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松口蘑的镇咳、祛痰、平喘作用研究



全 文 :松口蘑的镇咳 、祛痰 、平喘作用研究
吴映明 , 陈爱葵 , 曾小龙 , 曾晓春
(广东教育学院生物系 , 广东 广州 510310)
  摘要:用动物实验方法 , 研究松口蘑子实体水溶性
提取液治疗支气管炎 , 咳 、 痰 、 喘三种症状的效果及其
药理作用。给豚鼠腹腔注射松口蘑子实体水溶性提取液 ,
能非常显著地增大方波刺激迷走神经的引咳阈值;给小
白鼠灌胃 , 能非常显著增加其呼吸道的酚红排泌量;给
豚鼠离体气管滴入提取液 , 对气管有非常显著的扩张效
应;该提取液能非常显著地延长豚鼠的引喘潜伏期 , 对
蛙口腔粘膜上皮的纤毛运动有一定的加快作用。松口蘑
子实体水溶性提取液有明显的镇咳 、 祛痰和平喘作用。
关键词:松口蘑提取液;引咳阈值;酚红排泌量;
引喘潜伏期
中图分类号:R965   文献标识码:A
文章编号:1003-8310 (2003) 04-0037-04
松口蘑 [ Tricholoma matsutake (S.Itoet Imai)
Sing.] , 别名杉蕈 、 松菇 , 日本称松茸。 隶属真菌
门 、 担子菌亚门 、 蘑菇目 、 口蘑科 、 口蘑属[ 1] , 主
要分布在日本 、 朝鲜半岛以及我国东北 、 西南和台
湾等省[ 2] 。由于松口蘑质地细嫩 , 口味鲜美且具有
淡雅的松脂清香 , 故倍受美食家的赞誉。同时松口
蘑还具有很高的药用价值。据文献记载 , 松口蘑具
有强身 、 益肠胃 、 止痛 、 理气化痰和驱虫等功
效[ 3] 。现代研究表明 , 松口蘑还可治疗糖尿病 , 并
具有抗癌作用。关于松口蘑治疗支气管炎的药效和
药理作用未见专题报道。我们结合临床 , 以动物为
对象 , 对松口蘑子实体水溶性提取液 (以下简称松
口蘑提取液)的镇咳 、 祛痰 、 平喘作用进行了初步
研究。
1 实验材料
1.1 松口蘑制剂 松口蘑子实体干片购自昆明食
用菌研究所 , 产地为云南省中甸 , 实验用其水溶性
提取液。
1.2 实验动物 昆明种小白鼠购自广东省医药实
验动物中心;豚鼠购自广州市白云九佛强龙动物养
殖场;青蛙购自广州农贸市场。
1.3 实验药品  氯化乙酰胆碱 , 纯度 98.0% ~
100%, 配制成 2%水溶液;磷酸组胺 , 纯度 ≥
98%, 配制成 0.4%水溶液。
2 方法与结果
2.1 镇咳作用
选取 480 ~ 500g健康豚鼠 10 只 , 腹腔注射乌拉
收稿日期:2003-01-07
[ 2] 张均田主编.现代药理实验方法 [M] .北京医科大
学中国协和医科大学联合出版社 , 1998.1029
[ 3] 韩怡凡 , 陈先瑜.中枢胆碱递质系统与学习记忆关系
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[ 4] 沈映君主编.中药药理学 [ M] .上海科学技术出版
社 , 1997.129 , 160.
