全 文 ：� 3067 �中华中医药杂志(原中国医药学报)2013年 10 月第28卷第10期 CJTCMP , October 2013, Vol .28, No. 10
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（收稿日期：2012年7月24日）
·研究报告·
榅桲叶提取物对肾性高血压大鼠血压及
血压相关指标的影响
周文婷，阿布来提·阿布力孜，王雪飞，轻曼古丽·阿吉，田树革，孙晓伟，艾尼瓦尔·吾买尔
（新疆医科大学，乌鲁木齐 830011）
摘要：目的：研究榅桲叶提取物对肾性高血压大鼠（RHR）的降压作用以及对血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）、肾
素活性（RA）、apelin-12、内皮素（ET）、一氧化氮（NO）的影响。方法：采用两肾一夹法（2K1C）制造肾性
高血压大鼠（RHR）模型，随机分为6组：假手术组、模型组、榅桲叶提取物高、中、低剂量组、阳性对照药卡
托普利组，每组10只。连续给药8周，在给药前和给药后每2周测量大鼠的收缩压（SBP）和舒张压（DBP），末
次给药后测量大鼠AngⅡ、RA、apelin-12、ET、NO的变化。结果：给药8周后，榅桲叶提取物明显降低RHR的血
压（P<0.05）；榅桲叶提取物可以减少血和肾脏AngⅡ和apelin-12的含量，降低RA，减少血浆ET并提高血清NO含
量（P<0.05）。结论：榅桲叶提取物的降压作用可能与影响肾素-血管紧张素系统的活性，减少缩血管物质的同
时增加舒血管物质的释放有关。
关键词：榅桲叶提取物；肾性高血压大鼠；血管紧张素Ⅱ；内皮素；一氧化氮
基金资助： 新疆维吾尔自治区科技计划项目（No.201033126）
通讯作者：艾尼瓦尔·吾买尔，新疆乌鲁木齐市新医路393号新疆医科大学基础医学院药理教研室，邮编：830011，电话：0991-4365602
E-mail：anwar.umar@126.com
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近年心脑血管疾病已成为危害人类健康的最主要的疾病
之一，高血压是其中最常见的一类心血管疾病。据统计以高血
压为原发病的各种心脑血管疾病已成为人类死因之首[1]。因此，
对于高血压及其并发症治疗的研究有着重大意义。高血压是以
全身动脉血压升高为主要特征的疾病，高血压的发生和发展是
一个多因素的复杂过程，即存在异常的血流动力学，又存在糖
类、脂肪和蛋白质的代谢紊乱，还会造成其他靶器官心、脑、肾
等的损害。所以近些年来对高血压的研究不仅集中在单纯降压
上，更多的是最大限度的降低心血管疾病的危险和死亡。
榅桲叶为蔷薇科榅桲属植物榅桲（Cydonia Oblonga Mill，
COM）的叶，含有多糖类、黄酮类、生物碱类、氨基酸及多肽、
鞣质、有机酸、挥发油等成分[2]。根据《维吾尔常用药材学》记
载，榅桲具有降血压、调血脂、补血、补肾、止泻、利尿、心脏病
等功效。据其它文献报道榅桲还具有抗氧化，抗菌等作用[3-4]。本
项目前期研究发现，榅桲叶提取物有抗凝血、抗血栓作用[5]；本
实验将对榅桲叶提取物对肾性高血压大鼠（renal hypertension
rat，RHR）血压及对血压相关指标的影响进行研究，为进一步
在心脑血管病的防治方面开发利用榅桲的药用价值提供一定的
实验依据。
材料
1 .动物　Wis t a r大鼠6 0只，雄性，6-7周龄，体质量
（200±20）g，清洁级，由新疆医科大学实验动物中心提供，动
物生产许可证号：SCXK（新）2011-0004，动物使用许可证号：
SYXK（新）2011-0004。每日饲以普通颗粒饲料，饮用清洁自
来水。
2. 药品　榅桲叶（2011年10月购自新疆维吾尔自治区叶城
县）；卡托普利片（captopril，CAP），山西津华晖星制药有限公
司，批号：100803，25mg/片。
3. 试剂和仪器　75%医用乙醇（伟业实验材料公司，批
号：11030801）；注射用青霉素钠（中诺药业有限公司，批号：
101003017，规格：80万单位/支）；戊巴比妥钠（Solar Bio，批号：
6900183）；大鼠血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AngⅡ）、肾素活性
（renin activity，RA）、apelin-12、内皮素-1（endothelin-1，ET-1）、
一氧化氮（NO）试剂盒（R&D，批号：CK-E30668）；BP-6型动
物无创血压测试仪（成都泰盟科技有限公司）；U型银夹，内径
0.20mm；LXJ-IIB型低速大容量多管离心机（上海安亭科学仪
器厂）；TDL-5M型台式大容量冷冻离心机（长沙湘仪离心机仪
