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麒麟紫葳一步成苗离体培养技术研究



全 文 :·生物技术· 北方园艺2013(03):122~123
作者简介:韩德伟(1979-),男,辽宁盖州人,本科,实验师,现主要
从事无土栽培及组织培养等工作。
收稿日期:2012-10-22
麒麟紫葳一步成苗离体培养技术研究
韩 德 伟
(辽宁农业职业技术学院 生物技术系,辽宁 营口115009)
  摘 要:以麒麟紫葳嫩茎段为外植体,研究了不同消毒方式和不同培养基对麒麟紫葳一步成
苗离体培养的影响。结果表明:麒麟紫葳一步成苗离体培养的外植体材料选用0.05% HgCl2
2min+0.05% HgCl25min处理的消毒效果最佳,在培养基1/2MS+IBA 0.5mg/L中一步成苗
率最高。
关键词:麒麟紫葳;离体培养;一步成苗
中图分类号:S 792.119 文献标识码:B 文章编号:1001-0009(2013)03-0122-02
  麒麟紫葳(Radermachera sinica)属紫葳科菜豆树属
热带落叶乔木,又名麒麟紫葳、菜豆树。材质轻而坚韧,
不易变形、翘裂,可作建筑、家具和车辆等用材,根、花、果
可药用,能凉血消肿、消炎解毒、接骨止痛。盆栽则形态
优美,叶片小而翠绿,树影婆娑,是非常珍贵的室内观赏
植物。作为盆栽观赏树木,麒麟紫葳越来越受到人们的
青睐[1]。
麒麟紫葳种子繁殖变异系数大,扦插繁殖种源消耗
量大,因此,最近几年有学者进行了离体组培繁苗技术
研究,主要是从初代诱导、增殖培养、试管生根3个环节
分别进行。现通过初代诱导、试管生根同步进行一步成
苗试验,研究了不同消毒方式和不同培养基对麒麟紫葳
一步成苗离体培养的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试麒麟紫葳购自辽宁熊岳鲜花市场,选择盆栽
10cm高植株上的绿枝嫩茎段为外植体。
1.2 试验方法
1.2.1 不同消毒方法对麒麟紫葳一步成苗离体培养的
影响 将麒麟紫葳长5cm以下新生嫩梢剪下,置于流
水下冲洗0.5h,然后在无菌条件下按不同的消毒方法
(表1)进行消毒灭菌处理,最后用无菌水冲洗3遍,剪切
成0.5cm长带1个腋芽的嫩茎段,接种到1/2MS+琼
脂6g/L+蔗糖30g/L+IBA 0.5mg/L+AC 0.5g/L
培养基上培养。每个处理接种20个材料,每瓶接种1个
材料,重复3次。温度23~27℃、光照强度2 500~
3 000lx、光照时间12h/d。30d进行观察统计。
1.2.2 不同培养基对麒麟紫葳一步成苗离体培养的影
响 所选材料按方法1.2.1的步骤用0.05% HgCl2
2min+0.05% HgCl25min对外植体进行消毒处理,然
后剪切成0.5cm长带1个腋芽的嫩茎段,接种到以 MS
或1/2MS+琼脂6g/L+蔗糖30g/L为基本培养基,并
添加不同附加物的培养基(表2)上。每瓶接种1个材
料,每个处理接种20瓶,重复3次。温度23~27℃、光
照强度2 500~3 000lx、光照时间12h/d。
1.3 项目测定
30d后观察成苗生长情况,计算成苗率。
污染率(%)=污染材料数/接种材料总数×100;玻
璃化率(%)=玻璃化材料数/接种材料总数×100;死亡率
(%)=死亡材料数/接种材料总数×100;存活率(%)=存
活材料数/接种材料总数×100;一步成苗率(%)=完整
植株数/接种材料总数×100。
2 结果与分析
2.1 不同消毒方式对麒麟紫葳一步成苗离体培养的
影响
由表1可以看出,以麒麟紫葳嫩茎作为外植体,消
毒剂的种类和浓度选择非常重要,同一条件下,选用高
浓度的HgCl2和NaClO处理的材料,死亡率较高,反之
则低;选用70%酒精处理20s,然后再用其它消毒剂处
理的材料死亡率均在15%以上;NaClO即使使用较低浓
度,在较高污染率的情况下仍有较高的死亡率,只有
0.05% HgCl2 min+0.05% HgCl25min的方式处理外
植体材料存活率、一步成苗率最高,因此,0.05% HgCl2
2min+0.05% HgCl25min的方式为处理外植体的最佳
消毒方法。
2.2 不同培养基对麒麟紫葳一步成苗离体培养的影响
试验发现,供试材料培养7d,腋芽萌动,向上生长;
15d后在嫩茎段基部切口处开始形成根原基,30d顶芽
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北方园艺2013(03):122~123 ·生物技术·
长3.0cm以上(图1),根长3cm以上(图2),从而一步
成苗,形成完成植株,此时统计的一步成苗率见表2。由
表2可以看出,在添加IBA 0.1~0.5mg/L的基本培养
上,随其浓度的升高,其上萌发的新芽渐高,根数逐渐增
多,而当其浓度达到1.0mg/L时,其在愈伤组织上长
根,会降低移栽成活率;在相同培养条件下,高无机盐浓