Pharmacological Activity of Cultured Products of Flammulina velutipes
WANG Ya-fang , ZHANG Jian-jun*
(Institute of Materia Medica , Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College , Beijing 100050, China)
Abstract:Mice were given Flammulina velutipes (FV)(0.5g/ kg , 1g/kg and 1.5g/ kg) orally twice before exper-
iments.Learning and memory impairment was induced by injection of scopolamine (1mg/kg , ip) or NaNO2 (120 mg/
kg , ip), and the step-through test was performed.The gasping time of mice after decapitation was used to evaluate the
effect of FV on hypoxia.Swimming experiment was performed to observe the effect of FV on fatigue in mice.Results indi-
cated FV (0.5g/kg , 1g/ kg and 1.5g/kg , p.o.) significantly decreased the latencies and error frequency of mice in
the step-through test , and prolonged the gasping time of decapitated mice and the swimming time of normal mice.These
data showed that FV significantly improved the learning and memory impairment induced by scopolamine or NaNO2 , and
showed strong protective action on hypoxia and improvement of fatigue.
Key words:Flammulina velutipes (FV);Learning and memory;Anti-hypoxia;Anti-fatigue
37第 22 卷 第 4期       中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA
DOI :10.13629/j.cnki.53-1054.2003.04.012
坦(1g/kg)麻醉 , 沿颈正中线切开皮肤 , 分离一
侧迷走神经;用动脉夹夹住上腹皮肤 , 牵引至张力
换能器上 , 以描记膈肌收缩活动情况。豚鼠咳嗽时
隔肌活动加强 , 牵动腹壁 , 可借此记录咳嗽的次数
和强度。用方波刺激迷走神经 , 找出引咳阈值 (刺
激参数:频率 10Hz , 波宽 10ms , 每次持续时间
5s)。两次刺激之间间隔5s , 电压从 1V 试起 , 逐渐
递增 , 找到刚刚引起咳嗽的最小电压值 , 即为该豚
鼠的引咳阈值 , 连续测试 3次 , 取其平均数 , 作为
对照值;然后 , 给豚鼠腹腔注射松口蘑提取液 7g/
kg (浓 度 2g/ml), 药 后 15、 30 、 45 、 60、 90、
120min 分别进行测试 , 先用药前引咳阈值刺激 , 视
其引咳情况 , 然后逐渐减少或加大刺激电压 , 找出
其引咳阈值[ 4] , 结果见表 1。
从表 1 看出 , 给药后 15min 阈值已经是药前的
1.33倍 , 而且随着时间的延长 , 增加倍数越来越
大;经显著性检验 , 药后 15min 与药前比较 , P<
0.05 , 差异显著 , 药后 30 、 45、 60、 90、 120min 与
药前比较 , P值均小于 0.01 , 差异非常显著。
表 1 松口蘑提取液对引咳阈值的影响 (x±Sx n=10)
药物剂量
(g/ kg)
给药前
引咳阈值 (V)
给药后引咳阈值 (V)
15min 30min 45min 60min 90min 120min
7
1.05
±0.05
1.40
±0.15
2.30
±0.29
3.10
±0.38
3.60
±0.26
4.20
±0.29
4.80
±0.19
阈值增加倍数 1 1.33 2.19 2.95 3.43 4.00 4.57
t 检验 P<0.05 P<0.01 P<0.01 P<0.01 P<0.01 P<0.01
  选取体重为 26 ~ 34g 健康小白鼠 28 只 , 禁食
12h (不禁水), 随机等分成两组 , 一组以松口蘑提
取液灌胃 (10g/ kg)作试验组 , 另一组以等量生理
盐水灌胃作对照 , 30min 后每只小白鼠腹腔注射
0.25%酚红溶液 , 以 30g体重注射 0.30ml酚红计算
注射量;30min后将小白鼠窒息至死 , 分离气管 ,
用已抽吸 5%NaHCO3 水溶液 0.5ml 具 7 号针头的
1ml注射器 , 从甲状软骨处插入气管约 0.5cm , 结
扎固定后 , 来回注吸 , 冲洗呼吸道 3次 , 以同法吸
取 5%NaHCO30.5ml共 3 次 , 每次冲洗呼吸道 3 次 ,
冲洗液注入同一小离心管内 , 经离心机离心 6min
(2 200r/min)后 , 用 721 分光光度计波长 510nm 处
测O.D.值 , 结果见表2。
从表 2可见以松口蘑提取液灌胃的试验组光密
度O.D.值与对照组相比较有明显增加 , 显著性检
验 P<0.01 , 差异非常显著。
2.2 蛙口腔粘膜上皮纤毛运动试验
选取 13只体重 150 ~ 160g的健康青蛙 , 依次用
蛙钉固定于蛙板上 , 分开上下颌 , 使上颌粘膜面充
分暴露 , 不时用0.65%生理盐水湿润暴露的粘膜
表 2 松口蘑提取液对气管酚红排泌量的影响
(X±Sx n=14)
组别 气管灌洗液的O.D.