器有限公司）；FSH-2A型可调高速匀浆机；放射免疫γ-计数
器；Coda KM-00025-00型全自动酶标仪（Bio-Rad）。
方法
1. 榅桲叶提取物的制备方法　榅桲叶用水洗净，55℃鼓风
干燥48h，粉碎后过60目筛，用65%乙醇按1∶30料液比超声提
取3次，每次1h，合并滤液后减压蒸馏浓缩至浸膏状，冷冻干燥
24h后得固体粉末备用。
2. 两肾一夹法（2K1C）肾性高血压大鼠模型的建立[6-8]　
健康Wistar雄性大鼠若干，适应性饲养1周。大鼠用1%戊巴比妥
钠腹腔注射麻醉（40mg/kg）后仰卧位固定，腹部手术野备皮，
消毒后于剑突下1-2cm处沿腹中线剪开皮肤层和肌层，用镊子
移开腹内组织，暴露肾静脉。肾静脉上可见一分支通向肾上腺，
此分支和肾静脉形成一三角区域。在此区域暴露肾动脉，小心
地套上U型银夹（内径为0.2mm），最后分层缝合手术切口。术
后后肢肌肉注射青霉素8万单位/只，注射3d，以预防感染。术后
动物清醒前注意保温，清醒后置于干净笼内饲养。假手术组只
分离左肾，动脉不套银夹。手术过程中不触及右侧肾脏。
Study on the antihypertensive effect and related substances of Cydonia oblonga Mill.
(COM) leaf extracts on renal hypertension rats
ZHOU Wen-ting, Ablat Abliz, WANG Xue-fei, Qimangul Aji, TIAN Shu-ge, SUN Xiao-wei, Anwar Umar
( Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China )
Abstract: Objective: To study the antihypertensive eff ect and related substances Cydonia oblonga Mill. (COM) leaf
extracts, such as angiotensin-Ⅱ (AngⅡ), renin activity (RA), apelin-12, endothelin (ET) and nitric oxide (NO). Methods: Two-
kidney, one-clip (2K1C) model rats were operated and divided randomly into six groups: sham group, model group, captopril
group, COM leaf extracts low, medium and high dose groups, 10 rats in each group. The drugs were administered for eight weeks.
Systolic blood pressure (SBP) and diastolic blood pressure (DBP) were measured before and every 2 weeks after administration.
After the last administration, all rats were sacrifi ced under deep anesthesia, and blood and kidney samples were collected to detect
the level of AngⅡ, RA, apelin-12, ET and NO. Results: After treatment for eight weeks, COM leaf extracts signifi cantly declined
the pressure of RHR (P<0.05), which had no signifi cant diff erence in COM high dose group compared with captopril group;
In COM leaf extracts groups, the levels of AngⅡ, apelin-12, RA and ET were declined, while the level of NO was increased.
Conclusion: The antihypertensive activity of COM leaf extracts may be related to action on the renin-angiotensin system and
balance of the vaso-excitor materials and vasodilator substances.
