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〔2015-03-17 修回〕
(编辑 苑云杰 /曹梦园)
豨莶精醇对大鼠的抗栓作用及机制
张殿文 李木石1 王 清 李 响 吴 迪 邵世博 杨 光 李 伟
(吉林省中医药科学院，吉林 长春 130012)
〔摘 要〕 目的 探讨豨莶精醇的抗栓作用及其作用机制。方法 采用大鼠体内、外血栓形成实验、血小板聚集和黏附功能实验等方法。结果
豨莶精醇可明显延长大鼠体内血栓形成时间、缩短血栓长度、减轻血栓干重并能显著抑制大鼠体内外血小板集聚和黏附。结论 豨莶精醇具有明
显的抗栓作用，其作用机制可能与抑制血小板聚集和黏附有关。
〔关键词〕 豨莶精醇;抗栓作用;血小板聚集;血小板黏附
〔中图分类号〕 Ｒ28 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2016)17-4157-02;doi:10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2016. 17. 009
基金项目:吉林省卫生厅 2011 年课题(2010Z028)
1 吉林大学生命科学院
通讯作者:王 清(1973-) ，女，副主任药师，主要从事心血管药理研究。
第一作者:张殿文(1969-) ，男，副主任药师，主要从事心血管药理研究。
豨莶草为常用中药，近年研究结果表明，家兔静脉注射豨
莶草提取物，可使血栓湿重明显减轻，其抑制率为 51. 4%〔1〕;腺
梗豨莶草有效组分具有明显的抗血栓、抑制血小板聚集及抗凝
作用〔2，3〕。为阐明豨莶草抗栓作用的物质基础，本研究从腺梗
豨莶中提取出单体成分豨莶精醇，并对其体内外抗栓、抗血小
板聚集和黏附作用进行了实验研究。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 动物及药物 Wistar大鼠，体重 200 ～ 220 g，雌雄均用;
购于吉林大学基础医学院动物实验中心，动物许可证号:SCXK-
(吉)2008-0005。豨莶精醇，纯度 99%，北京大学天然药物及仿
生药物国家重点实验室提供。
1. 1. 2 分组 大剂量组，取豨莶精醇 200 mg，以适量吐温-80
研匀，加 0. 5%羧甲基纤维素钠(0. 5% CMC-Na)至 200 ml，配制
成 0. 1%浓度的混悬液，实验前将上述混悬液分别稀释 1 倍、2
倍作为中、小剂量组。阳性对照组药物为阿司匹林肠溶片，沈
阳奥吉娜药业有限公司生产，批号:080904，规格 25 mg /片。配
制方法:取一片阿司匹林研碎，加 0. 5% CMC-Na至 50 ml，配制
成 0. 05%浓度的混悬液。
1. 1. 3 试剂与仪器 二磷酸腺苷(ADP) ，大连美仑生物技术
有限公司分装，批号:20080308;羧甲基纤维素钠(CMC-Na) ，国
药集团化学试剂有限公司，批号:20080406。BT87-3 型实验性
体内血栓测定仪，包头医学院心血管研究室制造;SPA-4 型多功
能血小板聚集仪，上海科达测试仪器厂;体外血栓形成和血小
板黏附两用仪，江苏无锡医疗电子仪器厂。
1. 2 方法
1. 2. 1 对大鼠体内血栓形成的影响 参照文献方法〔4〕，取大
鼠 50 只，随机等分为五组，第一组为溶媒对照组，第二组为阿
司匹林 10 mg /kg，第三、四、五组分别为豨莶精醇 20、10 和
5 mg /kg，灌胃给药，每日 1 次，连续 7 d，体积均为 20 ml /kg，溶
媒对照组给予等体积 0. 5% CMC-Na。于末次给药后 1 h 将大
鼠以 3% 的水合氯醛 0. 3 g /kg 麻醉，分离颈总动脉。采用