对照组 0.158±0.0189
显著性检验 (试验
组光密度 O.D.值
与对照组的比较)
试验组
(10g/ kg) 0.237±0.0368 t=3.012 P<0.01
和皮肤。口腔粘膜上皮的纤毛是朝食管方向摆动
的。以蛙两眼窝前缘连线的中点作为起点 , 两边上
下颌角之间的连线作用终线;在起点放置一粒直径
约 1mm (芝麻大小)的软木屑 , 以秒表记录由纤毛
摆动促使软木屑由起点移到终线的时间 , 连续 3
次 , 求其平均值 , 分别作为每只蛙给药前纤毛运动
而推动软木屑移动同一距离的时间。然后朝上颌粘
膜滴 0.1ml (0.1g/ml)松口蘑提取液 , 10min 后 ,
同上法用同一软木屑 , 以秒表记录软木屑从起点到
同一终线的时间 , 求出 3 次平均值 , 并与给药前比
较 , 其结果见表 3。
表 3 松口蘑提取液对蛙口腔粘膜上皮纤毛运动的影响 (X±Sx n=13)
药物剂量
(ml/只)
动物数
(只)
给药前软木屑移动时间
(s)
给药后软木屑移动时间
(s) 药后比药前增快
t检验
 
0.1ml (0.1g/ml) 13 91.800±6.6203 86.960±6.0290 5.23% P>0.05
  从表 3可见 , 给药后蛙口腔粘膜上皮纤毛运动
移动软木屑同等距离的时间 , 比药前减少 5.23%,
但 t检验结果 P>0.05 , 无显著差异。
2.3 平喘作用
38 中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA       Vol.22 , No.4
2.3.1 对豚鼠离体气管容积的影响
选取 360~ 400g 的健康豚鼠 , 用木棒击毙 , 迅
速沿正中矢状面切开颈部皮肤和肌肉 , 取出完整的
气管置于 Knebs-Henseleit 营养液中 , 用营养液冲
洗气管 , 剥去外附组织;将气管一端扎在 0.1ml吸
管的尖端 , 气管的另一端扎在 “ U” 形管上 , U 形
管连接一吸有营养液的注射器 , 将营养液徐徐注入
气管内 , 调节气管到适当长度 (既要保持一定张
力 , 又不可牵拉太紧), 营养液温度保持在 (38±
0.5)℃, 调节充气袋胶管上的止水夹 , 使空气气泡
缓慢 、 均匀地放入营养液内;待吸管内液面高度恒
定 10min 后 , 缓缓滴加 1ml (0.3g/ml)松口蘑提取
液于营养液内 , 使药物与气管接触 5min 观察并记
录吸管中液面高度的变化[ 5] , 结果见表 4。
从表 4 可看出给药后与 10 只离体气管相连的
吸管液面减少了 10ul , 显著性检验 P<0.01 , 有非
常显著的差异。
表 4 松口蘑提取液对离体气管容积的影响
(X±Sx n=10)
药物剂量 动物数(只)
药后吸管内营养液
减少体积 (ul) t 检验
1ml (0.3g/ml) 10 11.20±2.0442 P<0.01
2.3.2 对乙酰胆碱和组胺混合液引喘作用的影响
实验选用体重 170 ~ 220g 的幼年健康豚鼠 8只 ,
每次取 1 只放入容积1 400ml 配有喷雾装置的容器
内 , 盖紧盖后将喷雾瓶内 2∶1 的 2%氯化乙酰胆碱
和 0.4%磷酸组胺混合液均匀压缩 , 以雾的形式喷
入封闭容器内 , 以秒表记录从喷雾开始到豚鼠出现
间歇性全身痉挛 , 跌倒的时间 , 作为给药前引喘潜
伏期。 24h 以后腹腔注射松口蘑提取液 7g/ kg (浓
度 1g/ml), 30min后同上法在同等条件下测定其引
喘潜伏期 , 将所得数值与药前的数值作比较 , 测定
差异的显著性 , 结果如表 5。
表 5 松口蘑提取液对引喘潜伏期的影响 (x±Sx n=10)
药物剂量 动物数(只)
给药前引喘潜伏期
(s)
给药前引喘潜伏期
(s)
延长倍数
药前 药后 检验
7g/ kg 8 81.83±5.2467 193.10±26.3221 1 2.36 P<0.01