Key words: Cydonia oblonga Mill. extracts; Renal hypertension rats; Angiotensin-Ⅱ; Endothelin; Nitric oxide
Fund assistance: Xinjiang Uygur Autonomous Region Science and Technology Project (No.201033126)
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3. 分组及给药　手术4周后测定血压，每周1次，每次每
只大鼠血压连续测定5次取平均值，载止术后6周，以收缩压
（systolic blood pressure，SBP）>150mmHg为筛选标准，连续2周
血压超过150mmHg者进入实验，低者剔除。术后6周筛选出造
模成功的50只大鼠按收缩压水平随机分为5组：肾性高血压模
型组、卡托普利组、榅桲叶提取物低剂量组、榅桲叶提取物中剂
量组、榅桲叶提取物高剂量组，另加假手术组10只。
术后第6周开始，每天灌胃给药1次，连续给药8周。榅桲叶
提取物低、中、高剂量组给药剂量分别为40、80、160mg/kg；卡
托普利组给药剂量按人与大鼠的给药比例1∶7换算给予卡托普
利混悬液（25mg/kg）；假手术组与模型组均灌胃等剂量0.9%氯
化钠溶液，各组大鼠每天灌胃容积均为10mL/kg。大鼠每周测1
次体质量，根据体质量变化随时调整给药剂量。
4. 大鼠血压的测定　于给药前、给药后2、4、6、8周，把6
组大鼠置于安静、干燥、通风的环境中，用BP-6型大鼠无创血
压测定仪测量血压的SBP和舒张压（diastolic blood pressure，
DBP）。给药后血压测定在末次给药后1h开始进行。每次测3个
值，取平均值做最后的血压值。
5. 标本采集与指标测定
5.1 血清样本　各组大鼠腹腔注射1%戊巴比妥钠（30mg/kg）
麻醉后，经腹主动脉采血。采血管不加抗凝剂，4℃下3 000
r/min离心10min，分离上清液-80℃保存，按试剂盒说明测定血
清apilin-12、NO的含量。
5.2 血浆样本　经腹主动脉采血，迅速注入预先加入酶
抑制剂（10%EDTA二钠30μL和抑肽酶40μL）的抗凝管内，摇
匀，4℃ 3 000r/min离心10min，取上清液-80℃以下保存待测，
按试剂盒说明测定血浆Ang Ⅱ、ET-1的含量及RA。
5.3 组织匀浆样本　大鼠处死后取右侧肾脏0.5g，铝箔纸包
埋保存于-80℃冰箱待测。测定时加4.5mL 0.9%氯化钠溶液用
匀浆机制成10%的匀浆，3 000r/min离心15min，分离上清液，测
定肾组织中AngⅡ、apilin-12的含量。
6. 统计学方法　所有数据均以x-±s表示，用SPASS 17.0统
计软件处理。多组样本均数的比较采用One-Way ANOVA方法。
经方差齐性检验后，方差不齐的采用Dunnett-t检验；方差齐性
的则采用LSD-t检验。检验水准α=0.05。
结果
1. 榅桲叶提取物对大鼠体质量的影响　实验期间大鼠一
般情况良好、毛发光泽、饮食饮水量正常、体质量持续增加。各
组大鼠体质量增长速度相近，经方差分析，个体间无显著性差
异，组间也无显著性差异，见表1。
2. 榅桲叶提取物对RHR SBP和DBP的影响 结果见表2-
表3。手术6周后（给药前），模型组血压升高，和空白组比较具
有显著性差异（P<0.05），说明造模成功；给药8周后，榅桲叶
提取物各剂量组和卡托普利组均可明显降低RHR的SBP与DBP
（P<0.05）。随着各给药组给药剂量的升高及给药时间的延长
对大鼠血压的影响越发明显，在给药后6、8周各给药组与模型
组相比SBP与DBP均有显著性差异（P<0.05）。
3. 榅桲叶提取物对RHR血浆AngⅡ、血清apelin-12含量及血
浆RA的影响 从表4可知，各给药组均能有效减少血浆AngⅡ、
血清apelin-12含量，降低血浆肾素活性（RA），与模型组比较，
差异均有统计学意义（P＜0. 05）。随着剂量的增加，榅桲叶提取
物对血浆AngⅡ、血清apelin-12、血浆RA的影响逐渐增强。
表1　各组大鼠体质量的变化（x-±s，g）
