全 文 ：＊国家自然科学基金资助课题No.30260123
排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠血清干扰素-γ
和肝脏组织病理学的影响＊
黄琳芸　钟　鸣　杨增艳　陈少锋　余胜民
(广西民族医药研究所·南宁 530001)
摘　要　目的:探讨排钱草总物碱抗肝纤维化作用与干扰素-γ(IFN-γ)的关系。 方法:腹腔注射猪血清
复制免疫性肝纤维化大鼠动物模型 ,给药 8 周后 ,测定大鼠血清 IFN-γ的含量并观察肝脏组织结构变化。
结果:排钱草总生物碱高 、中剂量组大鼠血清 IFN-γ的含量显著高于模型对照组 ,具有显著的统计学意义
(P <0.001)。与模型对照组比较 ,肝脏病理切片观察各给药组大鼠肝纤维化程度较模型组减轻。结论:排
钱草总生物碱能提高免疫性肝纤维化大鼠血清 IFN-γ的含量 , 改善肝组织纤维化程度 , 可能是其抗肝纤
维化作用机理之一。
主题词　肝硬化/中医药疗法　@排钱草总生物碱/治疗应用　肝硬化/病理学　肝/病理学　大鼠
　　慢性肝炎多有肝纤维化 , 后者是肝硬化形成的必经阶
段 ,其发生与细胞因子的改变有关 ,其中干扰素 IFN-γ在肝
纤维化消长过程中起着不可忽视的作用。 排钱草 Desmodium
pulchellum(L.)Benth.有行血破瘀 、除湿消肿之功效。 治肝脾
肿大 , 关节炎 , 跌打损伤。从排钱草根中提取的总生物碱为
排钱草的有效成分 , 药理研究表明其具有抗肝纤维化作
用[ 1] 。为了进一步探讨排钱草总生物碱其它方面的药理作
用 ,观察了其对免疫性肝纤维化大鼠血清 IFN-γ含量及肝
脏组织病理学的影响 ,报告如下。
1　材料和方法
1.1　实验动物　SPF级雌性Wistar大白鼠 , 体重(180±12)g ,
由广西医科大学实验动物中心提供 , 实验动物合格证号:
SCXK桂 2003-0003。动物随机分笼 ,于(25±1)℃,相对湿度
(70±10)%环境中饲养 ,喂颗粒饲料 ,自由饮水。
1.2　实验分组及处理　动物按体重随机分为 6 组 , 每组 10
只。分别为正常对照组 、免疫肝纤维化模型组 、秋水仙碱阳
性组(0.1mg/kg)、排钱草总生物碱高 、中 、低(30 、20 、10mg/ kg)
3 个剂量组。除正常对照组外 , 其余各组动物采用腹腔注射
猪血清的方法造模[ 3] ,每周 2 次(0.5ml/鼠),连续 8 周。造模
同时每日灌胃给药 1次(给药容量 2.0ml/100g体重), 正常对
照组和模型对照组给予相同体积的蒸馏水 ,连续8 周。
1.3　标本处理　末次给药后 ,动物禁食 16h , 腹主动脉采血 ,
分离血清 , -20℃冰箱保存待测。
1.4　实验指标及测定　IFN-γ:采用双抗体夹心 ELISA法测
定 ,试剂由深圳晶美生物公司提供。主要仪器:Biored-550
酶标仪。
肝脏组织病理检查:取大鼠肝脏右叶 , 10%中性甲醛固
定 ,石蜡包埋 , 切片 ,HE 染色 ,光镜下观察。
1.5　统计学处理　数值以 x±s表示 , 采用双侧 t检验。
2　结果
2.1　对免疫性肝纤维大鼠 IFN-γ含量的影响　见附表。
附表 排钱草总生物碱对免疫性肝纤维化大鼠血清 IFN-γ
含量的影响( x ±s)
组别 动物数(只)
剂量
(mg/kg)
血清 IFN-γ
　(pg/ml)
空白对照组 10 - 147.89±35.23＊＊＊
模型对照组 10 - 207.36±32.40■■■
阳性对照组 10 0.1 247.14±64.6■■■
低剂量组 10 10 232.51±44.23■■■
中剂量组 10 20 285.39±47.26＊＊＊■■■
高剂量组 10 30 290.21±47.10＊＊＊■■■
　　与模型对照组比较＊＊＊P<0.001;与空白组比较■■■P<
0.001
2.2　肝组织病理观察结果　
空白对照组大鼠肝脏颜色鲜红 , 表面光滑 , 质脆柔软。
HE 染色显示肝小叶结构正常 , 分界明显 , 无炎性细胞浸润 ,
汇管区见胶原纤维少许 , 肝细胞形态大小正常;模型组大鼠
