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苦楝叶乙醇提取物对水葫芦叶片伤害的生理生化研究



全 文 :苦楝叶乙醇提取物对水葫芦叶片伤害的生理生化研究
周 兵,闫小红,黄志军
(井冈山大学 生命科学学院,江西 吉安 !!##$)
!摘要 采用植物抗性生理的分析测定技术,研究了苦楝叶乙醇提取物对水葫芦叶组织细胞膜透性、丙二醛
(%&’)含量及过氧化物酶( ()&)、抗坏血酸过氧化物酶(’(*)和过氧化氢酶(+’,)活性的影响。 结果表明,
苦楝叶乙醇提取物使水葫芦叶组织细胞膜透性上升,膜脂过氧化加强,%&’ 含量上升,叶片的 ()&、’(* 和
+’, 的活性均较对照降低。说明水葫芦叶乙醇提取物具有防治空心莲子草的潜力。
!关键词 苦楝;水葫芦;伤害;生理生化
-中图分类号. /$$ -文献标识码. ’ -文章编号. 012!320456##47#63##043#!
收稿日期:6##23003#!
基金项目:井冈山大学校级课题资助8
作者简介:周 兵(0$223),男,湖北黄梅人,博士,副教授,主要从事外来生物入侵及生物防治研究#
苦楝 5 !#$% %&’%(%)* +,7别名紫花树、森树、
金铃子、苦楝芽、图儿夹矮等,属楝科楝属的落叶乔
木,高可达 6#9,奇数羽状复叶,花芳香,花期 6:;
个月,果实 00 月份成熟。果为核果状<种子长椭圆
形,暗褐色,纵裂。在我国黄河流域以南、长江流域
各地及台湾、福建、广东和广西等省都有栽培或野
生,多生长于低山或平原地带-0.。
6# 世纪中叶在农业领域为实现病虫害综合管
理,要求使用无公害的生物型杀虫剂,从植物界中
寻找杀虫活性物质就成为了热门研究课题,其中对
印楝5-&%’$(%)*.% $/’$)%7 和苦楝等几种楝科植物杀
虫特性的研究成果最为引人注目。近年来,各国学者
对苦楝的化学成分-6活性-00:0.等作了多方面的研究。但关于其对植物伤
害作用方面的研究却未见报道。
水葫芦 50$)**1(/$% )(%22$12 3!%(.,4 51#6287又
名凤眼莲,属单子叶植物纲(%=>=?=@ABCD=>CEC)百合
目(FGBGHB=IEC)雨久花科((=>@CDCIGE?CEC)凤眼兰属。
0$#0 年作为花卉引入我国,在 6# 世纪 ;#:1# 年代
作为猪饲料在长江流域及其以南普遍推广,现广泛
分布在华南、华中和华东等地区-0;.。水葫芦的入侵,
导致生态系统中生物多样性丧失,物种单一,造成
严重的生物污染<同时还堵塞河道,影响水运,引发
水灾-01.。水葫芦已成为世界十大害草之一,被列入国
家环保总局 6##! 年公布的“中国第一批外来入侵
生物名单”-02.。因而,防除水葫芦,既是维护生物多样
性的需要,也是保证农业生产、保护环境的需要。
由于化学防除和人工防除的缺陷,生物防除成
为目前控制水葫芦的主要方法,主要利用昆虫 -04:6#.、
病原菌-60.及植物代谢产物-66<6!.等。本文以苦楝叶乙醇
提取物处理水葫芦叶片,检测了处理后叶片组织生
理生化变化,为探讨苦楝生物防治水葫芦了提供了
重要的理论基础。
$ 材料与方法
$#$ 试验材料的处理
取生长均匀一致、无病虫害的水葫芦叶片,自来
水轻轻冲洗 6#9G>,用蒸馏水清洗 ! 次,以滤纸吸干
水分。用刀片切取 #8;?9J#8;?9的方块,混合均匀,
称取 #8;K,分别浸入盛有蒸馏水和不同浓度苦楝叶
乙醇提取物溶液 5168;、06;、6;#、;##、0### !K L 9F7
的 6#9F试管中,真空减压处理至叶片完全沉没于
水中,置于 6;M光照下 4N,供生理指标测定。各项指
标测定均设 个重复,同时设对照 +O。
$#% 细胞膜透性的测定
材料取出后用蒸馏水冲洗 !次,快速吸干叶片