  从表 5可见给药后乙酰胆碱和组胺混合液引喘
潜伏期比药前延长了 1.36 倍;显著性检验 P<
0.01 , 差异非常显著。
2.4 急性毒性试验
小白鼠 50只 , 体重 18 ~ 22g , 按简化机率单位
法[ 6]求得松口蘑提取液灌胃的 LD50为 98±0.6044g/
kg;LD50的 95%平均可信限 92~ 103.5g/ kg。经解剖
观察 , 试验小白鼠的心 、 肝 、 肾 、 脾等内脏器官未
见病理变化 , 而仅见胃有胀气现象。说明松口蘑提
取液毒性很小。
3 小结与讨论
动物咳嗽模型大多数由刺激呼吸道粘膜 、 胸膜
或咳嗽反射弧中的传入神经而形成[ 7] 。本实验用电
刺激咳嗽反射传入通路上的迷走神经 , 测定其引咳
阈值 , 以评价松口蘑提取液的镇咳作用。实验结果
表明给豚鼠腹腔注射该药后 , 引咳电压强度阈值明
显增大 , 说明松口蘑提取液有明显镇咳效果。其作
用机制可能是抑制了咳嗽反射弧中的感受器或传入
咳嗽冲动的迷走神经。这种抑制效应属末梢性或传
入神经性镇咳作用。镇咳药可直接抑制延髓咳嗽中
枢或抑制反射弧中某一环节而产生镇咳作用[ 8] 。松
口蘑提取液对延髓咳嗽中枢有无抑制作用 , 有待进
一步研究。
药物的祛痰作用是通过各种方式使气管的分泌
量增多 , 痰液变稀或深解而易于咳出[ 8] 。本实验以
测定气管的酚红排泌量和比较蛙口腔粘膜上皮纤毛
运动速度的方法 , 以评价松口蘑提取液的祛痰作
用。松口蘑提取液给小鼠灌胃 , 能非常显著地增加
气管的酚红排泌量;给蛙口腔粘膜滴加该提取液 ,
粘膜上皮细胞的纤毛运动有所加快。气管排泌量的
增加利于痰液的稀释 、 溶解和排出;口腔粘膜上皮
纤毛运动加快 , 有助于痰液的排出。可见松口蘑子
实体水溶性提取液有较好的祛痰作用。
支气管平滑肌痉挛是引起哮喘的直接原因 , 目
前治疗哮喘的药物主要有支气管平滑肌松弛药 , 抑
制炎症过程的抗炎平喘药和影响免疫过程的平喘
药[ 8] 。我们用松口蘑提取液作用于豚鼠的离体气
管 , 与气体相连的吸管液面非常显著地降低 , 此降
低是气管平滑肌舒张 、 气管容积扩大所致。此处 ,
用乙酰胆碱组胺混合液喷雾引喘法实验证明 , 松口
蘑提取液能延长引喘潜伏期 , 表明该药有明显的平
喘作用。使气管 、 支气管平滑肌松弛 , 气管扩张 ,
是松口蘑提取液平喘的主要机理 。
松口蘑提取液的毒性小。本实验所用剂量是急
性毒性试验 LD50的 1/ 10 左右 , 而临床剂量内服 ,
煎汤 30 ~ 60g[ 9]约为 LD50的 1/100。松口蘑提取液不
论灌胃 、 腹腔注射 , 还是与离体器官组织接触 , 均
有很好的镇咳 、 祛痰 、 平喘功效 , 毒性小 , 安全系
39第 22 卷 第 4期       中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA
菌物学家科海萍踪
臧 穆   
  一二九 李建义 我国近代菌物学家 。
一生颇为坎坷。生前长期在西北工作 。早
期曾留苏学习 , 生前有兴趣于黑盘孢目和
一些半知菌类的研究 , 曾到全国山地采集
标本和搜集第一手资料 。西北地区 , 在抗
战时期 , 就有很多植物和菌物学者在那里
做开拓研究和教学 , 如辛澍帜 , 王云章 ,
黄逢源等均对该地的区系工作有所贡献 。
李从七三年即计划开展该项工作 , 但因某
种问题 , 工作困难 , 很不顺心 , 时常晋京
上访 , 有时仅落脚于地下室的简陋住处 ,
颇近潦倒。幸其同行张天宇君 , 在此领域
中 , 堪称后起之秀 , 使该类真菌的研究有
了新的局面 。
  一三零 克劳狄一世 Claudius I (公元
前 108—54)罗马皇帝 。一生有战功 , 曾御
驾亲征 , 横渡泰晤士河。他创立了一个类
似自由民议会的组织 。其皇后阿格莉碧娜
Agrippina , 为了要提早篡位 , 曾用多种谋杀
方式加害 , 结果用一种漂亮的毒菌:杀蝇
