全 文 :·30· 中国中医药信息杂志 2002年2月第9卷第2期
·中药研究与开发·
粗叶榕的镇咳、祛痰、平喘作用
曾晓春 陈淑慧 赖斯娜 陈 建
(广东教育学院 广州 510303)
[提 要] 目的:用动物实验方法,研究粗叶榕根乙醇提取液治疗支气管炎,咳、痰、喘三种症状的效果及其
药理作用。方法:给豚鼠腹腔注射粗叶榕根乙醇提取液,能显著地增大方波刺激迷走神经的引咳阈值;给小白鼠灌
胃,能非常显著地增加其呼吸道的酚红排泌量;给蛙口腔粘膜滴提取液,粘膜上皮纤毛运动速度明显加快;该提取
液能非常显著地延长给豚鼠组氨喷雾的引喘潜伏期;对豚鼠离体气管容积也有一定扩大效应。结果与结论:粗叶
榕根乙醇提取液有明显的镇咳、祛痰和平喘作用。
[关键词] 粗叶榕根乙醇提取液 引咳阈值 酚红排泌量 纤毛运动 引喘潜伏期 气管容积
Ficus Simplicissima Lour.’s Effect on the Eliminating Cough, Sputum and Stridor. Zeng Xiaochun, Chen Shuhui,
Lai sina,et al (Guangdong Education Institute Guangzhou 510310)
Abstract Objective: A study on the results and pharmacologic effects of curing three kinds of
symptoms of bronchitis(cough, sputum and stridor) by the liquid extracted from Ficus simplicissima Lour.
was done through animal experiments. Methods: Injecting liquid extracted from Ficus simplicissima Lour.
root by the alcohol into the abnominal cavity of a guinea pig can obviously increase the threshold value of
causing cough got by stimulating vagus nerve with square wave. Filling the liquid into a little white rat’s
stomach can greatly increase the excretory amount of phenolsulphonphthalein of its respiratory tract.
Dropping this liquid into the oral cavity mocosa of a frog can evidently accelerate its ciliary movement. The
liquid can distinctly lengthen the incubation of causing stridor of a quinea pig by using histamine spray,
and has a certain enlarging effect on the volume of the guinea pig’s widpipe in vitro.Resull and
Conclusion:The ethanol liquid extrated from Ficus simplicissima Lour. root can distinctly eliminate
cough, sputum and stridor.
Key words alcohol liquid extracted from Ficus simplicissima Lour. root;Threshold value;
Phenosulp-