表面的水分,置于盛有 0#9F 蒸馏水的 6#9F 试管
中,用滤网使叶片完全浸入水中,于不同浓度提取物
溶液中浸泡后,在室温下用电导仪测定叶组织浸出
液的电导率,最后将各处理材料煮沸 049G>,冷却至
室温后再测定叶片组织细胞膜彻底破坏后的最大电
导率值,计算相对电导率,计算方法如下式。
相对电导率P5处理电导率 L最大电导率7J0##Q
$#& 丙二醛’()*+含量的测定
4N 后取出材料并洗净,加入 ;9F 磷酸缓冲液
5RS284,内含 0Q(T(7,冰浴研磨匀浆,于 6;##K 离心
0#9G>,取上清液 69F 与 69F,U’ 56#Q三氯乙酸,
#8;Q硫代巴比妥酸7混合,0##M水浴 !#9G>,冷却后
第 6$ 卷 第 6 期
6##4 年 6 月
井冈山学院学报(自然科学)
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井冈山学院学报(自然科学) 第 ! 卷第 ! 期
! 讨论
苦楝叶乙醇提取物能引起水生植物水葫芦离
体叶片细胞膜投性上升,#$% 含量上升,叶组织膜
透性变化趋势与 #$% 含量变化趋势比较相似,说
明提取物引起细胞膜的伤害,造成膜功能的紊乱。
植物体内活性氧的产生是多部位和多途径的,
活性氧能直接或间接启动膜脂过氧化作用,导致膜
的损伤&!’(。和其它植物一样,水葫芦细胞内具有防御
活性氧毒害的抗氧化系统)%*+、*,$、-%.等/,它们
在清除超氧阴离子自由基、过氧化氢、过氧化物羟
基自由基等方面起着重要作用。利用较低浓度的苦
楝叶乙醇浸提取物处理的水葫芦叶片组织,抗氧化
系统都保持着较高的活性,仍然起着一定的保护植
物免受提取物引起的活性氧的伤害。随着提取物浓
度的增加,活性明显下降,暗示在胁迫程度较高的
情况下细胞内活性氧形成与清除之间的平衡被破
坏,活性氧偏大从而产生毒害作用。
相对较低的提取物胁迫下,通过体内活性氧清
除系统来解除活性氧的毒害,水葫芦叶片使其体内
活性氧的产生和猝灭处于动态平衡。但是由于胁迫
强度的提高,活性氧清除系统各酶类之间的相互协
调不能维持活性氧代谢平衡,不能阻止或减弱膜脂
过氧化的伤害,抗氧化酶活性明显降低)尤其是 *,$
和 -%./,膜脂过氧化增强。
参考文献
&0(周兆祥 1 苦楝的新用途&2(1 林业科技开发 3 00(!)4 !56
!71
&!(刘德汞3马万山3法玉琦1从苦楝籽中提取多萜类化合物的研
究&2(1信阳师范学院学报)自然科学版/3!88!309)0/4:96:;1
&5(贺亮3 殷宁1 苦楝果多糖的分离纯化及组分分析&2(1 天然
产物研究与开发3 !88;3 04 5965:1
&7(王元兰3 何平3 曹福祥1 苦楝果乙醇粗提物对斜纹夜蛾幼
虫取食行为的影响&2(1 经济林研究3 !8893 !5)0/4 5865!1
&9(王元兰3 何平3 曹福祥1 苦楝果乙醇粗提物对卫矛尺蠖生
物活性的影响&2(1 安徽农业科学3 !88’3 57)/4 0:5;60:5:1
&’(赵博光3 李小平3 陈小平1 苦楝果提取物对桑天牛产卵量
及卵孵化率的影响 &2(1 南京林业大学学报 )自然科学版 /3
!88!3 !’)0/4 706771
&;(-<=>?@ABCD $E3 FGH> I3 $HJK@ #3 @B =?1 LMN=JB CG OCB=DHJ=?
@PB>=JBA Q@>HR@Q G>CM #@?H= =S@Q=>=J< =DQ %S=QH>=JQHJ= CD NCNU?=BHCDA CG *?UB@??= PV?CAB@??= =DQ HBA D=BU>=?
@D@MH@A4 % GH@?Q B@AB CG ?=OC>=BC>V GHDQHDWA &2(1 XHC?CWHJ=?
