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紫云英叶蛋白沉淀方法的比较研究



全 文 :
一 4 8一 饲料工业 1 92 9年第 1 3卷第 7期
毫克 /升的水溶液 ,然后按规定的数量加入到榨汁液 中 ,观察其絮凝效果 。
表 2 聚乙二醉对叶蛋白的沉淀 效果
沉淀条件 P E G 用量 沉淀物干重 沉淀粗蛋白含量 粗蛋白沉淀率
(g / 10 0 m一汁液 ) ( g ) (% ) ( g / 1 0 0m l汁液 )
加热 30 ℃ 2 0 无
加热 40 ℃ 2 0 2 . 2 0 4 4 . 7 0 0。 33
15 1

46 4 6
.
5 6 0
.
2 3
1 0 1

16 4 6

8 8 0
.
1 8
5 1
.
08 5 4

4 6 0
.
2 0
2
.
5 1
.
4 3 4 2

3 2 0
.
2 0
盐酸酸化 30 2 . 00 4 4 . 1 8 0 。 8 8
( 0
·
IN H C I4 毫升 / 2 0 2 ` 0 0 4 2 。 0 2 0。 8 4
1 0 0m l 汁液 ) 10 1 . 6 0 3 8 . 7 a 0。 6 2
5 1 4 0 3 8

2 0 0
.
5 3
说明 : 榨汁液用童加热处理为 10 0 毫升 , 盆酸酸化为 20 0 毫升 。
表 2 所列试验结果表明 ,在 18 ℃ 和 30 ℃的温度条
件下 ,加入 PE G 未能使叶蛋白沉淀 . 加热到 40 ℃ 时就
有凝聚作用产生 ,其中 P E G 用量少的处理 , 絮凝出现
较快 。 但从沉淀量来看 ,仍以 PE G 用量最大的处理 (每
10 毫升汁液加 20 毫克 P E G )最好 ,其他四种用量处
理差别不大 。
酸度影响着 PE G 对叶蛋白的絮凝作用 。 将榨汁液
酸化 , 即每 10 毫升汁液加 0 . I N H cl 4 毫升 ,混合液
PH 值约 4 . 7 ,此时加入 PE G ,其沉淀效果显著提高 。 汁液酸化再加 P E G 的粗蛋白沉淀率为 0 . 53 ~ 0 . 8 克 /
1 0 0 毫升汁液 ,加热加 P EG 的粗蛋白沉淀率为 0 . 18 ~
0
.
3 克 / 1 0 0 毫升汁液 ,盐酸处理的粗蛋白沉淀率为
.0 17 一 0 . 2 5 克 / 1 00 毫升汁液 (见表 3) 。 显然 ,汁液酸
化后 PGE 的沉淀效果要高于加酸及加热加 P EG 两沉淀效果之和 。
P E G 絮凝的沉淀物粗蛋 白含量较高 ,但絮凝慢 ,
各处理要经过 30 多小时才能获得较多的沉淀 。 总的来
看 ,本试验的 P E G 对叶蛋白的沉淀作用似乎不及国外
报道的那么显著 。 另外 ,我们还试验了聚丙烯酞胺的叶
蛋白沉淀效果 ,结果亦不甚明显 。 因此 ,使用絮凝剂来
沉淀叶蛋白 ,其絮凝条件还需进一步探讨 。
表 3 几种沉淀荆对叶蛋白的沉沈效果
沉淀剂名称 沉淀剂用量 沉淀物千重 沉淀粗蛋白含量 粗蛋白沉淀率 清液
(每 10 0m l 汁液 ) ( g ) (% ) ( s / 1 0 0nlI 汁液 ) p H 值
0 I N H C I 10 m l 0
.
8 2 5 6
.
1 8 0
.
2 3 4
.
0
s m l 0
.
7 4 4 7

