全 文 ：第 27 卷　第 1 期 《新疆师范大学学报》(自然科学版) Vol.27 , No.1
2008 年 3 月 Journal o f Xinjiang Normal Unive rsity Mar.2008
(Natural Sciences Edition)
榅桲籽与香梨籽中总黄酮含量的测定
古力伯斯坦·艾达尔 , 　沙拉买提·托乎提
(新疆师范大学生命与化学科学学院 ,新疆 乌鲁木齐 830054)＊
摘 要:三氯化铝与黄酮类化合物作用后 ,生成黄酮的络合物为黄色 ,以芦丁为标准品 ,使用分光光度法测定总黄酮的含
量 ,用 50%乙醇分别对榅桲籽和香梨籽中黄酮类成分进行分离及测定实验 ,实验结果表明 ,榅桲籽与香梨籽中的总黄酮含量分别
为 4.96%, 1.38%。
关键词:榅桲籽;香梨籽;总黄酮;分光光度法
中图分类号:　O629.9　　　文献标识码:　A　　　文章编号:　1008-9659-(2008)-01-0080-03
榅桲(Cydonia oblonga Mill.)又名木梨 , 尚处零星分散种值 , 未形成生产规模。新疆的榅桲主要在天山以南 , 沿塔里木盆
地边缘的绿洲上 ,以阿克苏地区的沙雅 、新和 、库车县最多 ,库尔勒 、喀什 、克州 、和田也有种植 ,阿图什乡最多。
榅桲为落叶乔木 ,树高 3 ～ 6m , 树冠以圆形为主 ,果枝密集 , 披黄色绒毛 ,叶互生 , 暗绿色背面有金黄色绒毛。花5瓣 ,白色 ,
果实成熟后有白色 、绿色 , 但以黄色居多。
新疆维吾尔族人称榅桲为“比也” ,他们除生食外 , 主要用作抓饭的辅助食材 , 熬制果酱等[ 1] 。
榅桲的主治:补脑益心 , 祛湿利尿 ,健脾胃 , 用于头晕心慌 ,小便不利 ,食欲不振 , 肝炎和胃肠道疾患[ 2] 。
榅桲籽有强化皮肤保湿力 ,光滑皮肤 , 退烧 ,止咳 , 降低干躁等药理作用。
榅桲籽的主治:各种发烧 , 结核病 ,感冒 , 舌酸 ,咳嗽[ 3] 。
香梨是落叶乔木 ,小枝粗壮 , 幼时有柔毛 ,越年生的枝紫褐色有皮孔。叶互生 , 革质 ,卵形或椭圆状 , 长 5 ～ 10 厘米 , 宽 6 厘
米 ,上端锐尖 , 基部阔楔形 ,叶缘锯齿锐细如针 , 初时两面有绒毛 , 后变光滑 ,花瓣 5 ,白色卵形 , 花期 4 月 ,果期 9 月。
香梨的主治:生津 , 润燥 ,清热 , 化痰 ,治热病津 , 伤烦渴 ,消渴 , 热咳 ,痰热 , 惊蹶 ,噎膈 , 便秘[ 4] 。
1　黄酮类化合物概述
黄酮类(flavonoids)的名称来源于这类化合物大都显黄色并且其 4 位都具有羰基之故。此类化合物广泛分布在自然界 ,
是一类重要的天然有机化合物。这类化合物多存在于双叶子植物及裸子植物中 , 大部分以苷的形式存在 , 另一部分游离存在 ,
由于黄酮类化合物广泛分布于植物界 ,其生理活性多种多样 , 引起了国内外广泛关注 , 目前已分离出的黄酮类化合物总数超
过 4000 个 ,广泛用于医药领域。
黄酮类化合物是一种生理活性活泼的物质 , 此类物质有降低血管脆性及异常的通透性 , 降血脂 , 降血压 ,抑制血小板聚集
及血栓的形成 ,抗肝脏病毒 , 抗炎抗菌等作用[6] 。还具有抗癌防癌作用 ,有很强的抗氧化效果 ,抗衰老 , 治疗心脑血管疾病等药
用保健作用。研究证明:黄酮类化合物是一类安全可靠 ,成本低 , 来源广 ,具有强抗氧化活性的抗氧化剂 , 是一种具有广阔开发
前景的新型饲料添加剂 ,将逐步取代人工合成的抗氧化剂[ 7] 。
2　结果与分析
2.1　原料 、试剂与仪器
原料:榅桲籽(新疆和田), 香梨籽(新疆库尔勒)。
＊ [ 收稿日期] 2007-07-19
[ 作者简介] 古力伯斯坦·艾达尔(1966-),女 ,维吾尔族 ,新疆乌鲁木齐人 ,副教授 ,主要从事中草药有效成分提取分离方面的教学
与研究。
第 1 期 古力伯斯坦·艾达尔 　　榅桲籽与香梨籽中总黄酮含量的测定
试剂:芦丁 , 三氯化铝 ,醋酸钠 , 乙醇 ,盐酸 , 镁粉(以上均为 AR)。
