全 文 ：·研究报告·
生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2014年第4期
收稿日期 ： 2014-01-17
基金项目 ：国家自然科学基金面上项目（31270663），国家转基因生物新品种培育科技重大专项（2013ZX08009003-002-004）
作者简介 ：孙帆，男，硕士硕士生，研究方向 ：植物抗逆基因克隆和功能 ；Email ：sunfan0041@126.com
通讯作者 ：张凌云，女，博士，硕士生导师 ；研究方向 ：植物生殖与逆境生理 ；E-mail:lyzhang73@sohu.com
生长素在植物的生长发育过程中具有重要的作
用［1］。生长素在胚胎形成、细胞分裂伸长以及分化，
侧根形成和顶端优势的形成等过程中发挥重要的功
能［2，3］。生长素调节下游基因表达的机理十分复杂，
近年来生长素信号转导途径研究取得了较大的成果。
在生长素信号转导途径中，主要有两类基因发
青杄生长素抑制蛋白基因 PwARP-1 的克隆及表达分析
孙帆  罗朝兵  周燕妮  张凌云
（北京林业大学林学院 森林培育与保护教育部重点实验室，北京 100083）
摘 要 ： 从青杄的 cDNA 文库中筛选出一个生长素抑制蛋白基因 PwARP-1（Auxin-repressed protein 1），并通过 RACE-PCR
技术获得 PwARP-1 cDNA 全长。生物信息学分析显示，PwARP-1 基因编码 155 个氨基酸残基的蛋白，分子量为 17.1 kD，理论等电
点为 10.07，富含无规则卷曲。以多年生青杄和青杄幼苗为研究材料，通过 RT-qPCR 技术检测 PwARP-1 的组织特异性表达、激素
的响应模式及种子萌发过程中的表达量模式。结果表明，PwARP-1 在青杄各个组织中均有表达，在花粉中表达量最高，在种子中
的表达量最低。PwARP-1 在种子萌发过程中表达量呈先上升，在第 10 天表达量达到最高后开始下降。进一步试验表明，PwARP-1
能响应多种逆境胁迫和激素处理。在赤霉素（GA）和生长素（IAA）处理下 PwARP-1 的表达量被抑制。在干旱胁迫和油菜素内酯
（BR）激素处理下 PwARP-1 的表达量逐渐升高，而在在盐胁迫、茉莉酸甲酯（MeJA）和脱落酸（ABA）等激素处理下 PwARP-1 的
表达量先下降后上升。这些结果显示 PwARP-1 可能参与了植物种子萌发、多种逆境胁迫和激素响应过程。
关键词 ： 青杄 生长素抑制蛋白 表达分析 植物激素
The Cloning and Expression Analysis of PwARP-1 in Picea wilsonii
Sun Fan Luo Chaobing Zhou Yanni Zhang Lingyu
（Key Laboratory of Forest Silviculture and Conservation of Ministry of Education，College of Forestry，Beijing Forestry University，Beijing
100083）
Abstract:  An auxin repressed protein gene PwARP-1 is cloned from Picea wilsonii. The full length cDNA of PwARP-1 is obtained by
RACE-PCR assays based on the cDNA library of Picea wilsonii and EST fragment of PwARP-1. Bioinformatic tools are applied for the prediction
of PwARP-1. PwARP-1 encodes a protein with 155 amino acids. The molecular weight is 17.1 kD and theoretical pI is 10.07 and the protein is
rich in random coil. The tissue-specific expressions and the response to phytohormones of PwARP-1 were investigated by RT-qPCR assays. The
tissue-specific expression assays suggested that the expression level in pollen was the highest among all tissues and the expression level in seed
was the lowest. During seed germination, the expression of PwARP-1 was increased, peaked at the 10th day and then decreased. Furthermore,
the expression of PwARP-1 was significantly inhibited by Auxin and Gibberellin. However, the expression level of PwARP-1 is up-regulated by
Brassinolide and drought stress treatment. The expression level of PwARP-1 declined and then up-regulated under salt stress, methyl jasmonate,
and abscisic acid treatments. These results indicate that PwARP-1 has a potential function in seed germination and responding to stresses and
phytohormone treatments.