0 4 0
.
1 7 4

5
4 m l 0
.
9 3 5 4
.
7 6 0

2 5 4

7
3 m l 0

7 0 4 8
.
7 7 0

17 5

0
I N 乳酸 1 0 m l 2 。 6 4 2 . 2 4 0。 5 5 3 。 2
7

s m 2
.
2 4 1
.
7 0 0

4 6 3

5
5而 3 。 6 4 0 . 6 5 0。 7 3 4 . 0
2

s m l 3

5 4 0

8 6 0

7 2 5
.
0
K AI ( 5 0 一 ) 2 2 g 4
.
9 3 1

4 8 0

8 3 4
.
7
+ l g 4
.
3 3 1
.
1 0 0

6 1 4

7
0
.
I N H C I 0
.
5 9 3

8 3 9

8 8 0
.
5 9 4
.
7
0
.
2 5 9 3

7 3 7
.
8 8 0
.
6 2 4
.
7
说 明 : K AI (S O 。 ) : 各处理加 0 . I N H C I 均为 4耐 / I OOm l 汁液 。
2
.
3 几种沉淀剂对叶蛋 臼淀沉的效果
本试验采用了 0 . I N H cl 、 0 . IN N a o H 、 IN 乳酸
及K户d (so ; ) 2等沉淀剂 ,它们沉淀叶蛋白效果见表 3 。将 .0 IN H c l 力口入到榨汁液后 , 叶蛋白沉淀很快
产生 ,但沉淀细小 . 在几个不同盐酸用量试验中 , 以每
10 毫升汁液加 4 毫升 0 . I N H cl ,结果最好 ,不仅沉
淀发生快 ,而且沉淀的干重和粗蛋白含量高 。这种情况
的出现 ,可能与紫云英叶蛋白的等电点有关 。
.0 NI N a 0 H 加入榨汁液的几个处理 , 均未见有
叶蛋白沉淀生成 。
I N 乳酸是由试剂乳酸配制而成的 。表 3 所列数据
表明 ,加 I N 乳酸的几个处理沉淀效果都比较好 ,乳酸
加入的数量基本上不影响沉淀的粗蛋白含量 。但是 ,乳
酸加入量较大的两个处理 ,即每 10 0毫升榨汁液加 7 . 5
和 10 毫升 I N 乳酸 ,沉淀物干重反比乳酸用量较少的
处理要低 ,同时上部的澄清液混浊 ,呈绿色或淡黄色 ,
反映出叶蛋白沉淀不够完全 。 由此看来 ,乳酸与盐酸一
样 , 作为沉淀剂主要是调整汁液的 PH 值接近叶蛋白
19 9 2年第 一 3卷第 7期 饲料工业 4 9 一
的等电点 ,它们用量过大或过小 ,都会使汁液 PH 值远离等电点 , 叶蛋白沉淀效果随之下降。
KAI (S o
; ) : 是一种很强的胶体絮凝剂 . 我们先在
榨汁液中直接加入 K声d (so ; ) 2 ,沉淀效果甚微 ,后来用盐酸将榨汁液酸化 , 每 10 毫升榨汁液加 0 . I N H cl 4
毫升 ,再加入 KA I (S 0 。 ) : ,沉淀作用非常强烈 ,沉淀立即发生 , 1 . 5 小时后基本沉淀完全 。 KA I (so ; ) : 的用量影响着沉淀的数量和成份 , K A I (so ; ) : 用量增大 ,叶蛋白沉淀物干重随之增加 ,沉淀中粗蛋白含量则呈相反
的趋势 , 因此 ,各用量处理的粗蛋白沉淀率差别并不呈
规律性 。 这就是说 , 每 10 毫升汁液加入 0 . 25 一 2 克
阴 ( 5 0 ; ) 2 , 沉淀效果大 体相近 。 汁液酸化能提高
K A I ( 5 0 ; ) 2的沉淀作用 。 例如 ,在同一酸度下 ,即每 10
毫升榨汁液加 0 . I N H cl 4毫升 ,未加 K A I ( so ; ) : 处理的沉淀物干重为 0 . 25 克 ,而加 K A I (so ; ) : 的沉淀物干重达 0 . 7 0 克 , 比前者增加 1 . 8 倍 。
P
.
Han
e az k ow
s址 ( 1 , s峨)曾以 ^ l: (os 。 ): 作紫花首
箱榨汁掖叶蛋白的沉淀剂 ,获得的沉淀物干重及灰分
含量比 H c l 和絮凝济」p家曰蛇 o l4 l l K 的都高 ,粗蛋白及胡
萝 卜素含量则较低 。 我们试脸的结果与之基本一致 。
2
.
4 乳酸发醉的叶蛋白沉淀效果
试验证明 , I N 乳酸能使叶蛋白很好的沉淀 。 那么
在榨汁液中直接进行乳酸发醉产生乳酸 ,能否使叶蛋
白沉淀呢? 试验结果表明 ,这条途径是可行的 。
发醉试验采用了五种乳酸菌 , 它们的来源是 : ①
SZ 一 1 : 由紫云英鲜叶上直接培养的乳酸菌 ; ②sz 一 2 :
由饱菜水接种培养的乳酸菌 ,③ lA 一 1 : 一种制作酸乳
的乳酸球菌 ;④ lA 一 2 : 一种制作酸乳的乳酸杆菌 ; ⑤
LT
:粉丝酸浆培养的乳酸菌 。
榨汁液发酸的步骤是 , 用 250 毫升的锥形瓶装入
25 0毫升的榨汁液 ,分别加入一定数量的乳酸菌母液 ,
将消毒后的橡胶塞塞紧瓶 口 ,再涂蜡密封 , 然后将锥形
瓶放置在不同温度下培养 ,定时观察沉淀情况 。试验结
果见表 4 。
表 4 五种乳酸发酵菌对叶蛋 白的沉途效果 ( 30 ℃培养 48 小时 )
菌种代号 菌液用量 沉淀物干重 沉淀粗蛋白含蛋 粗蛋白沉淀率 清液
(每 z 0 0 m l汁液 ) (吕) ( % ) ( g / 100m 一汁液 ) p H 值
5 2