honphthalein excretion; Ciliary movement; Incubation of causing stridor; Windpipe volume
粗叶榕(Ficus simplic ssima Lour.),又名牛奶树、对
叶榕、五爪龙、五指毛桃等,为桑科植物,灌木或小乔木,高
2~8m,全株具乳汁,分布于我国南部及西南部。据报道[1]粗叶
榕有健脾化湿,补肺化痰,行气舒筋作用,治疗肝硬化腹水,慢
性肝炎,慢性支气管炎,盗汗,白带,产后无乳等症。其根入药,
味甘,气微香,性平。治疗支气管炎时取其根(单味)水煎服,
每日 30~60g;也常加映山红、胡颓子叶、鱼腥草、羊耳菊
一起水煎。广东等地民间和餐馆,常用粗叶榕根做汤料,与猪
排、鸡等一起老火煲汤,美味可口。关于粗叶榕的药理作用,
未见专题报道。我们对粗叶榕的镇咳、祛痰、平喘作用进行
了初步研究。
1 实验材料
粗叶榕制剂:原药材购自河源市食品公司,实验用其根
60%乙醇提取液,pH 6.7~6.8,注射量按0.1ml/10g计算。
氯化乙酰胆碱(上海试剂三厂),纯度 98.0%~102.0%,配
制成2%水溶液。
磷酸组胺(上海丽珠东风生产技术有限公司),纯度≥
98.0%,配制成0.4%水溶液。
2 方法与结果
2.1 镇咳作用
选取400~500g健康豚鼠9只,腹腔注射乌拉坦(1g/kg)
麻醉,沿颈正中线切开皮肤,分离一侧迷走神经;用动脉夹夹住
上腹皮肤,牵引至张力换能器上,以描记膈肌收缩活动情况。
豚鼠咳嗽时隔肌活动加强,牵动腹壁,可借以记录咳嗽次数和
强度。用方波刺激器刺激迷走神经,找出引咳阈值(刺激参数:
频率10Hz,波宽10ms,每次持续时间5s)。两次刺激之间相隔
5min,电压从 lV试起,逐渐递增,找到刚刚引起咳嗽的最小电
压值,即为该动物的引咳阈值。连续测试 3次,取其平均值,
作为对照值。然后,给豚鼠腹腔注射粗叶榕根乙醇提取液
8g/kg(浓度2g/ml),药后15、30、45、60、90、120min分别
进行测试,先用药前阈值刺激,视其引咳情况,然后逐渐增加
或逐渐减小刺激电压,找出其引咳阈值。结果见表1。
2002年2月第9卷第2期 中国中医药信息杂志 ·31·
表1 粗叶榕对引咳阈值的影响(n=9,剂量:6g/kg)
给药后引咳阈值(V) ±标准差(min) 给药前引咳阈值
(3次均值V)±标准差 15 30 45 60 90 120
引咳阈值 2.64±0.485 5.6±2.01 7.0±2.90 7.4±2.58 9.1±2.88 14.9±5.22 16.9±5.74
阈值增加倍数 1 2.11 2.65 2.8 3.43 5.64 6.42
注:显著性测验,P>0.05
从表 1看出,给药后 15min,与药前比较引咳阈值已增加
2.65倍,而且随着时间的延长,增加倍数越来越大。经显著性
测验,药后60、90、120min与药前比较,P<0.05,差异显著。
2.2 祛痰作用
2.2.1 气管的酚红排泌量试验 选取体重 25~30g健康小
白鼠26只,停食12h(不停水),随机分成两组。一组以粗叶榕
乙醇提取液灌胃(8g/kg),另一组以等量生理盐水灌胃作对
照。30min后,每只小白鼠腹腔注射 0.25% 酚红溶液,以 25g
体重注射0.25ml酚红计算其注射量;30min后将小白鼠窒息
致死。分离气管,从已抽吸5% NaHCO3水溶液0.5ml具7号针
头的1 ml注射器,从甲状软骨处插入气管约0.5cm,结扎固定
后,来回注吸,冲洗呼吸道 3次。以同法吸取 5% 的 NaHCO3
0.5ml共 3次,每次冲洗呼吸道 3次,冲洗液注入同一比色管
中,然后用光电比色计(绿色滤光板,510毫微米)比色。结果
见表2。
表2 粗叶榕对气管酚红排泌量的影响(—x±s)
组 别 气管灌洗液的光密度值T
显著性测验(给药组光密度值T
与对照组的比较)
对照组 0.202±0.0076 T=19.64
粗叶榕组 0.418±0.3030 P<0.001
2.2.2 蛙口腔粘膜纤毛运动试验 选取 10只体重 150~
170g健康大蛙,依次用蛙钉背位固定在蛙板上,分开上下颌,