组别 2周 4周 6周 8周
空白组 252.8±26.1 272.2±20.0 274.4±20.4 282.3±20.5
模型组 224.5±23.8 224.6±23.8 231.3±23.4 252.2±31.7
卡托普利组 253.1±25.0 264.0±38.6 273.6±24.1 278.7±26.1
榅桲叶提取物低剂量组 236.3±28.8 232.8±38.6 244.5±32.7 247.8±39.5
榅桲叶提取物中剂量组 224.8±33.6 226.6±37.5 243.3±43.5 246.7±37.4
榅桲叶提取物高剂量组 243.3±29.7 241.3±33.7 255.0±28.4 263.0±28.3
表2　榅桲叶提取物对RHR SBP的影响（x-±s，n=10，mmHg）
组别 给药前 2周 4周 6周 8周
空白组 127.1±6.5 126.7±3.5 128.1±8.2 127.1±8.5 126.7±4.5
模型组 182.5±7.4* 182.9±6.6* 189.5±5.4* 190.5±6.4* 191.9±5.6*
卡托普利组 180.4±8.7 166.2±7.8△ 160.4±9.1△ 159.4±9.7△ 157.2±5.8△
榅桲叶提取物低剂量组 184.4±6.7 177.8±5.7 174.4±5.7△ 170.4±10.7△ 166.8±7.4△
榅桲叶提取物中剂量组 182.4±7.3 174.0±7.9△ 172.4±6.6△ 168.4±6.3△ 162.0±5.1△
榅桲叶提取物高剂量组 181.9±8.5 172.9±8.6△ 169.9±7.5△ 164.9±9.5△ 159.9±10.6△
注：与空白组比较，*P<0.05；与模型组比较，△P<0.05。下表同。
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4. 榅桲叶提取物对RHR肾脏AngⅡ、apelin-12含量的影响
从表5可知，模型组肾脏AngⅡ和apelin-12含量明显升高，与空白
组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。随着榅桲叶提取物给药
剂量的增加，肾脏中AngⅡ、Apelin-12含量逐渐降低，除榅桲叶
提取物低剂量组的肾脏AngⅡ指标外，各给药组与模型组比较，
均有显著性差异（P＜0.05）。
5. 榅桲叶提取物对RHR血浆ET-1和血清NO含量的影
响 由表6可见，模型组大鼠血浆ET-1较空白组明显升高
（P<0.05），而NO含量明显降低（P<0.05）；给药8周后，榅桲叶
提取物高、中剂量组血浆ET-1含量低于模型组（P<0.05）；榅桲
叶提取物不同剂量给药组和Cap组均能增加大鼠血清NO含量，
与模型组比较具有显著性差异（P<0.05）。
讨论
肾性高血压是一种常见的继发性高血压，其主要病因是
肾动脉狭窄。由于肾血流量的减少，异常激活RAS，导致钠、
水潴留，引起血压升高[9]。肾性高血压大鼠是筛选降压药常用
的动物模型之一，其病理生理过程与人类高血压具有很多相
似之处，对降压药物的选择也与高血压病人相似，所以常用来
评价抗高血压药的药效。在肾性高血压的发生机制中，最重
要的是肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system，RAS）
被异常激活。RAS可调节水钠平衡、血管收缩张力，对肾性高
血压的发生发展起到重要作用。而在RAS中关键因子无疑是
AngⅡ。血管紧张素转化酶既可以水解血管紧张素，又可以降解
apelin。apelin是小分子活性多肽，在血管、心脏、大脑中都有表
达[10-13]。apelin可以调节血管的收缩功能，随着AngⅡ浓度升高，
apelin浓度会相应升高，拮抗AngⅡ的升压作用；AngⅡ浓度降
低，apelin浓度也会相应降低。
高血压时血管内皮细胞的结构与功能发生变化，ET合成或
释放增加而NO释放减少，两者平衡失调，引起血管收缩血压升
高。AngⅡ与ET之间存在相互作用，ET有促进血管紧张素转化
酶活性，可催化合成AngⅡ，而AngⅡ可诱导内皮细胞ET基因表