-CDB>C?3 !88’3 54 08960071
&:(Y=B<=D EE1 ZGG@JBA CG #@?H= =S@Q=>=J< CD DUB>HBHCD=? NC?CWV =DQ @DSVM@ =JBHRHBH@A CG B<@ >HJ@ ?@=G GC?Q@>
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&(Y=B<=D EE3 E@=J< ]1 @PB>=JB
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^VO?=@HQ=@/&2(1 ->CN *>CB@JBHCD3 !88’3 !94 !:;6!01
&08(韩莉3 万福珠3 刘朝奇1 苦楝果浸出液对荷瘤小鼠及其感
染白色念珠菌的影响&2(1 咸宁医学院学报3 03 05)5/4
0760901
&00(翟兴礼3 刘秀花1 苦楝果实提取物对 XB6:808 和 XB6;!0’
的抑菌活性&2(1 华北农学报3 !88’3 !0)9/4 05!60571
&0!(翟兴礼3 王启明3 王立娟1 苦楝果实提取物对几种芽孢杆
菌的抑菌活性1 安徽农业科学3 !88’3 57)/4 08:6081
&05(-=>NHD@??= #-3 ^@>>@>C [[3 %?CDAC I%3 @B =?1 %DBHGUDW=?
=JBHRHBV CG #@?H= =S@Q=>=J< G>UHB @PB>=JB &2(1 _HBCB@>=NH=3
03 ;84 !’6!:1
&07(F<=D #I3 FH<=>= #3 ,MC?CAC %$1 %DBHMHJ>COH=? =JBHRHBV
CG ^C>AGH@?QH= <@?‘HWHH =DQ #@?H= =S@Q=>=J< &2(1_HBCB@>=NH=3
!8803 ;!4 7!567!;1
&09(段惠 3 强胜 3 吴海荣,等 1 水葫芦 &ZHJ<DH= J>=AAHN@A
)#=>B1/ EC?MA1(&2(1 杂草科学3 !885)!/4 56781
&0’(潭承建3 董强3 王银朝,等1 水葫芦的危害、利用与防除&2(1
动物医学进展3 !8893 !’)5/4 9969:1
&0;(国家环保总局3 中国科学院1 中国第一批外来入侵物种名
单&2(1 国务院公报3 !8853 !54 7067’1
&0:(丁建清3 陈志群3 付卫东,等1 水葫芦象甲对外来杂草水
葫芦的控制效果&2(1 中国生物防治3 !8803 0;)5/4 ;60881
&0(X=>>@BC I3 -<=>UQ=BB=D I3 *CM@??= %3 @B =?1 XHC?CWHJ=?
JCDB>C? CG D@CB>CNHJ=? =aU=BHJ ‘@@QA ‘HB< GUDWH &2(1 ->CN
*>CB@JBHCD3 !8883 04 ’;6;851
&!8([=C ]3 ]H X1 % NCB@DBH=? D=BHR@ D=BU>=? @D@MV CG HDR=AHR@
=aU=BHJ ‘@@Q 6 ‘=B@> !88’):/0’:60’!1
&!0(E<=O=D= b#3 X=K= c%#3 %OQ@?6_=BB=< [#1 %?B@>D=>H= @T
HJ<DH=@3 = OHC?CWHJ=? JCDB>C? =W@DB GC> ‘=B@>MVJC<@>OHJHQ=? GC>MU?=BHCD =DQ N=T
AB>UJBU>=? @ANCDA@A &2(1 ZU>CN@=D 2CU>D=? CG *?=DB
*=B&!!(易振3 张茂新3 凌冰,等1 马缨丹及其酚类化合物对水葫
芦生长的抑制作用&2(1 应用生态学报3 !88’3 0;)/4 0’5;6
0:781
&!5(E=P@D= #F1 %aU@CUA ?@=J<=B@ CG ]=DB=D= J=M=>= KH??A
‘=B@> D=? CG -<@MHJ=? ZJC?CWV3 !8883 !’