使上颌粘膜面充分暴露,以生理盐水湿润暴露的粘膜和皮肤。
口腔粘膜上皮的纤毛是朝食管方向摆动的,以蛙两眼窝前缘
的中点作为起点,上下颌角连线作为终线。在起点放置一粒直
径约 1mm(芝麻大小)的软木屑,以秒表记录由纤毛摆动促使
软木屑由起点到终线的时间,连续 3次,求其平均值,分别作
为每只蛙给药前纤毛运动推软木屑移动同一距离的时间。然
后朝上颌粘膜面滴0.2ml(2g/ml)粗叶榕乙醇提取液,2min后,
同上法用同一软木屑,以秒表记录软木屑从同一起点到同一
终线的时间。求出3次平均值,并与给药前比较,结果见表3。
2.3 平喘作用
2.3.1 对组胺引喘作用的影响 选取体重 160~240g的幼
年健康豚鼠10只,每次取1只放入容积1 400ml配有喷雾装
置的容器内,盖紧后将喷雾瓶内 2∶1的 2%氯化乙酰胆碱和
0.4%磷酸组铵混合液均匀恒压压缩,以雾的形式喷入封闭容
器内,以秒表记录从喷雾开始至豚鼠出现间歇性全身痉挛、跌
倒的时间,作为给药前引喘潜伏期。24h后腹腔注射粗叶榕根
乙醇提取液5g/kg,30min后同上法和同等条件下测定其引喘
潜伏期,将所得数值与给药前作比较,结果见表4。
表3 粗叶榕对蛙口腔粘膜上皮纤毛运动的影响
增快倍数 药物剂量 n 给药前软木屑移动时间 (3次均值·s)
给药后软木屑移动时间
(3次均值·s) 给药前 给药后
t
0.2ml(2g/ml) 10 76.21±12.01 45.23±8.39 1 1.68 P<0.05
表4 粗叶榕对引喘潜伏期的影响(—x±s)
延长倍数 药物剂量 n 给药前引喘潜伏期(s) 给药后引喘潜伏期(s)
给药前 给药后
显著性测验
5g/kg 10 131.51±14.67 427.2 ±59.40 1 3.25 P<0.01
2.3.2 对豚鼠离体气管容积的影响 选取体重 300~400g
健康豚鼠,用木棒击毙,迅速沿正中矢状面剖开颈部皮肤和肌
肉,取出完整的气管,置于Knebs-Henseleit营养液中。用营
养液冲洗气管,剥去外附组织。将气管一端扎在毛细玻管尖端,
另一端扎在U形管上。U形管连接吸有营养液的注射器,将营
养液徐徐注入气管内,排除气管内的气泡,调节毛细玻管液面
至适当高度。将气管放入盛有营养液的浴管内,调节气管至适
当长度(既要保持一定张力,又不可牵拉太紧)。水浴温度保持
在(38±0.5)℃,调节充气袋胶管上的止水夹,使空气气泡缓
慢、均匀地放入营养液内。待毛细玻管液面高度恒定 10~
20min后,缓缓滴加0.1ml(浓度为500mg/ml)粗叶榕根乙醇提
取液于浴管内,使药物与气管接触 5min,观察并记录毛细玻
管中液面高度的变化,结果见表5。
2.4 急性毒性试验
小白鼠 50只,按简化机率单位法[2]求得粗叶榕根乙醇提
取液腹腔注射的 LD50为(132.22±15.37)g/kg。经解剖观察,
实验小白鼠的心、肝、肾、脾等未见病理变化;而小肠却有
胀气现象。
·32· 中国中医药信息杂志 2002年2月第9卷第2期
表5 粗叶榕对离体气管容积的影响(—x±s,单位:mm)
药物剂量 n 给药前毛细玻管液面高度 给药后毛细玻管液面高度
给药后液面平均
降低百分数 显著性测验
0.1ml(500mg/ml) 12 205±0 196±19.93 4% P>0.05
3 讨论
动物咳嗽模型大多由刺激呼吸道粘膜、胸膜或咳嗽反射
弧中的传入神经而形成[3]。本实验用电刺激咳嗽反射传入通
路上的迷走神经,测定其引咳阈值,结果表明,引咳电压强度
阈值明显增大,说明粗叶榕根乙醇提取液有明显的镇咳作用。
其作用机理可能是抑制了咳嗽反射弧中的感受器或传入咳嗽
冲动的迷走神经。这种抑制效应属末梢性或传入神经性镇咳
作用。粗叶榕根乙醇提取液给小白鼠灌胃,能非常显著地增加
气管的酚红排泌量;给蛙口腔粘膜滴加该药,能显著地加快上
皮细胞纤毛运动。气管排泌量增加利于痰液的稀释和溶解,
粘膜上皮纤毛运动加快利于痰和异物的排出。
支气管平滑肌痉挛是引起哮喘的直接原因。我们用组氨