仪器:721E 型可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司);AL204 型电子天平 , HWS 12型电热恒温水浴锅(上海一恒科学
仪器有限公司)。
2.2　实验方法
2.2.1　黄酮的定性分析
称取 20g 榅桲籽和香梨籽(粉), 分别放置两个锥形瓶用 150ml 50%乙醇泡 45h。然后过滤 , 做定性分析。
2.2.1.1　与三氯化铝的反应:榅桲籽和香梨籽与三氯化铝反应 , 颜色变为深黄色 , 这表明:榅桲籽和香梨籽中有黄酮类化合
物。
2.2.1.2　与醋酸钠的反应:榅桲籽和香梨籽与醋酸钠反应 , 颜色变为淡黄色 ,这表明:榅桲籽和香梨籽中有黄酮类化合物。
2.2.1.3　与盐酸一镁的反应:榅桲籽和梨梨籽与盐酸 — 镁反应 ,颜色变为橙红色 , 这表明榅桲籽和香梨籽中有黄酮类化合
物。
2.2.2　最大吸收波长的选择
以50%的乙醇为溶剂 , 以三氯化铝 ,醋酸钠为显色剂 ,作标准品芦丁的吸收曲线在 340 ～ 460nm 波长下扫描其吸光度 , 在
421nm 处有强吸收峰故选择 421nm 为测定波长。(结果见表 1)
表 1　最大吸收波长的选择
λ 340 350 360 370 380 390 400 410 420 421 430 440 450 460
A 0.323 0.353 0.392 0.442 0.491 0.591 0.673 0.735 0.741 0.742 0.692 0.593 0.456 0.294
　　实验操作:准确称取 1mg 芦丁 , 置于 50ml容量瓶中 ,然后加 2ml 0.1mol/ L 三氯化铝 ,加 2ml 1ml/ L醋酸钠 , 后用 50%的
乙醇稀释至刻度 ,然后测定吸光度。
2.2.3　标准曲线的绘制
准确称取经干燥至恒重的芦丁标准品 30mg 置于 100容量瓶中 , 用 50%的乙醇溶解并稀释至刻度 ,得 0.3mg/ml的溶液。
标准曲线的绘制:吸上述标准溶液0.1 , 0.5 , 1.0 , 1.5 , 2.0 , 2.5 , 3.0 , 3.5 , 4.0 , 4.5 , 5.0ml分别加入到50ml容量瓶中 ,再分别加
入 2ml 0.1mol/ L三氯化铝溶液 , 2ml 1mol/ L 醋酸钠 ,用 50%的乙醇稀释至刻度 ,然后放置 45min ,在 421nm 处测定吸光度。
图 1　芦丁吸光度的标准曲线
标准曲线的回归方程:
A =30.012C+0.0038　　　　r =0.9997
其中 A 为吸光度 , C为芦丁标准的浓度此结果表明当标准品含量在 0.009mg/ ml ～ 0.018mg/ ml 之间与吸光度呈良好的
线性关系。
样品制备:准确称量 5.0000g榅桲籽和香梨籽(粉)置于2个锥形瓶中 , 加60ml 50%乙醇溶液 , 密封45h ,过滤 , 然后精密吸
取 5ml分别放置50ml容量瓶用50%乙醇稀释 ,然后加入1ml 0.1mol/ L三氯化铝溶液 , 1ml 1mol/ L醋酸钠放置 45min , 后测定
吸光度(在 421nm 处测定):
榅桲籽中总黄酮含量为:4.96%, 香梨籽中总黄酮含量为:1.38%。
2.2.5　加样回收率的测定
取一定浓度的标准样溶液(榅桲籽 , 香梨籽)分别置于50ml容量瓶中 ,然后加芦丁 0.6mg , 在加入1ml 0.1mol/ L三氯化铝
溶液 , 1ml 1mol/ L醋酸钠溶液用 50%乙醇稀释至刻度 , 然后测其吸光度:榅桲籽和香梨籽的回收率分别为:95.18%, 74.11%
2.2.6　稳定性实验
2.2.6.1　温度对黄酮测定结果的影响
称取 5.000g榅桲籽和香梨籽(粉), 加60ml 50%乙醇置于锥形瓶 ,放置 45h ,然后过滤 , 放在水浴锅中分别测定25 , 30 , 40 ,