Key words:  Picea wilsonii Auxin-repressed protein Expression analysis Phytohormone
挥了功能，包括生长素素结合蛋白（Auxin binding
proteins，ABFs）以及受生长素调控的转录因子。生
长素结合蛋白和生长素的结合，通过调控细胞周期
参与了细胞的分裂和扩增［4，5］。在生长素信号转导
途径中有多种家族的基因（Auxin responsive gene）
参与其中，包括生长素响应因子（Auxin response
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2014.04.005
2014年第4期 65孙帆等 ：青杄生长素抑制蛋白基因 PwARP-1 的克隆及表达分析
factors，ARFs） 和 AUX/ IAA 转 录 因 子 等。ARFsN
端 DNA 结合域识别受生长素调节基因启动子中的
生长素响应元件（Auxin responding elements）而调
节下游基因的表达［6-8］。AUX/ IAA 是一种可被泛素
蛋白酶体途径（ubiquitin-proteasome pathway）降解，
寿命很短暂的一种蛋白［9］。在较低的生长素浓度下，
AUX/ IAA 不与 DNA 直接作用，而是和 ARFs 形成
异源二聚体，阻止 ARFs 调控下游基因的表达［10］。
在 较 高 的 生 长 素 浓 度 下， 泛 素 化 的 AUX/ IAA 被
COP9 信 号（COP9 signalosome） 招 募 到 26S 蛋 白
酶体中水解，从而释放出 ARFs 引起下游基因的
表达［11］。
在植物的生长发育过程中，生长素抑制蛋白
（Auxin repressed protein）具有重要的功能。在草莓中，
随着果实的生长 ARP 基因 SAR5 的表达被生长素抑
制，而且抑制作用和果实的成熟呈现正相关［12］。在
烟草花粉成熟的过程中，烟草 ARP 基因表达量上升，
但在花粉萌发的过程中表达受到抑制［13］。在之前的
文献报道中，ARP 基因使植物停止生长，维持休眠
的状态。但是 ARP 基因导致植物休眠的分子机制所
知甚少。
青杄（Picea wilsonii Mast.），又名青皮云杉，为
松科（Pinaceae）云杉属（Picea）常绿乔木，是我国
特有的树种。青杄分布较广，是一种优良的用材和
园林绿化树种，对逆境环境具有较强的抵抗能力［14］。
本研究在实验室前期研究的基础上通过 RACE-PCR
技术从青杄 cDNA 文库中克隆到一个生长素抑制蛋
白基因，获得其全长 cDNA 序列，通过生物信息学
分析命名为 PwARP-1 ；根据其核酸序列推导出其氨
基酸序列，通过生物信息学软件进行蛋白结构预测。
利用 RT-qPCR 技术测定 PwARP-1 在不同组织、种
子萌发和不同激素逆境的响应过程中表达量的变化。
本试验旨在为研究生长素抑制蛋白 ARP-1 在林木生
长发育和抗逆过程中的功能，及林木遗传育种和林
木抗逆基因的筛选提供试验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 植物材料和培养条件 组织特异性表达试验
参考李长江等试验方法［15］，使用 3 年苗龄青杄幼苗
根、茎及针叶和成年青杄的花粉及种子，青杄种子
与花粉采集于中国科学院北京植物园。种子春化后
播于滤纸上，保持滤纸湿润。种子萌发后移苗至培
养基质中。青杄幼苗培养于室温，空气湿度 50%，
光周期为 16 h 光照，8 h 黑暗的温室，培养基质为
营养土和蛭石按 1∶1 混合，每周使用自来水充分浇
灌一次。植物材料经处理后液氮速冻于 -80℃保存
备用。
1.1.2 试验试剂 青杄 cDNA 文库载体为 pDONR222
购自 Invitrogen 公司。克隆载体为 pEASY-T1，购自
Transgene 公司。PCR Taq Mix、DNA Maker（DL2000）、
荧 光 定 量 PCR 试 剂 盒（SYBR Green SuperReal
Premix） 和 RNA 提 取 试 剂 盒（RNAprep Pure Plant
Kit）购自天根（北京）生化科技有限公司，逆转录
试剂盒（Revert AidTM First Strand cDNA Synthesis Kit）
购自 Fermentas 公司。所用激素购自 Sigma 公司。其
他试剂购自 AMRESCO 公司。
1.2 方法
1.2.1 RACE-PCR 获取目的基因 PwARP-1 的全长
以青杄 cDNA 文库为模板［16］，从载体 pDONR222 接
头序列和目的基因的 EST 序列设计引物，使用引物
5-F 和 5-R 扩增 5 方向，使用 3-F 和 3-R 扩增出 3
方向的序列。5-F ：CTGTTCGTTGCAACAAATTG A，
5-R ：TGGCAGAATTAGTAATAGTTG ；3-F ：AGTAA-
TAAGTACAAAAATAAC，3-R ：T TAAACAACGTTG-
CTTGTCCA。
1.2.2 生 物 信 息 学 分 析 根 据 PwARP-1 cDNA 全
长序列，利用 DNAMAN 推导出 PwARP-1 的开放阅
读框确定其蛋白氨基酸序列，运用 clustalx 软件和
DNAMAN 软件多序列比对，利用 MEGA5.0 软件构
建系统发育树，构树方法为邻连法（Neighbor-joini
ng），bootstap 检 测 为 1 000 次。 利 用 Expasy 中 的
Compute pI/Mw 工具来计算蛋白的理论等电点与分子
量 ； 利 用 Prot- Scale 工（http ：//web.expasy.org/prot
scale/）进行疏水性分析 ；利用 NCBI 的保守域数据
库（http ：//www.ncbi.nlm.nih.gov/cdd/） 对 目 的 基 因
的结构域进行预测 ；利用 GOR4（http ：//npsa-pbil.
ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automa t.pl?page=npsa_gor4.html）
进行蛋白的二级结构预测。
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2014年第4期66
1.2.3 激素和胁迫处理 激素和胁迫试验参考 Li
等［17］处理方法，将处理的激素处理时间和浓度加
以调整。具体处理方法如下 ：将 8 周苗龄的青杄幼
苗根浸入激素溶液分别处理3、6 和 12 h，以水为对照。
试 验 中 使 用 的 激 素 包 括 ABA、IAA、GA、MeJA、
SA、Br 和 Eth，浓度均为 100 nmol/ L。盐胁迫试验
中，使用 100 nmol/ L 的 NaCl 溶液模拟盐胁迫。干
旱胁迫试验中，将 8 周苗龄的青杄幼苗干旱处理 20
d，以正常浇水处理的青杄幼苗为对照。处理后的青
杄幼苗液氮速冻，于 -80℃保存备用。用于该基因在
不同外源激素和胁迫的响应分析。
1.2.4 种子萌发试验 参考李长江等［15］试验方法
将青杄种子春化 1 个月后，放置于滤纸上，保持滤
纸湿润，在室温条件（25℃）下进行萌发试验。从
种子放置于湿润的滤纸上的第 1 天开始取样，每
隔 1 d 取 1 次样，每次取样后液氮速冻，并于 -80℃
保存备用，用于该基因在种子不同萌发时期表达量
分析。
1.2.5 实时荧光定量 PCR 分析 通过艾德来公司植
物 RNA 提取试剂盒提取青杄各个器官总 RNA，利
用 Fermentas 公司的反转录试剂盒合成 PwARP-1 的
第一链 cDNA。以青杄 EF1-α［18］为内参基因，根据
PwARP-1 的 CDS 序列设计特异性引物。F ：CTCAG-
TTCTTATGG AGGA ；R ：GCATTCACAA CAATGT-
CA。利用天根公司的荧光定量 PCR 试剂盒在实时
荧 光 定 量 PCR 仪 上（ABI Step One Plus） 进 行 RT-
qPCR 试验，分析 PwARP-1 组织特异性表达、不同
激素和逆境胁迫的响应模式。
2 结果
2.1 PwARP-1的克隆
PwARP-1 的全长 cDNA 序列共有 956 bp，在第
12 bp 处发现起始密码子 ATG，在 476 bp 处发现终
止密码子 TGA，共编码 155 个氨基酸残基。3 非编
码区包含 477 bp，在序列末端发现 Poly（A）21 尾巴
（图 1-A）。
1
1
61
20
121
40
181
60
241
80
301
100
361
120
421
140
481
541
601
661
721
781
841
901
图 1 PwARP-1 的全长序列和氨基酸序列
2.2 生物信息学分析
2.2.1 理化性质分析 利用 Protpapram 工具分析，
PwARP-1 分子量为 17.1 kD，理论等电点为 10.07。
预测的分子式为 C747H1215N223O227S5。PwARP-1 蛋白中
的氨基酸以丝氨酸（Ser）含量最多，为 12.3%，其
次精氨酸（Arg）为 9.7%，丙氨酸（Ala）为 9%，。
2014年第4期 67孙帆等 ：青杄生长素抑制蛋白基因 PwARP-1 的克隆及表达分析
不稳定系数为 69.33，表明 PwARP-1 状态不稳定。
疏水性分析结果显示其疏水性最大值为 1.244，亲
水 峰 最 高 是 -3.122， 平 均 疏 水 性 为 -0.610， 显 示
PwARP-1 是一个亲水性蛋白质（图 2-A）。Foldindex
固有无序化分析显示，PwARP-1 蛋白无序化较大，
推测目的蛋白在生理环境下动态活性较高（图 2-B）。
通过 TMHMM 工具对 PwARP-1 蛋白的跨膜结构分析，
未发现含有跨膜结构。
4-A）发现，在所比较的同源基因中，PwARP-1 和
PsDAAP-1（Dormancy/ Auxin association protein） 聚
为一簇，亲缘关系最近。
表 1 PwARP-1 的同源基因
物种 基因名 登录号 e 值
北美云杉 PsDAAP-1 HM198123 4.00E-106