肝脏体积较正常缩小 , 质地较韧 ,边缘较钝 , 颜色呈暗红色 ,
个别呈暗灰色 ,表面粗糙。HE 染色表现为肝小叶失去正常
结构 , 肝细胞索排列紊乱 , 小叶散在性坏死 , 胶原纤维增生明
显 , 并可见厚薄不一的纤维分隔包绕肝小叶 , 部分有肝细胞
再生及假小叶形成 , 肝细胞坏死及炎性细胞浸润明显;排钱
草总生物碱各组与秋水仙碱对照组大鼠肝脏在色泽 、质地 、
大小及表面光滑度方面较模型组均有明显改善 ,HE 染色显
示肝脏组织内炎性细胞浸润 、肝细胞坏死和纤维组织增生等
方面均较模型组大鼠为轻 , 纤维有部分分割肝小叶 , 但未见
完整的假小叶形成 ,肝组织有部分再生。
3　讨论　近年来 , 关于肝纤维化发病机制的研究显示肝星
状细胞(HSC ,又称贮脂细胞)激活与转化是肝纤维化形成的
关键 , 而 HSC 的激活则与诸多细胞因子有关。 IFN-γ是由 T
细胞分泌的 ,分子量 21～ 24kD的单体糖蛋白 , 具有免疫调节
作用和直接抗肝纤维化作用的细胞因子 , IFN-γ抗肝纤维化
·101·中国中医药科技 2006 年 3月第 13 卷第 2 期 Mar.2006 Vol.13 No.2
作用的机制:①抑制Ⅰ 、Ⅲ 、Ⅳ型胶原的表达 , 使胶原合成减
少。②直接抑制 HSC 的活性和增生 , 从而减少细胞外基质
(ECM)的合成。目前认为 HSC 是肝纤维化 ECM 的主要来
源 ,它的活化是肝纤维化形成过程的关键。 ③抑制转化生长
因子 β1(TGFβ1)表达。 ④促进 、活化与降解有关酶-基质金
属蛋白酶 1 , 9(MMP-1 ,MMP-9)的表达[ 4] 。
本研究结果显示 ,用猪血清持续诱导大鼠免疫损伤性肝
纤维化后 ,各组动物血清 IFN-γ含量均较正常对照组升高 ,
提示机体受到外来损伤因素刺激后 ,免疫系统可产生 IFN-γ
以抵御外来损伤因素 , 此结果与有关的文献报导一致[ 5 、6] 。
给予排钱草总生物碱治疗后 , 可大幅度升高大鼠血清中 IFN
-γ含量 , 并呈良好的剂量依赖关系 , 排钱草总生物碱中 、高
剂量组与模型对照组比较有明显差异。
　　参考文献
1　江苏新医学院《中药大辞典》编写组.中药大辞典.上海:上海科学
技术出版社 ,1985:2092
2　黄琳芸 ,钟鸣,余胜民 ,等.排钱草总生物碱对免疫性肝纤维化大
鼠肝组织 Hyp和血清 HA 、LN、PC Ⅲ的影响.中医药学刊 , 2004;22
(5):825
3　于世赢 ,贲长恩 ,杨美娟 ,等.免疫性和化学性损伤肝纤维化动物
模型的比较.实验动物科学与管理.1995;12(4):5
4　Li D.Friedman SL.Liver fibrogenesis and the role of hepatic stellate
cells:new insights and prospects for therapy.J Gastro Hepatol , 1999;
14(7):618
5　贺永文 ,刘薇 ,曾令兰 ,等.γ-干扰素对血吸虫小鼠肝纤维化的影
响.中华医学杂志, 1996;76(5):371
6　汪国运 ,蔡卫民 ,翁红雷,等.TGF-β 和 IFN-γ在实验性肝纤维化
中的变化及意义.浙江医学 , 1999;21(8):469
(收稿:2005-01-20)
瓜蒌葛参汤联合生脉注射液治疗冠心病 58例临床观察
汪根水
(浙江省富阳市中医医院·富阳 311400)
1　临床资料　本组冠心病(CHD)患者 ,均为 2001-03～ 2004-11采
集 ,共 105例 ,诊断符合 1980 年全国内科学术会议确定的诊断标
准[ 1] 。随机分为两组。治疗组 58例 ,男 37例 ,女 21例;年龄 47～ 88
岁 ,平均 58岁;病程 6个月 ～ 16年 ,平均 3.8年。其中稳定性心绞痛
41例 ,不稳定性心绞痛 17例;ST 段有缺血表现者 49例 ,伴室性早搏
7例 ,房性早搏 19例 , Ⅱ 、Ⅲ度房室传导阻滞 3例 ,心动过速 6例 ,心
动过缓者 4例 ,高血压 13例 ,高脂血症 8例 ,糖尿病 6例。对照组 47