50 ,60 , 70 , 80℃时的吸光度(取一定浓度的标准样溶液加 2ml 0.1mol/ L 三氯化铝溶液 , 2ml 1mol/ L醋酸钠溶液 , 放入 50ml 容
量瓶用 50%乙醇稀释至刻度 , 见表 2)。
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新疆师范大学学报(自然科学版) 2008 年
表 2　温度对黄酮测定结果的影响
　　　　T
A　　　　 25℃ 30℃ 40℃ 50℃ 60℃ 70℃ 80℃
榅桲籽 0.463 0.495 浑浊 浑浊 浑浊 浑浊 沉淀
香梨籽 0.293 0.347 浑浊 浑浊 浑浊 浑浊 沉淀
结果表明测定最佳温度是 25℃ ～ 30℃时 ,吸光度稳定 , 加热到 30℃以上时溶液逐渐浑浊。吸光度增大 , 80℃生成沉淀。
2.2.6.2　时间对测定吸光度的影响
称取 5.0000g 榅桲籽和香梨籽(粉)放置三个锥形瓶中 ,放入 60ml 50%乙醇 ,放置 45h ,过滤后吸取一定浓度的标准样溶
液置于 50ml 容量瓶中稀释加入 2ml 1mol/ L 三氯化铝溶液 , 2ml 1mol/ L醋酸钠溶液 , 然后用 50%乙醇稀释至刻度 , 测定不同
时间的吸光度(见表 3)。
表 3　时间对黄酮测定结果的影响
　　t(min)
A　　　 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200
榅桲籽 0.344 0.414 0.485 0.501 0.519 0.528 0.548 0.550 0.553 沉淀
香梨籽 0.141 0.120 0.190 0.181 0.195 0.194 0.201 0.204 0.203 1.002
结果表明从加显色剂开始至 3个小时左右吸光度基本保持稳定 ,但随着时间的延长 , 标准品与样品 , 逐渐浑浊 ,生成沉淀。
3　结论
3.1　榅桲籽和香梨籽中总黄酮含量分别为:4.96%和 1.38%, 即榅桲籽 >香梨籽。
3.2　在测定样品及标准样品的吸光度时 ,应该掌握测定时间以及测定温度 , 否则会产生较大误差。
参考文献:
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Measurement of the Total Flavonoid in the Corn
of Cydonia Oblonga Mill and Pear
Gulbostan HAYDAR , 　Salamet TOHTI
(School of L i fe S cience and Chem istry , X inj iang Normal University ,Urumqi X inj iang 830054)
Abstract:The aluminium complex compound of aluminium trichlorid and f lavonoid is yellow.In this
paper , we determined the content o f the to tal f lovonoid by using spectrophotometer.50% ethanol w as
used to separa te f lavonoid in the corn o f Cydonia oblonga Mill and Pear.The eExperiment show s that the
to tal f lav onoid in the co rn of Cydonia oblonga M ill and Pear are 4.3% and 1.3%.
Key words:Corn o f Cydonia oblonga Mill;corn of Pea r;f lavonoid;spect rophotomete r
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