62. 82 － 125. 10
1 ∶ 6 45. 58 71. 24 67. 62 － 14. 57
1 ∶ 8 46. 02 72. 12 71. 85 93. 58
1 ∶ 10 45. 17 71. 88 71. 28 46. 08
黄绿色荧光。第 14 管出现球松素斑点，说明从
140 mL开始出现泄漏。
最大上样量的考察，取 DM130 型树脂40 mL，
按体积流量 1. 0 mL /min 分别上样品液 (0. 05
g /mL)120、140、160、180 mL，吸附，洗脱，分
别检测，计算洗脱液收膏率，总黄酮回收率和球松
素回收率。综合评价，确定 160 mL 相当于 4 倍树
脂量为最大上样体积。结果见表 8。
表 8 最大上样量考察结果
Tab. 8 Investigation results of maximum sample quantity
上样量 /mL
收膏率 X1 /
%
总黄酮回收
率 X2 /%
球松素回收
率 X3 /%
综合评价
得分 (Y)
120 43. 16 68. 06 52. 16 32. 13
140 43. 25 67. 25 52. 74 35. 49
160 44. 13 67. 79 54. 23 77. 10
180 38. 93 61. 35 48. 65 － 144. 72
2. 5. 7 除杂用水量的考察 取 40 mL 完成上样的
DM130 树脂，分别加入 80、120、160、200 mL 纯
水除杂，洗脱，除杂效果直接影响产物的纯度，分
别检测，计算洗脱液中总黄酮和球松素回收率和含
量，结果见表 9。
表 9 不同体积水除杂考察结果
Tab. 9 Inspection results of different volumes of water im-
purity
除杂用水
量 /mL
总黄酮回收
率 /%
总黄酮
/%
球松素回
收率 /%
球松素
/%
80 85. 74 34. 94 82. 86 5. 88
120 83. 01 37. 68 81. 43 6. 44
160 81. 52 47. 36 81. 34 8. 23
200 76. 15 47. 21 76. 95 8. 16
572
2013 年 2 月
第 35 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2013
Vol． 35 No． 2
洗脱用水量使总黄酮和球松素的含量增加，当
用洗脱水量超过 160 mL (4 倍树脂量)时，总黄
酮和球松素的回收率明显降低，故选取 4 倍量为除
杂用水量。
2. 5. 8 洗脱液浓度的确定 取完成上样并除杂后
的树脂柱 4 根，分别用 30%、50%、70%、95%
乙醇洗脱，并检测，计算洗脱液收膏率，总黄酮回
收率和球松素回收率，综合考虑评价结果和生产成
本因素，选取 70%乙醇作为洗脱液。结果见表 10。
表 10 不同洗脱液浓度考察结果
Tab. 10 Results of different elution concentrations
洗脱液 /%
收膏率 X1 /
%
总黄酮回
收率 X2 /%
球松素回
收率 X3 /%
综合评价
得分 (Y)
30 37. 05 77. 12 48. 65 － 47. 87
50 41. 51 78. 88 65. 47 － 18. 26
70 45. 61 82. 22 82. 27 32. 93
95 45. 31 82. 08 82. 15 32. 20
2. 5. 9 洗脱速率的考察 取已完成上样的树脂柱
4 根，按体积流量 1. 0 mL /min，4 倍量纯水除杂
后，用 70%乙醇按不同体积流量进行洗脱，分别
检测，计算洗脱液收膏率，总黄酮回收率和球松素
回收率。洗脱体积流量增大 3 个指标变化不大，当
体积流量大于 1. 5 mL /min时各项 3 个回收率明显
减小，综合考虑评价结果和时间因素，选取 1. 5
mL /min作为洗脱体积流量。结果见表 11。
表 11 不同洗脱速率考察结果
Tab. 11 Investigation results of different elution rates
洗脱速率 /
(mL·min －1)
收膏率 X1 /
%
总黄酮回
收率 X2 /%
球松素回
收率 X3 /%
综合评价
得分 (Y)
0. 5 45. 17 84. 51 83. 75 31. 86
1. 0 44. 94 83. 28 83. 67 18. 83
1. 5 44. 50 83. 01 82. 56 6. 57
2. 0 43. 62 80. 37 80. 21 － 57. 26
2. 5. 10 洗脱液用量的考察 分别用不同量的
70%乙醇洗脱，检测，计算收膏率，总黄酮回收率
和球松素回收率。当洗脱液用量为 160 mL 时，总
黄酮和球松素基本洗脱完全，选取洗脱液用量 160
mL (4 倍树脂量)。结果见表 12。
表 12 不同洗脱乙醇量考察结果
Tab. 12 Investigation results of different elution volumes of
alcohol
乙醇用量 /
mL
收膏率 X1 /
%
总黄酮提
取率 X2 /%
球松素提
取率 X3 /%
综合评价
得分 (Y)
80 34. 10 72. 01 72. 32 － 45. 31
120 42. 51 78. 08 77. 21 － 27. 47
160 44. 39 82. 75 84. 50 36. 52
200 45. 17 83. 01 84. 93 36. 26
2. 5. 11 树脂重复使用次数的考察 用确定上样条
件和洗脱条件，连续 4 次对同一根树脂柱进行重复
上样，洗脱。比较不同上样次数的收膏率，总黄酮
回收率和球松素回收率。结果第 4 次使用时吸附效
率显著降低，所以树脂可重复上样 3 次，需再生。
结果见表 13。
表 13 树脂重复试验次数考察结果
Tab. 13 Investigation results of resin repeat test times
上样次数