例 ,男 31例 ,女 16例 , 年龄 51～ 86岁 , 平均 57岁;病程 5个月 ～ 16
年 ,平均 3.9年。其中稳定性心绞痛 34例 ,不稳定性心绞痛 13例;ST
段有缺血表现者 37例 ,伴室性早搏 5例 ,房性早搏 16例 , Ⅱ 、Ⅲ度房
室传导阻滞 2例 ,心动过速 4例 ,心动过缓者 3例 ,高血压 11 例 ,高
脂血症 6例 ,糖尿病 4例。两组资料经统计学处理 , 无显著性差异
(P>0.05),具有可比性。
2　治疗方法　治疗组服用自拟瓜蒌葛参汤(瓜蒌壳 15g 、薤白 12g 、
法半夏 12g 、丹参 30g、葛根 30g),每日 1剂 ,水煎至 300ml ,早晚分服。
同时用生脉注射液(华西医科大学制药厂生产 ,每 10ml含红参 1g 、麦
冬 3.12g 、北五味子 1.56g),每次 30ml加入生理盐水 200ml中静脉滴
注 ,每日 1次 , 3周为 1疗程。其中 10例因心绞痛发作较剧而临时加
服硝酸甘油片。对照组用消心痛(山东博山制药厂生产 , 批号
960104)10mg ,每天 3次口服。治疗前后观察临床症状 、体征 、心率 、
血压 、心电图变化。
3　治疗结果
3.1　疗效标准　按 1979年上海会议制订的冠心病心绞痛及心电图
疗效评定标准进行评定[2] 。显效:心绞痛发作次数减少 80%, 心电
图恢复正常;有效:心绞痛发作次数减少 50%,心电图好转;无效:心
绞痛发作次数<50%,心电图无改变。
3.2　心绞痛症状疗效　治疗组 58例中 ,显效 32例 ,改善 21例 ,无效
5例 ,总有效率 91.37%;对照组 47例中 ,显效 12例 ,改善 24例 ,无效
11例 ,总有效率 76.59%。两组比较有显著性差异(P<0.05)。
3.3　心电图疗效　治疗组 49例中 ,显效 11 例 ,改善 20例 ,无效 18
例 ,总有效率 63.26%;对照组 37例 , 显效 2 例 ,改善 14 例 ,无效 21
例 ,总有效率 43.24%。两组比较有显著性差异(P<0.01)。
3.4　副反应　治疗组有 3例出现轻度腹泻。对照组服消心痛后有
头痛 、头胀 5例 ,恶心 2例 ,用药 5天后缓解 ,其中 2例药物减量才缓
解。
4　讨论　CHD 是由于冠状动脉粥样硬化导致心肌缺血 、缺氧而引
起的心脏病 ,属中医“胸痹”范畴 ,其病机为本虚标实之证。 本虚以
气阴两虚为主 ,标实以痰瘀痹阻为患。应益气养阳 ,宣痹化瘀通络 ,
标本同治。本病西医治疗主要用硝酸酯类药物 ,虽可迅速缓解心绞
痛 ,但可产生耐药性 ,且容易反复发作。中医单纯采用活血化瘀或
芳香化瘀或芳香温通等治疗 , 疗效较差 ,久用易耗伤正气。生脉注
射液大补元气而生津敛阴 ,体现了治病求本这一基本治则。瓜蒌葛
参汤由瓜蒌 、薤白 、半夏加丹参 、葛根组成。瓜蒌壳开胸中痰结 ,半
夏化痰降逆 , 薤白辛温通阳 、豁痰下气 , 专为胸痹之痰阻而设。丹
参 、葛根活血化痰 ,通利血脉 ,使瘀滞得解 ,心脉得通。生脉注射液
中人参有升高血压强心作用 , 麦冬可稳定心肌细胞膜 ,五味子有助
于心脏活动 ,对动物有强心作用。实验研究表明, 生脉注射液具有
改善微循环 ,抑制血栓形成 ,提高心肌耐缺氧能力, 保护心肌缺血损
伤 ,抗疲劳 、抗心律失常作用;丹参 、葛根能扩张冠状动脉 ,降低心肌
耗氧量 ,改善冠脉循环。静脉滴注生脉注射液合煎服瓜蒌葛参汤能
明显消除CHD的症状 ,对 CHD的病因有积极治疗作用。经临床 58
例观察治疗 ,疗效可靠而满意 ,无严重的副作用 ,值得临床推广。
　　参考文献
1　第一届全国内科学术会议心血管病专业组.关于冠状动脉硬化性
心脏病命名诊断标准的建议.中华内科杂志 ,1981;20(4):253
2　中西医结合治疗冠心病 、心绞痛 、心律失常研究座谈会报道.冠心
病心绞痛疗效评定标准.医学研究通讯 ,1979;12(3):17
(收稿:2005-05-08)
·102· 中国中医药科技 2006年 3 月第 13 卷第 2期 Mar.2006 Vol.13 No.2