度的MS一步成苗的质量较1/2MS上稍差,因此选用培
养基1/2MS+IBA 0.5mg/L为麒麟紫葳一步成苗的最
佳培养基。
  表1 不同消毒方式对麒麟紫葳一步成苗离体培养的影响
序号 消毒方式 接种材料总数/个 污染率/% 死亡率/% 存活率/% 玻璃化率/% 一步成苗率/%
A1  70%酒精20s+0.05% HgCl25min  20  25  50  25  20  5
A2  70%酒精20s+0.1% HgCl25min  20  0  100  0  0  0
A3  70%酒精20s+1.3% NaClO 7min  20  75  15  10  5  5
A4  70%酒精20s+2.6% NaClO 7min  20  50  100  0  0  0
A5  0.05% HgCl22min+0.05% HgCl25min  20  5  0  95  5  85
A6  0.05% HgCl22min+1.3% NaClO 7min  20  15  15  70  10  60
  注:消毒方式为:药剂处理1次+无菌水漂洗2次+药剂处理1次。
表2 不同培养基对麒麟紫葳一步成苗离体培养的影响
序号 培养基/mg·L-1 接种材料总数/个 一步成苗率/% 成苗的生长状况
B1  1/2MS+IBA 0.1  20  5 腋芽2cm高,切口处1条根
B2  1/2MS+IBA 0.3  20  15 腋芽3cm高,切口处长1~2条根
B3  1/2MS+IBA 0.5  20  85 腋芽3.5cm高,切口直接生长2~3条根
B4  1/2MS+IBA 1.0  20  70 腋芽3cm高,切口有少量愈伤组织,2~3条
B5 MS+IBA 0.5  20  60 腋芽3cm高,1~2条根
图1 麒麟紫葳一步
成苗的萌动芽
图2 麒麟紫葳一步
成苗的根
2.3 移栽驯化
将麒麟紫葳一步形成的完整试管苗置于自然光下
培养10d,光强低于4 000lx,然后解盖、取苗,洗去根上
的培养基,置于1 000倍100%法国进口海藻“速建”(台
湾五洲肥料骨份有限公司生产)中浸泡5s,取出,稍晾
干,移栽至消毒过的草炭∶蛭石=1∶1的基质中,移栽
后15d内空气湿度保持在80%以上,基质湿度保持在
60%左右,温度23~25℃,15d后根尖向前生长,新叶生
成,代表成活,成活率在95%以上可逐渐通风、换气,当
苗高10cm以上时,可进行换钵移栽。
3 结论与讨论
麒麟紫葳是目前市场上比较受青睐且珍贵的室内
观赏花卉,离体组培繁苗已成其新的繁殖手段,该试验
采用麒麟紫葳嫩茎段,形成了“一段一芽,一芽一植株”
的简化模式,既节省了原材料,又将初代诱导、试管生根
同步进行,一步成苗,简化了培养程序,缩短了成苗周
期,提高了成苗率。该试验结果表明,麒麟紫葳一步成
苗外植体材料最佳消毒方式是0.05% HgCl22min+
0.05% HgCl25min,在培养基1/2MS+IBA 0.5mg/L
中一步成苗率最高。
参考文献
[1] 赵艳燕,段祖安,王海朋,等.麒麟紫葳的离体培养与快速繁殖[J].山
东林业科技,2009(5):24,67-68.
Study onin vitro Regeneration of One-tep Seedling for Radermachera sinica
HAN De-wei
(Department of Biotech,Liaoning Agricultural Vocation-technical Colege,Yingkou,Liaoning 115009)
Abstract:Taking the stem segments of Radermachera sinica as material,the influence of diferent disinfection and
diferent medium on the efect of one-step-seedling formation in vitro culture were studied.The results showed that the
disinfection efect of explants in the medium of 0.05% HgCl2 min+0.05% HgCl25min in one-step seedling formation
in vitro culture of Radermachera sinica was the best,the seedling rate of explants in the medium of 1/2MS+IBA 0.5
mg/L was the best.
Key words:Radermachera sinica;in vitro culture;one-step seedling formation
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