二穗短柄草 BdARP-1 XM_003574531 7.10E-02
玉米 ZmARP-2 NM_001157109 3.00E-00
玉米 ZmARP-1 EU964946 7.00E-12
拟南芥 AtDAAP-2 AT1G54070 2.00E-11
水稻 OsDAAP-1 AK106100 7.00E-12
烟草 NtARP-1 AY183722 4.00E-10
2.2.3 二 级 结 构 预 测 利 用 GOR4 对 PwARP-1 的
二级结构预测后发现，PwARP-1 含有无规则卷曲
（58.71%）、α- 螺旋（32.26%）和和延伸链（9.03%）。
无规则卷曲含量在整个二级结构中最高（图 4-B，
4-C）。利用 NCBI 网站的保守域数据库预测，结果
表明 PwARP-1 含有一个生长素抑制蛋白家族（Auxin-
repressed superfamily）的保守域，E 值 2.03e-13。
2.3 PwARP-1的表达分析
2.3.1 PwARP-1 的组织表达特异性分析 分别提取
3 年生青杄幼苗根、茎及针叶和成年青杄种子及花
粉的 RNA，经琼脂糖凝胶电泳验证 RNA 提取质量
良好，28S 与 18S 条带清晰，适合后续的逆转录以
及 RT-qPCR 试验。RT-qPCR 结果（图 5）分析显示，
PwARP-1 在各个组织中均有表达，但在花粉中的表
达量最高，依次为根、针叶、茎和种子。
2.3.2 PwARP-1 种子萌发过程中表达分析 提取不
同萌发天数的青杄种子 RNA，经琼脂糖凝胶电泳
验证 RNA 提取质量良好，28S 与 18S 条带清晰，可
以进行后续的试验。RT-qPCR 结果（图 6）显示，
PwARP-1 表达量随着种子的萌发呈现先增加后下降
的趋势。种子萌发早期，PwARP-1 表达量开始上升，
在第 10 天表达量达到最高后，开始下降。
2.3.3 PwARP-1 对不同激素和非生物胁迫的响应试
验 相对于对照，在 100 nmol/ L 的 IAA 处理 6 h 和
12 h 后，PwARP-1 的表达量被明显的抑制。在 100
nmol/ L GA 和 Eth 的处理下 PwARP-1 的表达量逐渐
下降。在 100 nmol/ LABA、MeJA 和 SA 分别处理后，
1.5
1.0
1.5
-0.5
-1.0Sc
or
e
-1.5
-2.0
-3.0
-3.5
20 40 60 80 100 120 140
Position
-2.5
0
A
1.00
0.50
0.00
-0.50
-1.00
0 50 100
Residue Number
folded
unfolded
150 155
B
A ：PwARP-1 的疏水性分析 ；B ：PwARP-1 的固有无序化分析
图 2 PwARP-1 的理化性质分析
2.2.2 多序列比对及系统发育树分析 运用 NCBI 的
BLAST 工具检索 PwARP-1 的同源基因，发现白云杉
（Picea glauca）、毛果杨（Populus trichocarpa）、苹果
（Malusx domestica）和拟 南 芥（Arabidopsis thaliana）
等物种中的同源基因（表 1）。利用 ClustalX 软件对
PwARP-1 及其同源基因的氨基酸序列多序列比对后
发现 ARP 家族基因的在 N 端和 C 端比较保守（图
3）。结合软件 Mega5.0 构建系统发育树，结果（图
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2014年第4期68
PwARP-1 的表达量先下降，在 6 h 降到最低后上升。
ABA 和 SA 处理 12 h 后 PwARP-1 表达量和处理 3 h
表达量差异不显著。MeJA 处理 12 h 后 PwARP-1 的
表达量有所上升，但和处理 3 h 的表达量相比差异
显著。在 100 nmol/L 的 BR 处理下，PwARP-1 的表
达量逐渐上升（图 7-A）。
利 用 RT-qPCR 测 定 PwAPR-1 的 表 达 量 变 化。
以正常浇水的青杄幼苗为对照（Mock），将 8 周苗
40PwARP-1
40PsDAAP-1
40BdARP-1
40ZmARP-1
40ZmARP-2
