全 文 ：采用本工艺得到的紫杉醇合成的前体物 10-
DABⅢ的纯度大于 90%,说明实验采用的分离和纯
化工艺是可行的 。但由于本工作目前还处于实验室
研究阶段 ,在重结晶操作环节中尚存在一些问题 ,如
怎样去除残留溶剂对重结晶的影响 ,晶形的改善等
还都需要进一步的研究。
由于中国野生红豆杉濒临灭绝 ,加之栽培红豆
杉生长极其缓慢 ,更加剧了紫杉醇供应危机 。如能
针对本研究所建立的工艺实行优化改良 ,进行生产
规模的设计放大 ,通过生物或化学的半合成方法将
该前体物质转化为具有临床药用价值的紫杉醇或其
类似物 ,则具有十分明显的经济和社会效益。
参 考 文 献
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(2005-12-14收稿)
TheExtractionandSeparationofAnActiveandAvailableComponentfromTaxusmairei
WUMian-bin, MAShu-zhen
(BioengineeringInstitute, ColegeofMaterialScienceandChemicalEngineering, ZhejiangUniversity, Hangzhou310027, China)
Abstract　ToStudyonthe10-deacetylbaccatinⅢ extractfromtheleavesandbranchesofTaxusmairei.Anewmethodwaspro-
posedtoextractandpurify10-DABⅢ , whichwasadoptedastheparentnucleusofthehigheficaciousantitumourdrug-taxolanddo-
cetaxelinthecompositivesynthesis.Optimizationselectionwasalsomadeintheextractionandpurificationconditionsoftaxol.Thepu-
rityquotientof10-DABⅢ obtainedviathistechnicscouldreach91%, withtheyieldabove70%.Ithasbeentestifiedthatthetech-
nicswasfeasibleinindustrialpractice.
Keywords　Taxusmairei;Antitumor;Taxol;10-deacetylbaccatinⅢ
小紫金牛的化学成分研究
李药兰 1 ,苏妙贤1 ,岑颖洲 1＊ ,张晓琦 2 ,戴　毅2 ,叶文才 2
(1.暨南大学生命科学技术学院化学系 ,广东广州 510632;2.暨南大学中药及天然药物研究所 ,广东广州
510632)
　　摘要　对瑶族草药小紫金牛的化学成分进行研究 ,从小紫金牛乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位中分离得到 7
个化合物 , 采用光谱分析和文献对照的方法 , 确定它们的结构分别为:水杨酸(1), 对羟基间甲氧基苯甲酸(2), 没食
子酸乙酯(3), 4-羟基-3, 5-二甲氧基苯甲酸(4),原儿茶酸(5), 没食子酸(6)和儿茶素(7)。以上化合物均为首次从
该植物中分离得到 , 其中化合物 7首次从该属植物中得到。
关键词　小紫金牛;乙酸乙酯萃取部位;化学成分
中国分类号:R284.2/R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2006)04-0331-03
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.:20472024, 20172020)和广东省自然科学基金资助项目(No:04010479, 010401)
　　＊通讯作者:岑颖洲
　　在赴粤北瑶乡的草药资源调查研究中 ,我们发
现一种生长在深山溪边的药用植物 ,当地人称之为
“黄胆草 ”。经专家鉴定 , “黄胆草 ”为紫金牛科
(Myrsinaceae)紫金牛属 (ArdisiaSwartz)小紫金牛
(ArdisiachinensisBenth)。据报道 ,紫金牛科紫金牛
属植物全世界约有 500种 ,分布于热带和亚热带地
区 ,多供药用 ,不同产地紫金牛属植物含有的化学成
分和生理活性不尽相同〔1〕 ,我国紫金牛属植物资源