l N a C I
:
g5 2

6 1 3 7
.
0 5 0
.
3 9 4 8
3s 2

6 3 3 3
.
3 5 0

3 5 4 7
l名 2 . 7 6 3 5` 6 5 0 。 3 9 4 . 6
5 2

2 15 m l 2

7 5 3 2
.
1 3 0

35 3
.
6
1 0 m皿 2 。 6 0 3 3 . 0 0 、 0 . 3 4 3 6
6
.
7 m l 2
.
6 3 3 5
.
1 9 0
.
37 4
.
7
5而 2 . 6 7 4 0 . 0 0 0 . 4 3 4 . 7
A I

l
:
m
{
2

5 6 3 3

5 3 0

3 4
:
.
:` 】. , l 2 . 8 2 3 1 . 5 9 0 . 3 6
A I一 2 1创 3 . 1 2 2 9 . 8 8 0 . 3 7 4 . 5

3
.
0 4 3 1

9 7 0

3 9 4
.
8
2 m l
T L 15 m l 1
.
5 3 4 1
.
0 3 0
.
3 1 4 5
10 m l 1
,
5 6 4 1
.
56 0
.
3 2 4
.
5
6
.
7m l l

4 0 4 5

47 0
.
3 2 4
.
6
sm l 1
.
3 0 4 0

5 0 0
.
2 6 4
.
6
仅以粗蛋白沉淀率来比较 ,除 TL 乳酸菌处理外 ,
其他四种乳酸菌发醉对叶蛋白的沉淀效果大体相近 ,
但从整个发酵过程来看 ,应以 5 2 一 2 的效果最好 。 sz
一 2 母液加到榨汁液中 ,沉淀产生较快 , 10 小时左右基
本沉淀完全 ,沉淀团聚程度较大 ,上部澄清液清亮呈褐
色 。 sz 一 1 等四种乳菌发酵 ,产生沉淀缓慢 ,沉淀细小 ,
L部清液混浊 , 呈浅绿色或黄绿色 ,沉淀与清液之间分
层不明显 。
几种乳酸菌发酵后清液的 PH 值 , 除 SZ 一 2 的两
个处理是 3 . 6 外 , 其他各处理为 4 . 5~ 4 . 8 ,与表 3 中
N1 乳酸沉淀效果相 比 ,清液 PH 值相近 ,但叶蛋 白沉
淀的数量和粗蛋白含量都要低一些 ,粗蛋白沉淀率则
要低 13/ 一 2 / 3 。 由此看来 ,乳酸发醉致使叶蛋白沉淀
的主要原因仍是乳酸的作用 , 由于发酵产生的乳酸逐
渐积累增加 , 汁液的 PH 值渐次减小 。 这样酸液的强度
及其对叶蛋白的沉淀作用 ,乳酸发醉与 I N 乳酸两种
方法之间就有一定的差别 。
为探讨乳酸发醉法在叶蛋白生产中连续进行的可
能性 ,我们用发醉后的澄清液再应用于叶蛋白沉淀 。 试
验设兰个处理 : ① sz 一 2 乳酸菌母液+ 榨汁液 , 8J ℃培
养 ,② sz 一 2R , 用处理① 18 ℃发醉澄清液 + 榨汁液 ,
1 8 ℃培养 ;③sz 一川 , 用处理① 30 ℃发醉的澄清液十
榨汁液 , 18 ℃培养 。
一 5 0 一 饲料工业 19 9 2 年第 1 3 卷第 7 期
表 5 乳酸发酵澄清液对叶蛋 白的沉淀效果 ( 18 ℃培养)
菌种代号 菌液用量 沉淀物干重 沉淀粗蛋白含量 粗蛋白沉淀率 清液
(每 1 00m l 汁液 ) ( g ) ( % ) ( g / 1 0 0而 汁液 ) p H 值
5 2 一2 1 5 m l l

5 6 4 2

6 3 0
.
3 3 5. 2
(母液 ) 1 0 m l 1 . 2 8 4 7 。 2 8 0 . 3 1 5 . 0
S Z
es
ZR 1 0 m l 1
.
6 2 3 7
.