)08/4 !7596!77;1
&!7(赵世杰1 植物中丙二醛测定方法的改进&2(1 植物生理学通
讯3 073 58)5/4!8;6!081
&!9(徐朗莱3 叶茂炳1 过氧化物酶活力连续记录测定法&2(1 南
京农业大学学报3 0:3 0!)5/4:!6:51
&!’(潘瑞织1 植物生理学&#(1 北京4 高等教育出版社3 !8871
(下转第 !页)
!8
井冈山学院学报(自然科学) 第 ! 卷第 ! 期
!#$%& ’ (#)*+ +,#-+.+$/ )#+ #%/+0’) #1%.+$% ’0
2/3&*’)’43 +0- 5*’$/#6*&%.3 ’ 7)%#.0+0%/#.+
2/*)’1#.’*-#& )#+ %*&&8#
#$%& ’()*+ ,-. /(01231)*+ $&-.4 #3(256)
789311: 1; <(;= 89(=)9=+ >()**0)*?30) &)(@=A?(BC+ >(D0) EFEGG,H3()0I
75&%.+$%9 J3= =;;=9B? 1; K=:(0 0L=M0A093 :=0; =B30)1: =NBA09B 1) B3= B(??6= O=AP=0Q(:(BC+ KR- 91)B=)B+
S%R+ -S/ 0)M H-J 09B(@(B(=? 1; 0:B=A)0)B3=A0 O3(:1N=A1(M=? :=0@=? T=A= ?B6M(=M QC B3= 0)0:CB(90:
B=93)(U6=? () A=?(?B0)9=V J3= A=?6:B? ?31T=M B30B KV 0L=M0A093 :=0; =B30)1: =NBA09B ()9A=0?=M B3= B(??6=
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09B(@(B(=? () -V O3(:1N=A1(M=? :=0@=?V J3=?= ()M(90B=M B30B KV 0L=M0A093 :=0; =B30)1: =NBA09B 30M B3=
O1B=)B(0: 0Q(:(BC B1 OA=@=)B 0)M 91)BA1: -V O3(:1N=A1(M=?V
:#3 ;’.-&9 K=:(0 0L=M0A093W -:B=A)0)B3=A0 O3(:1N=A1(M=?W ()56ACW O3C?(1:1*C 0)M Q(193=P(?BAC
(上接第 !页)
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789311: 1; X);1AP0B(1) 89(=)9= 0)M H1PP6)(90B(1),>()**0)*?30) &)(@=A?(BC,>(D0) EFEGG,H3()0I
75&%.+$%9J3= O0O=A QA(=;:C M=?9A(Q=? B3= P=930)(?P 1; P6:B(B3A=0M()* () 50@0 :0)*60*=+ 0)M ?B0B=? B3=
9:0??(9 ?C)93A1)(L0B(1) OA1Q:=P 1; A=0M=A? 0)M TA(B=A? () 1O=A0B()* ?C?B=PV XB ()(B(0::C OA1O1?=? B3A==
0:*1AB3P?D )=T T0C? 1; B3(? OA1Q:=P+ P0Y=? 0 M==O =NB=)M=M A=?=0A93 ;1A B3= 0:*1AB3P=?D T0C? + 0)M *(@=?
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展示此问题的演示过程和效果。于此,可帮助相关
研究者更透彻更深入地理解该问题,并能为利用
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参考文献
^_‘891BB %0Y?+ $=)AC ]1)*V >0@0 J3A=0M? EAM+ aM(B(1) ^K‘V
%D[=(::C+ !GGFV
^!‘(日)结城浩V >0@0 多线程设计模式^K‘V 博硕文化译V 北京b
中国铁道出版社+!GGcV
^E‘(美)’(: <=T(?+R0)(=: >V’=A*V深入学习b>0@0 多线程编程^K‘V
关欣译V北京b 电子工业出版社+ !GGGV
^F‘’A69= a9Y=:V J3()Y()* () >0@0+ EAMV ^K‘V 北京 b 机械工业
出版社+ !GG!V
^c‘罗宇V操作系统^K‘V 北京b北京邮电大学出版社,!GGFV
^d‘汤子瀛+哲凤屏+汤小丹V计算机操作系统^K‘V西安b电子科技
大学出版社+!GGGV
^e‘李金忠 +夏洁武 V[=0M=A? \]A(B=A? 问题的拓展研究及其 S \ f
操作的实现^>‘V井冈山学院学报,!GGd,!e(!)V
^g‘李金忠+夏洁武V基于 >0@0 多线程机制解决哲学家进餐问题
的深入探究^>‘V井冈山学院学报,!GGe,!g(d)V
(责任校对:彭晓冬)
(责任校对:彭晓冬)
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