·331·中药材第 29卷第 4期 2006年 4月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2006.04.010
丰富 ,约有 68种 , 12变种 〔2〕 ,在瑶医临床中应用广
泛 〔3〕 ,据 《广东植物志 》记载 ,小紫金牛全株有活血
散瘀 、解毒止血的作用 ,治肺结核 、咯血 、呕血 、跌打
损伤 、又治黄疸 、睾丸炎 、尿路感染 、闭经等症 〔2〕。
本文首次报道了小紫金牛的化学成分分离和结构鉴
定的研究 ,从该植物乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部
位中得到七个化合物 ,均为首次从该植物中分离得
到 ,其中一个化合物首次从该属植物中得到。
1 　仪器与材料
X-6显微熔点测定仪(未校正),北京泰克仪器
有限公司;上海亚荣生化仪器厂 RE-52AA旋转蒸发
仪;巩义市英峪予华仪器厂 SH2-D(Ⅲ)循环水式多
用真空泵;上海嘉鹏科技有限公司 RE-52CS三用紫
外线分析仪;INOVA-500核磁共振仪;美国 Thermo
Finnigan公司 LCQAdvantageMAXLC-(ESI)MS质
谱仪;硅胶薄层层析板(GF254)和柱层析硅胶(80-
100目和 200-300目)均为青岛海洋化工厂分厂产
品;SephadexLH-20(25-100μm),为瑞士 Fluka公司
产品;有机溶剂均为分析纯 ,购自天津化学试剂一
厂 。小紫金牛(ArdisiachinensisBenth)全株采自广
东韶关始兴县 ,由广州中医药大学詹若挺副教授鉴
定和广东化工制药职业技术学院蔡岳文老师鉴定。
2 　提取与分离
晒干切碎的小紫金牛全株(13 kg),用 95%乙
醇室温浸提 3次 ,每次 10d,提取液合并后减压浓缩
得乙醇粗提取物(661 g)。将该粗提物分散于蒸馏
水中 ,依次用石油醚和乙酸乙酯萃取 ,减压浓缩乙酸
乙酯萃取层得乙酸乙酯萃取物(26 g)。将该萃取物
(25g)过硅胶柱层析(80 ～ 100目),正己烷-乙酸乙
酯(1∶1 , 1∶1.5和 1∶1.8)梯度洗脱 ,用 TLC分析跟
踪洗脱 , 合并相同的部位 , 得到 7个部位 (Fr1 ～
Fr7)。将 Fr2(2 g)过硅胶柱层析(200-300目),正
己烷:乙酸乙酯(6∶1)洗脱 , TLC分析跟踪洗脱 ,合
并相同组分 ,得到 20个组分(Fr2-1 ～ Fr2-20)。 Fr2-
12(80 mg)反复用 SephadexLH-20柱层析纯化 ,氯
仿:甲醇(3∶7)洗脱 ,得到化合物 1(100 mg)。 Fr2-
16(180 mg)过硅胶柱层析(200-300目),用氯仿:甲
醇:甲酸(98∶2∶0.5)洗脱;SephadexLH-20柱层析纯
化 ,氯仿:甲醇(3∶7)洗脱 ,得到化合物 2(15 mg)和
3(20mg)。Fr2-18(200 mg)过硅胶柱层析(200-300
目),氯仿:甲醇:甲酸 (98∶2∶0.5)洗脱;Sephadex
LH-20柱层析纯化 ,氯仿:甲醇(3∶7)洗脱 ,得到化合
物 3(16mg)和 4(15 mg)。Fr2-20(165 mg)过硅胶
柱层析(200-300目),氯仿:甲醇:甲酸(97∶3∶0.5)
洗脱;用 SephadexLH-20柱层析纯化 ,氯仿∶甲醇
(3∶7)洗脱 ,得到化合物 5(22mg)。Fr3(300mg)用
SephadexLH-20柱层析纯化 ,氯仿∶甲醇 (3∶7)洗
脱 ,得到化合物 6(100 mg)。 Fr5(300mg)过硅胶柱
层析(200-300目),氯仿∶甲醇∶甲酸(97∶3∶0.5)洗
脱;SephadexLH-20柱层纯化 ,氯仿∶甲醇 (3∶7)洗
脱 ,得到化合物 7(30 mg)。
3　结构鉴定
化合物 1:白色针状结晶(甲醇 -水), m.p.159-
160℃。在硅胶薄层板上用不同的溶剂体系展开 ,均
为单点 ,喷 FeCl3-EtOH试剂显红色 。 ESI-MS:275
(2M-1), 138(M)。1HNMR(500MHz, CDCl3):10.39
(1H, OH), 7.93(1H, d, J=8.0Hz, H-6), 7.53(1H,
dd, J=8.4, 7.8Hz, H-4), 7.02(1H, d, J=8.4Hz, H-
3), 6.93(1H, dd, J=7.8, 7.4Hz, H-5)。13 CNMR
(125MHz, CD3COCD3 ):172.67 (C-7, -COOH),