8 3 0

3 1
: :(澄清液 ) s m l 1 . 0 0 3 5 。 3 1 0 。 2 8
5 2

ZH 1 0 m l 1
.
6 0 3 6
.
5 0 0

2 9 4

8
( 澄清液 ) s m l l 。 68 3 5 . 6 6 0 . 3 0 4 。 8
试验结果表明 (见表 5) ,发酵后的澄清液与母液
的叶蛋白沉淀相近 , 以加液量同为 10 毫升的三个处理
试验结果比较 , sz 一 ZR 与 5 2 一 ZH 比 sZ 一 2 沉淀的干
重要多 0 . 32 ~ 0 . 34 克 ,沉淀粗蛋白含量要少 9 . 45 %
一 1 0 . 7 8% ,粗蛋白沉淀率则相同或相差微小 。所以 ,发
酵后澄清液与母液性质类似 ,都可以作为叶蛋白沉淀
剂使用 ,从而使叶蛋白生产流程中叶蛋白沉淀工艺可
能通过自身物质循环而解决 ,与其他沉淀方法相比 ,更
少能源和物质的消耗 ,生产成本也大可降低 。
乳酸发醉沉淀的叶蛋白呈绿色 ,具有乳酸香味 ,除
去了浆汁的草味 ,作饲料可增加适 口性 , 同时它的 PH
值较低 ,有一定的防腐能力 ,因此是一种优良的蛋白质
饲料 。
3
. 小 结
3
.
1 加热方法叶蛋白沉淀快 , 团聚程度大 , 效果
好 ,在 45 一 90 ℃范围内 ,汁液温度与沉淀物干重 、 沉淀
粗蛋白含量以及粗蛋白沉淀率呈显著的直线关系 。
3
.
2 絮凝剂聚乙二醉 (PE G ) , 在汁液加热 40 ℃
或加盐酸酸化后 ,对叶蛋白有一定的絮凝作用 。但为获
得最佳沉淀效果 ,还需进一步摸索絮凝条件 。
3
.
3 0
.
I N cH l 和 I N 乳酸都是 良好的叶蛋白
沉淀剂 , 而且后者的沉淀效果更佳 。在汁液酸化的条件
下 ,加 K A I (so ` ) : 可获得最高的粗蛋白沉淀率 , 不同用
量的 0 . I N Na o H 加入汁液后未见有沉淀发生 。
3
.
4 加人适宜的乳酸菌种母液使榨汁液发酵 ,控
制发酵适度 ,可使叶蛋白较好地沉淀 ;发酵澄清液可代
替母液循环使用 ,沉淀的叶蛋 白呈绿色并带有乳酸香
味 。 故此法有可能是一种成本最低的沉淀方法 。
(参考文献 3 篇本刊略 )
(温琢 英副教授 、 夏国模副教授提供试验菌种及技
术资并 , 谨致感谢 !)
〔作者通讯地址〕 4 1 01 2 8 长沙市东郊
绳 蛆 的 无 菌 养 妓 技 术
广东省肇庆市旅食局科技中心 郑建平
蝇蛆的粗蛋白含量约 5 8 % ,必需氨基酸种类齐全
且含量丰富 ,营养价值接近秘鲁鱼粉 . 用活虫体饲喂家
禽 、 蝎子 、 牛蛙 、 美国青蛙 、 鸟类 、 鳌等 , 生长效果 、 肉质
的细嫩鲜美程度等均优于饲喂植物性饲料 ;把蝇蛆烘
干粉碎后 ,可代替秘鲁鱼粉配于混合饲料中 。故利用家
蝇生产营养成分齐全的高蛋白动物性饲料 ,是开发饲
料资源的有途径之一 但家蝇喜栖不洁之地 ,其成虫 、
幼虫 (蝇蛆 )的体表带有细菌 ,禽畜多吃会产生不良效
果 。 笔者在广东省肇庆市粮食局科技中心蓝塘蛙场指
导养殖美国青蛙时 ,养殖蝇蛆供幼蛙食用 ,对家蝇的无
菌养殖进行了探索 。 现将结果整理如下 。
一 、 种妮的饲并
1
. 种蝇的采集及灭菌
家蝇本身虽不滋生细菌 ,但它是细菌的中间宿主 ,
必须经过灭菌处理后方可留作种用 。 .将 80 吓的麦数 ,
2 0 %的 已切碎 的动物 内脏混匀 , 加水 ,使含水量达
60 %~ 70 %
,置于通风阴凉避雨的地方 ,再加几滴稀氨
水或碳酸氢按水 (蝇有趋氨性 ) , 以诱蝇觅食 。家蝇在觅
食爬行过程中会交配产卵 。 受精卵经过 5 小时孵化为
幼虫 ,幼虫生长 5一 6 天即行化蛹 . 把蛹用摄子拣出 ,放
入 1 %的高锰酸钾溶液或 3%的漂白粉溶液中浸泡约
3 分钟 , 以杀灭蛹体表所带的细菌 , 然后置入种蝇笼 。