达增强，故ET和AngⅡ是相互促进的关系[14]。ET具有强烈收缩
冠状动脉、肾小动脉、提高全身血压作用，是已知最强的收缩血
管物质；NO是体内最主要的内皮依赖性舒血管物质之一，高血
压患者体内存在内皮功能的障碍和自由基的损伤，内皮障碍的
机制最主要的就是氧化应激降解NO[15]。目前，高血压与氧自由
基和NO的关系已经成为医学界研究的一个热点问题，在治疗
高血压的同时应该注意对血管内皮的保护，同时加强抗自由基
损伤的治疗[16]。
本项目组前期研究结果初步表明，榅桲叶提取物具有一定
降压作用[17]。本实验研究结果进一步证实榅桲叶提取物具有明
表4　榅桲叶提取物对RHR血浆AngⅡ、血清apelin-12含量及血
浆RA的影响（x-±s，n=10）
组别
AngⅡ
（pg/mL）
apelin-12
（pg/mL）
RA
（ng/mL）
空白组 317.2±13.6 172.8±10.6 1.07±0.18
模型组 380.8±15.3* 224.6±11.2* 3.02±0.21*
卡托普利组 348.9±14.1△ 193.0±10.4△ 1.63±0.11△
榅桲叶提取物低剂量组 363.1±16.2△ 210.8±9.3△ 1.84±0.34△
榅桲叶提取物中剂量组 356.1±17.0△ 205.7±7.1△ 1.81±0.20△
榅桲叶提取物高剂量组 349.3±11.9△ 190.5±13.5△ 1.76±0.17△
表5　榅桲叶提取物对RHR肾脏AngⅡ和apelin-12含量的影响
（x-±s，n=10，pg/mg）
组别 AngⅡ apelin-12
空白组 11.2±2.6 4.2±0.6
模型组 20.8±3.3* 7.6±0.2*
卡托普利 组 14.9±3.1△ 5.1±0.5△
榅桲叶提取物低剂量组 18.1±2.4 6.9±0.3△
榅桲叶提取物中剂量组 16.5±2.7△ 6.3±0.7△
榅桲叶提取物高剂量组 14.3±2.9△ 5.6±0.6△
表6　榅桲叶提取物对RHR血浆ET-1和血清NO含量的影响
（x-±s，n=10）
组别 ET-1（pg/mg） NO（μmol/mL）
空白组 92.1±12.7 57.3±4.7
模型组 152.2±8.5* 50.3±3.9*
卡托普利组 115.4±16.3△ 66.7±5.4△
榅桲叶提取物低剂量组 143.9±18.0 65.1±7.3△
榅桲叶提取物中剂量组 137.7±16.2△ 68.5±8.3△
榅桲叶提取物高剂量组 121.3±22.7△ 68.4±4.9△
表3　榅桲叶提取物对RHR DBP的影响（x-±s，n=10，mmHg）
组别 给药前 2周 4周 6周 8周
空白组 90.1±6.5 89.7±3.5 89.1±8.2 91.1±8.5 90.7±4.5
模型组 137.5±7.4* 138.9±6.6* 139.5±5.4* 139.8±6.4* 140.3±5.6*
卡托普利 组 136.4±8.7 126.2±7.8△ 125.4±9.1△ 122.4±9.7△ 120.2±5.8△
榅桲叶提取物低剂量组 134.4±6.7 137.8±5.7 135.4±5.7 132.4±10.7△ 128.8±7.4△
榅桲叶提取物中剂量组 135.4±7.3 135.0±7.9 132.4±6.6△ 129.4±6.3△ 124.0±5.1△
榅桲叶提取物高剂量组 136.9±8.5 132.9±8.6△ 130.9±7.5△ 127.9±9.5△ 121.9±10.6△
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显的降低肾性高血压大鼠SBP和DBP的作用，且随着给药剂量
的增加，作用更加显著，药效表现出较好的浓度依赖性。本研
究的创新点在于通过测定血和肾脏AngⅡ、apelin-12含量及肾
素活性，以及影响血管舒缩功能的重要物质ET和NO的含量，
推断榅桲叶提取物加压作用可能与影响肾素-血管紧张素系统
的活性，并调节血压相关物质apelin-12、NO和ET之间的平衡有
关，其作用机制还有待进一步研究。
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（收稿日期：2013年2月1日）