163.09(C-2), 136.79(C-4), 131.25(C-6), 119.96
(C-5), 118.10(C-3), 113.13(C-1)。以上光谱数据
与文献值 〔4〕基本一致 ,鉴定化合物 1为水杨酸(sali-
cylicacid)。
化合物 2:淡黄色针状结晶(甲醇 ), m.p.165-
170℃。在硅胶薄层板上用不同的溶剂体系展开 ,均
为单点 , 喷 FeCl3 -EtOH显红色。 ESI-MS:167(M-
1)。1HNMR(500MHz, CD3OD):7.55(1H, d, J=
1.8Hz, H-2), 7.53(1H, dd, J=1.8, 8.7Hz, H-6),
6.82(1H, d, J=8.7Hz, H-5), 3.88(3H, s, H-8, -
OCH3)。13 CNMR(125MHz, CD3OD):167.6(C-7),
152.68(C-4), 148.75(C-3), 125.33(C-6), 123.5
(C-1), 115.91(C-2), 114.11(C-5), 56.56(C-8, -
OCH3)。以上光谱数据与文献值 〔5〕基本一致 ,鉴定
化合物 2为对羟基间甲氧基苯甲酸 (4-hydroxy-3-
methoxy-benzoicacid)。
化合物 3:淡黄色针状结晶(甲醇 ), m.p.150-
151℃。在硅胶薄层板上用不同的溶剂体系展开 ,均
为单点 , 喷 FeCl3 -EtOH显蓝色。 ESI-MS:197(M-
1)。1HNMR(500MHz, CD3OD):7.04(2H, s, H-2,
6), 4.26(2H, q, J=7.15Hz, H-8, -O-CH2 -), 1.32
(3H, t, J=7.15Hz, H-9, -CH3)。13 CNMR(125MHz,
CD3OD):168.64(C-7, -COO-), 146.55(C-3 , 5),
139.75(C-4), 122.00(C-1), 110.18(C-2 , 6), 61.69
(C-8, -OCH2 -), 14.66(C-9 , -CH3)。以上光谱数据
与文献值 〔6〕基本一致 ,鉴定化合物 3为没食子酸乙
酯(galicacidethylester)。
化合物 4:淡黄色针状结晶(甲醇), m.p.194℃
(分解)。在硅胶薄层板上用不同的溶剂体系展开 ,
·332· 中药材第 29卷第 4期 2006年 4月
均为单点 ,喷 FeCl3 -EtOH显红色 。 ESI-MS:197(M-
1)。1HNMR(500MHz, CD3OD):7.32(2H, s, H-2,
6), 3.87 (6H, s, -OCH3 )。13 CNMR(125MHz,
CD3OD):169.96(C-7, -COO-), 148.97(C-3, 5),
141.98(C-4), 122.05(C-1), 108.65(C-2, 6), 59.94
(-OCH3)。以上光谱数据与文献值 〔7〕基本一致 ,鉴
定化合物 4为 4-羟基 -3, 5-二甲氧基苯甲酸 (4-hy-
droxy-3, 5-dimethoxybenzoicacid)。
化合物 5:白色针状结晶 (甲醇), m.p.199-
200℃。在硅胶薄层板上展开后 ,喷 FeCl3 -EtOH显
蓝黑色 。 ESI-MS:307(2M-1), 153(M-1)。1HNMR
(500MHz, CD3OD):7.44(1H, d, J=2.0Hz, H-2),
7.43(1H, dd, J=2.0, 8.0Hz, H-6), 6.80(1H, d, J=
8.1Hz, H-5), 为苯环 ABX偶合系统的 3个 H质
子 。13 CNMR(125MHz, CD3OD):170.28 (C-7, -
COO-), 151.54(C-4), 146.07(C-3), 123.97(C-6),
123.24(C-1), 117.84(C-2), 115.85(C-5)。以上光
谱数据与文献值 〔8〕基本一致 ,鉴定化合物 5为原儿
茶酸(protocatechuicacid)。
化合物 6:白色针状结晶 (甲醇), m.p.236-
238℃。在硅胶薄层板上展开后 ,喷 FeCl3 -EtOH显
深蓝色 。ESI-MSm/z:169[ M-1] 。1HNMR(500MHz,
CD3OD)δ(ppm):7.05(2H, s, H-2, 6)。 13CNMR