收膏率 X1 /
%
总黄酮回收
率 X2 /%
球松素回收
率 X3 /%
综合评价
得分 (Y)
1 44. 10 82. 93 84. 37 26. 74
2 41. 11 80. 11 83. 14 30. 27
3 37. 03 71. 92 78. 98 3. 14
4 35. 01 66. 38 69. 52 － 60. 15
2. 6 纯化工艺条件验证
按照以上确定的条件:DM130 型树脂，按径
高比 1 ∶ 8 装柱，4 倍量质量浓度为 0. 05 g /mL样品
液，体积流量 1. 0 mL /min 上样，上样完成后静置
2 h，以 4 倍量的纯水除杂，4 倍量的 70%乙醇洗
脱，进行工艺验证试验 (n = 3) ，纯化的总黄酮由
27. 1%达到 50. 0%以上，球松素的量由 4. 1%达到
9. 0%以上。结果见表 14。
表 14 纯化工艺验证
Tab. 14 Purification of process validation
样品编号 收膏率 /% 总黄酮 /% 球松素 /%
1 43. 58 52. 21 9. 59
2 44. 07 54. 30 9. 55
3 43. 92 51. 48 9. 63
平均值 43. 86 52. 66 9. 59
3 讨论
由于山橿黄酮类成分极性差异较大，所以首先
选择了沧州宝恩吸附材料科技有限公司、山东鲁抗
立科药物化学有限公司、日本三菱化学株式会社 3
个厂家的 11 个型号的树脂进行了静态吸附考察，
从中优选了效果较好的 6 个型号进行动态吸附，最
终确定了 DM130 树脂吸附效果较好，能够获得纯
度较高的产物。
为了保证纯化过程中主要成分不流失，本实验
选择指标性成分球松素、总黄酮和收膏率 3 个指标
对工艺进行考核;参考相关文献 ［7］，同时用主
要特征指纹峰面积的保留率评价山橿总黄酮精制效
果，试验结果证明 11 个主要成分峰全部保留，峰
面积比例未改变，说明纯化过程对总黄酮的主要成
分组成保留效果较好。见图 3 和图 4。
672
2013 年 2 月
第 35 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2013
Vol． 35 No． 2
A. 球松素
A. pinostrobin
图 3 山橿 HPLC色谱图
Fig. 3 HPLC chromatogram of Lindera reflexa Hemsl．
A. 为球松素
A. pinostrobin
图 4 树脂纯化后样品 HPLC图谱
Fig. 4 HPLC chromatogram of sample with resin
purification
参考文献:
［1］ 崔鸿宾． 山胡椒属系统的研究［J］． 植物分类学报，1987，
25(3) :167-171．
［2］ 《全国中草药汇编》编写组． 全国中草药汇编［M］ 下册。
北京:人民卫生出版社，1978．
［3］ 河南省卫生厅． 河南省药品标准［S］． 郑州:河南科技出
版社，1984．
［4］ 张均增，方起程． 山橿化学成分的研究［J］． 中草药，
1994，25(11) :565-568．
［5］ 张 峰． 山橿活性部位筛选及其指纹图谱研究［D］． 郑州:
河南中医学院，2009．
［6］ 邱 东． 多指标综合评价方法的系统分析［M］． 北京:中
国统计出版社，1991．
［7］ 黄月纯，黄樱华，刘翠玲． 大孔吸附树脂纯化侧柏叶总黄
酮的工艺研究［J］． 中药新药与临床药理，2010，21(1) :
75-80．
［8］ 张 彤，徐莲英，陶建生． 多指标综合评分法优选葛根提
取工艺［J］． 中草药，2004，35(1) :38-40．
正交试验法比较女贞子中齐墩果酸与特女贞苷的乙醇提取工艺
郭宇洁， 任 烨， 葛争艳， 孟 硕， 金 龙， 李雪丽， 刘建勋*
(中国中医科学院西苑医院实验中心，北京 100091)
收稿日期:2012-05-18
基金项目:科技部“重大新药创制”科技重大专项 (2010ZX09102-213．)
作者简介:郭宇洁 (1968—) ，女，副主任药师，中药制剂及其相关研究。Tel: (010)62835615，E-mail:guoyujie121@ sina． com
* 通信作者:刘建勋 (1955—)，男，研究员，博士生导师，中药药理及其相关研究。Tel: (010)62835601，E-mail:liujx0324@ sina． com
摘要:目的 通过正交试验法比较女贞子药材的乙醇提取工艺。方法 建立 HPLC法测定女贞子药材中齐墩果酸和特
女贞苷含量的方法。采用 L9(3
4)正交试验设计安排实验，分别以齐墩果酸和特女贞苷 2 种指标成分对正交试验结果
进行分析。结果 以齐墩果酸和特女贞苷为指标成分筛选出的女贞子提取工艺为以 6 倍量 75%乙醇提取 3 次，每次 2
h。结论 所得到的最佳醇提工艺可以反映女贞子两种成分的综合提取效果。
关键词:降糖消脂片;女贞子;齐墩果酸;特女贞苷;正交试验
中图分类号:R284. 2 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2013)02-0277-05
Alcohol extraction process of oleanolic acid and specnuezhenide of Ligustri lucidi
Fructus compared by orthogonal test
GUO Yu-jie， REN Ye， GE Zheng-yan， MENG Shuo， JIN Long， LI Xue-li， LIU Jian-xun*
(Center for Research，Xiyuan Hospital，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100091，China)
772
2013 年 2 月
第 35 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2013
Vol． 35 No． 2