喷雾引喘法测试粗叶榕提取液平喘作用,观察记录到给豚腹
腔注射该药,能非常显著地延长引喘时间;经离体气管容积法
测试,粗叶榕根乙醇提取液对与豚鼠离体气管相连的毛细玻
管液面均有降低作用,液面降低是气管平滑肌舒张、气管容积
扩大所致。从非常显著地延长组氨的引喘潜伏期和扩张离体
气管容积的结果可以认为,粗叶榕根乙醇提取液有较好的平
喘效果。
粗叶榕根乙醇提取液的毒性小。本实验所用剂量是急性
毒性试验LD50的1/16~1/26。无论灌胃、腹腔注射还是与离
体组织器官接触,均有显著的镇咳、祛痰、平喘效果。
参 考 文 献
1 中国医药科技出版社责任编辑组.中药辞海.北京:中国医
药科技出版社,1993.884
2 张昌绍.药理学.北京:人民卫生出版社,1965.390
3 药理学实验编写组.药理学实验.北京:人民卫生出版社,
1985.84
(收稿日期:2001-08-15)
(修回日期:2001-10-18)
(上接第27页)细胞分别接种于96孔培养板,每孔200μl,培
养2h后,更换培养液并加入50μM的D-GalN 2μl(终浓度为
0.5mM),然后分别将氯仿提取物、乙酸乙酯提取物及醇提物用
Me2SO溶解成不同浓度加入培养板中,对照组加1μl
Me2SO,继续培养24h,取出细胞培养液测定其中的ALT活性。
3.3 结果(见表1)
表1 茵陈蒿汤醇提物的不同部位对离体大鼠肝细胞
的影响(—x±s,n=3)
组 别 剂量(mg/ml) ALT活性(Karmen Unit)
正常组 57.35±3.16
模型组 115.23±1.78###
氯仿部位 0.3 73.76±5.25**
0.3×10-1 85.90±5.60**
0.3×10-2 91.33±5.00**
0.3×10-3 90.81±5.79**
0.3×10-4 103.99±2.05
乙酸乙酯部位 0.3 80.99±3.30**
0.3×10-1 107.61±4.46
0.3×10-2 108.91±11.88
0.3×10-3 118.21±8.93
0.3×10-4 107.61±8.72
乙醇提取物 0.3 89.78±8.57*
0.3×10-1 96.86±9.64*
0.3×10-2 95.52±5.88*
0.3×10-3 96.50±6.63*
0.3×10-4 93.27±3.50*
注:与对照组比较,###P<0.001;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
4 讨论
肝细胞培养液 ALT是反映肝细胞损伤的敏感指标,肝细
胞损伤时,细胞膜通透性增加,胞浆内 ALT释放入血,所以本
实验用ALT为指标来评价茵陈蒿汤醇提物氯仿、乙酸乙酯溶
剂萃取部位的保肝效应。Yoshinobu Kiso等证明,大鼠原代
肝细胞的培养与时间和 D-GalN 的浓度有关,他们的实验同
时证明以D-GalN 诱导的大鼠肝细胞的ALT水平24h时达到
顶峰,且 D-GalN的浓度在 0.5mM时为最佳[1、2]。因此本实验
用 0.5mM D-GalN 诱导大鼠肝细胞,在培养 24h时观察各组
ALT水平。
实验可见,茵陈蒿汤醇提取物的不同溶剂萃取部位对
D-GalN诱导的大鼠肝细胞的ALT的升高,氯仿再提取部位表
现出稳定的降低作用。这提示茵陈蒿汤的保肝物质是醇溶性
的,且是其中极性比较小的部分,但分析的最佳条件及干涉因
素还需要进一步探讨。
参 考 文 献
1 Yoshinobu Kiso,Masahiro Tohkin. Assay method for
antihepatotoxic activity using
galactosamine-inducted cytotoxicity in
primary-cultured hepatocytes. Journal of Natural
Products,1983,146(6): 41
2 汪 谦.大鼠肝细胞、Kupffer和Ito细胞的分离与培养.
中华实验外科杂志,1994,11(2):72
(收稿日期:2001-05-10)