(125MHz, CD3OD)δ(ppm):170.45(C-7, -COO-),
146.43(C-3 , 5), 139.64(C-4), 122.0(C-1), 110.37
(C-2, 6)。以上光谱数据与文献值 〔8〕基本一致 ,而
且该化合物 TLC与没食子酸的标准品 Rf值一致 。
鉴定化合物 7为没食子酸(galicacid)。
化合物 7:白色针状结晶 (甲醇), m.p.175-
176℃。在硅胶薄层板上展开后 ,喷 FeCl3 -EtOH显
蓝绿色 。ESI-MSm/z:289[ M-1] 。1HNMR(500MHz,
CD3OD):6.83(1H, d, J=1.7Hz, H-2 ), 6.75(1H,
d, J=8.1Hz, H-5 ), 6.71(1H, dd, J=1.7 , 8.1Hz, H-
6 ),属 ABX偶合系统 ,为黄酮醇 B环上的质子信
号。 5.92(1H, d, J=2.1Hz, H-6), 5.85(1H, d, J=
2.2Hz, H-8),属 AX偶合系统 ,为黄酮醇 A环上的
质子信号 。 4.56(1H, d, J=7.5Hz, H-2), 3.97(1H,
m, H-3), 2.84(1H, dd, J=5.9, 16.2Hz, H-4), 2.49
(1H, dd, J=8.1, 16.2Hz, H-4),为黄酮醇 C环上的
质子信号。13 CNMR(125MHz, CD3OD):157.89(C-
7), 157.63(C-5), 156.97(C-9), 146.30(C-3 ),
146.28(C-4 ), 132.29(C-1 ), 120.09(C-6 ),
116.14(C-5 ), 115.32(C-2 ), 100.89(C-10),
96.37(C-6), 95.58(C-8), 82.91(C-2), 68.87(C-
3), 28.56(C-4)。以上光谱数据与文献值 〔9〕基本一
致 ,鉴定化合物 7为儿茶素(catechin)。
参 考 文 献
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(2005-12-09收稿)
StudyontheChemicalConstituentsofArdisiachinensis
LIYao-lan1 , SUMiao-xian1 , CENYing-zhou1 , ZHANGXiao-qi2 , DAIYi2 , YEWen-cai2
(1.ColegeofLifeScienceandTechnology, JinanUniveristy, Guangzhou510632;2.InstituteofTraditionalChineseMedicine＆Nat-
uralProducts, JinanUniversity, Guangzhou510632)
Abstract　ThechemicalconstituentsofArdisiachinensis, whichtraditionalyusedintheareaofYaominorityinSouthernChina,
wereanalyzedandcharacterized.SevencompoundswereobtainedfromtheethylacetatefractionofethanolextractofArdisiachinensis.
These7compoundswerecharacterizedbyspectroscopicanalysisandcomparisonwithpublisheddatatobesalicylicacid(1), 4-hydrox-
y-3-methoxy-benzoicacid(2), galicacidethylester(3), 4-hydroxy-3, 5-dimethoxybenzoicacidmethylester(4), protocatechuic
acid(5), gallicacid(6)andcatechin(7).Allofthemwereisolatedfromthisplantforthefirsttime, andcompound7wasobtained
fromthisgenusforthefirsttime.
Keywords　Ardisiachinensis;Ethylacetatefraction;Chemicalconstituents
·333·中药材第 29卷第 4期 2006年 4月