BT87-3 型实验性体内血栓测定仪，依法测定大鼠体内血栓形成
时间。
1. 2. 2 对大鼠体外血栓形成的影响 参照文献方法〔5，6〕测定
大鼠体外血栓形成。取大鼠 50 只，随机等分为五组，第一组为
溶媒对照组，第二组为阿司匹林 20 mg /kg，第三、四、五组分别
为豨莶精醇 20、10 和 5 mg /kg，灌胃给药，每日 1 次，连续 5 d，
体积均为 20 ml /kg，溶媒对照组给予等体积 0. 5% CMC-Na。于
末次给药后 1 h，将大鼠以 3%的水合氯醛 0. 3 g /kg腹腔注射麻
醉，腹主动脉取血 1. 8 ml，立即注入已硅化的体外血栓胶管，将
管的两端对接形成圆环，放置在体外血栓形成和血小板黏附两
用仪上旋转 15 min，测量血栓长度、干重、湿重。
1. 2. 3 对大鼠体内血小板聚集性和黏附率的影响〔5，6〕 取大
鼠 50 只，随机等分为溶媒对照组、阿司匹林 20 mg /kg 组、豨莶
精醇 20、10 和 5 mg /kg组，灌胃给药，每日 1 次，连续 5 d，体积
均为 20 ml /kg，溶媒对照组给予等体积 0. 5% CMC-Na。于末次
给药后 1 h，将大鼠以 3%的水合氯醛 0. 3 g /kg腹腔注射麻醉，
·7514·张殿文等 豨莶精醇对大鼠的抗栓作用及机制 第 17 期
腹主动脉取血 3. 6 ml，注入内含有 0. 4 ml 3. 8%枸橼酸钠的试
管中，摇匀，取 1 ml放入圆形黏附球内，将黏附球插入体外血栓
形成和血小板黏附两用仪上，3 r /min，黏附 15 min，于显微镜下
计数黏附前后血小板数，计算黏附率。将余下的血离心
1 000 r /min，10 min，慢慢吸取上层富血小板血浆(PＲP) ，将上
述已吸取过 PＲP再次离心，3 000 r /min，10 min，吸取上层贫血
小板血浆(PPP)。取 PPP 200 μl 放到测试杯内(PPP ＜
1 万 /mm3)预热 5 min后调零，再取 PＲP 200 μl 放到测试杯内
(PＲP＜ 20 万 /mm3)预热 5 min 后，立即加入 0. 5 mmol /L 的
ADP诱导剂 10 μl，测定 3 min内血小板聚集率和最大聚集率。
1. 2. 4 对大鼠体外血小板聚集的影响〔3〕 PＲP 和 PPP 制备，
采用水合氯醛 300 mg /kg 麻醉大鼠，腹主动脉取血 4. 5 ml，以
3. 8%枸橼酸钠按 1 ∶9比例准确抗凝，离心 1 000 r /min，10 min，
慢慢吸取上层 PＲP，将剩余血浆再次离心 3 000 r /min×10 min，
小心吸取 PPP。取 PPP 200 μl放到测试杯内(PPP＜1 万 /mm3)
预热 5 min 后调零，再取 PＲP 200 μl 放到测试杯内(PＲP ＜
20 万 /mm3)预热 5 min后，分别加入蒸馏水、阿司匹林水溶液
10、5、2 μg /ml及豨莶精醇水溶液 10、5、2 μg /ml 10 μl后，立即
加入0. 5 mmol /L的 ADP诱导剂 10 μl，测定血小板最大聚集率。
1. 3 统计学方法 采用 SPSS12. 0 软件行 t检验。
2 结 果
2. 1 对大鼠体内血栓形成的影响 豨莶精醇 20、10、5 mg /kg
和阿司匹林 20 mg /kg 均可明显延长大鼠体内血栓形成时间
〔(22. 4 ± 5. 94)、(19. 7 ± 4. 34)、(17. 4 ± 3. 66)、(19. 8 ±
5. 36)min〕，与溶媒对照组〔(14. 3±2. 34)min〕比较，在相同剂
量条件下二者作用强度相似，豨莶精醇 20 mg /kg 抑制血栓形