40NtARP-1
Consensus
PwARP-1
PsDAAP-1
BdARP-1
ZmARP-1
ZmARP-2
NtARP-1
Consensus
PwARP-1
PsDAAP-1
BdARP-1
ZmARP-1
ZmARP-2
NtARP-1
Consensus
PwARP-1
PsDAAP-1
BdARP-1
ZmARP-1
ZmARP-2
NtARP-1
Consensus
79
80
58
62
59
67
116
116
92
95
98
106
154
153
130
130
134
136
多序列比对中的保守序列分别标记为黑色（相似性 =100%），红色（相似性 >75%），青色（相似性 >50%）（颜色标识见电子版）
图 3 不同物种 ARP 蛋白多序列比对
61
A
C
D
B
96
97
100
100
0.4
20
Query seq.
Specific hits
Superfamilies
1 25 50 75 100
Auxin_repressed
Auxin_repressed superfamily
40 60 80 100 120
0.3 0.2 0.1 0.0
OsDAAP-1
AtDAAP-2
NtAPP-1
PsDAAP-1
P2ARPP-1
ZmARP-2
ZmARP-1 Alpha helix
310 helix
Pi helix
Beta bridge
Extended strand
Beta turn
Bend region
Random coil
Ambigous states
Other states
50 is
0 is
0 is
0 is
14 is
0 is
0 is
9 is
0 is
0 is
32.26%
0.00%
0.00%
0.00%
9.03%
0.00%
0.00%
58.71%
0.00%
0.00%
Hh˖Gg˖Ii˖Bb˖Ee ˖Tt ˖Ss˖Cc˖?˖
BdARP-1
A ：构树方法为邻位相连法，步长检测 bootstrap 为 1000 ；B ：由 GOR4 工具预测 PwARP-1 的二级结构预测 ；C ：横轴表示氨基酸位置，
蓝色表示 α- 螺旋，红色部分为无规则卷曲（颜色标识见电子版）；D ：PwARP-1 保守域分析
图 4 青杄 PwARP-1 进化树分析和二级结构预测
2014年第4期 69孙帆等 ：青杄生长素抑制蛋白基因 PwARP-1 的克隆及表达分析
龄的青杄幼苗干旱处理 20 d 后，发现 PwARP-1 的表
达量上升（图 7-B）。100 nmol/ L NaCl 处理青杄幼苗
3 h、6 h 和 12 h 后以水（Mock）为对照，检测 PwA-
RP-1 的表达量后发现 PwARP-1 的表达量先下降而后
上升，处理 12 h 表达量和处理 3 h 的表达量相比差
异不显著。
3 讨论
本研究通过 RACE-PCR 方法成功获得一个分
子伴侣基因 PwARP-1 的 cDNA 全长序列。以青杄
cDNA 文库为模板的 RACE 试验是基于 EST 保守序
列和 pDONR-222 载体上特异的引物进行的，cDNA
全长是由 PwARP-1 的末端序列和 EST 序列进行拼
接而来，进而获得基因 cDNA 全长。相比之下，比
传统的通过同源植物保守序列设计兼并引物的方法
更加便捷［18］。经过生物信息学分析发现，PwARP-1
基因编码了一个包含 155 个氨基酸的蛋白，分子量
约为 17.1 kD，二级结构中无规则卷曲所占比重最
大，并 NCBI 保守域数据库预测 PwARP-1 含有一个
Auxin-repressed 家族保守域。多序列比对以及构建
系统发育树结果显示，PwARP-1 和 PsDAAP-1 聚为
一簇，显示青杄（Picea wilsonii）的 ARP-1 蛋白和北
美云杉（Picea sitchensis）DAAP 蛋白的亲缘关系最近。
DAAP-1 蛋白是一个休眠和生长素相关的蛋白，因此
推测 PwARP-1 可能与植物的休眠相关。
组织特异性表达试验显示，PwARP-1 在花粉中
的表达量最高，依次为根、针叶、茎和种子。因此
推测 PwARP-1 在花粉的休眠和萌发过程中发挥重要
作用。种子萌发过程中，PwARP-1 表达量在萌发前