菌 Amanita muscaria (L.:Fr.)Pers.在诱
其服用后 , 加以劝酒过量 , 结果遇害。后
其继子尼禄 Nero 又将其母后阿格莉碧娜赐
死 。这种残暴斗争 , 用毒菌来做为杀人手
段 , 令人发指。该菌据杨祝良教授云 , 此
菌习见于欧洲 , 我国待发现 。虽我国有文
献报道 , 但需待查和核实。
数大 , 是值得开发利用的药 (食)用真菌。
[ 参考 文 献]
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Tricholoma matsutake (S.Itoet Imai)Sing′s Effect on the
Eliminating Cough , Sputum and Stridor
WU Ying-ming, CHEN Ai-kui , ZENG Xiao-long , ZENG Xiao-chun
(Guangdong Education Institute , Guangzhou 510310 , China)
Abstract:A study on the results and pharmacologic effects of curing three kinds of symptoms of bronchitis (cough ,
sputum and stridor)by the liquid extracted from the fruit body of Tricholoma matsutake was done through animal experi-
ments.Injecting this liquid into the abdominal cavity of a guinea pig can obviously increase the threshold value of causing
cough got by stimulating vagus nerve with square wave.Filling the liquid into a little white rats stomach can greatly in-
crease the excretory amount of phenolsulphonphthalein of its respiratory tract.The liquid can distinctly enlarge the volume
of the guinea pig′s windpipe and lengthen the incubation period of stridor of a guinea pig by means of histamine spray.
Dropping this liquid onto the oral mocosa of a frog can accelerate its ciliary movement.The liquid extracted from the fruit
body of Tricholoma matsutake by water can distinctly eliminate cough , sputum and stridor.
Key words:Liquid extracted from the fruit body of Tricholoma matsutake (S.Itoet Imai)Sing.by water;
Threshold value;Phenosulphonphthalein excretion;Ciliary movement;Incubation of causing stridor;Windpipe volume
40 中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA       Vol.22 , No.4