成作用优于阿司匹林 10 mg /kg，提示豨莶精醇抗栓作用具有一
定的量效关系。
2. 2 对大鼠体外血栓形成的影响 见表 1。豨莶精醇
20 mg /kg和阿司匹林 20 mg /kg均可明显缩短血栓长度、减轻血
栓干重，对血栓湿重有一定的降低，但无统计学差异(P＞0. 05)。
表 1 对大鼠体外血栓形成的影响(x±s，n=10)
组别
剂量
(mg /kg)
血栓长度
(cm)
血栓湿重
(g)
血栓干重
(g)
溶媒对照组 － 11． 1±3． 01 0． 52±0． 24 0． 25±0． 078
阿司匹林 20 6． 78±3． 751) 0． 37±0． 23 0． 16±0． 1091)
豨莶精醇 20 6． 35±3． 082) 0． 39±0． 16 0． 18±0． 0461)
豨莶精醇 10 9． 52±4． 22 0． 44±0． 11 0． 22±0． 135
豨莶精醇 5 11． 1±2． 75 0． 50±0． 24 0． 26±0． 099
与溶媒对照组比较:1)P＜0. 05，2)P＜0. 01，下表同
2. 3 对大鼠体内血小板聚集性和黏附率的影响 见表 2。豨
莶精醇 20、10 mg /kg 和阿司匹林 20 mg /kg 均可明显降低
1、2 min血小板聚集率和最大聚集率，在相同剂量时二者作用
相近;豨莶精醇 10、5 mg /kg对血小板黏附率有一定降低作用，
但差异无统计学意义(P＞0. 05)。
2. 4 豨莶精醇水溶液对体外血小板聚集的影响 豨莶精醇水
溶液 10、5、2 μg /kg和阿司匹林水溶液 10、5 μg /kg对体外血小
板最大聚集率均有明显的抑制作用〔(22. 9±12. 3)%、(32. 0±
14. 2)%、(42. 7±14. 4)%、(34. 1±15. 6)%、(43. 1±15. 9)%〕，
与溶媒对照组〔(58. 9±15. 1)%〕比较差异显著(P＜0. 05) ，且
在相同剂量时，豨莶精醇作用优于阿司匹林(P＜0. 05)。
表 2 对大鼠体内血小板聚集性和黏附率的影响(x±s，n=10)
组别 剂量(mg /kg) 1 min聚集率 2 min聚集率 3 min聚集率 血小板最大聚集率 血小板黏附率
溶媒对照组 － 53． 1±9． 63 62． 9±7． 78 61． 1±7． 62 65． 6±7． 75 0． 18±0． 13
阿司匹林 20 41． 5±6． 222) 52． 7±8． 461) 53． 8±9． 80 56． 1±9． 121) 0． 068±0． 0491)
豨莶精醇 20 40． 4±9． 472) 49． 9±13． 61) 50． 6±15． 9 54． 0±13． 01) 0． 25±0． 13
豨莶精醇 10 43． 7±8． 971) 51． 3±12． 21) 51． 1±17． 7 58． 5±8． 94 0． 11±0． 09
豨莶精醇 5 45． 5±10． 3 55． 1±10． 2 56． 0±10． 5 58． 6±11． 0 0． 13±0． 13
3 讨 论
血栓形成与血小板聚集和黏附密切相关，本实验结果表
明，豨莶精醇能明显延长大鼠体内血栓形成时间、缩短血栓
长度、减轻血栓干重，同时其能显著抑制大鼠体内外血小板
集聚和黏附。由此可见，豨莶草中的单体成分豨莶精醇具有
明显的抗栓作用，其作用机制可能与抑制血小板聚集和黏附
有关。上述研究结果为豨莶草治疗血栓性疾病提供了一定的
科学依据。
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(编辑 郭 菁)
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