期呈上升趋势，在第 10 天表达量达到最高值后开始
下降。PwARP-1 在青杄种子萌发过程中发挥重要作
用。在进一步的激素响应试验中，在 100 nmol/ L 的
IAA 处理 6 h 和 12 h 后，PwARP-1 的表达量被明显
的抑制。但有趣的是，并非所有的 ARP 家族基因都
会被生长素抑制。在牛奶子（Elaeagnus umbellata）
中发现的 EuNOD-ARP1 是 ARP 家族成员，但是生长
素处理叶片后 EuNOD-ARP1 的表达量升高，显示出
ARP 家族基因功能的多样性［19］。在 100 nmol/L GA
和 Eth 的处理下 PwARP-1 的表达量逐渐下降。但在
100 nmol/ L 的 ABA、MeJA、SA 和 NaCl 分别处理后，
PwARP-1 的表达量先下降，在处理 6 h 后降到最低
后上升。处理 12 h 后 PwARP-1 的表达量恢复或者部
分恢复到 3 h 表达水平，推测 PwARP-1 在上述激素
处理和盐胁迫早期发挥作用。在 100 nmol/ L 的 BR
处理下，PwARP-1 的表达量逐渐上升。在干旱胁迫
处理后，PwAPR-1 的表达量升高。Hwang 等［20］研
A：青杄幼苗在不同激素和 NaCl 分别处理 3，6 和 12 h PwARP-1 的相对表达量；
B ：青杄幼苗在干旱胁迫处理 20 d 后表达量变化 ；** 表示在 1% 水平上差异
显著，* 表示在 5% 水平上差异显著
图 7 PwARP-1 在不同外源激素和胁迫处理下的表达量
** 表示在 1% 水平上差异显著
图 5 PwARP-1 组织特异性表达分析
** 表示在 1% 水平上差异显著，* 表示在 5% 水平上差异显著
图 6 PwARP-1 在种子萌发过程中的表达分析
0.0 ṩ 㤾 䪸ਦ 㣡㊹ ⿽ᆀ


0.5
1.5
2.5
3.0
2.0
1.0
Pw
AR
P-
1Ⲵ⴨
ሩ㺘
䗮䟿




0 0 2 4 6 8 10 12ᰦ䰤d
2
4
6
8
Pw
AR
P-
1Ⲵ⴨
ሩ㺘
䗮䟿









4A B
3
2
1
0 IAA ABA MeJA GA Eth SA BR NaCl ሩ➗ ᒢᰡ0
1
2
3
4
5
Pw
AR
P-
1Ⲵ⴨
ሩ㺘
䗮䟿
Pw
AR
P-
1Ⲵ⴨
ሩ㺘
䗮䟿
3 h
6 h
12 h
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2014年第4期70
究发现，白菜（Brassica rapa）在干旱、盐、热击和
冷害处理下 BrARP-1 的表达量升高。在之前的文献
报道中，非生物胁迫处理后，ARP 基因会被诱导上
升［21］。在本试验中 PwARP-1 对多种激素和非生物
胁迫处理都有不同响应，显示其在植物的生长发育
和胁迫响应过程中发挥多种功能，尤其是 PwARP-1
在种子和花粉萌发过程以及激素早期响应过程中的
功能需要更深入的研究。
4 结论
从 青杄 cDNA 文 库 中 克 隆 生 长 素 抑 制 蛋 白
PwARP-1， 含 有 155 个 氨 基 酸 残 基， 该 蛋 白 分 子
量为 17.1 kD，等电点为 10.07，富含无规则卷曲。
PwARP-1 响应多种激素和逆境处理。
参 考 文 献
［1］ Teale WD, Paponov IA, Palme K. Auxin in action ：signalling,
transport and the control of plant growth and development［J］. Nat
Rev Mol Cell Biol, 2006, 7（11）：847-859.
［2］ Leyser O . Dynamic in teg ra t i on o f aux in t ranspor t and
signalling［J］. Curr Biol, 2006, 16（11）：424-433.
［3］ Quint M, Gray WM. Auxin signalling［J］. Curr Opin Plant Biol,
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（责任编辑 李楠）